中期胃癌患者根治术后复发情况与术前LETM1、TIMP-1表达的关系研究

目的探讨中期胃癌患者根治术后复发情况与术前亮氨酸拉链EFhand结构域跨膜蛋白1(LETM1)、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)的关系。方法回顾性分析行胃癌根治术的中期胃癌患者102例,术前行LETM1、TIMP-1检查,以术后3年内胃癌是否复发为评估标准,经ROC曲线分析术后3年,术前LETM1、TIMP-1及联合检测在评估胃癌根治术后复发状况中的预测效能(敏感度、特异度);比较生存时间≥3年及<3年患者术前LETM1、TIMP-1表达情况。结果术后3年内胃癌复发57例(55.88%),未复发45例(44.12%)。其中65例LETM1阳性患者中,共有48例(73.85%)复发,17例(26.15%)未复发;37例LETM1阴性患者中共有9例(24.32%)复发,28例未复发(75.68%);TIMP-1阳性共63例,有46例(73.02%)复发,17例未复发(26.98%);TIMP-1阴性共有39例,其中有11例(28.21%)复发,28例未复发(71.79%)。联合检测预测3年内复发71例(69.61%),无复发31例(30.39%)。LETM1高表达共54例,其中43例(79.63%)生存时间<3年,11例(20.37%)生存时间≥3年;LETM1低表达共48例,其中10例(20.83%)生存时间<3年,38例(79.17%)生存时间≥3年;TIMP-1阳性共有62例,其中46例(74.19%)生存时间<3年,16例(25.81%)生存时间≥3年;TIMP-1阴性共有40例,其中共有7例(17.50%)生存时间<3年,33例(82.50%)生存时间≥3年。结论中期胃癌根治术后是否复发与LETM1、TIMP-1表达关系密切,同时LETM1、TIMP-1检测亦可用于预测中期胃癌患者根治术后生存状况,且准确率较高,具备临床价值。

胃癌组织中EPAS1、LETM1蛋白的表达与临床病理特征的关系

目的探讨胃癌患者癌组织中含有内皮PAS结构域的蛋白1(EPAS1)、亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1(LETM1)的表达与临床病理特征的关系。方法回顾性分析89例胃癌患者的临床资料,比较胃癌组织与癌旁正常组织中EPAS1与LETM1的表达情况,分析其与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织内EPAS1、LETM1免疫组化表达评分均高于癌旁正常组织(P<0.05)。不同年龄、性别、基础疾病类型、肿瘤位置、静脉浸润、淋巴结转移情况、肿瘤直径患者之间EPAS1表达情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同TNM分期、分化程度、浸润深度、组织学类型、Lauren's分型患者之间EPAS1表达情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、性别、基础疾病类型、肿瘤位置、静脉浸润、淋巴结转移情况、肿瘤直径、分化程度、组织类型患者之间LETM1表达情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同TNM分期、浸润深度、Lauren's分型患者之间LETM1表达情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者癌组织中EPAS1、LETM1免疫组化表达评分均高于正常组织,且与多项临床病理特征有关。

非小细胞肺癌患者组织LETM1表达及价值分析

目的探讨非小细胞肺癌组织亮氨酸拉链EFhand结构域跨膜蛋白1(leucine zipper/leucine zipper/EF-hand-containing transmembrane protein 1,LETMI1)表达及其与生存预后的关系。方法选取2018年6月至2021年6月收治的102例非小细胞肺癌患者作为研究对象,采用免疫组织化学染色检测肺癌组织和癌旁组织LETM1表达水平,比较LETM1表达与临床资料的关系,Kaplan-Meier法分析LETM1表达与非小细胞肺癌患者生存预后关系,Cox多因素回归分析影响患者生存的主要危险因素。结果LETM1蛋白在非小细胞肺癌组织的高表达率为57.9%(59/102),癌旁组织为10.8%(11/102),两者相比差异有统计学意义(χ^(2)=50.108,P<0.001)。LETM1高表达组与低表达组分化程度、临床分期、淋巴结转移情况等一般资料差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示,LETM1蛋白高表达术后总体生存期为(26.74±3.78)月,明显低于低表达(43.76±5.46)个月,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox多因素分析显示,LETM1蛋白高表达是影响患者生存预后的蛀牙危险因素(P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织LETM1呈高表达,LETM1可作为评估非小细胞肺癌患者生存预后的潜在指标。

LETM1在肝癌中的表达及其对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1(leucine bnzipper/EF-hand-containing transmembrane protein1,LETM1)在肝癌组织中的表达水平及通过RNAi技术靶向LETM1基因对肝癌细胞株SMMC-7721的增殖及凋亡的影响。方法采用免疫组织化学方法、Western blot检测重庆医科大学附属第一医院肝胆外科2012年9月至2013年4月共60例肝癌组织及其癌旁肝组织中LETM1蛋白表达情况。Western blot检测人肝癌细胞株SMMC-7721和Hep G2及人正常肝细胞株LO2中的LETM1蛋白表达情况。将LETM1 siRNA经Lipofectamine 2000TM脂质体转染SMMC-7721(实验组为si-LETM1、对照组为si-NC),实时荧光定量PCR及Western blot分别检测LETM1转染后肝癌SMMC-7721细胞株中LETM1 mRNA及蛋白的表达。CKK-8及流式细胞术检测LETM1低表达对肝癌细胞增殖及细胞凋亡的影响。结果 1免疫组织化学结果显示,LETM1蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为73.33%(44/60),明显高于癌旁组织中的表达率28.33%(17/60,P<0.01);Western blot检测结果显示,LETM1蛋白在肝癌组织中的表达相对量(2.335±0.221)较癌旁组织(1.386±0.081)明显增高(P<0.01)。2LETM1蛋白表达与肝癌肿瘤直径及门静脉侵犯有关(P<0.05),而与肝癌患者性别、年龄、甲胎蛋白、HBs Ag、Edmondson分级及TNM分期无关(P>0.05)。3LETM1蛋白在SMMC-7721及Hep G2中的表达相对量[(分别为(1.447±0.149)、(1.190±0.113)]均明显高于LO2[(0.918±0.027),P<0.05]。4si-LETM1组与si-NC组和空白组比较,si-LETM1组细胞的增殖受到抑制(P<0.01),尤以72 h及96 h最为显著;si-LETM1早期细胞凋亡数(14.6±2.3)%与si-NC早期细胞的凋亡数(6.3±0.7)%比较,差异有统计学意义(P=0.04)。结论 LETM1蛋白在肝癌组织的表达显著高于癌旁组织;基因沉默LETM1后的肝癌细胞其增殖能力明显减弱,凋亡能力明显增强。

LETM1蛋白在三阴性乳腺癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的探讨亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1(LETM1)在三阴性乳腺癌(TNBC)组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法选取100例TNBC患者的TNBC组织标本,另选取同期100例导管原位癌患者的导管内原位癌组织标本及其癌旁正常组织标本。采用免疫组织化学法检测各组织中LETM1蛋白的表达情况,分析LETM1蛋白表达与TNBC患者临床特征及预后的关系。结果 TNBC组织中LETM1蛋白的阳性表达率高于导管内原位癌组织和癌旁正常组织(P﹤0.05),导管内原位癌组织中LETM1蛋白的阳性表达率高于癌旁正常组织(P﹤0.05)。组织学分级为Ⅱ～Ⅲ级、临床分期为Ⅲ期、有淋巴结转移的TNBC患者的LETM1蛋白中等-强阳性表达率均高于组织学分级为Ⅰ级、临床分期为Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05);不同年龄、绝经状态、肿瘤直径和p53表达情况的TNBC患者的LETM1蛋白中等-强阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。单因素分析结果显示,年龄≥50岁、绝经后、组织学分级为Ⅱ～Ⅲ级、有淋巴结转移、LETM1蛋白表达为中等-强阳性的TNBC患者的中位总生存时间(OS)均短于年龄﹤50岁、绝经前、组织学分级为Ⅰ级、无淋巴结转移、LETM1蛋白表达为阴性+弱阳性的TNBC患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素分析结果显示,淋巴结转移和LETM1蛋白强阳性表达是影响TNBC患者OS的独立危险因素(P﹤0.05)。结论LETM1蛋白可作为临床上判断TNBC恶性程度的指标,是影响TNBC患者预后的独立危险因素,可作为TNBC预后预测的指标,有望成为TNBC潜在的生物学指标及治疗靶点。

胃癌组织中LETM1、HIF-1α的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中亮氨酸拉链EFhand结构域跨膜蛋白1(LETM1)与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达变化,并探讨其意义。方法选取胃癌患者95例,应用免疫组化技术检测胃癌组织及癌旁正常组织中LETM1和HIF-1α表达,并分析二者表达与患者临床病理特征的关系。随访5年,采用Kaplan-Meier法分析LETM1、HIF-1α表达与患者预后的关系。结果胃癌组织中LETM1和HIF-1α阳性表达率高于癌旁正常组织(P均<0.05)。胃癌组织中LETM1和HIF-1α表达与浸润深度、临床TNM分期、组织分化程度及淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、组织学分型及肿瘤直径无关(P均>0.05)。相关分析结果显示,胃癌患者LETM1和HIF-1α表达呈正相关(r=0.362,P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,LETM1和HIF-1α检出结果阴性的患者5年生存率高于结果阳性的患者(P均<0.05)。结论胃癌组织中LETM1和HIF-1α表达均升高,二者协同促进胃癌的发生发展;检测二者表达有助于胃癌诊断及病情判断。

LETM1对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的作用及其机制

目的 探讨亮氨酸拉链-EF-hand跨膜蛋白1(LETM1)对人骨肉瘤MG63及143B细胞增殖、迁移、凋亡、成骨分化及体内成瘤的作用及其机制。方法 将骨肉瘤MG63及143B细胞分为空白对照组(未加入腺病毒感染)、阴性对照组(sh-NC组,用RNAi阴性对照病毒感染)及LETM1敲低组(sh-LETM1组,用sh-LETM1腺病毒感染)。采用Western blotting检测各组LETM1蛋白在健康人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞中的表达水平,以验证腺病毒敲低效果;细胞克隆形成实验及CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕愈合实验及Transwell实验检测细胞迁移情况;DAPI染色法及Annexin V-APC/7-AAD流式细胞术双染法检测细胞凋亡情况;碱性磷酸酶(ALP)染色及茜素红S染色检测细胞的早期及晚期成骨分化情况。将10只裸鼠分为sh-NC组(n=5,以RNAi阴性对照病毒感染的143B细胞注入裸鼠皮下)与sh-LETM1组(n=5,以sh-LETM1腺病毒感染的143B细胞注入裸鼠皮下),并采用裸鼠皮下成瘤实验检测各组细胞的体内成瘤能力。结果 Western blotting检测结果显示,LETM1蛋白在骨肉瘤MG63及143B细胞中的表达明显高于健康人成骨细胞hFOB1.19(P<0.05),sh-LETM1腺病毒感染MG63及143B细胞后明显降低了LETM1蛋白的表达。细胞克隆形成实验及CCK-8法检测结果显示,在MG63及143B骨肉瘤细胞中,sh-LETM1组较sh-NC组及空白对照组的克隆形成能力及增殖能力明显降低(P<0.01)。Wound-healing实验及Transwell实验结果显示,在MG63及143B骨肉瘤细胞中,sh-LETM1组较sh-NC组及空白对照组的细胞迁移率明显降低(P<0.01)。DAPI染色及流式细胞术结果显示,在MG63及143B骨肉瘤细胞中,sh-LETM1组较sh-NC组的细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。ALP染色及茜素红S染色实验结果显示,在MG63及143B骨肉瘤细胞中,sh-LETM1组较sh-NC组及空白对照组染色区域及钙盐结节增多。裸鼠皮下成瘤实验结果显示,143B sh-LETM1组较143B sh-NC组细胞的皮下成瘤能力降低。结论 LETM1可促进MG63和143B骨肉瘤细胞的增殖、迁移及体内成瘤,其机制可能与抑制细胞凋亡及成骨分化有关。

亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1、钠氢交换蛋白1和腺苷酸环化酶相关蛋白2在胃癌组织中的表达及对术后复发的预测价值

目的探讨亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1(LETM1)、钠氢交换蛋白1(NHE-1)和腺苷酸环化酶相关蛋白2(CAP2)在胃癌组织中表达及对术后复发的预测价值。方法回顾性分析海门市人民医院2017年1月至2020年1月92例行外科手术治疗的早期胃癌患者的临床资料。根据术后6个月复发情况分为复发组(16例)和未复发组(76例)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测手术切除标本的癌组织和癌旁正常组织LETM1、NHE-1和CAP2 mRNA表达水平。采用多因素Logistic回归分析影响胃癌患者术后复发的独立危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析LETM1、NHE-1和CAP2 mRNA预测复发的效能。绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析不同LETM1、NHE-1和CAP2 mRNA表达水平患者的生存率。结果癌组织LETM1、NHE-1和CAP2 mRNA均明显高于癌旁组织(0.41±0.12比0.22±0.07、0.85±0.27比0.49±0.15和0.31±0.10比0.19±0.06),差异有统计学意义(P<0.01)。复发组N1期比例明显高于未复发组[9/16比22.37%(17/76)],差异有统计学意义(P<0.05);复发组癌组织LETM1、NHE-1和CAP2 mRNA明显高于未复发组(0.61±0.20比0.37±0.13、1.24±0.38比0.77±0.21和0.60±0.19比0.25±0.10),差异有统计学意义(P<0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,控制N分期后,LETM1、NHE-1和CAP2 mRNA仍是影响胃癌患者术后复发的独立危险因素(OR=1.52、3.11和1.21,95%CI 1.26~1.82、2.36~4.09和1.04~1.41,P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,LETM1、NHE-1和CAP2 mRNA预测胃癌患者术后复发的曲线下面积(AUC)分别为0.768、0.802和0.850,各指标联合预测胃癌患者术后复发的AUC为0.965。以ROC曲线分析获得的截断值为分界,将患者分为LETM1 mRNA高表达(>0.54,30例)与低表达(≤0.54,62例)、NHE-1 mRNA高表达(>1.09,35例)与低表达(≤1.09,57例)、CAP2 mRNA高表达(>0.49,28例)与低表达(≤0.49,64例)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,LETM1、NHE-1和CAP2 mRNA高表达患者生存率明显低于低表达患者(73.33%比98.39%、80.00%比96.49%和78.57%比95.31%),差异有统计学意义(χ^(2)=15.08、6.95和6.75,P<0.01)。结论LETM1、NHE-1和CAP2 mRNA与早期胃癌术后复发有关,检测三者表达有望为术后复发的预测提供一种新的策略。