Leptin、解偶联蛋白与能量代谢失衡

在严重创伤、脓毒症等病理条件下 ,葡萄糖代谢障碍 ,脂肪成为机体能量代谢的主要来源。Lep tin是由成熟脂肪细胞分泌的激素 ,可增加能量消耗 ,防止脂肪堆积 ;解偶联蛋白在脂肪组织和骨骼肌表达丰富 ,表达升高可增加能量散失。二者均与烧伤、脓毒症导致的高能量代谢有关。本文就其性质、分布及表达的影响因素 。

运动对糖尿病大鼠瘦素受体基因水平与功能的影响

目的 :中小强度运动对糖尿病大鼠瘦素受体的蛋白和 RNA水平的影响 ,探讨运动改善糖尿病大鼠代谢紊乱的可能机理。方法 :40只 SD大鼠分为 4组 :糖尿病非运动组 ,糖尿病运动组 ,正常非运动组和正常运动组。运动组进行12周的中小强度跑步训练。 Western印迹法检测大鼠肝脏 ,骨骼肌和胰腺组织瘦素受体的含量。 RT- PCR检测肝脏 ,骨骼肌和胰腺组织的瘦素受体 RNA水平。结果 :(1)糖尿病大鼠血糖较正常对照大鼠显著升高 (P<0 .0 5 ) ,血清胰岛素和瘦素 (L eptin)水平明显下降 (P<0 .0 5 )。(2 )糖尿病运动组大鼠经 12周跑步训练后 ,血糖浓度显著下降 (P<0 .0 5 ) ,血胰岛素浓度显著升高 (P<0 .0 5 ) ,血浆瘦素 (L eptin)水平相应显著上升 (P<0 .0 5 ) ;(3)糖尿病大鼠肝脏 ,骨骼肌和胰腺组织瘦素受体的蛋白含量和 RNA水平有不同程度的显著下降 (P<0 .0 5 ) ,12周运动后各组织的瘦素受体的蛋白含量和 m RNA水平显著增加 (P<0 .0 5 )。结论 :运动通过对瘦素受体基因水平和蛋白功能的影响介导胰岛素分泌和代谢作用的改善 。

瘦素及其受体对肌肉组织蛋白质代谢的调节

近年来,体内外试验研究表明,瘦素的短期或长期处理能够调节哺乳动物骨骼肌和肌细胞内蛋白质的代谢,而这主要是由于瘦素可以调节肌细胞内与蛋白质代谢相关的信号通路(如胰岛素相关信号通路和丝裂原活化蛋白激酶信号通路)的活性。因此,本文综述了瘦素及其受体在动物体内肌肉组织蛋白质代谢过程中的调节作用,并分析讨论了这一过程中瘦素的可能作用机制,为营养物质通过激素调节蛋白质代谢的深入研究及其应用提供参考。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对中重度银屑病患者血清脂肪因子水平的影响:前瞻性非随机对照试验

目的分析注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对中重度斑块型银屑病患者血清脂联素(adiponectin,APN)、视黄醇结合蛋白4 (retinol binding protein 4,RBP4)、瘦素(leptin,LEP) 3种脂肪因子水平的影响。方法选取2016年11月至2018年5月在北京协和医院皮肤科就诊的30例中重度斑块型银屑病患者作为治疗组,同时选取在本院健康医学部进行体检的25名健康人作为健康对照组。治疗组均给予重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白50 mg皮下注射,每周1次,共12次。检测健康对照组及治疗组治疗前(基线)和治疗后12周血清APN、RBP4、LEP的浓度;分析两组之间以及治疗组治疗前后血清脂肪因子水平是否存在差异,并采用Spearman相关分析法评估治疗组基线血清APN、RBP4、LEP表达水平与银屑病皮损面积和严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)之间有无线性相关关系。结果治疗组基线APN水平[9. 73(6. 69,12. 37)比(14. 25 (10. 53,23. 28),P <0. 001]、LEP水平[0. 42 (0. 17,2. 60)比3. 90 (1. 38,7. 20),P=0. 002]较健康对照组降低, RBP4较健康对照组升高[12. 29 (10. 62, 21. 33)比9. 13 (7. 36,15. 78),P=0. 024];治疗组治疗后APN水平[11. 95 (8. 12,15. 26)比9. 73 (6. 69, 12. 37), P=0. 027]、LEP水平[2. 84 (1. 04,9. 34)比0. 42 (0. 17,2. 60),P<0. 001]较治疗前明显升高,而RBP4水平较治疗前差异无统计学意义(P=0. 125);基线APN、RBP4、LEP浓度均与PASI无线性相关关系。结论脂肪因子可能参与了银屑病的慢性炎症过程,抗肿瘤坏死因子α治疗可能改善银屑病的炎症状态。

免疫瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白对SD大鼠脂肪沉积的影响

目的原核表达瘦素受体（OBR）近跨膜区重组融合蛋白并进行SD大鼠免疫实验，观察其对SD大鼠脂肪沉积的影响。方法设计1对带有BamHI和Hindlll酶切位点特异性引物，扩增OBR胞外近跨膜区基因片段（1705～2364bp），经酶切后连接到表达载体pRSETA的BamHI和HindⅢ两酶切位点之间，构建OBR胞外近跨膜区重组表达质粒并在大肠杆菌E．coli BL21（DE3）中表达，SDS．PAGE电泳分析和western blotting鉴定表达产物。随后制备OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白并免疫SD大鼠，观察其对SD大鼠体质量、采食量、体长、Lee’S指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积、皮下脂肪沉积的影响。结果SDS．PAGE电泳分析和Western blotting鉴定结果显示，在IPTG诱导下OBR胞外近跨膜区重组表达菌表达了相对分子质量27600左右的融合蛋白。对SD大鼠免疫0BR胞外近跨膜区重组融合蛋白后，体质量、体长、Lee’S指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积与对照组无明显差异，而采食量显著增加、皮下脂肪细胞体积减小。结论成功表达西藏小型猪瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白，免疫SD大鼠可促进采食和抑制皮下脂肪沉积。

瘦素和瘦素受体及其下游信号通路在非酒精性脂肪性肝病中的表达及临床意义研究

目的探讨瘦素、瘦素受体、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)(p85α)以及蛋白激酶B(PKB)在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的表达及临床意义。方法选取2007年5—9月武汉市中心医院肝胆外科收治的术前B超诊断为脂肪肝,术中肝穿刺活组织检查证实为NAFLD的患者30例为NAFLD组;另选择同时期因胆囊结石(静止期)及胆囊息肉住院的肝功能正常者30例为对照组,检测两组患者血清瘦素水平,并采用免疫组织化学法检测两组患者肝细胞中瘦素、瘦素受体、PI3-K(p85α)及PKB的表达,分析其相关性。结果 NAFLD组患者血清瘦素水平为(10.90±3.39)μg/L,较对照组的(5.55±1.96)μg/L升高(t=-7.841,P<0.05)。NAFLD组较对照组肝细胞瘦素、瘦素受体水平及PI3-K(p85α)光密度值增高,PKB光密度值降低(P<0.05)。NAFLD组患者血清瘦素水平与肝组织中瘦素光密度值,肝细胞中瘦素光密度值与PI3-K(p85α)光密度值均呈正相关(r值分别为0.413和0.365,P<0.05);肝细胞中PI3-K(p85α)光密度值与PKB光密度值,血清瘦素水平与肝细胞中PKB光密度值均呈负相关(r值分别为-0.854和-0.923,P<0.05)。对照组患者血清瘦素水平与肝细胞中瘦素光密度值,肝细胞中瘦素光密度值与PI3-K(p85α)光密度值,PI3-K(p85α)光密度值与PKB光密度值,血清瘦素水平与PKB光密度值均呈正相关(r值分别为0.593、0.795、0.840和0.686,P<0.05)。结论 NAFLD患者中瘦素及瘦素受体表达增高,PKB表达降低,瘦素的过度表达不能活化PKB,存在瘦素抵抗。瘦素/PI3-K激活PKB的缺陷可能是NAFLD瘦素抵抗的一种新的机制。

肥胖儿童血清高敏C反应蛋白、瘦素、可溶性瘦素受体和胰岛素的水平及意义

目的探讨肥胖儿童血清高敏C反应蛋白、瘦素、可溶性瘦素受体及胰岛素的水平变化及临床意义。方法对64例12岁肥胖儿童进行血清高敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive pro-tein,hs-CRP)、瘦素(leptin,Lp)、可溶性瘦素受体(soluble leptin receptor,sLR)及胰岛素(Insulin,INS)的水平测定,与48例健康体检儿童进行对照比较。其中,血清Lp、INS采用放射免疫分析法(RIA)测定,sLR采用酶联免疫吸附试验法检测,hs-CRP采用电化学发光免疫法测定。结果肥胖儿童组血清hs-CRP、Lp、INS水平及BMI均显著高于对照组(均P<0.01),sLR水平低于对照组(P<0.05);相关性分析显示肥胖儿童血清hs-CRP水平与Lp、INS、BMI之间均呈显著性正相关性(r=0.575,P<0.01;r=0.504,P<0.01;r=0.685,P<0.01),与sLR呈显著性负相关性(r=-0.339,P<0.01);Lp与INS、BMI之间呈显著性正相关性(r=0.352,P<0.01;r=0.503,P<0.01),与sLR呈显著性负相关性(r=-0.467,P<0.01),sLR与BMI呈显著性负相关性(r=-0.398,P<0.01)。结论肥胖儿童已存在炎症状态的改变及瘦素、胰岛素抵抗,且三方面密切相关。对这些血清学指标的检测,有助于儿童肥胖状态的监控和治疗。

ATRA对人骨髓间充质干细胞成脂肪细胞分化及瘦素生成的影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对人骨髓间充质干细胞(BMSC)成脂肪细胞分化及瘦索(Lp)生成的影响。方法体外分离、培养和鉴定BMSC。在诱导培养液中加入不同浓度的ATRA进行成脂肪分化诱导,光学显微镜下油红O染色观察BMSC分化情况;RT-PCR和Western blotting测定细胞过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因及相应蛋白表达;RT-PCR和ELISA法检测分化过程中细胞Lp基因表达及蛋白分泌水平的变化。结果ATRA(0.1～1.0μmol/L)作用后,BMSC向脂肪细胞分化呈现浓度依赖性抑制,PPARγ、FABP4 mRNA和蛋白表达均呈现一致性下降;诱导后细胞LpmRNA表达和蛋白分泌显著减少。结论0.1～1.0μmol/L ATRA可抑制BMSC向脂肪细胞分化及其Lp生成,其机制可能与下调PPARγ和FABP4表达有关。

瘦素、IL-18、NLRP3与高血压性脑出血严重程度、预后的关系及其在预后评估中的价值

目的探讨瘦素、白介素-18(IL-18)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)与高血压性脑出血(HICH)严重程度、预后的关系,并分析其在预后评估中的价值。方法选取2018年1月至2018年12月医院收治的132例HICH患者设为疾病组,根据神经功能缺损程度将其分为轻型、中型、重型3组,同时选取同时期体检中心收入的50例健康受试者设为健康组,对比各组受试者外周血瘦素、IL-18、NLRP3;随访6个月,根据HICH患者预后情况将其分为预后良好组和预后不良组,对比2组外周血瘦素、IL-18、NLRP3及可能影响因素的差异,并采用Logistic回归分析法明确导致预后不良的危险因素;通过绘制受试者工作曲线(ROC),分析外周血瘦素、IL-18、NLRP3对HICH患者预后预测价值。结果不同严重程度疾病组外周血瘦素、IL-18、NLRP3均高于健康组(P<0.05),且重型组大于轻型和中型组,中型组大于轻型组(P<0.05);预后良好率为68.18%(90/132);预后不良组瘦素、IL-18、NLRP3均高于预后良好组(P<0.05);预后不良组性别、高血压病程、发病至手术时间、出血部位、入院高血压分级、合并糖尿病、不同手术方式患者构成比比较,差异均无统计学意义(P>0.05);预后不良组年龄>60岁、重型神经功能缺损、破入脑室、出血量>30 mL、入院GCS评分≤8分患者构成比均高于预后良好组(P<0.05);经Logistic回归分析,年龄>60岁、破入脑室、出血量>30 mL、瘦素>16.2 ng/mL、IL-18>220 ng/L、NLRP3 mRNA相对表达量>3.1、重型神经功能缺损、入院GCS评分≤8分均是导致预后不良的危险因素(P<0.05);ROC结果显示,瘦素、IL-18、NLRP3对预后不良预测最佳截断点分别为41.7 ng/mL、265.4 ng/L、3.3,AUC分别为0.755、0.801、0.852。结论除常见危险因素高龄、破入脑室、出血量高外,外周血瘦素、IL-18、NLRP3异常表达同样是导致HICH患者预后不良的危险因素,且三者与HICH患者病情严重程度及预后关系密切,其中NLRP3对预后不良预测效果最佳。

肥胖伴有哮喘儿童血清瘦素、脂联素和视黄酸受体反应蛋白2与肺功能的相关性研究

目的探讨血清瘦素、脂联素及视黄酸受体反应蛋白2水平同肥胖伴有哮喘患儿肺功能的相关性。方法选择2021年6月-2022年6月我院就诊的70例哮喘患儿为研究对象,根据患儿体重指数将其分为正常组(n=35)和肥胖组(n=35)。对比两组患儿血清瘦素、脂联素及视黄酸受体反应蛋白2表达水平,采用肺功能仪检测两组患儿的用力肺活量(FVC)所占预估值百分率(FVC%)和第1秒用力呼气容积(FEV1)所占预估值百分率(FEV1%);分析血清瘦素、脂联素及视黄酸受体反应蛋白2与肥胖哮喘患儿肺功能的相关性。结果肥胖组患儿FVC%、FEV1%、脂联素表达水平低于正常组,血清瘦素和视黄酸受体反应蛋白2水平高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。患儿脂联素正表达水平与肺功能呈正相关,而瘦素和视黄酸受体反应蛋白2表达水平与肺功能呈负相关(P<0.05)。结论肥胖哮喘患儿血清瘦素、脂联素及视黄酸受体反应蛋白2水平均与肥胖哮喘患儿的肺功能具有较高的相关性,可作为临床预测肥胖哮喘患儿肺功能情况的有效指标。

肥胖儿童运动减肥治疗前后的瘦素抵抗 血脂及炎症状态分析

目的研究显示C-反应蛋白(CRP)、瘦素(Lp)、可溶性瘦素受体(sLR)及多种血脂成分均参与了肥胖的发生发展。本研究旨在探讨运动减肥治疗前后肥胖儿童瘦素抵抗、血脂及炎症状态的改变,以期明确运动对肥胖儿童内分泌环境的影响。方法对51例12岁肥胖儿童进行为期2月的运动减肥治疗,观察血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、Lp、sLR、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平变化。40例健康体检儿童作为对照组。结果肥胖儿童组血清Lp、TG、TC、LDL-C和hs-CRP水平及体重指数(BMI)均显著高于对照组(均P<0.01),sLR水平低于对照组(P<0.05)。运动减肥治疗后肥胖儿童组血清hs-CRP、Lp、TC、TG和LDL-C水平及BMI与治疗前比较显著下降(P<0.05)。相关性分析显示肥胖儿童血清Lp水平与血脂及hs-CRP呈显著正相关(P<0.05);Lp、hs-CRP与sLR呈显著负相关(P<0.05);hs-CRP与血脂呈显著正相关(P<0.01)。结论肥胖儿童已存在瘦素抵抗及血脂和炎症状态的改变,运动减肥治疗可不同程度地改善这些改变。

慢性束缚应激大鼠下丘脑ARC中Ob-R、AgRP及NPY的表达及逍遥散的调节作用

目的:探讨慢性束缚应激大鼠下丘脑弓状核(ARC)瘦素受体(Ob-R)、刺鼠基因相关蛋白(AgRP)、神经肽Y(NPY)变化及中药逍遥散的影响。方法:120只SD实验大鼠随机分为正常组、7d模型组、21d模型组、中药组。采用束缚制动法复制应激大鼠模型,中药组在每日束缚制动前灌服中药逍遥散21d。观察实验大鼠摄食量及体质量变化;ELISA方法检测大鼠外周血Leptin含量;Western Blot和qRT-PCR法分别检测各组大鼠下丘脑ARC中Ob-R、AgRP和NPY蛋白及基因表达。结果:在应激第7、14、21天,21d模型组大鼠体质量、摄食量均显著性少于正常组(P<0.01);而中药组大鼠体质量增长明显优于21d模型组(尤其应激第7、21天)(P<0.05),摄食量在应激第14、21天较21d模型组增加明显(P<0.05)。与正常组比较,7d模型组和21d模型组大鼠血清Leptin含量、下丘脑ARC中Ob-R蛋白及基因表达显著性升高(P<0.05,P<0.01),而AgRP和NPY蛋白及基因表达则显著降低(P<0.05,P<0.01);中药组大鼠血清Leptin含量、下丘脑ARC中Ob-R蛋白及基因表达较21d模型组降低(P<0.05,P<0.01),而AgRP和NPY蛋白及基因表达则显著提高(P<0.01),中药组与7d模型组比较上述指标差异无统计学意义。结论:慢性束缚应激大鼠食欲下降、体质量增长缓慢等躯体不适症状可能与其下丘脑ARC中Ob-R表达增多,AgRP、NPY合成、分泌减少有关,中药逍遥散能通过调节ARC中Ob-R、AgRP和NPY蛋白及基因表达水平,有效改善慢性束缚应激大鼠上述躯体不适症状。

妊娠不同时期脂肪细胞因子的动态变化与胰岛素抵抗的关系

目的探讨妊娠不同时期脂肪细胞因子的动态变化及其与孕妇胰岛素抵抗的关系。方法选择2004年10月—2005年10月在我院门诊行产前检查的正常孕妇67例,其中妊娠早期18例(妊娠早期组),妊娠中期19例(妊娠中期组),妊娠晚期30例(妊娠晚期组);另选同期正常非孕妇女46例为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测各组妇女血清中可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFR)-Ⅰ、Ⅱ水平;采用放射免疫法测定各组妇女血清中瘦素、脂联素水平;采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法检测妊娠晚期组妇女胎盘及脂肪组织中sTNFR定位与阳性表达。结果(1)妊娠早、中、晚期组及对照组妇女血清中sTNFR-Ⅰ水平分别为(799±173)、(1003±241)、(1278±306)及(729±167)ng/L,妊娠中、晚期组明显高于对照组,分别比较,差异有统计学意义(P<0·001)。(2)妊娠早、中、晚期组及对照组妇女血清中sTNFR-Ⅱ水平分别为(1383±305)、(1772±293)、(1933±498)及(1002±221)ng/L,妊娠早、中、晚期组明显高于对照组,分别比较,差异均有统计学意义(P<0·001)。并随孕期的增加,sTNFR-Ⅱ水平不断升高。(3)妊娠早、中、晚期组及对照组妇女血清中瘦素水平分别为(65±37)、(70±40)、(89±57)及(61±37)μg/L,妊娠晚期组明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0·05)。(4)妊娠早、中、晚期组及对照组妇女血清中脂联素水平分别为(13±6)、(9±5)、(10±4)及(14±7)mg/L,妊娠中、晚期组明显低于对照组,分别比较,差异有统计学意义(P<0·05)。(5)妊娠晚期组妇女胎盘及脂肪组织中sTNFR-Ⅰ、Ⅱ均呈阳性表达,无阴性表达;sTNFR-Ⅰ阳性染色颗粒主要定位于胎盘绒毛组织中的合体滋养细胞以及细胞滋养细胞中的胞质和胞膜,sTNFR-Ⅱ阳性染色颗粒主要定位于胎盘血管内皮细胞中的胞质和胞膜。结论孕妇血清中sTNFR-Ⅰ、Ⅱ及瘦素水平随孕期的增加不断升高;而脂联素水平则随孕期的增加有所下降,上述变化可能与孕妇的胰岛素抵抗有关。

瘦素受体基因K109R多态性对非酒精性脂肪性肝病发病的影响及其与脂肪滋养蛋白3基因1148M多态性的交互作用

目的探讨青岛地区汉族人群瘦索受体（LEPR）基因K109R及其与脂肪滋养蛋白3基因（PNPLA3）1148M多态性的交互作用对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病风险的影响。方法收集296例NAFLD患者及321例健康对照人群的血液标本，采用PCR及基因型检测的方法对其进行基因分型，运用相关统计学方法对两组人群的基因型、等位基因以及临床资料进行比较。使用广义多因子降微法研究LEPRK109R与PNPLA31148M之间基因的交互作用。结果LEPRK109R基因型及等位基因分布在NAFLD组和正常对照人群之间无明显差异（P〉0．05）。PNPLA31148M基因多态性与NAFLD发病密切相关，携带G突变基因的人群患NAFLD的风险是未携带者的2．07倍[比值比（OR）=2．07，95％可信区间（CI）：1．423～3．013，JP〈0．001]。LEPRK109R与PNPLA31148M联合作用使NAFLD的发病风险明显增加（OR：3．393，95％a：1．856～6．201，P〈0．001）。结论在青岛地区汉族人群中，LEPRK109R基因多态性与NAFLD的发病无明显的相关性，而与PNPLA31148M多态性的交互作用能显著增加NAFLD的发病风险。

瘦素受体和磷酸化蛋白激酶B在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其意义

目的探讨瘦素受体(OBR)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法检测山东第一医科大学附属省立医院2010年至2015年90例DLBCL和20例反应性淋巴组织增生(RLH)组织中OBR和p-AKT的表达;应用细胞增殖实验(MTS)检测瘦素对DLBCL细胞株SUDHL4和SUDHL5增殖能力的影响;应用蛋白质印迹法检测瘦素培养后SUDHL4和SUDHL5细胞p-AKT的表达情况。结果OBR和p-AKT在DLBCL中的高表达率为47.7%(43/90)、27.7%(25/90),在20例RLH中均为低表达,OBR和p-AKT在DLBCL和RLH中的表达差异均有统计学意义(P<0.01,P=0.027)。OBR和p-AKT的表达与患者年龄、性别、结外浸润、临床分期、乳酸脱氢酶(LDH)水平、B症状及国际预后指数(IPI)评分均无关(均P>0.05)。OBR和p-AKT在DLBCL中的表达呈正相关(r=0.532,P<0.05)。瘦素可以提高SUDHL4和SUDHL5细胞增殖能力,促进细胞内p-AKT的表达。结论瘦素和OBR可通过激活PI3K-AKT途径促进DLBCL细胞的增殖,参与DLBCL的发生发展。