用MTT－LAI方法鉴定人胃癌特异性转移因子的免疫活性

本文以四唑翁盐－白细胞粘附抑制实验（ＭＴＴ－ＬＡＩ）代替同位素－ＬＡＩ实验，用于胃癌特异性转移因子（ｓｐ－ＴＦ＿１）抗原持异活性的检测，克服了同位素法的不便。在摸索到的最佳ｓｐ－ＴＦ＿１浓度（１０￣（－４）ｕ／ｍｌ）和胃癌抗原浓度（１０￣（－３）ｕｇ／ｍｌ）条件下的实验结果表明：在胃癌抗原（ｓｃＡｇ）存在下，ｓｐ－ＴＦ＿１能明显抑制白细胞的粘附；而非特异性转移因子（ＴＦｎ）则无此作用。且ｓｐ－ＴＦ＿１与乙脑病毒（ＥＢｖ）或乙肝抗原（ＨＢｓＡｇ）共同温育也不表现出粘附抑制活性。实验证明：ＭＴＴ－ＬＡＩ实验是体外检测特异性转移因子细胞免疫活性的快速、简便的方法。此外．本文用该法观察了不同温度下ｓｐ－ＴＦ＿１活性的稳定性。

卵巢癌特异性转移因子的制备与鉴定

目的：为了卵巢癌手术后免疫治疗的需要，我们用透析法从用癌组织免疫的山羊脾及淋巴结制备了卵巢癌特异性转移因子（ＳＴＦ）。方法：按中国药典及白细胞粘附抑制试验（ＭＴＴ法）对ＳＴＦ的理化性质和免疫学性质进行了检测和鉴定。结果：所制备的卵巢癌ＳＴＦ符合转移因子质量标准，具有对卵巢癌细胞抗原的特异性。在１５例卵巢癌病人的临床应用中，未发现任何毒副反应。结论：用该法制备的卵巢癌ＳＴＦ，可以安全地应用于卵巢癌的免疫治疗。

用白细胞粘附抑制法鉴定HBV-TF特异免疫活性

选用白细胞粘附抑制试验来鉴定乙肝特异性转移因子(HBV-TF)免疫活性。实验结果表明:经HBV-TF致敏的淋巴细胞与乙肝抗原(HBV-Ag)孵育后,显示出明显的粘附抑制活性,而非特异性转移因子(TFn)致敏淋巴细胞与乙肝抗原孵育、HBV-TF致敏淋巴细胞与甲肝抗原(HAV-Ag)孵育或HBV-TF致敏淋巴细胞与1640液(代替抗原液)孵育时均不能表现出这种抑制作用,说明HBV-TF具有抗原特异性免疫活性。实验证明,本法是体外鉴定HBV-TF免疫活性简便易行的方法。

猪瘟特异性转移因子的制备及免疫活性鉴定

为制备猪瘟特异性转移因子(CSFV-STF)并鉴定其免疫学活性,用猪瘟兔化弱毒和石门系强毒(CSFV-Shimen)配合免疫健康猪,取猪的脾脏,制备猪瘟特异性转移因子,并采用改良白细胞黏附抑制试验检测其免疫活性。结果显示,猪瘟特异性转移因子的LAI%为76.0%,显著高于对照组(P<0.01)。表明猪瘟特异性转移因子具有特异性免疫活性。

特异性转移因子对卵巢癌患者淋巴细胞转化和白细胞粘附抑制试验的影响

目的 观察特异性转移因子在化疗的卵巢癌患者的体内生物学活性。方法 对化疗的卵巢癌患者用特异性转移因子免疫治疗。利用淋巴细胞转化试验及白细胞粘附抑制试验检测外周血淋巴细胞、白细胞。结果 实验组淋巴细胞转化率 ,有 3 4 4%显著高于对照组 (P <0 0 1)。实验组白细胞粘附抑制试验显著高于对照组 (P <0 0 5 )。结论 山羊来源的特异性转移因子对化疗卵巢癌患者 ,有促进淋巴细胞转化率及白细胞粘附抑制率作用。

抗乙肝免疫核糖核酸脂质体前体对小鼠生物活性的研究

为了避免抗乙肝核糖核酸 (iRNA)口服易受RNase降解而失活 ,将其制备成抗乙肝iRNA脂质体前体。采用白细胞粘附抑制试验 (LAI)检测了抗乙肝iRNA脂质体前体体外和小鼠口服后体内生物活性。结果表明 ,抗乙肝iRNA脂质体前体口服给药小鼠可明显抑制白细胞粘附 ;而裸露iRNA和正常肝RNA脂质体前体均无作用 ;抗乙肝iRNA脂质体前体体外活性检测未粘附抑制指数 (NAI % )在 5 3.8%～ 76 .2 %。多批次样品活性检测结果显示稳定性和重复性较好。说明将抗乙肝iRNA制备为脂质体前体可作为有效的口服剂型。

胎盘多肽生物活性测定方法研究

本文利用分光光度-白细胞黏附抑制实验测定胎盘多肽生物活性。结果表明,在抗原存在的情况下,实验组与对照组相比,白细胞黏附抑制率显著升高;此法准确、简便并具有良好的重复性,可以作为胎盘多肽活性的测定方法。

转移因子脱E受体活力测定方法的优化及基于微量板-白细胞黏附抑制试验的新方法研究

目的优化现行标准中用于测定转移因子制剂活力的脱E受体法,并建立可用于替代的新方法,用上述方法对来自3个生产企业的57批转移因子制剂进行测定。方法采用改进的细胞涂片-染色法制备样品的细胞涂片;采用新鲜猪胸腺、兔胸腺分别与绵羊红细胞进行交叉试验;建立微量板-白细胞黏附抑制替代方法,对方法的线性、重复性、专属性等进行考察。结果改进的涂片-染色法,镜检效果清晰可靠,便于读数和保存。猪胸腺淋巴细胞与兔胸腺淋巴细胞均能与绵羊红细胞形成E玫瑰花结,两种方法试验结果无显著差异。白细胞黏附抑制率结果与玫瑰花结活力测定结果无显著性差异,可用于替代。结论以改进的染色涂片方法替代原有的细胞计数板法,能更清晰的反应样品的活力值,且可长期保存,适合对大批量样品的随时读片和复核。微量板-白细胞黏附试验替代方法,降低了人为主观因素,较原方法更加准确、快速、重现性好、专属性强,且适合大批量样本的高通量检测。