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两株lager啤酒酵母在传代及自溶过程中生理性能差异的比较 被引量:5
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作者 丁华建 段鸿绪 +5 位作者 王金晶 李崎 李永仙 郑飞云 刘春凤 钮成拓 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期57-64,共8页
以2株拉格型啤酒酵母菌株为研究对象,通过研究其在传代及自溶过程中细胞形态、细胞活性活力、胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)以及DNA的损伤等指标,分析啤酒酵母在传代发酵及自溶过程中的生理性能变化。结果表明,在传代培养过... 以2株拉格型啤酒酵母菌株为研究对象,通过研究其在传代及自溶过程中细胞形态、细胞活性活力、胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)以及DNA的损伤等指标,分析啤酒酵母在传代发酵及自溶过程中的生理性能变化。结果表明,在传代培养过程中,原本表面圆润饱满且呈椭圆型的啤酒酵母细胞会在活力下降后出现褶皱,甚至因为细胞内部结构的严重水解而干瘪失型。同时,细胞壁厚度在传代过程中也会逐渐变薄;高活力的菌株所表现的抗自溶能力、抗压能力都强于活力低的菌株,而且高活力的菌株所产生的ROS含量相对少、且稳定,DNA损伤速度也相对缓慢。研究啤酒酵母在传代及自溶过程中具体的生理性能变化,不仅有助于了解酵母细胞在传代发酵过程中的自我防御机制,对选育优良啤酒酵母也有重要指导意义。 展开更多
关键词 啤酒酵母 传代发酵 生理活力 抗自溶性能
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Lager酵母中CRISPR-Cas9基因敲除系统的构建 被引量:3
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作者 李梦琦 张可心 +4 位作者 郑飞云 钮成拓 刘春凤 李崎 王金晶 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期36-44,96,共10页
利用CRISPR-Cas9基因编辑技术在Lager型啤酒酵母(Saccharomyces pasteurianus)中建立CRISPRCas9基因敲除系统。将质粒pMY中毕赤酵母基因表达系统中常用GAP启动子替换为酿酒酵母基因表达系统中常用PGK1启动子,增强外源基因表达量。设计... 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术在Lager型啤酒酵母(Saccharomyces pasteurianus)中建立CRISPRCas9基因敲除系统。将质粒pMY中毕赤酵母基因表达系统中常用GAP启动子替换为酿酒酵母基因表达系统中常用PGK1启动子,增强外源基因表达量。设计酿酒酵母(S.cerevisiae)基因组及真贝酵母(S.eubayanus)基因组中目的基因TRP1小向导RNA。增加向导RNA结构中锤头状核酶和肝炎三角洲病毒核酶结构,提高gRNA转录水平。Lager型啤酒酵母Pilsner中TRP1基因被敲除,成功构建Lager型啤酒酵母中CRISPR-Cas9基因敲除系统。 展开更多
关键词 lager酵母 CRISPR-Cas9 基因敲除 S.pasteurianus
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高抗氧化活性lager型啤酒酵母选育 被引量:3
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作者 李磊 王金晶 +4 位作者 郑梅莹 郑飞云 钮成拓 刘春凤 李崎 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期40-49,共10页
采用过氧化氢刺激lager型啤酒酵母,Tadpoling法筛选细胞活力恢复较快突变菌,根据各菌株线粒体膜电位、胞内氧自由基(ROS)水平筛选获得4株活性较高菌株。比较突变菌与原始菌传代发酵性能、胞内ROS、活力指标及每一代细胞死亡率水平,最终... 采用过氧化氢刺激lager型啤酒酵母,Tadpoling法筛选细胞活力恢复较快突变菌,根据各菌株线粒体膜电位、胞内氧自由基(ROS)水平筛选获得4株活性较高菌株。比较突变菌与原始菌传代发酵性能、胞内ROS、活力指标及每一代细胞死亡率水平,最终获得一株抗氧化能力提高且活力稳定性较高啤酒酵母菌株。分析验证突变菌线粒体DNA修复相关基因MHR1发现,该基因发生部分碱基突变。 展开更多
关键词 lager型啤酒酵母 抗氧化性 Tadpoling法 细胞活力
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麦汁关键氨基酸对Lager酵母发酵性能的影响 被引量:3
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作者 尹花 贺扬 +1 位作者 董建军 陆健 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期987-993,共7页
为探究麦汁中氨基酸在啤酒酿造中的作用,研究了麦汁中4种关键氨基酸(谷氨酸、脯氨酸、缬氨酸和赖氨酸)对酵母发酵性能的影响。以工业Lager酵母(Saccharomyces pastorianus TT-1)为研究对象,通过关键氨基酸添加的发酵实验,在合成培养基... 为探究麦汁中氨基酸在啤酒酿造中的作用,研究了麦汁中4种关键氨基酸(谷氨酸、脯氨酸、缬氨酸和赖氨酸)对酵母发酵性能的影响。以工业Lager酵母(Saccharomyces pastorianus TT-1)为研究对象,通过关键氨基酸添加的发酵实验,在合成培养基中对关键氨基酸在酵母增殖及风味物质代谢中的作用进行了分析,并进一步在工业生产麦汁中对其作用进行了验证。结果表明,谷氨酸和脯氨酸抑制酵母增殖;赖氨酸会促进酵母的增殖;缬氨酸会促进高级醇的生成。 展开更多
关键词 麦汁 氨基酸 lager酵母 发酵性能
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Lager啤酒酵母起源的历史足迹及基因组学研究 被引量:3
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作者 尹花 贺扬 +2 位作者 侯晓平 陈璐 董建军 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期274-281,共8页
Lager酵母(Saccharomyces pastorianus)是由酿酒酵母(S. cerevisiae)与真贝氏酵母(S. eubayanus)通过自然杂交获得的异源多倍体菌株。Lager酵母保留了来自于两个亲本的染色体,同时也产生了新的重组片段,这就赋予Lager酵母适合低温发酵... Lager酵母(Saccharomyces pastorianus)是由酿酒酵母(S. cerevisiae)与真贝氏酵母(S. eubayanus)通过自然杂交获得的异源多倍体菌株。Lager酵母保留了来自于两个亲本的染色体,同时也产生了新的重组片段,这就赋予Lager酵母适合低温发酵、麦芽三糖利用率高等重要特性。根据菌株的染色体含量,可以将Lager酵母分为两个类型:GroupⅠ型(Saaz型)与GroupⅡ型(Frohberg型)。近年来,多株Lager酵母菌株陆续完成了全基因组测序,为探索不同类型Lager酵母起源提供了基因组学基础。该文综述了Lager酵母的起源及基因组信息,并讨论了不同类型Lager酵母进化的模型。 展开更多
关键词 lager酵母 基因组 异源多倍体
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不同啤酒酵母在麦汁发酵过程中发酵性能的对比研究 被引量:5
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作者 郑莉烨 赵海锋 赵谋明 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2012年第12期1659-1663,共5页
研究了四种具有不同遗传背景的下面发酵啤酒酵母(Saccharomyces pastorianus,FBY0095、FBY0096、FBY0097和FBY0098)在12°P正常浓度与24°P超高浓度麦汁中发酵性能的差异。考察的发酵性能指标包括发酵速率、细胞生长量、酵母活... 研究了四种具有不同遗传背景的下面发酵啤酒酵母(Saccharomyces pastorianus,FBY0095、FBY0096、FBY0097和FBY0098)在12°P正常浓度与24°P超高浓度麦汁中发酵性能的差异。考察的发酵性能指标包括发酵速率、细胞生长量、酵母活性、麦汁发酵度、产酒量、游离氨基氮的消耗量、风味物质浓度及双乙酰的还原能力。结果表明,同一酵母菌株在正常浓度和超高浓度麦汁中的发酵性能显著不同。正常浓度发酵条件下,啤酒酵母FBY0095和FBY0098具有良好的发酵特性;而超高浓度条件下,啤酒酵母FBY0097和FBY0098表现出了较好的发酵性能。 展开更多
关键词 啤酒酵母 正常浓度麦汁 超高浓度麦汁 发酵性能
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抗氧化啤酒酵母菌株TK-10的选育及工业生产验证 被引量:2
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作者 陈璐 万秀娟 +2 位作者 尹花 贺扬 林洪 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期77-81,共5页
以啤酒酿造Lager酵母TS-01为出发菌株,依次利用含乙硫氨酸、羟基正缬氨酸的平板进行定向育种,利用硝酸铅平板分离出高产SO2、低产H2S的菌株,然后通过EBC管、100 L中试发酵试验,以发酵液的SO2、H2S、双乙酰、乙醛、高级醇的含量和发酵度... 以啤酒酿造Lager酵母TS-01为出发菌株,依次利用含乙硫氨酸、羟基正缬氨酸的平板进行定向育种,利用硝酸铅平板分离出高产SO2、低产H2S的菌株,然后通过EBC管、100 L中试发酵试验,以发酵液的SO2、H2S、双乙酰、乙醛、高级醇的含量和发酵度为筛选指标,得到1株发酵性能优良的菌株TK-10。以出发菌株TS-01为对照进行600 t大生产对比验证,表明新菌株TK-10的SO2产量明显升高,成品酒抗氧化性能得到改善,且口感良好,保持原有风味不变。 展开更多
关键词 lager酵母 抗氧化SO2 产物反馈抑制
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Lager啤酒酵母RLM1基因调控对其抗自溶性能的影响 被引量:4
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作者 王金晶 李梦琦 +5 位作者 侯丹 许维娜 郑飞云 刘春凤 钮成拓 李崎 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1059-1070,共12页
啤酒酵母的自溶会严重影响啤酒的品质,而酵母的质量也被认为是啤酒酿造的关键因素之一。前期在啤酒酵母自溶的研究中发现细胞完整性途径中重要的转录因子RLM1基因与酵母自溶有密切关系。本研究在啤酒酵母单倍体菌株中对RLM1进行敲除与... 啤酒酵母的自溶会严重影响啤酒的品质,而酵母的质量也被认为是啤酒酿造的关键因素之一。前期在啤酒酵母自溶的研究中发现细胞完整性途径中重要的转录因子RLM1基因与酵母自溶有密切关系。本研究在啤酒酵母单倍体菌株中对RLM1进行敲除与过表达,发现RLM1敲除后,酵母菌抗自溶性能差,而RLM1过表达则有助于酵母的抗自溶。另外,发现RLM1基因的敲除影响了酵母的抗渗透压性能、细胞壁损伤的耐受性、抗氮饥饿性能和温度耐受性。研究发现细胞壁组装及DNA损伤应答相关基因GAS1的表达随RLM1的过表达与敲除而调整,而CWI途径中其他相关基因的调控方式并没有明显的规律,推测RLM1可能主要影响了CWI途径中GAS1基因的表达,进而提高啤酒酵母在恶劣环境中的抗逆性。此研究结果对于进一步选育抗自溶啤酒酵母以及了解啤酒酵母的自溶机制提供了基础。 展开更多
关键词 lager啤酒酵母 抗自溶性能 RLM1 细胞壁完整性
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Metabolic energy variation of yeast affects its antioxidant properties in beer brewing
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作者 Jinjing Wang Xuerong Fu +4 位作者 Mengqi Li Feiyun Zheng Chengtuo Niu Chunfeng Liu Qi Li 《Systems Microbiology and Biomanufacturing》 2021年第3期311-322,共12页
Oxidation destroys the flavor and freshness of the beer,and yeast with improved antioxidant activity would benefit the flavor stability of the beer.The aim of this work was to study the antioxidant networks of lager y... Oxidation destroys the flavor and freshness of the beer,and yeast with improved antioxidant activity would benefit the flavor stability of the beer.The aim of this work was to study the antioxidant networks of lager yeast for brewing industry.Through transcriptome and metabolome analysis,we were able to map changes in anti-oxidant pathways and transcription of genes in lager yeast.Results suggested that metabolic energy variation in yeast might be the main reason for the improved anti-oxidant capacity.Lower metabolic rate kept the yeast at relatively lower respiratory status at the end of fermentation,thereby prolonging the lifespan and potentially supporting its usage in serial fermentations.Up-regulation of mannose synthesis and hexose transport strengthened the cell structure,which may have contributed to the anti-oxidant capacity of yeast.A deeper understanding of the globally regulation pattern of anti-oxidation in lager yeast is expected to support the design of strain development strategies for improved anti-oxidant capacity of yeast for fermentation industry. 展开更多
关键词 lager yeast ANTI-OXIDATION Metabolic energy variation ROBUSTNESS
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异柠檬酸脱氢酶基因调控对拉格酵母抗自溶性能的影响
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作者 叶可嘉 吴豪博 +4 位作者 刘春凤 钮成拓 郑飞云 李崎 王金晶 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3451-3463,共13页
啤酒酵母的自溶会影响啤酒的风味和品质,对酵母自溶的调控是工业啤酒生产的迫切需求。前期在啤酒酵母自溶的研究中发现柠檬酸循环相关基因对酵母自溶有较大影响。为探究柠檬酸循环中异柠檬酸脱氢酶基因调控对自溶的影响,在典型拉格啤酒... 啤酒酵母的自溶会影响啤酒的风味和品质,对酵母自溶的调控是工业啤酒生产的迫切需求。前期在啤酒酵母自溶的研究中发现柠檬酸循环相关基因对酵母自溶有较大影响。为探究柠檬酸循环中异柠檬酸脱氢酶基因调控对自溶的影响,在典型拉格啤酒酵母(Saccharomyces pastorianus H.)Pilsner中对IDP1和IDP2基因进行了破坏和过表达。结果发现IDP1基因的破坏能提高酵母的抗自溶能力,自溶96 h抗自溶指数为8.40,比原始菌提高了1.5倍。IDP1基因的破坏提高还原型辅酶Ⅱ(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)的供应,NADPH/NADP^(+)的比值为1.94,发酵结束时胞内ATP水平比原始菌提高1.8倍,活性氧(reactive oxygen species,ROS)相比原始菌减少10%。IDP2基因的缺失造成酵母快速自溶和NADPH供应的减少,自溶96 h抗自溶指数为4.03,NADPH/NADP^(+)的比值为0.89。发酵结束时胞内ATP水平相比原始菌减少8%,ROS是原始菌的1.3倍。本研究进一步阐释了柠檬酸循环相关基因对酵母自溶的调控机理,为选育自溶性能可控的优良酵母提供了理论基础。 展开更多
关键词 拉格酵母 抗自溶性能 柠檬酸循环 NADPH
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走出青藏高原:拉格啤酒酵母的起源与演化
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作者 白逢彦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期4188-4201,共14页
采用低温底层发酵的拉格(lager)啤酒15世纪开始在德国巴伐利亚地区出现,19世纪初流行至全世界,目前已成为全球产量最高的酒精饮料。目前已阐明,拉格啤酒发酵酵母为巴斯德酿酒酵母(Saccharomyces pastorianus),该种是一个杂交种,由艾尔(a... 采用低温底层发酵的拉格(lager)啤酒15世纪开始在德国巴伐利亚地区出现,19世纪初流行至全世界,目前已成为全球产量最高的酒精饮料。目前已阐明,拉格啤酒发酵酵母为巴斯德酿酒酵母(Saccharomyces pastorianus),该种是一个杂交种,由艾尔(ale)啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)与野生真贝氏酿酒酵母(Saccharomyces eubayanus)杂交而成,后者赋予了拉格啤酒酵母的耐低温能力。近年的群体遗传学和群体基因组学研究表明,拉格啤酒酵母的野生亲本S.eubayanus起源于青藏高原,可能通过丝绸之路传播到了欧洲。比较基因组学研究表明,拉格啤酒酵母包含2个株系,即Ⅰ系/Saaz系和Ⅱ系/Frohberg系,早期分别流行于中欧和西欧地区。前者为近似异源3倍体,后者为近似异源4倍体。2个株系在耐低温、麦芽三糖利用和风味物质产生能力等方面具有明显差异。在中国普通微生物菌种保藏管理中心(China General Microbiological Culture Collection Center,CGMCC)保藏的S.pastorianus菌株绝大多数属于Ⅱ系/Frohberg系。野生S.eubayanus的发现为通过人工杂交创建新的啤酒酵母杂交菌株,从而为选育具有独特发酵性能的新型非转基因啤酒酵母菌株提供了新途径,可能会对啤酒酿造的未来产生重大影响。本文除简要介绍啤酒酵母的研究历史外,重点阐述近年来在拉格啤酒酵母的杂种特性、起源、演化和基因组构成等方面的最新研究进展,并指出需要进一步解决的问题和未来研究趋势。 展开更多
关键词 拉格啤酒酵母 酿酒酵母 巴斯德酿酒酵母 真贝氏酿酒酵母 比较基因组
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RIM21基因缺失对拉格啤酒酵母絮凝性能的影响 被引量:2
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作者 周雪飞 索婧怡 +5 位作者 侯丹 刘春凤 钮成拓 郑飞云 李崎 王金晶 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期4373-4381,共9页
拉格啤酒酵母是我国啤酒酿造的主要菌种。细胞絮凝是啤酒酵母重要的生产性状,在不影响发酵性能的情况下适度提高酵母的絮凝能力,有助于发酵结束时细胞和产物的分离,有利于工业化啤酒生产,具有较高的经济价值。前期在对一株工业用拉格啤... 拉格啤酒酵母是我国啤酒酿造的主要菌种。细胞絮凝是啤酒酵母重要的生产性状,在不影响发酵性能的情况下适度提高酵母的絮凝能力,有助于发酵结束时细胞和产物的分离,有利于工业化啤酒生产,具有较高的经济价值。前期在对一株工业用拉格啤酒酵母G03及其絮凝突变株的研究中,挖掘到一个可能影响啤酒酵母絮凝性的候选基因RIM21。为了验证该基因的作用,文中在G03中对RIM21进行了敲除,发现RIM21敲除后,酵母在11℃发酵条件下的絮凝性能增强,基因FLO5、Lg-FLO1及细胞壁完整性途径中的部分基因表达上调。同时,CO2失重、酒精度、发酵度等发酵指标未有明显变化。另外,发现RIM21的缺失增强了啤酒酵母对细胞壁抑制剂的耐性。研究结果为阐释低温发酵条件下啤酒酵母的絮凝调控机理及菌株絮凝性的改善提供了基础。 展开更多
关键词 拉格酵母 低温发酵 絮凝 基因缺失 RIM21
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拉格啤酒酵母菌物种和株系的快速分子鉴定 被引量:3
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作者 邴健 白逢彦 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1441-1453,共13页
近年来的基因组学研究结果已证实拉格啤酒酵母Saccharomycespastorianus是一个由艾尔啤酒酵母S.cerevisiae和真贝氏酿酒酵母S.eubayanus杂交而成的杂交种,并可根据地域传承和染色体倍性分为两个株系,即I型/Saaz系和II型/Frohberg系。前... 近年来的基因组学研究结果已证实拉格啤酒酵母Saccharomycespastorianus是一个由艾尔啤酒酵母S.cerevisiae和真贝氏酿酒酵母S.eubayanus杂交而成的杂交种,并可根据地域传承和染色体倍性分为两个株系,即I型/Saaz系和II型/Frohberg系。前者主要为异源3倍体,后者则主要为异源4倍体。为了探讨中国啤酒酿造酵母菌的物种和菌系归属,我们根据拉格啤酒酵母及其两个菌系的基因组特性,制定了一套基于IntFR片段种特异性扩增和ITS-RFLP分析的精确但简便易行的拉格啤酒酵母菌物种和株系鉴定新方法,并以酿酒酵母属内相关种的模式或权威菌株和部分酒精及面包酵母为参照,对保藏于中国普通微生物菌种保藏中心(CGMCC)的41株啤酒酿造酵母菌进行了重新鉴定和分型。这些菌株除1株原定名为贝氏酿酒酵母S. bayanus外,其余菌株的原定名均为S. cerevisiae。研究结果确认了S. bayanus菌株鉴定的正确性,但在其余的40株啤酒酵母菌株中,21株属于S. cerevisiae,1株属于葡萄汁酿酒酵母S. uvarum,18株属于S. pastorianus。菌系鉴定和流式细胞测定结果显示在确认的S. pastorianus菌株中,1株为I型/Saaz系,3倍体;17株为II型/Frohberg系,其中9株为4倍体,两株为3倍体,5株介于3倍至4倍体之间。啤酒酵母物种和株系的确认对优化发酵工艺和菌种选育及遗传改造等具有重要意义。 展开更多
关键词 拉格啤酒酵母 艾尔啤酒酵母 酿酒酵母 巴斯德酿酒酵母 真贝氏酿酒酵母
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