RP-HPLC同时测定莲心总碱中的3种生物碱含量

目的：建立同时测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的反相高效液相色谱法。方法：以Hypsil C18（4．6mm×250mm，5μm）为固定相，甲醇-磷酸盐缓冲液（73：27，pH9．0）为流动相，检测波长为286nm及230nm，流速1mL·min^-1。结果：3种生物碱分离良好，在20～700μg·mL^-1。线性关系良好，日内、日间RSD在0．24％～4．83％，3种生物碱的加样回收率分别为97．9％，98．4％，98．1％。利用该方法测定了不同批次不同方法提取的莲心总碱中3种生物碱含量，结果显示莲心总碱的甲醇提取方法优于乙醇提取方法。结论：本法简单、快捷、适合于测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的含量。

HPLC法测定莲子心提取物及其胶囊剂中三种主要生物碱的含量

目的建立HPLC法同时测定莲子心提取物中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的含量。方法采用Hedera ODS-2色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：甲醇-0.05%三乙胺溶液（72.5∶27.5）;检测波长：283 nm;柱温：25℃;流速：1.0ml·min-1。结果 3种生物碱分离良好,莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱分别在3.92～117.60、3.84～115.20、5.44～163.20μg·ml-1范围内呈现良好的线性关系。利用该法测定莲子心提取物及其胶囊剂中生物碱的含量,平均总碱含量高于76%。结论该测定方法准确性高、重复性好、专属性高,可用于同时测定莲子心提取物及其胶囊剂中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的含量。

RP-HPLC法同时测定莲子心提取物中4种生物碱的含量

目的应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定莲子心提取物中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱和莲心季铵碱4种生物碱的含量。方法色柱谱:ZORBAX SB-C 18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水-三乙胺(磷酸调节pH值为3.3);流速:0.8 mL·min^-1;检测波长:282 nm;柱温:30℃;进样量:20μL。结果莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱和莲心季铵碱分别在0.4~4.9,0.5~6.1,0.0525~0.6200和0.614~2.158μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r>0.9994),且平均回收率较好(RSD<2.3%);样品中4种生物碱的含量分别为66.95,38.71,62.43和35.82μg·mL-1。结论RP-HPLC法可用于同时测定莲子心提取物中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱和莲心季铵碱的含量,该方法简便、高效,灵敏度高,具有较好的重复性,可为莲子心提取物的质量控制提供参考。

HPLC法测定不同炮制工艺莲子心中生物碱的含量

目的HPLC法测定不同炮制工艺莲子心中生物碱的含量,从而确定莲子心最佳炮制工艺。方法莲子心测定:色谱柱:Hypersil BDS柱(250mm×4.6mm,5μm);乙腈-水(46∶54,V/V),乙二胺调pH为10.98为流动相;流速:1.0mL.min-1;紫外检测波长(λ)为282nm;测定不同炮制工艺莲子心中生物碱的含量。结果莲心碱在0.192μg～1.344μg范围内,异莲心碱在0.152μg～1.064μg范围内,甲基莲心碱在0.176μg～0.75μg范围内呈良好的线性关系;并均具有较好的加样回收率。结论该方法灵敏度高,重复性好,可同时用于对莲子心药材中3种异喹啉生物碱的含量测定。

HPLC测定建莲莲子心生物碱的含量

目的:建立同时测定莲子心中莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱含量的HPLC方法,并测定了10个不同产地、批次的建莲莲子心生物碱的含量。方法:Platisil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水(55∶45),乙二胺调pH 9.80;检测波长282 nm,流速1 mL·min-1。结果:莲心碱在3.9～115.9 mg·L-1(r=0.999 8)、异莲心碱在4.0～120.7 mg·L-1(r=0.999 8)、甲基莲心碱9.7～290.2 mg·L-1(r=0.999 8)呈现良好的线性关系。平均回收率分别为100.24%,99.17%,100.10%,RSD分别为0.78%,1.31%,1.40%。福建产的10个不同产地、批次的建莲莲子心的莲心总碱的含量多数在1.50%～2.00%。结论:该方法简便、灵敏、准确、可靠。测定的10个产地批次的建莲莲子心中,以产自福建建宁的几何莲子芯茶样品中莲心总碱含量最高,可达2.28%。

HPLC法测定莲子心提取物中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的含量

【目的】建立高效液相色谱法测定莲子心提取物中指标成分莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的方法,为莲子心提取物的质量控制提供依据。【方法】Gemini-NX5U C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-甲醇-水-三乙胺(40∶20∶40∶0.12)作为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长282 nm,柱温30℃。【结果】莲心碱在进样质量0.067~0.670μg,异莲心碱在进样质量0.107~1.070μg,甲基莲心碱在进样质量0.148~1.480μg线性关系良好。方法稳定性、重复性好。莲心碱平均回收率为99.75%、异莲心碱平均回收率为100.53%、甲基莲心碱平均回收率为101.05%;RSD值分别为1.57%、1.54%和1.14%。【结论】所建立的高效液相色谱法简单快速,稳定性高,重复性好,可以用于莲子心提取物的质量控制。

高效液相色谱法测定莲子心中3种生物碱的含量

建立了同时测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱等３种生物碱含量的高效液相色谱法，以二氯甲烷—异丙醇—二乙胺（７０∶３０∶０．２）为流动相，检测波长２８２ｎｍ，在上述条件下三组分能完全分离。

高效液相色谱法同时测定莲子心中四种异喹啉生物碱的含量

目的:建立同时测定莲子心中四种异喹啉生物碱-莲心季铵碱、莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的离子对反相高效液相色谱(RP-HPLC)法.方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,色谱柱:HibarTR,5μm,250 mm×4.6 mm;流动相:乙腈-水-冰醋酸(55:45:1,每1000 ml中加入4 g十二烷基磺酸钠);流速:1.2 ml/min;检测波长:282 nm;柱温:30℃.结果:莲心季铵碱在0.94～2.82μg,莲心碱在1.14～3.42μg,异莲心碱在0.7～2.1μg,甲基莲心碱在0.96～2.88μg范围内均呈良好线性关系;并均具有较好的加样回收率(＞95%).结论:该分析方法快速、准确、灵敏度高,重复性好,可用于同时对药材莲子心中四种异喹啉生物碱的含量测定.

四种莲子心生物碱对H_2O_2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨中药莲子心中4种生物碱莲心季铵碱(Lot)、莲心碱(Lien)、异莲心碱(Iso)和甲基莲心碱(Nef)对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化损伤的保护作用。方法采用MTT法测定不同浓度Lot、Lien、Iso和Nef对正常和H2O2损伤ECV304细胞活性的影响,通过比色法测定并比较各组细胞一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的水平。结果 Lot、Lien、Iso和Nef对正常ECV304细胞形态和活性均无影响;Lot为100μmol/L,Lien、Iso和Nef为0.1μmol/L时,对H2O2致损内皮细胞活性有较好的缓解作用,此时细胞活性分别为H2O2损伤组的112.8%、129.3%、125.6和118.2%(P<0.01或0.05)。4种生物碱在上述剂量时对H2O2致损内皮细胞形态的改善作用与阳性药卡托普利基本相近,除Lot的作用较弱外,Lien、Iso和Nef均可使受损内皮细胞的细胞间隙缩小,细胞彼此相连增强,细胞边界变清晰。另外,且4种莲子心生物碱均可提高H2O2致伤内皮细胞的NO浓度(P<0.05),增加损伤内皮细胞的NOS活性(P<0.05)。结论莲心季铵碱、莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱均对H2O2诱导内皮细胞损伤的有一定的保护作用,其作用机制可能是通过增加NOS生成提高血管内皮细胞释放NO,从而发挥保护内皮的功能。

大孔吸附树脂对莲子心中有效成分的分离纯化研究

目的研究大孔吸附树脂吸附分离莲子心中莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的工艺条件及参数。方法考察了AKS-W、AB-8和H214树脂对莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的静态及动态吸附性能,并采用HPLC定量分析莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱。结果AKS-W树脂对莲子心中有效成分有较好的吸附分离效果,提取物中莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的质量分数分别提高到10.2%、6.7%和11.9%。结论大孔型非极性吸附树脂AKS-W对莲子心中有效成分是一种较为理想的分离介质。

福建莲子心的质量评价

目的建立评价福建莲子心质量的方法。方法根据《中国药典》测定了福建莲子心的含水量、总灰分含量,用薄层色谱法进行鉴别;建立了HPLC测定莲子心生物碱含量的方法。结果福建莲子心的含水量、总灰分含量符合《中国药典》要求,莲子心的莲心碱最高含量为0.29%。结论福建莲子心生物碱含量差异较大;我们所建立的HPLC法简单、快速、灵敏、准确,可对莲子心进行有效的质量控制。

莲心碱与甲基莲心碱在大鼠体内的药动学研究

采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定莲心碱与甲基莲心碱在大鼠体内的血药浓度,并对2种生物碱的药动学及体内分布进行研究,比较2种生物碱在大鼠体内的药动学和组织分布差异。结果表明:建立的RP-HPLC适用于2种生物碱的体内药物浓度分析;莲心碱静脉注射给药后在大鼠血浆中的药物浓度-时间曲线符合二室模型;2种生物碱静脉注射给药后,均主要分布于大鼠的心、肝、脾、肺和肾,浓度依次为肾>肺>心>肝>脾,而在脑组织中均未检测到两种生物碱。本实验所建立的大鼠血浆和组织中莲心碱与甲基莲心碱含量的HPLC法具有专属、准确、简单及灵敏度等特点,适用于大鼠体内的药动学和组织分布学研究;静脉注射给药后,2种生物碱在大鼠体内均符合二室模型代谢;组织分布学研究表明,2种生物碱给药后均能分布于心、肝、脾、肺和肾等主要脏器但不能穿透血脑屏障。

湘莲莲房中主要生物碱成分提取方法优化与含量测定

目的以莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱为湘莲莲房质量评价指标,优化提取工艺参数,建立高效液相色谱法同时测定3种物质。方法用酸性80%乙醇作溶剂超声提取莲房生物碱类成分,碱化后分离定量。经Waters XSelect C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,以甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钠为流动相进行梯度洗脱。结果莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱分别在1.994~79.76μg/mL(r^(2)=0.9993,n=6)、1.951~78.05μg/mL(r^(2)=0.9996,n=6)、1.972~78.87μg/mL(r^(2)=0.9998,n=6)范围内线性关系良好,回收率分别为99.5%、98.2%、98.7%(n=9)。结论该方法简便、回收率高,实验结果为莲房中生物碱定量分析和湘莲莲房质量评价提供参考。

对《中国药典》2015年版一部莲子心含量测定方法的改进

目的:改进并优化莲子心中有效组分莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的含量测定方法。方法:80%乙醇浸泡30 min,超声处理30 min进行提取,采用TSKgel ODS-100V(4.6 mm×250 mm,5μm)柱;流动相为乙腈-0.015 mol·L^(-1)十二烷基磺酸钠溶液(取十二烷基磺酸钠0.41 g,加水100 m L使溶解)-冰醋酸(54∶45∶1);流速1.0 m L·min^(-1);检测波长230 nm,柱温35℃。异莲心碱、甲基莲心碱含量以莲心碱计。结果:莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱能得到较好分离。进样量在0.050 04~1.251μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=1.000 0(n=7),平均回收率为88.6%,RSD=1.5%(n=6)。修改后方法对莲心碱的提取率是药典方法的192%。结论:本法比药典方法提取率高,所用试剂毒性小且操作简便,HPLC图谱分离好,测定准确、稳定、重复性好,可用于市售莲子心的质量评价。

莲子心中3种生物碱类成分含量影响因素分析

目的:分析莲子心中3种生物碱类成分含量的影响因素,为制订合理的莲子心质量标准提供依据。方法:用HPLC法测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的含量。采用SPSS19.0软件行单因素方差分析,比较不同采收期、不同加工方式、不同品系莲子心中3种生物碱类成分含量的差异。结果:莲子心不同采收期的甲基莲心碱、莲心碱含量有较大差异,嫩莲明显低于麻莲和铁莲(P<0.05);不同加工方式对其含量也有影响;不同品系莲子中莲子心生物碱类成分含量差异无统计学意义(P>0.05);3种成分单一量与生物碱总量均呈极显著正相关。结论:应严格执行中国药典关于莲子心的采收期和加工方式的规定,建议选择甲基莲心碱作为莲子心含量测定指标性成分。

基于磺化杯芳烃的莲子心中生物碱类成分辅助提取工艺优化研究

目的:优化莲子心在磺化杯6芳烃(SC6A)或磺化杯8芳烃(SC8A)辅助下的提取工艺条件,并验证莲子心中主要生物碱类成分与SC6A、SC8A的选择性键合作用。方法:以莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱为指标,采用单因素结合正交设计优化确证最佳药材提取工艺;荧光竞争滴定法测定生物碱与SC6A、SC8A的键合常数并采用核磁共振氢谱(1H-NMR)对代表性键合物进行结构表征以验证键合作用。结果:与传统水提工艺比较,SC6A辅助提取可分别增加莲子心中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的提取效率2.52、2.04、2.12倍,SC8A辅助提取可分别增加2.49、2.14、2.13倍。SC6A、SC8A与3种生物碱均为1∶1键合比例。结论:SC6A、SC8A可用于莲子心中生物碱类成分的提取,能显著提高提取效率且工艺简单、安全、环保。