Validation of HPLC and FIA Spectrophotometric Methods for the Determination of Lansoprazole in Pharmaceutical Dosage Forms and Human Plasma

A chromatographic and aspectrophotometric methods for the quantitative determination of lansoprazole in pharmaceutical combinations and human plasma were developed. The analytical parameters were studied according to International Conference on Harmonization guidelines. The Flow Injection Analysis (FIA) method is based on the oxidation of lansoprazole by a known excess of N-bromosuccinimide (NBS) in an acidic medium, followed by a reaction of excess oxidant with chloranilic acid (CAA) to bleach its purple color. The separation was carried out using RP-C18 column with a mobile phase composed of ACN: TEA: phosphate buffer (60: 0.2: 39.8 v/v) adjusted to pH = 4.

RP-HPLC法测定人体血浆中吉西他滨的浓度

目的:建立一种测定人体血浆中吉西他滨血药浓度的高效液相色谱方法。方法:取血浆样品1 mL,加内标100μL(含氟脲苷0.8μg·mL-1),混匀,加甲醇-乙腈(1:9)3 mL混匀,放置5 min,离心(3500 r·min-1,10 min),取上清液于60℃水浴放置,氮气吹干,残渣用0.5 mL流动相溶解,离心(15000 r·min～1,10 min),取上清液,进样50μL。色谱柱:Lichrospher 5-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:40 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(用醋酸调节pH=5.5)-乙腈(97.5:2.5),流速:0.8 mL·min～1,检测波长:268 nm,柱温:25℃。结果:本方法线性范围0.20—10.0μg·mL～1,r=0.9999,方法检测限为0.10μg·mL-1(S/N>4),定量限为(0.21±0.02)μg·mL-1(S/N>10);方法回收率为100.1%-106.6%(n=21),日内RSD为2.3%-4.0%(n=21),日间RSD为3.2%-5.2%(n=21)。结论:本方法灵敏度高,操作简便、准确,可用于人体血浆中吉西他滨浓度的测定及药动学研究。

RP-HPLC法测定人血浆中兰索拉唑浓度

目的:建立 RP-HPLC 法测定人血浆中兰索拉唑浓度。方法:1 mL 血浆样品以奥美拉唑为内标,加入0.5 mL Na_2HPO_4溶液(0.5 mol·L^(-1),pH 9.05)碱化,用5 mL 乙醚-二氯甲烷(7:3,v/v)混合液振荡萃取,分取有机相空气流下吹干。残渣用200μL甲醇-0.1 mol·L^(-1)碳酸钠(50:50,v/v)混合液溶解,40 μL进样。采用 NUCLEOSIL C_(18)分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.025 mol·L^(-1)磷酸二氢钠-乙腈(60:40,v/v)为流动相,流速为1 mL·min^(-1),柱温为30℃,于285 nm 波长下检测。结果:兰索拉唑在20～2400μg·L^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9996),最低检测浓度为20μg·L^(-1)。血浆中低、中、高3种浓度的萃取回收率(n=5)分别为69.9%,64.0%,58.8%;RSD(n=5)分别为7.94%,5.33%,5.39%;方法回收率(n=5)分别为98.6%,106.3%,101.9%;日内和日间精密度均小于10%。结论:该法操作简单,灵敏,准确,重现性好,适用于该药的临床药代动力学研究。

RP-HPLC法测定人体血浆中罗红霉素的浓度

目的:建立一种测定人体血浆中罗红霉素血药浓度的高效液相色谱方法。方法:色谱柱:Lichrospher C_(18)(150mm×4.6mm,5μm),流动相:水(含0.020mol·L^(-1)磷酸氢二钠,磷酸调 pH 为3.18)-乙腈(65:35),流速:1mL·min^(-1),检测波长:210nm,柱温:30℃。含药血浆处理采用碱化,有机溶剂萃取法。取有机相4mL,40℃水浴中通氮气吹干,200μL流动相溶解,40μL进样分析。结果:本法线性范围:0.25～20.00μg·mL^(-1),r=0.9991(n=5),最低定量浓度为0.25μg·mL^(-1);方法的准确度在90.3%～107.7%之间;提取回收率>70%(RSD<10%);日内、日间 RSD<10%。结论:本方法灵敏度高,操作简便、准确,可用于人体血浆中罗红霉素的测定及药代动力学研究。

RP-HPLC法测定人体血浆中愈创木酚的浓度

目的建立测定人血浆中的愈创木酚浓度的RP唧C法。方法采用Hypersil ODS柱，以质量分数为0．5％H3PO4和质量分数为0．5％三乙胺的水溶液-乙腈（体积比为100：50）为流动相，流速为1 mL·min^-1，检测波长220nm。结果愈创木酚的线性范围为0．5808-87．12mg·L^-1。最低定量限为0．5808mg·L^-1，回归方程Y=22494．27X-6906．97，r=0．9994（权重1／^c4×10^3）；平均回收率为（99．78±3．85）％，日内及日间精密度分别为2．99％和2．59％（n=6）。结论该方法简便、快速、准确，适用于临床上呱西替柳体内的研究，为呱西替柳的临床研究提供可靠的动力学依据。

RP-HPLC法测定人血浆中磷酸西他列汀药物含量

目的建立测定人血浆中磷酸西他列汀含量的高效液相色谱法。方法采用Symmetrix ODS-H为分析柱，甲醇-0．1％高氯酸水溶液（40：60）为流动相；流速为1．0mL·min^-1，检测波长为268nm，采用外标法定量测定。结果进样浓度在5～500μg·mL^-1范围内与峰面积呈良好线性关系，r=0．9993，方法回收率为96．1％-100．9％。最低检测限为2μg·mL^-1。日间、日内精密度均小于4％。结论此方法操作简便、灵敏，重复性好，适用于人血浆中磷酸西他列汀含量的测定。

RP-HPLC测定人血浆中的阿昔洛韦

目的采用RP-HPLC法测定人血浆中的阿昔洛韦。方法Lichrospher C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-10 mmol.L-1磷酸二氢钠缓冲液(3:97,磷酸调pH3.4);流速1.0 ml.min-1;检测波长254 nm;柱温40℃。结果阿昔洛韦在0.05~5.00μg.ml-1线性良好(r=0.9994),最低检测浓度为50.00 ng.ml-1,方法回收率93.33%~104.96%,日内、日间RSD分别为1.46%~3.83%和2.32%~6.37%。结论所建方法简便、快速、灵敏、准确、干扰少,适用于阿昔洛韦血药浓度的测定。

RP-HPLC-FLD法测定人血浆中的阿替洛尔

目的建立RP-HPLC-FLD方法测定血浆中阿替洛尔的浓度。方法血浆样品用有机溶剂（乙酸乙酯-异丙醇=4：1）提取浓缩后测定，内标法定量。色谱柱为Phenomenex C18柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-水（含25mmol·L^-1磷酸二氢钠和5mmol·L^-1十二烷基磺酸钠）=30：70（v／v）；激发波长：226nm，发射波长：310nm。结果阿替洛尔浓度在9．6～1200．0ng·mL^-1呈良好线性关系（r=0．9993），最低定量下限浓度为9．6ng·mL^-1，方法回收率为94．3％～104．5％（n=15），日内RSD为6．1％～11．8％（n=15），日间RSD为6．0％～11．1％（n=45）。结论本方法准确、简单、灵敏，可用于阿替洛尔的药动学研究。

反相HPLC法测定人血中苄普地尔浓度及其药物动力学参数

本文建立了用反相高效液相色谱(HPLC)法测定人血浆中苄普地尔浓度,并由人血药浓度-时间曲线算得动力学参数。 以苄普地尔的溴化衍生物作内标,正己烷-异丁醇(98:2)混合溶剂提取人血浆中苄普地尔,于YWG-C_(28)H_(37)柱上进行色谱测定。选择甲醇-水-10％三乙胺磷酸调节至pH3.3(74:16:10)为流动相,检测波长UV-254nm。本法由人血浆中提取苄普地尔的线性浓度范围为50～200Ong/ml血浆(Y=4.316×10^(-4)X+0.01517;γ=0.9997);方法回收率平均为102.01±5.54(s)％(n=30);天内、天间精密度平均CV各为3.40％及4.14％(n=5);最低检测浓度为15ng/ml血浆。本法为苄普地尔应用于临床治疗可提供血药浓度监测(TDM)需要。

RP-HPLC测定人血浆中的联苯丁酮酸

目的测定人血浆中的联苯丁酮酸。方法采用Kromail C18柱，以甲醇-0．02mol·L^-1KH2PO4-乙腈（70：25：5）（用磷酸调pH3）为流动相，流速1．0ml·min^-1，检测波长285nm。结果联苯丁酮酸的线性范围为16．0-0．16mg·L^-1，最低定量限为0．16mg·L^-1，回归方程为：Y=5．287×10^4X-2．083×10^2（r=0．9993）；提取回收率为98．32％～103．47％，日内及日间精密度（n=6）分别为2．91％～3．86％和2．96％～4．79％。结论所建方法简便、快速、准确，适用于联苯丁酮酸的临床研究。

反相高效液相色谱法测定人血浆中兰索拉唑的浓度

目的:建立反相高效液相色谱法测定人血浆中兰索拉唑的浓度。方法:色谱柱为Agilent Eclipse XDB C_(18)(150 mm×4．6 mm,5μm),流动相为0．01 mol·L^(-1)磷酸二氢铵(内含1‰正辛胺)-乙腈(66:34),流速为1．0 ml·min^(-1),检测波长为285 nm,内标为奥美拉唑。结果:兰索拉唑的线性范围为0．01-2．00μg·ml^(-1),回归方程为Y=0．0019C+0．0022(r=0．999 4);批内RSD为2．95％～3．25％,批间RSD为1．09％-1．95％。结论:本方法操作简便,测定结果准确,检测限较低,重现性好,可用于兰索拉唑人体药物动力学研究。

反相高效液相色谱法测定人体血浆中扑尔敏的浓度

目的:建立一种测定人体血浆中扑尔敏浓度的高效液相色谱法。方法:取人体血浆1.5 mL,加内标右美沙芬后,用三氯甲烷提取,取其有机相于60℃水浴挥干,剩余物加流动相复溶,并用乙酸乙酯洗涤,取水相20μL进样。流动相为0.025mol·L^(-1)磷酸二氢铵(用磷酸调pH为3.5)-乙腈(70:30),色谱柱为Diamonsil ODS C_(18)柱(5μm,4.6mm×150mm),检测波长为200 nm,流速为1.0mL·min^(-1),柱温为室温。结果:本方法线性范围为0.5～16ng·mL^(-1),,r=0.998 7,最低检测限为0.25ng·mL^(-1),方法回收率为96.6％～108.0％,日内RSD为4.1％～5.9％,日间RSD为4.6％～5.9％。结论:本方法灵敏度高,特异性强,重现性好,可用于人体血浆中扑尔敏浓度的测定。

反相高效液相色谱法测定人血浆苯磺酸左旋氨氯地平浓度

目的 建立测定人体血浆苯磺酸左旋氨氯地平浓度的反相高效液相色谱测定法（RP-HPLC）。方法 采用C8色谱柱（4．6mm×150mm，5μm），以甲醇：20mmol·L^-1磷酸二氢钾（KH2P04）缓冲液（pH值3．5）=42：58为流动相．地尔硫[艹卓]为内标；流速：1.0mL·min^-1；血浆样品用甲醇沉淀蛋白，使用冷冻干燥的方法将样品浓缩，然后进样，进样量：50μL；紫外检测波长为238nm。结果 苯磺酸左旋氨氯地平浓度在0．2～20．0ng·ml^-1范围内线性关系良好（r=0．9987），平均绝对回收率为94．3％±4．6％（n=15），日内与日间精密度均≤9．6％。最低检测限为0．1ng·mL^-1；内源性物质不干扰测定。结论 该方法工作曲线稳定，灵敏度高，操作步骤简单。可以用于苯磺酸左旋氨氯地平的药动学研究及临床血药浓度监测。

反相高效液相色谱法测定健康志愿者血浆中格列吡嗪浓度

目的建立反相高效液相色谱（RP-HPLC）测定格列吡嗪血药浓度的方法。方法血浆用活化的固相萃取小柱洗脱药物。色谱柱为MAHEREY-NAGELC18（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-30mmol·L^-1醋酸铵水溶液（内含2．5％甲酸）（50：50），柱温50℃，流速1．0mL·min^-1，检测波长225nm。结果格列吡嗪浓度在16．8～1680．0ng·mL^-1内的线性关系良好（r=0．9999），血浆中低、中、高3种浓度的方法回收率在100．32％～103．38％，日内RSD≤8．90％，日间RSD≤9．06％。结论本法快速、灵敏、高效，适于格列吡嗪的血药浓度监测。

反相高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血浆药物浓度

目的：采用反相高效液相方法测定血浆中盐酸二甲双胍的药物浓度。方法：色谱柱为KromasilC18OSD柱，流动相：水相（10mmol／L磷酸二氢钠含4mmol／L辛烷基磺酸钠）：乙腈=85：15，流速1．0ml／min，柱温25℃，灵敏度0．1AUFS，检测波长233nm。结果：盐酸二甲双胍在0．05～4．00μg／mL范围内线性关系艮好（y=1.1386e^6＋52879．8，r=0．9999，n=7），最低定量限：0．05μg／mL，低、中、高3种浓度水平日内和日间差异（RSD％）分别为1．32．1．14．0．29（n=5）及2．79、7．37、7．00（n=5）。相对回收率低、中、高分别为98．5％、100．8％、102．9％，平均回收率（100．7±2.20）％。结论：本方法处理过程简单，可快捷、准确的应用于盐酸二甲双胍的血浆浓度测定。

反相高效液相色谱法测定人血浆和尿中丹皮酚浓度

目的建立测定血浆、尿样本中丹皮酚含量的反相高效液相色谱法。方法血浆样品经沉淀蛋白,尿样经稀释后,以乙腈-0.1%磷酸pH3.5（55∶45）为流动相,经DiamonsilC18柱分离,进行色谱分析。结果本方法丹皮酚的血浆浓度在20-1000μg·L^-1,尿中浓度在20-800μg·L^-1内线性关系良好,方法回收率在81.0%-85.0%之间,日内、日间RSD均小于11.0%。结论本方法简便、快速、灵敏度高,可用于丹皮酚的药动学研究。

反相高效液相色谱法测定人血浆及尿样中普卢利沙星活性代谢物

目的建立分析人血浆及尿样中普卢利沙星活性代谢物浓度的反相高效液相色谱方法。方法样本用甲醇-乙腈(1 :1)沉淀后离心取上清液进行色谱分析。分析柱为Diamonsil C_(18)(250 mm×4．6 mm,5μm)。流动相为乙腈—0．05 mol/L磷酸二氢钾(pH2．2,含1%的四丁基溴化铵);血浆和尿样分析分别用20:80(V/V)、流速1．0 mL/min和12:88(V/V)、流速1．6 mL/mln。激发和发射波长分别为280 nm和425 nm。结果血浆和尿样测定的线性范围分别为0．005～5 mg/L(r= 0．9999)和0．05～5 mg/L(r=0．9999),最低检测浓度分别为0．002 mg/L和0．01mg/L。血浆5．00、0．50和0．05 mg/L浓度的相对回收率在100．64%～101．00%,日内和日间相对标准差(RSD)分别小于2．5%和4．6%。尿样2．50、0．50和0．10 mg/ L浓度的相对回收率在97．20%～100．20%,日内和日间RSD分别小于1．3%和4．3%。方法成功用于健康人口服普卢利沙星的药动学研究。结论本方法具有简便、快速、灵敏度高、重现性好等特点,适用于普卢利沙星的药动学研究。

用梯度反相高效液相色谱法测定人血浆中的谷氨酸和谷氨酰胺的含量

作者以常用的ＹＷＧ－Ｃ１８为填料，以１０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ６．８）－甲醇为洗脱系统，采用梯度洗脱方式，测定了人血浆中谷氨酸和谷氨酰胺的含量。谷氨酸和谷氨酰胺的线性关系良好。相对回收率分别为９８．５％和９６．２％。该方法简便、准确。

高效液相色谱荧光法测定健康人血浆中赖诺普利浓度

目的:建立测定血浆中赖诺普利浓度的方法,为临床血药浓度的测定提供快速、有效的分析手段。方法:高效液相色谱法荧光法,采用HypersilODS柱,流动相为20mmol/LKH2PO4缓冲液(pH=3.0)-甲醇(35∶65,V/V),流速为1.0mL/min;血浆样品经固相萃取后与荧光试剂(荧光胺)发生衍生化反应,进样量为20μL;荧光检测器的激发波长为383nm,发射波长为477nm。结果:赖诺普利浓度在2～200ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9978),平均绝对回收率为68.55%(n=15),日内与日间精密度均小于3%,最低检测限为1ng/mL;内源性物质不干扰测定。结论:高效液相色谱荧光法工作曲线稳定,灵敏度高,操作步骤简单,可以用于赖诺普利的药动学和药效学研究及临床血药浓度的监测。

反相高效液相色谱法测定人血浆中拉米夫定浓度

目的:建立RP-HPLC测定人体血浆中拉米夫定浓度。方法:采用ODS色谱柱(4．6 mm×150 mm,5μm),以乙腈: 40 mmol·L-1的KH2PO4缓冲液(含0．1％三乙胺,pH 3．5)=18:82为流动相,法莫替丁为内标;流速:1．0 ml·min-1;紫外检测波长为270 nm。结果:拉米夫定在2-2 500 ng·ml-1。浓度范围内线性关系良好(r=0．997 3),最低检测限为0．5 ng·ml-1,平均绝对回收率为91．6％(3．2％,n=15),日内与日间RSD均小于5％。结论:本法操作简单,灵敏度高,可以用于拉米夫定的药动学研究及血药浓度监测。