猪肺炎支原体LAP的结构预测及其抑制剂Bestatin对支原体生长的影响

本研究旨在以猪肺炎支原体为代表,研究支原体LAP酶活中心的高级结构及其被抑制后对支原生长的影响。亮氨酸氨肽酶(LAP)是一类广泛存在于各类生物的氨基酸代谢酶,有研究表明病原微生物的LAP酶活中心被抑制后可以直接影响微生物的代谢和生长。本研究拟以猪肺炎支原体(Mhp)LAP为模型,研究其理化特性和高级结构,探索LAP抑制剂乌苯美司(Bestatin)对支原体生长的影响。本研究首先用Clustal Omega进行序列同源性比较,分析LAP活性位点在不同支原体中的保守情况。然后采用GST融合标签表达猪肺炎支原体LAP蛋白,通过GST亲和层析和分子筛层析纯化蛋白,圆二色谱测定LAP的二级结构,用Alpha fold 2预测三级结构。最后用Bestatin与猪、鸡、羊等不同种属的支原体共培养来观察其影响。结果表明虽然总体序列同源性不高,但是LAP酶活中心的关键位点在常见支原体相对保守。猪肺炎支原体LAP可以通过GST标签进行可溶性表达。酶切GST标签后,分子筛层析显示LAP是六聚体,圆二色谱表明LAP具有正确的二级结构。预测的LAP三级结构显示其具有保守的底物结合关键位点。Bestatin对不同种属支原体的生长均产生抑制,且呈现剂量依赖性,但在不同菌株间存在差异,最低在6μg/mL的浓度可通过抑制氨肽酶的活性抑制猪肺炎支原体的生长。该研究为新一代抗菌药物的研发提供了新的思路。

孕早期血清P-LAP、NSF-1水平预测妊娠期糖尿病价值

目的:探讨妊娠早期血清胎盘亮氨酸氨基肽酶(P-LAP)、摄食抑制因子(NSF-1)对妊娠期糖尿病(GDM)的预测价值。方法:选取2020年1月—2020年6月在本院接受产前检查的孕早期女性,于妊娠6~12周采集晨空腹静脉血,测定血清P-LAP、NSF-1水平及糖脂代谢指标。于妊娠24~28周行GDM筛查,分为GDM组与糖耐量正常组。比较两组各项临床资料差异,采用logistic回归模型分析GDM的影响因素,应用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标对GDM的预测效能。结果:共纳入284l例孕妇,其中有61例诊断为GDM,发生率为21.5%。相比正常组,GDM组妊娠期体质指数(BMI)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)及血清NSF-1水平更高,P-LAP水平更低(均P<0.05)。logistic回归分析,P-LAP、NSF-1水平异常是GDM发病的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清P-LAP、NSF-1预测GDM的曲线下面积(AUC)分别为0.799、0.808,敏感度(95.1%、52.9%)和特异度(65.6%、88.3%),二项联合预测GDM的AUC为0.872,敏感度78.7%,特异度81.2%。结论:孕早期血清P-LAP降低和NSF-1增高是GDM的独立危险因素,且对GDM的发病有较好预测价值。

Discovery of a Novel Aminopeptidase N Inhibitor Dino-Leucine Borate

Aminopeptidase N(APN/CD13), a Zn2+-dependent ectopeptidase localized on the cell surface, is widely considered to influence the invasion of tumor cells. We found that boroleucine and dino-leucine borate exhibited a strong inhibitory effect on the enzyme activity of aminopeptidase N. The tested assay indicated that both compounds had an anti-proliferative effect on triple-negative breast cancer cells. Wound healing assay, migration test and matrigel-coated transwell assay showed that both boroleucine and dino-leucine borate inhibited the migration and invasion of breast cancer cells. Immunoblot analysis showed that both compounds down-regulated the expression of matrix metalloproteinase-2/9. In the capillary tube formation assay of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), dino-leucine borate showed better antiangiogenic activity than ubenimex even at a low concentration (10 μM). Moreover, compared with ubenimex, the anti-metastatic activity of dino-leucine borate in vivo was similar to or even better than that of ubenimex in the H22 pulmonary metastasis mouse model. In this paper, we found the novel APN inhibitors to markedly suppress the enzyme activity of APN and inhibit the migration and invasion of tumor cells in vitro and in vivo.

CG、LAP与miR-155对妊娠期肝内胆汁淤积症的诊断价值及与疾病严重程度的关系

目的:探讨甘胆酸(CG)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)与micro RNA-155(miR-155)对妊娠期肝内胆汁淤积症的诊断价值及与疾病严重程度的关系。方法:选取2018年11月至2023年3月六安世立医院收治的妊娠期肝内胆汁淤积症患者103例作为观察组,另选取同期在妇产科住院的非妊娠期肝内胆汁淤积症患者100例作为对照组,根据妊娠期肝内胆汁淤积症分度标准,将观察组患者分为重度组55例和轻度组48例。比较对照组患者和观察组、重度组和轻度组患者基础资料及CG、LAp、miR-155表达水平,分析CG、LAP与miR-155指标诊断妊娠期肝内胆汁淤积症及判定疾病严重程度的价值,并绘制ROC曲线。结果:观察组患者肝功能指标、CG、LAP与miR-155表达水平均高于对照组患者(P<0.05);重度组患者肝功能指标水平、CG、LAP与miR-155表达水平均高于轻度组(P<0.05);CG、LAP与miR-155联合检测诊断妊娠期肝内胆汁淤积症的AUC值高于单项检测(P<0.05),CG、LAP与miR-155联合检测评估妊娠期肝内胆汁淤积症严重程度的AUC值高于单项检测(P<0.05)。结论:检测CG、LAP与miR-155有助于早期诊断妊娠期肝内胆汁淤积症,且CG、LAP与MiR-155联合检测有助于早期预测妊娠期肝内胆汁淤积症的严重程度。

尿NAG和LAP对糖尿病早期肾损害的诊断价值

目的检测糖尿病无肾损害组和糖尿病合并肾损害组患者尿N-乙酰--βD氨基葡萄糖苷酶(NAG)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)的活性,探讨尿NAG、LAP对糖尿病早期肾损害的诊断价值。方法58例糖尿病患者随机分为两组:37例糖尿病无肾损害组和21例糖尿病有肾损害组,采用速率法检测糖尿病患者尿NAG、LAP的活性。结果糖尿病无肾损害组和肾损害组尿NAG、LAP的活性高于对照组(P<0.05);糖尿病肾损害组高于糖尿病无肾损害组(P<0.05)。结论检测尿NAG、LAP的活性对糖尿病早期肾损害的诊断具有价值。

ADA、5’-NT、TRF、TBA、LAP和PA在肝病诊断中的临床评价

目的探讨腺苷脱氨酶(ADA)、5’-核苷酸酶(5’-NT)、转铁蛋白(TRF)、总胆汁酸(TBA)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、前白蛋白(PA)6项指标在肝病诊断和治疗中的价值。方法使用日立7600全自动生化分析仪测定41例急性肝炎、78例慢性肝炎、62例肝硬化、50例肝癌患者和53例健康对照者血清的上述6项指标,并对检测结果进行统计学分析。结果与正常对照组相比,急性肝炎组与肝癌组ADA、5’-NT、LAP显著升高(P<0.01),TRF和PA显著降低(P<0.01),TBA升高(P<0.05);慢性肝炎组中ADA、5’-NT、TBA、LAP与正常组相比有显著升高(P<0.01),而TRF、PA显著降低(P<0.01);肝硬化组中ADA、TBA与正常组相比有显著升高(P<0.01),而TRF、PA显著降低(P<0.01),5’-NT升高(P<0.05),但是肝硬化组的LAP与正常组无差异(P>0.05)。急性肝炎组受试者工作特性曲线(ROC)下面积5’-NT最大,慢性肝炎组曲线下面积ADA和PA较大,肝硬化组ADA、TBA和PA曲线下面积较大,肝癌组ADA、5’-NT和PA曲线下面积较大,LAP在慢性肝炎、肝硬化和肝癌组的曲线下面积较小。结论上述六项指标中,ADA和PA对肝病的诊断价值较高,可作为各实验室的常规项目开展,而除LAP外的其他5项指标对肝硬化均有较高临床应用价值。此外,上述6项指标与常规指标联合应用,可对临床医师在诊断、治疗、评估肝功能状况时起到重要的参考作用。

尿液LAP和GGT联合检测对糖尿病早期肾损害的诊断价值

目的探讨尿亮氨酸氨基肽酶(LAP)和γ-谷氨酰基转移酶(GGT)筛查糖尿病早期肾损害的临床价值。方法采用速率法对糖尿病肾损害组和无肾损害组及正常对照组进行尿LAP、GGT及尿肌酐(Cr)水平检测,并用U/gCr的单位表示酶活性。结果糖尿病无肾损害组和肾损害组患者尿LAP和GGT活性明显高于正常对照组(P<0.01);糖尿病肾损害组高于糖尿病无肾损害组(P<0.01);且LAP和GGT呈正相关(r=0.59,P<0.01)。结论尿LAP和GGT的联合检测对糖尿病患者早期肾损害具有诊断价值。

文蛤亮氨酸氨肽酶LAP3的基因克隆及其在幼体不同发育时期、成体不同组织的表达分析

为探索贝类LAP3基因的结构和功能特征以及在生长发育过程中的作用,利用cDNA末端快速扩增(RACE)法获得文蛤LAP3(Mm-LAP3)基因的cDNA全长序列,并对其生物信息学、组织及发育时期表达特征进行了分析。结果显示,Mm-LAP3基因cDNA全长2 037bp,ORF区1 254bp,编码417个氨基酸;Mm-LAP3蛋白由Peptidase_M17超家族序列的N-端结构域和Peptidase_M17催化结构域组成。荧光实时定量PCR结果表明,Mm-LAP3基因在文蛤成体6个组织和幼体10个发育时期中均有表达,其中在斧足中的表达量显著高于其他组织(P<0.05),这与斧足蛋白含量丰富、代谢旺盛相关;在幼体10个发育时期中的表达量呈现逐渐升高的趋势,在D形幼虫时期达到最高,随后又有所降低,推测Mm-LAP3基因在早期发育时期参与了某些组织器官的形成。

孕妇孕期被动吸烟对母体血浆P-LAP、IL-6及IL-10的影响

目的探讨孕期被动吸烟母体胎盘亮氨酸氨基肽酶(P-LAP)、白介素(IL-6)及IL-10在正常孕妇和早产孕妇血浆中的变化趋势,并分析其对早产的影响。方法选取175例早产孕妇(28~36+6周)为研究组(早产组),根据有无被动吸烟分为早产被动吸烟组(n=96)和早产非被动吸烟组(n=79);同时选取177例足月孕妇为对照组(足月组),同样根据妊娠期被动吸烟情况,分为足月被动吸烟组(n=78)和足月非被动吸烟组(n=99)。采用酶联免疫吸附法,测定以上各组孕妇在相应孕周时的血浆P-LAP、IL-6和IL-10浓度。结果早产被动吸烟组孕妇血浆P-LAP、IL-6和IL-10浓度与足月被动吸烟组比较差异有统计学意义(tP-LAP=3.678、tIL-6=3.865、tIL-10=2.114,均P<0.05),早产被动吸烟组孕妇血浆P-LAP、IL-6及IL-10浓度与早产非被动吸烟组比较差异有统计学意义(tP-LAP=4.479、tIL-6=4.556、tIL-10=2.202,均P<0.05);而足月被动吸烟组孕妇血浆P-LAP、IL-6及IL-10浓度与足月非被动吸烟组比较差异无统计学意义(tP-LAP=1.170、t_(IL-6)=1.722、t_(IL-10)=1.423,均P>0.05)。结论孕期被动吸烟可致孕妇P-LAP和IL-10水平降低,IL-6水平升高,引起早产分娩启动,可能是引起孕期被动吸烟孕妇早产发生的关键因素。

重组果糖二磷酸醛缩酶SjLAP和亮氨酸氨基肽酶SjFBPA用于日本血吸虫病的诊断和疗效考核的评价(英文)

目的评价重组亮氨酸氨基肽酶(rSjLAP)和重组果糖二磷酸醛缩酶(rSjFBPA)抗原用于诊断人血吸虫感染以及疗效考核的价值。方法异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导pET-28a-rSjLAP/BL21和pET-28a-rSjFBPA/BL21表达目的蛋白,组氨酸标签亲和纯化柱纯化rSjLAP和rSjFBPA蛋白。88只BALB/c雌性小鼠随机分为4组,A、B和C组(各21只小鼠),D组(25只小鼠)。A、B和C组分别感染5、15和25条日本血吸虫尾蚴。D组为不感染对照组,在实验的第1天全部处死。A、B和C组在感染后第3、7、10、14、20、30和60天,分别处死小鼠3只,采眼球血制备血清,检测其抗体水平。采用单独或联合rSjLAP和rSjFBPA为抗原,ELISA法检测小鼠血清、急性血吸虫病(38份)和慢性血吸虫病患者(96份)血清中的抗体,以健康人(90份)血清为对照,同时检测华支睾吸虫病(33份)、卫氏并殖吸虫病(40份)和钩虫病患者(37份)血清,并检测急性血吸虫病患者吡喹酮治疗(60 mg/kg,2次/d×2 d)后1年的血清(36份)、慢性血吸虫病患者吡喹酮治疗(剂量,疗程同前)后1年(36份)和2年(64份)的血清。结果 BALB/c小鼠在感染后第10天,rSjLAP和rSjFBPA单独或联合使用均可检测到小鼠血清中的IgG抗体;B组(0.535±0.053,0.595±0.033,0.696±0.104)和C组(0.548±0.060,0.608±0.063,0.621±0.090)早期抗体水平明显高于A组(0.415±0.038,0.455±0.056,0.498±0.077)(P<0.05)。用rSjLAP为抗原可检测急性血吸虫病和慢性血吸虫病患者血清,阳性率分别为97.4%(37/38)和87.5%(84/96)(P>0.05);用rSjFBPA为抗原检测,其阳性率分别为94.7%(36/38)和88.5%(85/96)(P>0.05);用rSjLAP和rSjFBPA联合为抗原检测,则其阳性率分别为94.7%(36/38)和85.4%(82/96)(P>0.05)。rSjLAP或联合抗原的特异性均为96.7%(87/90),而rSjFBPA的特异性为97.8%(88/90)。给予吡喹酮治疗后,rSjLAP和rSjFBPA单独或联合使用检测急性血吸虫病血清(0.236±0.212,0.287±0.191,0.235±0.120)和慢性血吸虫病患者(0.266±0.124,0.261±0.143,0.265±0.140;0.204±0.074,0.176±0.074,0.176±0.073),抗体滴度普遍下降,与对照组(0.188±0.056,0.173±0.045,0.184±0.051)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。rSjLAP和rSjFBPA单独为抗原检测华支睾吸虫病患者血清,交叉反应率为15.2%(5/33)和12.1%(4/33),两者联合则为9.2%(3/33)。rSjLAP检测卫氏并殖吸虫的交叉反应率为15.0%(6/40),rSjFBPA为12.5%(5/40),两种抗原联合检测为15.0%(6/40)。上述抗原单独或联合检测钩虫的交叉反应率均为8.1%(3/37)。上述各组阳性率与健康人群之间差异有统计学意义(P<0.05),显示该重组抗原在其他蠕虫检测中存在一定的交叉反应。结论用rSjFBPA和rSjLAP作为抗原的ELISA法诊断血吸虫病具有良好的敏感性和特异性。

早期胰腺癌患者血清CA199、LAP和GGT的变化及价值

目的探讨早期胰腺癌患者血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)、r-谷氨酰转移酶(GGT)和CA199的变化及临床意义。方法对43例早期胰腺癌组、38例胰腺炎组和40例健康对照组血清分别采用速率法、酶法、发光法检测LAP、GGT和CA199含量。结果早期胰腺癌组LAP、GGT、CA199含量分别为(54.07±17.49)U/L、(138.25±45.69)U/L、(447.53±133.84)U/mL,高于胰腺炎组和对照组,差异均有统计学意义(P <0.05),但对于LAP胰腺炎组和对照组差异无统计学意义(P> 0.05),而对于GGT和CA199含量,胰腺炎组明显高于对照组(P <0.05);对于早期胰腺癌患者单项的敏感性最高的为GGT,敏感性为97.73%,特异性最高的为LAP,特异性为93.02%,联合检测的敏感性、特异性及约登指数均高于单项检测。结论 LAP、GGT、CA199联合检测对于早期胰腺癌的诊断具有重要价值。

亮氨酸氨肽酶LapA在无孢黑曲霉中的重组表达优化及酶学性质

针对目前国产食品级亮氨酸氨肽酶的工业生产产量不高的现状,将米曲霉、黑曲霉和酱油曲霉的5个亮氨酸氨肽酶基因(lapA、lap1O、lap2、lap1S、lap1N)在低蛋白背景的无孢黑曲霉HL-1中进行重组表达,通过信号肽替换对其编码区进行改造,利用杂合启动子PnaII及营养缺陷标记pyrG构建表达载体,并基于规律间隔成簇短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/Cas9工具设计亮氨酸氨肽酶的基因组定点整合策略,获得高活力的亮氨酸氨肽酶表达菌株,重组菌株LapA-C的亮氨酸氨肽酶活力达到11 701.2 U/mL,比未利用CRISPR工具的LapA-T重组表达菌株的酶活力(2 476.0 U/mL)提高了约3.7倍。此外,通过融合6×His标签实现了重组亮氨酸氨肽酶LapA的纯化,并对其进行了酶学性质研究:蛋白质大小约为35.0 kDa,重组亮氨酸氨肽酶LapA最适pH值为8.5,最适温度为65℃。综上所述,本研究基于CRISPR策略成功实现了亮氨酸氨肽酶在黑曲霉中的高效重组表达。

联合检测LAP、ALT、γ-GT对甲状腺功能亢进肝损害诊断价值的探讨

目的探讨血清LAP、ALT联合γ-GT对甲状腺功能亢进合并肝损害的诊断价值。方法选取2015年10月至2017年11月我院门诊及住院收治的188例甲亢患者。根据检查结果分为甲亢肝损害组(n=98)和甲亢无肝损害组(n=90)。选取同期健康体检者100例作为对照组。比较各组间血清FT_3、FT_4、TSH、LAP、ALT、γ-GT水平、相关性分析及诊断学指标。结果甲亢肝损害组和甲亢无肝损害组血清FT_3、FT_4水平显著高于对照组,TSH显著低于对照组(P<0.05),甲亢肝损害组血清FT_3、FT_4水平显著高于甲亢无肝损害组(P<0.05),而两组TSH水平无统计学差异(P>0.05)。甲亢肝损害组和甲亢无肝损害组血清LAP、ALT、γ-GT水平显著高于对照组,甲亢肝损害组血清LAP、ALT、γ-GT水平显著高于甲亢无肝损害组(P<0.05)。经过Spearson相关性分析,FT_3、FT_4与肝功能指标(LAP、ALT、γ-GT)均呈正相关关系。三项指标联合检测的灵敏度(90.0%)、特异性(95.8%)及准确度(92.9%)明显高于任一单项指标检测结果(P<0.05)。结论甲亢肝害患者LAP、ALT、γ-GT水平异常升高与甲状腺激素有密切关系,其联合检测有利于甲亢肝害伤的早期诊断。

血清AFU、LAP及GGT联合检测在早期原发性肝癌患者诊断中的应用价值

目的探讨血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、r-谷氨酰转移酶(GGT)联合检测在早期原发性肝癌患者中的诊断价值。方法对85例肝病患者(肝硬化组45例、早期原发性肝癌组40例)及40例健康体检者(健康对照组)的血清AFU、LAP及GGT含量进行检测。结果早期原发性肝癌组、肝硬化组血清AFU、GGT的含量均高于健康对照组(均P<0.05)。早期原发性肝癌组的LAP含量明显高于健康对照组,血清AFU、LAP、GGT单项检测及AFU+LAP+GGT联合检测阳性率均明显高于肝硬化组及健康体检组(均P<0.05),其中AFU+LAP+GGT联合检测阳性率最高(92%)。肝硬化组与健康对照组LAP含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AFU+LAP+GGT联合检测有利于原发性肝癌的早期诊断。

妊娠期糖尿病患者血清Lp-PLA2、P-LAP水平与糖脂代谢指标的相关性分析

目的:分析妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein associated phospholipase A2,Lp-PLA2)和胎盘亮氨酸氨基肽酶(placental leucine aminopeptidase,P-LAP)水平与糖脂代谢指标的相关性。方法:选取2019年11月-2021年6月深圳市龙华区人民医院确诊GDM患者156例为GDM组,同期非GDM健康孕妇117例为对照组。分别检测血清Lp-PLA2、P-LAP、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并计算出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:GDM组Lp-PLA2水平为(281.06±29.41)ng/mL,明显高于对照组的(142.73±23.60)ng/mL,而P-LAP水平为(495.27±186.58)pg/mL,明显低于对照组的(1019.67±205.95)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05)。GDM组患者FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、TC、TG及LDL-C水平分别为(6.37±1.42)mmol/L、(7.12±1.54)%、(13.02±5.21)μIU/mL、(2.31±0.73)、(4.23±0.71)mmol/L、(6.57±0.92)mmol/L及(3.80±0.54)mmol/L,均明显高于对照组的(4.09±0.65)mmol/L、(3.82±0.59)%、(7.89±2.65)μIU/mL、(1.49±0.48)、(3.10±0.47)mmol/L、(4.66±0.54)mmol/L及(2.59±0.26)mmol/L,而HDL-C水平为(1.24±0.26)mmol/L,明显低于对照组的(1.87±0.38)mmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析,Lp-PLA2与FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、TC、TG及LDL-C水平均呈正相关,与HDL-C水平呈负相关,而P-LAP与FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、TC、TG及LDL-C水平均呈负相关,与HDL-C水平呈正相关(P<0.05)。结论:GDM患者Lp-PLA2水平明显升高,而P-LAP水平降低,且与糖脂代谢指标具有一定的相关性,其可能是通过影响糖脂代谢而在发生GDM中发挥重要作用的。

血清AFU、AFP、GGT、LAP及APT联合检测在原发性肝癌中的诊断价值

目的探讨α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、甲胎蛋白(AFP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、异常凝血酶原(APT)五项联合在原发性肝癌中的临床诊断价值。方法选取2018年6月至2019年6月本院送检本中心实验室的180例患者标本,依据临床诊断分为肝癌组、肝脏良性疾病组和对照组,每组60例,回顾性分析3组患者血清检测数据。结果肝癌组AFU、AFP、GGT、LAP、APT血清水平与肝脏良性疾病组及对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),肝脏良性疾病组除APT水平外,AFU、AFP、GGT、LAP水平与对照组组间差异具有统计学意义(P<0.05);肝癌组和肝脏良性疾病组各指标单个检测阳性率与对照组比较比较差异均具有统计学意义(P<0.05),肝癌组与肝脏良性疾病组检测指标阳性率中,AFU、LAP和APT比较差异具有统计学意义(P<0.05),联合检测时差异无统计学意义,五项联合检测时灵敏度最高达84.12%,准确性为89.05%。结论血清AFU、AFP、GGT、LAP、APT五项联合检测能够提高原发性肝癌和良性肝病的准确效率,具有重要的临床价值,值得推广应用。

LAP3调控MMP-2/9的表达对人皮肤恶性黑色素瘤细胞侵袭转移的影响

目的探讨亮氨酸氨肽酶3(LAP3)基因沉默对人皮肤恶性黑色素瘤细胞增殖、侵袭及其迁移的影响。方法在黑色素瘤细胞中转染LAP3 siRNA,实验分为空白对照组、阴性对照组、LAP3干扰组,采用克隆形成实验、Transwell小室和划痕实验分别检测黑色素瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力,免疫印迹法检测黑色素瘤细胞中LAP3、MMP-2/9、上皮型钙黏蛋白、N-钙黏附素、波形蛋白的表达。结果在LAP3干扰后,黑色素瘤细胞A2058的存活率、克隆形成率、迁移细胞数、侵袭细胞数以及LAP3、MMP-2/9、N-钙黏附素、波形蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05),而细胞中上皮型钙黏蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。结论LAP3基因沉默可抑制黑色素瘤细胞的增殖,并通过减弱下游蛋白MMP-2/9的表达以及细胞上皮间质转化进程协同抑制黑色素瘤细胞侵袭和迁移。

尿液LAP、α_(1)-MG、NAG水平对2型糖尿病早期肾损害的诊断价值

目的:探究尿液亮氨酸氨基肽酶(LAP)、α_(1)-微球蛋白(α_(1)-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)对糖尿病早期肾损害的诊断价值。方法:从2020年4-11月到本院就诊的2型糖尿病早期肾损害患者中随机选取56例纳入试验组,从2型糖尿病非肾损害患者中随机选取56例纳入对照组;比较两组就诊时尿相关指标(LAP、α_(1)-MG、NAG)、血相关指标[胱抑素C(Cys C)、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)]水平;经ROC曲线分析尿相关指标(LAP、α_(1)-MG、NAG)对糖尿病患者早期肾损害的诊断效能;比较试验组就诊时及治疗4周后尿LAP、α_(1)-MG、NAG水平变化情况;Pearson检验分析糖尿病早期肾损伤患者上述尿相关指标与血相关指标表达水平的相关性。结果:就诊时,试验组尿相关指标(LAP、α_(1)-MG、NAG)、血相关指标(Cys C、β_(2)-MG)显著高于对照组(P<0.05);治疗4周后试验组尿相关指标(LAP、α_(1)-MG、NAG)显著低于就诊时;ROC曲线分析表明尿LAP(AUC=0.770,Cut-off值=15.32 U/L)、α_(1)-MG(AUC=0.847,Cut-off值=5.90 mg/L)、NAG(AUC=0.819,Cut-off值=9.53 U/L)均对糖尿病患者早期肾损害有良好的诊断价值(P<0.05),其中α_(1)-MG的诊断效能最佳;Pearson检验显示试验组就诊时尿LAP与血β_(2)-MG水平呈显著正相关(r=0.315,P<0.05)。结论:尿LAP、α_(1)-MG、NAG在糖尿病早期肾损害中发挥重要作用,并对糖尿病患者早期肾损害具有良好的诊断效能和较高的临床应用价值。

孕晚期母体血清IL-2、sIL-2R、P-LAP联合检测对早产的预测价值

目的探讨孕晚期母体血清白细胞介素-2(IL-2)、可溶性白细胞介素2受体(s IL-2R)、胎盘亮氨酸氨基肽酶(P-LAP)联合检测对早产的预测价值。方法回顾性分析2018年1月至2019年1月于我院分娩的356例产妇的临床资料,根据是否早产将其分为早产组(48例,分娩时孕周<37周)与非早产组(308例,分娩时孕周≥37周),产妇均于孕晚期检测血清IL-2、s IL-2R、P-LAP水平,并随访至分娩。比较两组产妇的血清IL-2、s IL-2R、P-LAP水平,并分析血清IL-2、s IL-2R、P-LAP联合检测对早产的预测效能。结果早产组血清IL-2、s IL-2R水平显著高于非早产组,血清P-LAP水平显著低于非早产组,差异具有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)显示,血清IL-2、s IL-2R、P-LAP联合检测预测早产的特异度和AUC均高于血清IL-2、s IL-2R、P-LAP单独预测。结论早产产妇孕晚期母体血清IL-2、s IL-2R、P-LAP水平存在异常情况,三者联合检测可作为早产的有效预测方式。

血清GLDH、LAP联合GGT在慢性乙型肝炎病毒感染性肝病生化检测中的应用研究

目的研究GLDH、LAP联合GGT在慢性乙型肝炎病毒感染性肝病生化检测中的应用价值。方法选择2018年6月至2019年9月共164例慢性乙型肝炎病毒感染患者作为研究组,随机选择同期160例健康体检者作为对照组,分别对两组患者的血清GLDH、LAP、GGT及肝纤维化程度进行检测。结果研究组血清中GLDH、LAP及GGT水平较对照组明显升高(P<0.05)。研究组GLDH、LAP及GGT水平呈正相关。研究组血清GLDH、LAP、GGT与透明质酸、Ⅲ型前胶原氨基端肽、Ⅳ型胶原蛋白、层粘连蛋白呈正相关(P<0.05)。结论GLDH、LAP及GGT可作为慢性乙型肝炎感染性肝病生化联合检测指标,可用于评估及判断疾病预后的参考指标。