基于UPLC特征图谱的南、北葶苈子及其混伪品的鉴别研究

目的:研究并建立南葶苈子药材超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱,并对北葶苈子及混伪品进行对比研究。方法:采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);以乙腈-0.3%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254 nm;流速为0.30 mL·min^(–1);柱温为35℃。结果:建立了南葶苈子药材UPLC特征图谱共有模式,标定了12个共有峰,指认了其中7个,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰3)可区分南葶苈子和北葶苈子;芥子碱(峰2)可区分南葶苈子和菥蓂子;异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰6)可区分南葶苈子和荠菜子。结论:建立的UPLC特征图谱能有效区分南葶苈子、北葶苈子及其混伪品荠菜子、菥蓂子,为控制葶苈子药材质量提供了参考。

基于网络药理学和基因表达数据库探讨银杏叶-葶苈子延缓心肌纤维化的作用机制

目的:借助网络药理学分析,联合分子对接及基因表达芯片分析验证,探讨银杏叶-葶苈子延缓心肌纤维化的作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台筛选银杏叶-葶苈子的有效成分和靶点,通过人类基因数据库(GeneCards)、人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获取心肌纤维化的靶点。将有效成分靶点与心肌纤维化靶点分别导入Cytoscape 3.8.0软件构建药物-成分-靶点网络、STRING平台构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,再利用Cytoscape自带的网络分析工具计算网络拓扑参数,分析获取关键靶点。将交集靶点通过R软件进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。最后利用基因表达数据库(GEO)的芯片数据进行数据分析,并利用AutoDock软件进行有效成分与核心靶点分子对接,Pymol软件绘制分子对接模式图验证核心靶点。结果:通过相关数据库,获得药物有效成分39个,筛选出有效成分作用靶点116个,心肌纤维化靶点3322个。网络拓扑图分析获得转录因子P65(RELA)、雄性激素受体(AR)、前列腺素G/H合酶1(PTGS1)、肿瘤蛋白质P53(TP53)、核因子-κB(NF-κB)抑制剂α(NFKBIA)等关键靶点。GO分析主要涉及对化学应激的细胞反应、对类固醇激素反应、DNA结合转录因子结合、核受体活动、泛素蛋白连接酶等过程,KEGG富集分析主要有脂质和动脉粥样硬化、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路(MAPK)等信号通路。基因表达数据库分析验证表明,前6个核心靶点中,AR、RELA、TP53、NFKBIA、PTGS1差异有统计学意义(P<0.05)。分子对接结果显示主要活性成分与靶点均能自发结合且大部分结合能力良好。结论:银杏叶-葶苈子可能通过NF-κB、MAPK、PI3K/AKT信号通路等发挥抗炎、抗氧化应激作用,抑制成纤维细胞相关增殖和活化过程,减少细胞外基质沉积,从而发挥延缓心肌纤维化作用。

葶苈子化学成分和药理作用的研究进展

对葶苈子的化学成分、药理和毒理作用等方面进行综述 。

维药家独行菜子镇咳、抗炎及抑菌作用初探

目的研究维吾尔族传统药材家独行菜子水提物的镇咳、抗炎作用及其水提物、醇提物的抑菌作用。方法以不同溶剂分离家独行菜子各组份,并以氨水引咳法探讨其水提物的镇咳作用;同时以二甲苯致炎法探讨其水提物的抗炎作用;通过抑菌实验探讨其水提物、醇提物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作用。结果家独行菜子水提物组与生理盐水组相比,能明显延长咳嗽潜伏期、降低每分钟咳嗽次数,及抑制鼠耳肿胀作用(均P<0.05);且家独行菜子水提物、95%乙醇提物、甲醇提物对4种细菌均有明显的抑菌作用。结论家独行菜子水提物具有显著的镇咳、抗炎作用,水、醇提物均具有明显的抑菌作用。

常用十字花科药用植物中芥子碱的分布研究

十字花科植物中的芥子碱是一种非常有价值的天然抗氧剂,在抗衰老药物的研究中受到了许多学者的重视。为了考察芥子碱在我国药用植物中的分布情况,采用反相高效液相色谱法测定了我国常用的4种十字花科药用植物白芥子、莱菔子、葶苈子、黄芥子中该成分的含量。采用的色谱柱为A lltim a Pheny l柱(250mm×4.6mm i.d.,5μm);流动相:3%醋酸溶液和乙腈的混合溶液,梯度洗脱;检测波长:326nm;柱温:25℃。该法快速,准确度高,重现性好,方法的建立不仅为上述4种药材的质量监测提供了有效的定量分析方法,而且对于芥子碱的深入研究具有重要意义。

葶苈子水提液对动物实验性心室重构的影响

目的研究葶苈子水提液对异丙肾上腺素(ISO)诱发小鼠,L-甲状腺素(L-Thy)诱发大鼠实验性心室重构的影响。方法小鼠每天scISO2mg/kg,连续7d;大鼠每天ipL-Thy0.3mg/kg,连续10d,制备心室重构动物模型。各组小鼠每天ig葶苈子水提液6、12g/kg和美托洛尔0.06g/kg,连续7d后,检测心脏指数、血浆环磷酸腺苷(cAMP)、心肌血管紧张素(Ang)量的变化;各组大鼠每天ig葶苈子水提液4、8g/kg和卡托普利0.02g/kg10d后,检测心脏指数、血浆中醛固酮(ALD)及左心肌Ang、羟脯氨酸(Hyp)量的变化。结果模型小鼠的心脏指数、cAMP、Ang量均明显升高,给予美托洛尔0.06g/kg或葶苈子水提液12g/kg均可抑制小鼠左心室重构和肥厚,降低心脏指数和血清cAMP水平及心肌Ang的量(P<0.05)。模型大鼠也出现心肌纤维化,心脏指数、心肌Ang、血浆ALD、心肌Hyp量均明显升高,给予卡托普利0.02g/kg或葶苈子水提液4、8g/kg均可降低大鼠心脏指数和Ang、ALD及心肌Hyp水平(P<0.05)。结论葶苈子水提液具有抑制实验动物心肌肥大、心室重构的作用,其作用机制可能与抑制交感神经系统兴奋性及抑制Ang、ALD等神经内分泌因子激活有关。

葶苈子水提液对内毒素致急性肺损伤大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞水通道蛋白5表达的影响

目的观察葶苈子水提液对内毒素致急性肺损伤大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞水通道蛋白5表达的影响。方法清洁级SD大鼠18只,随机分成空白对照组、模型组、葶苈子治疗组(治疗组)共3组,尾静脉注射内毒素建立急性肺损伤模型后4 h处死大鼠。计量24 h尿量,收集血液样本,测定血气分析,摘取肺脏,称重并计算肺系数,HE染色法观察肺组织病理,并采用免疫电泳法测定通道蛋白5(AQP5)的表达。结果模型组、治疗组肺湿重、肺系数与空白对照组相比,肺湿重、肺系数差异均具有统计学意义(均P<0.01);治疗组肺湿重、肺系数与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比较,模型组大鼠24 h尿量有所减少,但差异无统计学意义(P>0.05);葶苈子治疗组与模型组比较,大鼠24 h尿量差异有统计学意义(P<0.01)。模型组、治疗组与空白对照组相比,Pa O2、Pa CO2、p H均值差异均具有统计学意义(均P<0.01);治疗组Pa O2、Pa CO2、p H与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。肉眼观,与对照组比较,模型组大鼠双肺充血水肿、肺外周可见片状炎性渗出、体积明显增大,肺泡呈粉红色,气管内有粉红色分泌物溢出,或见血性胸水;模型组100倍镜下示肺泡广泛水肿及片状炎细胞浸润,局灶性出血,结构轮廓几乎丧失,部分肺泡受压萎陷。肉眼观,治疗组较模型组大鼠双肺肿胀减轻,肺表面光滑,弹性可;光镜下治疗组肺泡可见充血水肿,炎细胞浸润,肺泡结构及轮廓显示不清,但较模型组明显减轻,肺泡内水肿液明显减少,仅见炎细胞浸润。电泳结果示,模型组APQ5蛋白表达较对照组明显下调(P<0.01),与模型组比较,葶苈子治疗组可明显上调APQ5蛋白表达。结论葶苈子有改善急性肺损伤的效果,这种作用可能与其改善水通道蛋白5含量或者活性有关。

维药家独行菜子的药效学研究

目的研究维吾尔传统药家独行菜子水浸液对实验性胃溃疡镇痛作用及对小鼠小肠运动的影响。方法制作小鼠胃溃疡模型,以家独行菜子水浸液灌胃给药,观察实验组和对照组小鼠胃黏膜的溃疡指数,探讨其对胃的保护作用;以炭末推进法观察家独行菜子水浸液对小肠运动的影响并通过离体实验观察其对小鼠小肠平滑肌的作用;以热板法观察家独行菜子水浸液对实验动物的镇痛作用。结果家独行菜子水浸液对小鼠实验应激性胃溃疡黏膜具有修复作用,小鼠胃溃疡指数从30±10.12下降到22.7±5.54,可减少溃疡出血点(P<0.05);对小肠运动的抑制率为18.54%,拮抗硝酸毛果芸香碱致小肠蠕动振幅的加大,并显著延缓小鼠热刺激的痛反应时间(P<0.01)。结论家独行菜子水浸液具有抗实验性胃溃疡的作用,能促进溃疡愈合、抑制小肠运动,并具有显著的止痛作用。

葶苈子及其复方治疗心血管系统疾病的研究进展

综述葶苈子在治疗心血管系统疾病方面的主要有效成分、药理作用机制及临床应用的进展,并对其临床用于治疗心力衰竭的有效病例和机制作了综合分析。

高效液相色谱法测定南葶苈子饮片中芥子碱硫氰酸盐含量

目的采用高效液相色谱(HPLC)法测定南葶苈子饮片中芥子碱硫氰酸盐的含量。方法色谱柱为Phenomenex-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.08mol/LKH2PO4溶液(11∶89),检测波长为326nm,流速为1.0mL/min,柱温为室温。结果芥子碱硫氰酸盐进样量在0.944～4.720μg范围内与峰面积线性关系良好,加样回收率为98.85%,RSD=0.61%(n=6)。结论HPLC法操作简便、准确,具有很好的重现性和稳定性;炮制对南葶苈子饮片中芥子碱硫氰酸盐的含量有明显影响。

家独行菜子的化学成分研究

[目的]对家独行菜子的化学成分进行研究.[方法]利用溶剂萃取、柱色谱、LH-20凝胶、重结晶等方法对家独行菜子乙醇提取物进行化学成分分离,并通过波谱和理化性质等方法对化合物结构进行鉴定.[结果]从家独行菜子中得到12个化合物,分别为芥子酸（1）、芥子酸乙酯（2）、阿魏酸乙酯（3）、1,2-二芥子酰基葡萄糖（4）、对异丙基苯甲酸（5）、苯甲酸（6）、苯乙酰胺（7）、苯甲胺（8）、二苯乙酮（9）、蔗糖（10）、胡萝卜苷（11）、β-谷甾醇（12）.[结论]化合物2 ～ 10为首次从该植物中分离得到.

基于ITS2序列鉴定南北葶苈子药材及其混伪品

目的:利用ITS2序列对多基原药材葶苈子及其混伪品进行分子鉴定,以保证药材质量及临床疗效。方法:提取46份葶苈子药材及其混伪品的DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列并双向测序,应用CodonCode Aligner v 4.25对测序峰图进行校对拼接,并去除低质量序列及引物区,得到ITS2序列。用MEGA 6.0软件计算物种种内和种间Kimura 2-parameter(K2P)遗传距离,分析变异位点并构建邻接(NJ)系统聚类树,综合应用相似性搜索法、最近距离法以及NJ系统发育树等进行鉴定分析。结果:葶苈子的基原植物播娘蒿和独行菜的种内最大K2P遗传距离分别为0.021和0.010,均小于其与混伪品之间的种间最小K2P遗传距离;NJ树结果显示播娘蒿和独行菜各自聚为一支,表现出良好的单系性,均可与混伪品明显区分开。结论:以上几种鉴定方法分析结果表明,ITS2序列能准确鉴别南北葶苈子药材与混伪品,为保障临床安全用药提供了新的技术手段。

基于网络药理学和分子对接技术探讨人参、丹参、葶苈子治疗慢性心力衰竭的分子机制

目的 利用网络药理学方法及分子对接技术探讨中医“药物金三角”的代表用药人参、丹参、葶苈子治疗慢性心力衰竭的潜在作用机制。方法 从公开数据库获取中医“药物金三角”的代表用药人参、丹参、葶苈子的活性成分并进行靶点预测,将其与心力衰竭致病基因相映射以获取作用靶点。随后对药物作用于心力衰竭的靶点进行富集分析,并对关键信号通路中的靶点与成分进行分子对接验证。结果 共获得药物潜在活性成分187个,对应靶点455个,作用于心力衰竭的靶点共97个,其中肿瘤坏死因子(TNF)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、丝裂原激活的蛋白激酶8(MAPK8)、清蛋白(ALB)为关键靶点。经过富集分析,发现中医“药物金三角”治疗心力衰竭涉及对药物的反应、炎症应答、对外部刺激的反应等生物过程,可作用于环磷酸腺苷(cAMP)信号通路、环磷酸鸟苷(cGMP)-蛋白激酶G(PKG)信号通路、心肌收缩、心肌细胞中的肾上腺素能信号、醛固酮的合成和分泌等重要通路。分子对接结果显示,关键信号通路中的靶点与成分平均结合能为-29.246 kJ/mol,说明靶点与成分之间具有良好的对接关系。结论 中医“药物金三角”的代表用药人参、丹参、葶苈子可通过复杂网络形式调控心肌收缩、心脏负荷、心室重构等生理病理过程,从而发挥治疗心力衰竭的作用。

基于指纹图谱技术的车前子与混伪品的鉴别研究

目的利用高效液相色谱(HPLC)指纹图谱技术鉴别车前子的伪品葶苈子、青葙子、茺蔚子、荆芥子、党参子,同时对不同比例的掺伪行为进行识别。方法采用Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.5%醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速:1 mL·min^-1,检测波长:254 nm,柱温:30℃。以39批车前子为样本建立HPLC指纹图谱;利用液相色谱-串联质谱联用技术(LC-MS/MS)对其化学成分进行初步指认;将伪品与对照图谱比对,同时考察5%~20%掺伪行为的车前子指纹图谱的差异。结果构建了由10个共有峰组成的车前子高效液相色谱指纹图谱,同时采用LC-MS/MS技术对13个化学成分进行了指认,车前子及其混伪品在色谱峰的位置及相似度评价存在明显差异,指纹图谱技术能基本鉴别出10%以上的车前子掺伪行为。结论建立的车前子指纹图谱方法能有效鉴别车前子及其混伪品,可在车前子质量标准中增加指纹图谱鉴别,为车前子的质量控制提供更完善的方法。

卢尚岭大剂量用药经验总结与思考

卢尚岭教授临证常重用益母草、土茯苓、丹参、葶苈子、石菖蒲、附子、川乌、枳实、生地黄、麦冬、蜈蚣等药物,每取佳效。其用药主要以长期临床实践经验为依据,同时也因病位高下、病性虚实、病势急缓而异。单味药治病,也常取大剂奏效。从卢老的用药经验可知,大剂量用药需熟谙药性,有胆有识。人体生理功能的改变、疾病病情的需要、药物性状的古今差异可能是增加大剂量用药需求的影响因素。

葶苈子的炮制历史沿革及其药理作用研究进展

梳理自汉代以来有关葶苈子净制与炮制的记载,并总结出葶苈子的现代炮制工艺方法主要包括清炒法、微波法、炙法、蒸法与制霜法。同时归纳了葶苈子的现代药理作用研究进展,药理作用主要集中在改善心血管功能、细胞毒性、免疫调节、止咳祛痰、利尿、雌激素样与抗炎作用等7个方面。

强心方组分对心肌梗死后心力衰竭小鼠心功能的影响

目的研究强心方中三味主药黄芪、附子、葶苈子单独使用与联合使用对心肌梗死后心力衰竭心脏的保护作用。方法构建小鼠急性心肌梗死模型,模型建立第2天开始经食道给予药物治疗,分为假手术组(Sham)、手术对照组(PBS)、黄芪总提取物单独给药组(HQ)、附子总提取物单独给药组(FZ)、葶苈子总提取物单独给药组(TLZ)、1/3剂量混合给药组(黄芪总提取物+附子总提取物+葶苈子总提取物,Mix)、全剂量混合给药组(黄芪总提取物+附子总提取物+葶苈子总提取物,Mix full-dose)。给药30 d后观察各组分对心肌梗死后小鼠心功能的影响。结果给药30 d后心脏超声结果显示,各给药组小鼠的心脏功能相对于PBS组则均有不同程度的改善(P<0.05)。心肌组织切片染色结果显示各给药组小鼠的心肌梗死面积与PBS组相比均有显著的减少,心室重构程度显著减轻(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示给药组小鼠心肌细胞增生肥大程度降低(P<0.05)。结论黄芪、附子、葶苈子联合使用可以显著提高心肌梗死后小鼠的心功能,改善小鼠的左室重构,减轻心肌组织纤维化以及心肌细胞肥大,并促进心肌梗死后血管新生。尤其是1/3剂量混合治疗组好于全剂量混合治疗组,这些结果对于中药临床上剂量的应用具有明显的指导作用。

不同产地葶苈子脂溶性成分的GC-MS分析

目的对不同产地葶苈子的脂溶性成分进行气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析,比较各产地葶苈子之间脂溶性成分组成和含量的差异。方法采用加热回流提取法提取不同产地葶苈子的脂溶性成分,利用GC-MS对脂溶性成分中的化合物组成进行鉴定,面积归一化法计算各化合物的相对百分含量。结果从三个不同产地的葶苈子脂溶性成分中共鉴定得到70个化合物,其中从安徽产、河北产和吉林延边产的葶苈子中分别鉴定出34、32和43种脂溶性成分,主要有亚麻酸、11-二十碳烯酸、肉豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸等脂肪酸。这些脂肪酸在三种产地中的含量不同,其中亚麻酸的含量最多,且延边产地相对含量最高,达到48.67%;且这些脂肪酸的总含量分别为安徽产50.13%、河北产82.87%、延边产76.83%。结论不同产地对葶苈子脂溶性成分种类和含量均有差异,本研究为葶苈子的质量评价提供了实验依据。

强心方对充血性心力衰竭的临床疗效观察

目的 本研究拟揭示中药强心方对充血性心力衰竭 (CHF)的治疗作用。方法 随机、单盲设计 ,采用利水功著的十枣汤与具有强心之功的葶苈子等中药相配合共同治疗CHF 3 2例 ,并与地高辛及呋塞米相对照 (3 0例 ) ,共观察 1周时间。结果 强心方的总有效率为 75 %。该方可有效地降低心衰积分值及减轻患者存在的不同程度的主述 ,并可提高SOD酶及GSH PX酶活力 ,减少LPO。其中对阳虚水泛型及心肾阳虚型两个证型有较好疗效 ,总有效率分别达到94.1 %和 83 3 %。结论 强心方是一种临床治疗CHF的有效的中药复方制剂。

南北葶苈子的显微鉴别

目的进行南北葶苈子的鉴别研究为葶苈子药材的鉴定提供依据。方法采用肉眼或体式显微镜观察葶苈子性状特征;采用显微镜观察种子石蜡切片。结果北葶苈子扁卵形,较大,另端尖而微凹,具纵沟2条,其中1条较明显,表面具颗粒状突起;粘液层厚,纤维素柱较短;南葶苈子长圆形略扁,较小,另端较平截,表面具细密的网纹突起,粘液层薄,纤维素柱较长。结论研究发现的南北葶苈子的显微结构差异可作为南北葶苈子的鉴别特征。