饲料维生素C对花鲈(Lateolabrax japonicus)幼鱼生长和免疫的影响

采用单因子实验设计方法,进行了饲料中添加维生素C对花鲈幼鱼生长(增重率、存活率、特定生长率、饲料效率)、免疫反应(血清中溶菌酶活性和血清总补体活性)和组织中维生素C积累量影响的研究。结果表明,随着饲料中维生素C添加量由0提高到98.9mg/kg,花鲈的增重率和特定生长率显著提高。以特定生长率为指标,花鲈最佳生长性能的饲料维生素C添加量为103.0mg/kg左右;饲料中维生素C添加量在0—98.9mg/kg时,花鲈幼鱼肌肉和肝脏中维生素C的积累量随饲料中维生素C的增加而显著增加(P<0.05),花鲈幼鱼获得最大肝脏和肌肉中维生素C的积累量时,饲料中维生素C最低添加量为97.2mg/kg和105.0mg/kg;花鲈幼鱼血清溶菌酶和总补体活性随着维生素C添加量的增加而显著升高,维生素C添加量达到396.4mg/kg时,血清溶菌酶和总补体活性较高。综上所述,花鲈生长和免疫的维生素C适宜添加量为400mg/kg左右。

饲料中不同水解蛋白对鲈鱼(Lateolabrax japonicus)幼鱼鱼体及组织脂肪含量的影响

本研究通过8周的摄食生长实验来探讨高植物蛋白饲料中添加不同类型的水解蛋白对鲈鱼(Lateolabrax japonicus)幼鱼(初始平均体重为31.99 g)鱼体及组织脂肪含量的影响。实验设4个等氮等能的饲料处理组,对照组含有30%的鱼粉,通过在对照组饲料基础上分别添加水解猪血蛋白、水解豆粕蛋白和水解酵母蛋白替代10%的鱼粉来获得不同类型的实验组饲料,即水解猪血蛋白组、水解豆粕蛋白组和水解酵母蛋白组。养殖实验在近海浮式网箱中进行,每组饲料投喂3个重复的养殖网箱,每个网箱30尾鱼。实验结果显示,高植物蛋白饲料中水解猪血蛋白、水解豆粕蛋白及水解酵母蛋白并没有对鲈鱼幼鱼的鱼体、肝脏、肌肉和内脏的脂肪含量产生显著影响。但与对照组相比,添加水解酵母蛋白的处理组显著降低了鲈鱼幼鱼的血清甘油三酯、总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇含量(P<0.05)。水解酵母蛋白替代鱼粉显著提高了鲈鱼幼鱼肌肉中C20∶1n-9的含量,而水解豆粕蛋白和水解酵母蛋白显著降低了肌肉中C22∶5n-3的含量(P<0.05)。与对照组相比,水解酵母蛋白显著降低了血清中C20∶5n-3的含量(P<0.05)。在腹部脂肪组织中,与对照组相比,猪血、豆粕及酵母蛋白水解物替代鱼粉极显著提高了饱和脂肪酸、十八碳及十六碳单不饱和脂肪酸、亚油酸及亚麻酸的含量,而极显著降低了C20∶1n-9、C20∶4n-6、C22∶5n-3和C22∶6n-3的含量(P<0.01)。本研究表明,高植物蛋白饲料中猪血、豆粕及酵母蛋白水解物替代10%的饲料鱼粉并未有效调节鲈鱼幼鱼鱼体、肝脏、肌肉及内脏的脂肪累积,但水解酵母蛋白在一定程度上改善了血清甘油三酯和胆固醇的代谢。水解蛋白对鲈鱼幼鱼脂肪酸组成的调节因水解蛋白的类型及鱼体组织类型而异。本研究是国内外首次系统研究不同类型水解蛋白对养殖鱼类脂肪累积的调节作用,对该领域相关研究具有重要借鉴和参考意义。

鲈幼鱼对饲料中苏氨酸的需要量

以初始体质量(8.00±0.20)g的鲈为实验对象,在海水网箱(1.5 m×1.5 m×2.0 m)中进行为期8周的摄食生长实验,研究鲈对饲料中苏氨酸的需要量。通过在半精制基础饲料中添加晶体L-苏氨酸使饲料中苏氨酸含量分别达到0.75%、1.03%、1.36%、1.67%、2.04%和2.31%,配制成6水平等氮等能饲料(41.83%粗蛋白质,19.68 kJ/g总能)。每种饲料设3个重复,每个重复随机放养30尾鲈。实验采用表观饱食投喂方式,每天投喂2次(06:00和17:30),实验期间水温为26～32℃,盐度为22～28,溶解氧含量在7 mg/L左右。实验结果表明,各饲料处理组成活率(94.4%～98.9%)无显著差异。随着饲料中苏氨酸含量的增加,鲈的增重率显著升高(150.3%～256.9%)(P<0.05),且在1.67%苏氨酸饲料组达到最大值(256.9%),然而,随着饲料中苏氨酸含量的进一步增加,增重率有下降的趋势。鲈的氮累积率随着饲料中苏氨酸含量的增加而显著升高(13.18%～26.36%)(P<0.05),且在1.67%苏氨酸饲料组达到最大值(26.36%),随着饲料中苏氨酸含量的进一步增加,氮累积率有下降的趋势。饲料苏氨酸含量对鲈鱼体粗蛋白、粗脂肪和灰分含量无显著影响。以增重率和氮累积率为评价指标经二次回归分析得出,鲈对饲料中苏氨酸的需要量分别为1.77%和1.88%,占饲料蛋白质的4.21%和4.47%。

饲料中添加β-葡聚糖对花鲈生长性能、体成分、血清生化指标和抗氨氮应激能力的影响

本试验旨在研究饲料中添加β-葡聚糖对花鲈生长性能、体成分、血清生化指标和抗氨氮应激能力的影响。选用体重为(8.35±0.17)g的花鲈(Lateolabrax japonicus)720尾,随机分为6组,每组4个重复,每个重复30尾鱼。对照组投喂基础饲料,β-葡聚糖添加组分别投喂在基础饲料中添加200、400、600、800和1 000 mg/kgβ-葡聚糖的试验饲料,饲养6周后,应用氯化铵进行氨氮应激试验。结果表明:与对照组相比,各β-葡聚糖添加组花鲈的增重率和特定生长率显著升高(P<0.05),饲料系数显著降低(P<0.05);各组之间存活率、肥满度、肝体指数差异不显著(P>0.05)。各组花鲈鱼体的粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、水分含量差异不显著(P>0.05)。饲料中添加β-葡聚糖对花鲈血清谷丙转氨酶活性以及总蛋白、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、胆固醇、甘油三酯、尿素氮含量均无显著影响(P>0.05)。氨氮应激96 h,400和600 mg/kgβ-葡聚糖添加组的累计死亡率与对照组相比显著降低(P<0.05)。由此得出,饲料中添加β-葡聚糖可提高花鲈的生长性能以及抗氨氮应激能力;以增重率为评价指标,运用抛物线与折线模型相结合分析得出花鲈饲料中β-葡聚糖的适宜添加量为415.10 mg/kg。

饲料中添加外源酶对大黄鱼和鲈氮磷排泄的影响

本研究以大黄鱼和鲈为实验对象,探讨饲料中添加植酸酶(PY)和非淀粉性多糖酶(WX和VP)对其氨氮和可溶性磷(PO43--P)排泄的影响。以含植物蛋白的饲料为基础饲料,分别向每千克饲料中添加200mg植酸酶(酶的活性为2500IU/g)、800mg WX(主要包括葡聚糖酶、戊聚糖酶和纤维素酶,各种酶的活性皆为50IU/g)、400mg VP(主要为木聚糖酶,酶的活性为1000IU/g)以及800mg WX+400mg VP配制出5种实验饲料。实验鱼在海水网箱中经过8周的摄食驯养后,转入室内水族箱中进行氮磷排泄测定实验。在水族箱中经2天的适应后,测定饥饿状态下氨氮及可溶性磷的排泄率。然后饱食投喂,并连续测定摄食后48h内鱼体氨氮和可溶性磷的排泄率。实验期间水温为26.5—32.5℃,盐度为32.5‰—36‰,溶氧在7 mg/L以上。实验结果表明,饥饿状态下实验鱼的氨氮和可溶性磷排泄不受实验饲料影响(p>0.05)。而在饱食条件下,实验饲料中添加非淀粉性多糖酶(WX、VP及WX+VP)显著降低了实验鱼的氨氮排泄率(p<0.05),而添加植酸酶组实验鱼的氨氮排泄率与对照组差异不显著。饲料处理对实验鱼可溶性磷的排泄率的影响不显著(p>0.05),但添加植酸酶组实验鱼的可溶性磷排泄率有增加的趋势。

混合植物蛋白质替代鱼粉对花鲈和西伯利亚鲟生长和肉质影响的比较研究

通过16周的生长试验,比较研究混合植物蛋白质替代鱼粉对花鲈(Lateolabrax japoni-cus)和西伯利亚鲟(Acipenser baeri Brandt)生长和肉质的影响。2种试验鱼的对照组饲料均以低温蒸汽干燥鱼粉(白鱼粉)作为唯一蛋白质源,花鲈对照组饲料含56.9%的白鱼粉,粗蛋白质含量为40%,命名为LJ-FM;西伯利亚鲟对照组饲料含51.0%的白鱼粉,粗蛋白质含量为36%,命名为AB-FM。以混合植物蛋白质(豆粕∶谷元粉为1.00∶1.67,粗蛋白质含量为64.84%)在等氮等能的基础上分别替代对照组饲料中25%、50%、75%、100%的鱼粉,并相应命名为LJ-PPB25、LJ-PPB50、LJ-PPB75、LJ-PPB100和AB-PPB25、AB-PPB50、AB-PPB75、AB-PPB100。花鲈的初始体重为(7.34±0.01)g,随机分为5组,每组设4个重复,每个重复30尾;西伯利亚鲟的初始体重为(49.48±1.00)g,随机分为5组,每组设4个重复,每个重复22尾。结果表明:混合植物蛋白质替代鱼粉后,花鲈的摄食率显著下降(P<0.05);末均重以LJ-PPB25组最高,显著高于LJ-PPB75和LJ-PPB100组(P<0.05);LJ-PPB100组的饲料系数显著高于其他4组(P<0.05);混合植物蛋白质替代鱼粉后,花鲈全鱼的水分和粗灰分含量显著升高(P<0.05),粗脂肪含量显著下降(P<0.05),粗蛋白质含量和总能无显著变化(P>0.05)。各组西伯利亚鲟的摄食率、末均重、饲料系数及体成分均无显著差异(P>0.05)。同一替代水平下,西伯利亚鲟肌肉中各个游离氨基酸含量均远高于花鲈。一定水平(≤75%)的混合植物蛋白质替代鱼粉能显著提高花鲈肌肉中总游离氨基酸和呈味氨基酸的含量以及西伯利亚鲟肌肉中总游离氨基酸和必需氨基酸的含量(P<0.05)。对于花鲈,摄食含混合植物蛋白质饲料后肌肉中游离组氨酸(生物胺的前体物)含量显著增加(P<0.05);而西伯利亚鲟肌肉中游离组氨酸含量却随混合植物蛋白质替代水平的上升呈先升高后降低的趋势,以AB-PPB100组最低,显著低于除AB-PPB75组外的其他各组(P<0.05)。随着混合植物蛋白质替代水平的上升,花鲈肌肉游离氨基酸中牛磺酸含量先升高后降低,以对照组最低,显著低于除LJ-PPB100组外的其他各组(P<0.05);但对西伯利亚鲟没有显著影响(P>0.05)。2种试验鱼鲜鱼片的质构特性差异较大,但熟鱼片差异较小。混合植物蛋白质替代鱼粉后对2种试验鱼鲜鱼片和熟鱼片质构特性的影响均不显著(P>0.05)。2种试验鱼鲜鱼片的剪切力差异较大,西伯利亚鲟要远高于花鲈,但二者均未随着混合植物蛋白质替代水平的上升而发生显著变化(P>0.05)。2种试验鱼鲜鱼片中胶原蛋白含量差异较小,且随着混合植物蛋白质替代水平的上升均呈现先上升后下降的趋势,并均在替代水平为25%时达到最高值。混合植物蛋白质替代鱼粉对花鲈鲜鱼片的滴水损失没有显著影响(P>0.05),但降低了西伯利亚鲟鲜鱼片的滴水损失,且在替代水平为50%和100%时差异达到显著水平(P<0.05)。LJ-PPB25组花鲈的肌纤维密度显著低于LJ-PPB100组(P<0.05),但AB-PPB25组与AB-PPB100组间西伯利亚鲟的肌纤维密度无显著差异(P>0.05)。根据生长及肉质结果,花鲈饲料中混合植物蛋白质替代鱼粉的水平不宜高于50%。混合植物蛋白质完全替代鱼粉不影响西伯利亚鲟的生长,但考虑肉质指标建议最高替代水平为75%。

饲料亚麻酸含量对大规格鲈鱼生长性能、抗氧化指标和血清生化指标的影响

本试验旨在探讨饲料亚麻酸（ALA）含量对大规格鲈鱼生长性能、抗氧化指标和血清生化指标的影响,以确定大规格鲈鱼饲料中ALA的适宜含量。通过在基础饲料中添加苏子油,制成ALA含量分别为饲料干重0.06%、0.99%、2.03%、3.18%、4.12%和5.08%的6种等氮等脂的试验饲料。将上述试验饲料投喂初始体重为（207.77±0.64）g的鲈鱼,每种饲料设3个重复,每个重复放养20尾鱼,养殖周期为12周。结果表明：1）特定生长率（SGR）和饲料效率（FE）随饲料ALA含量的升高均呈先升高后降低的趋势,且SGR和FE均在2.03%ALA组有最大值,同时2.03%与3.18%ALA组的SGR和FE差异不显著（P〉0.05）;肝体指数（HSI）与脏体指数（VSI）均在5.08%ALA组达到最大值,且显著高于0.06%ALA组（P〈0.05）;存活率（SR）和肥满度（CF）在各组之间无显著差异（P〉0.05）。2）随着饲料中ALA含量的升高,鱼体粗蛋白质含量表现为逐渐下降的趋势,粗脂肪含量呈现增加趋势,4.12%和5.08%ALA组鱼体粗蛋白质含量显著低于0.06%ALA组（P〈0.05）,而4.12%和5.08%ALA组鱼体粗脂肪含量则显著高于0.06%、0.99%、2.03%、3.18%ALA组（P〈0.05）;不同组之间鱼体的水分与粗灰分含量无显著差异（P〉0.05）。3）2.03%ALA组血清和肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）活性与3.18%ALA组无显著差异（P〉0.05）,但显著高于0.06%与5.08%ALA组（P〈0.05）。2.03%、3.18%ALA组血清中丙二醛（MDA）含量显著低于0.06%和5.08%ALA组（P〈0.05）;同时,肝脏中MDA含量在2.03%ALA组达到最低,除与3.18%ALA组无显著差异（P〉0.05）外,显著低于其他各组（P〈0.05）。4）血清中谷草转氨酶（GOT）和谷丙转氨酶（GPT）活性均在2.03%ALA组最低,且显著低于0.06%与5.08%ALA组（P〈0.05）;血清中甘油三酯（TG）和胆固醇（CHOL）含量在4.12%ALA组有最大值,且显著高于0.06%ALA组（P〈0.05）;随着饲料中ALA含量的升高,血清中高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量呈先升高后降低趋势,2.03%、3.18%、4.12%ALA组显著高于其他组（P〈0.05）。综上所述,饲料中适宜含量（2.03%-3.18%）的ALA能够促进大规格鲈鱼的生长,提高抗氧化能力与肝脏健康水平;以SGR与FE作为评价指标,经二次曲线回归分析得出体重为207.77-406.94 g的鲈鱼饲料中ALA的适宜含量分别为饲料干重的2.53%和2.72%。

花鲈和西伯利亚鲟生长激素/类胰岛素样生长因子-Ⅰ轴相关基因全长cDNA的克隆和序列分析

本研究采用反转录聚合酶链式反应（ RT？PCR）和cDNA末端快速扩增（ RACE）技术克隆花鲈（ Lateolabrax japonicus）和西伯利亚鲟（ Acipenser baerii Brandt）生长激素（ GH）和生长激素受体（ GHR ） cDNA 全长序列。结果显示：花鲈 GH （ GenBank 登录号 JQ995145） cDNA 全长949 bp，开放阅读框615 bp，编码204个氨基酸，预测分子质量为23．06 ku，与其他物种的相似性为36．0％～90．2％；花鲈GHRⅠ（ GenBank登录号JX402001） cDNA全长3070 bp，开放阅读框1911 bp，编码637个氨基酸，预测分子质量为70．79 ku，与其他物种的相似性为32．2％～86．2％；花鲈GHRⅡ（ GenBank登录号JQ995146） cDNA全长2926 bp，开放阅读框1749 bp，编码582个氨基酸，预测分子质量为64．42 ku，与其他物种的相似性为30．8％～81．4％。西伯利亚鲟GH（ GenBank登录号JX003684） cDNA全长999 bp，开放阅读框645 bp，编码214个氨基酸，预测分子质量为24．14 ku，与其他物种的相似性为38．3％～70．1％；西伯利亚鲟GHR（ GenBank登录号JX003685） cDNA全长2283 bp，开放阅读框1716 bp，编码571个氨基酸，预测分子质量为63．41 ku，与其他物种的相似性为39．5％～49．2％。花鲈和西伯利亚鲟GH和GHR cDNA全长序列的获得为进一步研究鱼类GH／类胰岛素样生长因子－Ⅰ（ IGF？Ⅰ）轴对生长发育的调控机制奠定了科学基础。

几种免疫调节剂对花鲈生长性能、免疫力以及细菌感染后存活率影响的比较研究

本试验旨在比较几种免疫调节剂对花鲈生长性能、免疫力以及细菌感染后存活率的影响。首先设计1个鱼粉含量为38.500%的正对照组饲料,然后以豆粕替代正对照组饲料中13.500%的鱼粉作为对照组饲料,并在此基础上分别添加0.010%预混级黄霉素(负对照组)、0.004%壳寡糖、1.000%百泰A、0.050%酵母细胞壁、0.500%牛磺酸配成5种试验饲料,将上述7个组依次命名为FM、SBM、Fla、COS、GA、YCW、Tau组。选用初始体重为(18.30±0.01)g的花鲈840尾,随机分为7个组,每组4个重复,每个重复30尾鱼,养殖72 d后使用维氏气单胞菌(每100 g体重4×104CFU)对花鲈进行背鳍基部肌肉注射攻毒,观察记录攻毒后7 d的累计存活率。结果表明:豆粕替代13.500%的鱼粉后,花鲈的增重率、特定生长率显著下降(P<0.05),饲料系数显著上升(P<0.05),添加免疫调节剂后上述指标未能得到改善。各组花鲈的肥满度、肝体比没有显著变化(P>0.05),YCW组的脏体比显著高于SBM组(P<0.05),COS组的脾脏指数显著低于SBM组(P<0.05)。攻毒前,Fla组的血浆免疫球蛋白M和一氧化氮含量均处于最高水平,但是攻毒48 h后,Fla组花鲈全部死亡。攻毒前,GA、YCW组的血浆补体3含量显著高于COS组(P<0.05)。攻毒后,Tau组的血浆免疫球蛋白M含量、髓过氧化物酶活性、一氧化氮含量、抗超氧阴离子自由基活性以及全血呼吸爆发强度在7个组中均处于最高水平。FM、SBM、COS、GA、YCW、Tau组攻毒7 d后的存活率分别为50%、40%、50%、60%、85%、65%。由结果得出,上述几种免疫调节剂的添加对花鲈的生长性能均无显著影响,但是百泰A、酵母细胞壁、牛磺酸显著提高了花鲈的免疫力和对细菌感染的抵抗力,而黄霉素则对花鲈的抗病力产生了负面影响。

花鲈摄食调控相关因子全长cDNA的克隆和序列分析

本试验采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆花鲈（Lateolabrax japonicus）调控摄食因子雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、核糖体蛋白S6激酶beta-1（S6K1）、神经肽Y前体（NPY precursor）和脑肠肽前体（preproghrelin）cDNA全长序列。结果显示：花鲈mTOR（GenBank登录号KJ746670）cDNA全长8 296bp,开放阅读框7 551bp,编码2 516个氨基酸,预测其分子质量为286.14ku,与其他物种的相似性为62.0%～98.0%;S6 K1（GenBank登录号KJ746671）cDNA全长2 232bp,开放阅读框1 539bp,编码512个氨基酸,预测其分子质量为56.87ku,与其他物种的相似性为80.4%～84.9%;NPY precursor（GenBank登录号KJ850326）cDNA全长676bp,开放阅读框300bp,编码99个氨基酸,预测其分子质量为11.26ku,与其他物种的相似性为53.6%～99.0%;preproghrelin（GenBank登录号KJ850327）cDNA全长1 201bp,开放阅读框324bp,编码107个氨基酸,预测其分子质量为12.03ku,与其他物种的相似性为19.6%～85.0%。花鲈摄食调控因子cDNA全长序列地获得将为进一步研究其摄食调控机理奠定基础。