用凝集素和非同位素标记底物测定核心α-1,6-岩藻糖转移酶及其应用

报道了一个不需同位素和ＨＰＬＣ的α－１，６－岩藻糖转移酶（α１，６ＦｕＴ，又称核心岩藻糖转移酶）的测定法，包括从正常人血浆提纯运铁蛋白，消化成带有天冬酰胺（Ａｓｎ）的二天线Ｎ－糖链，去除外端唾液酸和半乳糖后，用生物素酰胺乙酰基团标记其Ａｓｎ，并以此生物素衍生物标记的Ａｓｎ－七糖的Ｎ－糖链为受体底物，ＧＤＰ－Ｌ－岩藻糖为供体底物，用ＬＣＡ柱吸附法分离岩藻糖化后的产物，再用ＨＲｐ－Ａｖｉｄｉｎ交联物与柱上带有生物素的产物结合，此ＨＲＰ－Ａｖｉｄｉｎ－生物素。岩藻糖化产物从柱上洗脱后测定ＨＲＰ活力可代表α１，６ＦｕＴ活力。此法在较宽的范围内，产物量与酶量和反应时间成正比．人肝细胞癌、亚硝胺诱发大鼠肝癌后期或用佛波酯（ＰＭＡ）处理人肝癌细胞后，α１，６ＦｕＴ增高，而用视黄酸或ｄｂ－ｃＡＭＰ处理人肝癌细胞后，则该酶活力降低。

甲胎蛋白分子变异体交叉亲和酶联免疫电泳分析法

本研究创立一种快速、直接的甲胎蛋白小扁豆凝集素(LCA)亲和分子变异体分析法,这种新方法交叉亲和酶联免疫电泳法是由小扁豆凝集素亲和电泳和酶联火箭电泳结合构成的,能直接将甲胎蛋白分为 LCA 反应性和非反应性两个部分。分析了15例原发性肝癌,其血清甲胎蛋白 LCA 结合型占总量的21～90%,15例中有14例 LCA 亲和谱呈双峰型,而6例良性肝病患者均呈单峰型,属LCA 非结合型。显然,本法可以有效的鉴别这两种疾患。