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细胞凝集素探针对典型赤潮生物的定量检测 被引量:1
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作者 黄辉 武模戈 +2 位作者 雷红灵 赖红艳 侯建军 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期279-292,共14页
采用14种异硫氰酸荧光素(FITC)标记的细胞凝集素探针对23株典型的有害赤潮生物进行了检测,结合流式细胞仪、荧光显微镜、荧光分光光度计对探针标记区分和识别目标藻的特异性和有效性进行定性和定量测定。结果表明,DBA可以把裸甲藻(Gymno... 采用14种异硫氰酸荧光素(FITC)标记的细胞凝集素探针对23株典型的有害赤潮生物进行了检测,结合流式细胞仪、荧光显微镜、荧光分光光度计对探针标记区分和识别目标藻的特异性和有效性进行定性和定量测定。结果表明,DBA可以把裸甲藻(Gymnodinium)GIXM01株与其他裸甲藻区分开;SBA、WGA和PNA探针能定性或定量地区分形态相似的裸甲藻GMDH01和TPXM01。PHA-E和SJA能分别将塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)ATDH04、ATMJ02株系与同种其他的藻株区分开;PNA也能从同种其他株系中识别塔玛亚历山大藻ATDH01,ATDH02,ATDH03株系;UEA I能从同种藻株中识别塔玛亚历山大藻ATCI01-JN、ATCI01藻株;RCA120可以区分产毒水平不同的亚历山大藻属(Alexandrium)的ASPGX01和ASPGX02。DBA、SBA、PNA和LCA探针能定性和定量区分微小原甲藻(Prorocentrum minimum)PMDH01和PMXM01;而PNA探针仅能定量区分原甲藻属(Prorocentrum)PDDH01与PMXM01。用WGA探针结合流式细胞仪、荧光显微镜、荧光分光光度等检测手段可以把探针标记的目标裸甲藻GSPXM01和TPXM01从米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)、东海原甲藻(P.donghaiense)和微小原甲藻(P.minimum)等组成的混合样品中区分开。 展开更多
关键词 细胞凝集素探针 赤潮种类 检测 流式细胞仪 荧光显微镜 荧光分光光度计
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三类分子探针对常见赤潮生物的检测
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作者 侯建军 赖红艳 +1 位作者 雷红灵 黄邦钦 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期200-208,共9页
集中使用寡核苷酸、肽核酸和细胞凝素3类探针对来自东海和厦门海域的现场赤潮样品进行了检测,尝试鉴定识别自然水样中有害的赤潮原因种塔玛亚历山大藻,微小原甲藻和纤小裸甲藻,建立和优化了这些探针的检测方法和样品处理程序。结果表明... 集中使用寡核苷酸、肽核酸和细胞凝素3类探针对来自东海和厦门海域的现场赤潮样品进行了检测,尝试鉴定识别自然水样中有害的赤潮原因种塔玛亚历山大藻,微小原甲藻和纤小裸甲藻,建立和优化了这些探针的检测方法和样品处理程序。结果表明,在东海和厦门海域的赤潮样品中均成功地检出了塔玛亚历山大藻的分布情况,各探针的检测效率为DBA>Tama28S>Tama5S;在东海和厦门海域的赤潮样品中,也成功地检测出了微小原甲藻,各探针的检测效率为:ConA>PM18S02>PM28S02;在厦门海域的赤潮水样中检出了纤小裸甲藻,各探针的检测效率为:WGA>PNATP28S01>TP18S02>TP28S01。各探针检测结果与相关文献的报道吻合较好。比较这3类探针的特异性,其中以PNA探针为最好,其次为DNA;lectin探针的特异性相对较弱。 展开更多
关键词 赤潮 寡核苷酸 肽核酸 细胞凝集素 探针
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不同分子探针对赤潮样品检测效果的比较研究
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作者 侯建军 赖红艳 +1 位作者 武模戈 刘绍平 《湖北民族学院学报(自然科学版)》 CAS 2008年第3期249-255,共7页
采用荧光标记的DNA和lectin探针对来自赤潮现场样品中的目标赤潮原因种进行了检测.结果表明这些探针能从比较复杂的现场样品背景中把目标赤潮生物识别出来.从检测效果上看,各种DNA探针对塔玛亚历山大藻、微小原甲藻和T.pulchellum标记... 采用荧光标记的DNA和lectin探针对来自赤潮现场样品中的目标赤潮原因种进行了检测.结果表明这些探针能从比较复杂的现场样品背景中把目标赤潮生物识别出来.从检测效果上看,各种DNA探针对塔玛亚历山大藻、微小原甲藻和T.pulchellum标记识别的荧光信号强度相对于lectin探针要弱.Lectin探针与明视野下的显微镜计数结果呈现出很好的相关性,但lectin探针对目标藻的绝对检出数量比明视野下的计数结果要低.lectin探针(ConA)和DNA探针(PM18S02、PM28S02)对现场样品中微小原甲藻的检测计数结果也有较好的相关性,表明在这些检测条件下,不同的探针对特定目标藻的检测结果具有可比性、相关性和可操作性. 展开更多
关键词 赤潮生物 DNA探针 细胞凝集素探针 原位荧光杂交 现场样品
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糖链受体在肿瘤微环境中的功能机制研究
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作者 顾建新 阮元元 《科技创新导报》 2016年第33期183-184,共2页
糖链是继蛋白质、核酸之后的第三条生命之链。研究表明,正常细胞表面超过70%的蛋白被糖基化修饰。在肿瘤中,糖基化的改变及糖链异常是一种非常普遍的现象,糖链异常在肿瘤增殖、迁移、侵袭、免疫逃避和耐药等过程中起重要作用。因此阐明... 糖链是继蛋白质、核酸之后的第三条生命之链。研究表明,正常细胞表面超过70%的蛋白被糖基化修饰。在肿瘤中,糖基化的改变及糖链异常是一种非常普遍的现象,糖链异常在肿瘤增殖、迁移、侵袭、免疫逃避和耐药等过程中起重要作用。因此阐明糖链结构及其受体在肿瘤发生发展过程中的作用,有助于在此基础上寻找肿瘤的治疗靶点以及进行基于糖类的创新药物研究,这是当今国际上生命科学研究中最受关注的领域之一。肿瘤是一个严重的公共卫生问题,开辟肿瘤诊断和治疗的新理念和新策略是一项十分迫切的国家需求。该项目旨在通过糖化学与糖生物学两大学科的交叉和整合,以我国发病率较高的肺癌、肝癌、乳腺癌和宫颈癌为主要研究对象,从糖科学的新视角探索糖链在肿瘤发生、发展和转移过程中的功能及分子机制;采用糖化学生物学方法,拟解决两个关键科学问题:1肿瘤功能相关糖链探针的可获得性问题;2肿瘤相关糖链的变化规律和功能机制。该项目主要研究内容将紧紧围绕当前糖化学生物学发展中的若干重要前沿问题,从肿瘤细胞和肿瘤微环境两个方向,从糖链结构特征、糖链合成调控和糖链功能实现等方面入手,运用糖链探针研究肿瘤相关特征性糖链结构、其调控机制及其功能性凝集素受体,揭示糖链在肿瘤发生、发展和转移中的生物学功能和分子机制,发现肿瘤中糖链相关的诊断和治疗靶点。另一方面,以解决糖链的高效合成为导向,采用化学及酶法两条互补的途径合成肿瘤相关的糖链及其缀合物分子,并以此为探针来验证特异性糖链在肿瘤生物学功能中的作用;进一步设计合成糖链及其模拟物,对肿瘤的糖链异常进行干预和调控,发展新的肿瘤治疗手段。 展开更多
关键词 糖化学 糖生物学 肿瘤 糖链探针 糖基转移酶 凝集素
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Galactose functionalized diketopyrrolopyrrole as NIR fluorescent probes for lectin detection and Hep G2 cell targeting based on aggregation-induced emission mechanism
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作者 YANDi Hang Xiaolei Cai +3 位作者 Jian Wang Tao Jiang Jianli Hua Bin Liu 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2018年第8期898-908,共11页
Since the elucidation that sugar-lectin interactions contribute to the understanding of ‘‘Glycomics' ', how to construct glycosensors with rapid response, excellent sensitivity and selectivity is of intense ... Since the elucidation that sugar-lectin interactions contribute to the understanding of ‘‘Glycomics' ', how to construct glycosensors with rapid response, excellent sensitivity and selectivity is of intense research interest. Herein, we report the design of three NIR emissive glyco-probes based on diketopyrrolopyrrole(DPPs) conjugated with two(DPPG), four(DPPF-G) and six(DPPS-G) galactose groups. All three molecules could probe lectins with excellent sensitivity and selectivity. The increase of glyco-DPP emission in NIR region upon interaction with lectin is due to the aggregates formation induced by sugar-lectin interactions, which have been verified by dynamic light scattering(DLS) and scanning electronic microscope(SEM) analysis.Due to the multiple glyco-ligands on DPPS-G, it has been successfully used to stain Hep G2 cells through interactions between galactose and asialogly-coprotein(ASGP-R), which are overexpressed on the surface of Hep G2 cells. 展开更多
关键词 排放机制 半乳糖 NIR G2 房间 荧光灯 扫描电子显微镜 相互作用
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尿液纤维连接蛋白糖链结构在膀胱癌患者中的变化及意义 被引量:1
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作者 郭剑明 张永康 +4 位作者 张立 杜广 张夏英 陈惠黎 王国民 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期601-604,共4页
目的寻求诊断膀胱癌的检测新方法。方法收集8例膀胱癌患者术前和术后3个月(正常)尿液标本16份,提纯纤维连接蛋白(Fn),辣根过氧化物酶(HRP)标记的凝集素作探针,连接到已固定在膜上的Fn糖链,检测已结合的HRP代表Fn糖链与凝集素的结合力,... 目的寻求诊断膀胱癌的检测新方法。方法收集8例膀胱癌患者术前和术后3个月(正常)尿液标本16份,提纯纤维连接蛋白(Fn),辣根过氧化物酶(HRP)标记的凝集素作探针,连接到已固定在膜上的Fn糖链,检测已结合的HRP代表Fn糖链与凝集素的结合力,增强化学发光法(ECL)检测已结合HRP的结合力。高效液相(HPLC)和荧光标记底物测定膀胱癌和癌旁正常组织N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(GnT)活力。结果用伴刀豆球蛋白凝集素(ConA)-HRP作探针时,膀胱癌尿液Fn结合力仅为正常膀胱尿液Fn的0.18,而用蔓陀罗凝集素(DSA)-HRP和麦胚凝集素(WGA)-HRP作探针时,膀胱癌组的结合力为正常组的3.34倍和3.26倍。膀胱癌患者尿液中FnN-糖链的天线数和平分型GlcNAc结构都升高。尿Fn与WGA的结合力与病理分期、分级相关。膀胱癌组织GnT-Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ的酶活力比癌旁正常组织分别增加34.0、18.1和1.6倍。结论凝集素-HRP检测分析尿液Fn的N-糖链结构改变有可能是一种简单和精确诊断膀胱癌的方法。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 尿液纤维连接蛋白 N-糖链 凝集素探针 糖基转移酶 纤维连接蛋白(Fn) 膀胱癌组织 尿液标本 糖链结构 癌患者
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前列腺增生和前列腺癌患者血、尿中PSA糖链结构的改变及意义
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作者 杜广 袁维祥 +2 位作者 李东 王浩 陈惠黎 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2008年第6期33-35,共3页
目的探索前列腺癌的早期诊断和鉴别诊断的新依据。方法收集前列腺增生和前列腺癌患者空腹第一次晨尿和血标本各90份和30份,随机分为3组,用PSA抗体亲和层析柱提纯尿液和血液中的PSA,用辣根过氧化物酶(HRP)标记的凝集素SNA(sambucus nigra... 目的探索前列腺癌的早期诊断和鉴别诊断的新依据。方法收集前列腺增生和前列腺癌患者空腹第一次晨尿和血标本各90份和30份,随机分为3组,用PSA抗体亲和层析柱提纯尿液和血液中的PSA,用辣根过氧化物酶(HRP)标记的凝集素SNA(sambucus nigra agglutinin)做探针,连接到已固定在膜上纯化的PSA的糖链,检测已结合的HRP来代表PSA糖链与凝集素的结合力,用增强化学发光法(ECL)检测已结合的HRP的结合力,其数值用发光单位(LLU)来表示。结果用HRP标记的凝集素SNA-HRP作探针检测前列腺癌和前列腺增生血中PSA时,前列腺癌血中平均LLU仅为前列腺增生血中PSA的18.3%,与SNA-HRP的结合力两者之间有明显差异(P<0.001);而在尿液中两者无明显差异(P>0.05)。说明前列腺癌血中PSA糖链结构中唾液酸残基表达较前列腺增生明显减少。结论前列腺癌患者血中PSA糖链结构与前列腺增生相比发生改变,其中糖链结构中唾液酸残基表达的改变可能为今后前列腺癌的早期诊断和鉴别诊断提供新的依据。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 前列腺增生 前列腺特异抗原 凝集素探针
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