Ligustrazini Inhibits Endotoxin Induced PAI-1 Expression in Human Umbilical Vein Endothelial Cells

Plasminogen activator inhibitor 1 (PAI 1) is one of important coagulant factors. Endotoxin lipopolysaccharide (LPS) induces thrombosis by stimulating PAI 1 secretion of vascular cells (EC). Using sandwich enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and Northern blot, was investigated the effects of Chinese medicine ligustrazini on PAI 1 expression in EC and LPS stimulated EC. The results showed that ligustrazini inhibited both basal and LPS induced PAI 1 mRNA expression in EC. The effect of ligustrazini on LPS induced PAI 1 secretion worked in a dose dependent manner. This study provided theoretic and experimental evidence for use of ligustrazini against septic shock and cardiovascular diseases.

Mechanism of ligustrazini against thrombosis

Objective To investigate the mechanism of Chinese medicine ligustrazini against thrombosis, and the effects of ligustrazini on plasminogen activator inhibitor (PAI 1) expression in normal endothelial cells and lipopolysaccharide (LPS) stimulated endothelial cells Methods Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were cultured by trypsin digestion method PAI 1 protein in HUVEC conditioned medium was measured by Sandwich enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), and PAI 1 mRNA expression was determined by Northern blot analysis Using electrophoretic mobility shift assay (EMSA), we observed HUVEC nuclear factor kappa B (NF κB) nuclear translocation Results LPS treatment of cultured HUVECs resulted in a significant increase in PAI 1 protein and mRNA expression by these cells However, when HUVECs were incubated with LPS plus ligustrazini, the upregulation of PAI 1 by LPS was abated Moreover, ligustrazini could decrease the basal level of PAI 1 protein and mRNA in HUVECs as compared with control Nuclear extracts prepared from HUVECs stimulated by LPS demonstrated that binding to the NF kB oligo nucleotide increased as compared with the unstimulated cells, but ligustrazini did not change those binding in the absence or presence of LPS Conclusions Ligustrazini inhibited both basal and LPS induced PAI 1 protein and mRNA expression in endothelial cells, and the modulation of PAI 1 in HUVECs by ligustrazini might have other mechanisms rather than NF kB pathway

川芎嗪对实验性心肌缺血再灌注损伤中一氧化氮和内皮素的干预

目的 :探讨一氧化氮 (NO)和内皮素 (ET)在心肌缺血再灌注损伤 (MIRI)中的作用及川芎嗪对其的影响。方法 :实验兔分为假手术对照组 (n =10 )、心肌缺血再灌注组 (n =10 )及心肌缺血再灌注 +川芎嗪组 (n =10 ) ;分别检测缺血前、缺血 40min和再灌注 2 0min 3个时点的指标变化。检测血浆及心肌组织一氧化氮代谢产物 (NOP)含量、测定ET水平、乳酸脱氢酶 (LDH)活性 ,并行心肌电镜观察。结果 :心肌缺血 40min、再灌注 2 0min血浆NOP明显低于、ET及LDH显著高于假手术对照组 ,尤以再灌注 2 0min变化显著 (均P <0 0 1) ;心肌组织NOP和LDH明显低于、ET显著高于假手术对照组 (P <0 .0 5和P <0 .0 1) ;心肌超微结构发生异常改变。川芎嗪可逆转上述指标的异常变化。结论 :缺血再灌注导致血管内皮功能紊乱 (即NO水平下降和ET水平升高 ) ,在MIRI发生发展中起介导作用 ;川芎嗪通过保护冠脉内皮 ,提高机体内NO水平和降低机体内ET水平 。

川芎嗪和维拉帕米纠正阿霉素对小鼠艾氏腹水癌的抗药性

阿霉素(adriamycin,ADR)广泛应用于肿瘤临床,但易产生抗药性及多药抗药性(multidrug resistance,MDR),从而限制了其临床疗效的发挥。MDR与细胞表型改变有关。抗ADR的人乳腺癌细胞和小鼠SEWA癌细胞内,谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活性增高。ADR的MDR可被钙拮抗剂逆转,但是否与GST有关尚未见报道。

尼莫通和川芎嗪对脑缺血-再灌注时c-fos和bcl-2蛋白表达的影响

目的：为临床应用尼莫通和川芎嗪治疗缺血性脑血管病提供充分的理论依据。方法：对实验大鼠于脑缺血前应用尼莫通和川芎嗪进行药物干预，然后采用免疫组化法检测脑缺血 再灌注不同时间内ｃ ｆｏｓ 及ｂｃｌ ２蛋白表达的变化。结果：①与未用药组相比，尼莫通组和川芎嗪组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小，但两用药组之间相比无显著性差异；②尼莫通组和川芎嗪组脑缺血 再灌注时皮质和基底节区ｃ ｆｏｓ的表达明显下降；而ｂｃｌ ２ 的表达明显增高。

川芎嗪对缺血-再灌注损伤兔心肌线粒体结构及功能的影响

为了探讨川芎嗪对心肌缺血 再灌注损伤 (MIRI)时心肌细胞线粒体功能及结构的影响。本实验选用日本大耳白兔 30只 ,随机分为正常对照组 (A组 )、心肌缺血 再灌注损伤组 (B组 )和心肌缺血 再灌注损伤 +川芎嗪治疗组(C组 )。复制MIRI模型 ,分别观察心肌线粒体呼吸功能、Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]m)、丙二醛浓度 (MDA)、超氧化物歧化酶活性 (SOD)及超微结构的改变和心肌组织三磷酸腺苷 (ATP)、二磷酸腺苷 (ADP)、一磷酸腺苷 (AMP)含量、总腺苷酸量 (TAN)、能荷 (EC)的变化。结果发现 ,C组与B组比较 ,线粒体呼吸控制率 (RCR)、Ⅲ态呼吸速率 (ST3)、SOD、面密度 (Sv)、比表面 (δ)明显升高 ,Ⅳ态呼吸速率 (ST4 )、[Ca2 + ]m 、MDA、体密度 (Vv)、横径 (Hd)显著降低 ,心肌组织ATP、ADP、TNA及EC均明显增高 ;且与A组比较 ,ST3、ST4 、SOD、Vv、Sv、δ、数密度 (Nv)、纵径 (Vd)及ADP、AMP、TNA无明显差异。可见 ,川芎嗪可通过降低氧自由基水平和减轻钙超载 ,而改善缺血 再灌注损伤心肌的线粒体功能及结构。

川芎嗪抗剪切应力诱导血小板聚集的实验研究

目的：观测川芎嗪对剪切应力诱导血小板聚集（ＳＩＰＡ）的影响。方法：采用新研制的激光散射剪切装置观测川芎嗪及对照药Ａｓｐｉｒｉｎ在体内外对抗ＳＩＰＡ的作用。结果与结论：Ａｓｐｉｒｉｎ能抑制ＡＤＰ诱导的血小板聚集，但不能抑制ＳＩＰＡ。川芎嗪在体内（２５～５０ｍｇ·ｋｇ－１）体外（９．２～７３．４ｍｍｏｌ·Ｌ－１）均有显著抗ＳＩＰＡ作用（Ｐ＜０．０１），其机制待进一步研究。

川芎嗪抗血栓形成的机制研究

纤溶酶原激活物抑制剂-1是一种重要的促凝血因子。内毒素脂多糖通过刺激血管内皮细胞分泌纤溶酶原激活物抑制剂-1导致炎症过程中血栓形成。为探讨其机制，本文采用酶联免疫吸附试验法、North-ern印迹法和电泳迁移法观察中药川芎嗪对内毒素脂多糖所致内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1表达的影响及可能机制进行探讨。结果发现．川芎嗪不仅抑制内毒素脂多糖所致内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1蛋白分泌和mRNA表达．而且抑制内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1基础水平的表达。此结果提示，川芎嗪并非通过核因子NF－KB途径抑制内毒素脂多糖所致内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1表达增强的作用。

川芎嗪预处理对清醒大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :用心肌缺血预处理的整体动物模型 ,观察川芎嗪预处理对清醒大鼠心肌缺血灌注损伤所致心律失常、心肌梗塞面积、乳酸脱氢酶和磷酸肌酸激酶活性的保护作用。方法 :先将实验动物麻醉 ,在人工呼吸状态下 ,开胸 ,左主动脉下穿线。然后 ,缝合胸腔。术后第 6d ,进行实验。单纯缺血再灌注组 :结扎冠脉 30min ,其后再灌 12 0min ;缺血预处理组 :冠脉结扎 5min ,再灌 5min ;然后 ,再次结扎冠脉 30min ,其后再灌 12 0min ;药物组 :川芎嗪 2 0mg·kg- 1 和 40mg·kg- 1 分别连续静脉给药 5min ;5min后 ,结扎冠脉 30min ,其后再灌 12 0min ;结果 :川芎嗪降低缺血和再灌时间VF和VT的发生 ,其发生率为 37 5 % ;使心肌梗塞面积缩小 ,乳酸脱氢酶和磷酸肌酸激酶的释放减少 ;上述指标与单纯缺血再灌注组相比 ,均有显著性差异。其结果与缺血预处理(冠状结扎 5min ,再灌 5min)对心肌缺血再灌注损伤产生的保护作用一致。结论 :川芎嗪通过预处理途径对清醒大鼠心肌缺血再灌注损伤所致心律失常、心肌梗塞面积、乳酸脱氢酶和磷酸肌酸激酶活性产生保护作用。

川芎嗪对肝缺血-再灌注损伤时黄嘌呤氧化酶活性的影响

目的 :探讨川芎嗪 (L GT)对肝缺血再灌注损伤 (HIRI)时黄嘌呤氧化酶 (XO)活性的影响。方法 :选择 HIRI实验兔及肝癌手术患者 ,动态观察血浆 XO活性的变化及 L GT对它的影响。结果 :HIRI期间 ,血浆及肝组织内 XO活性明显增强 (P<0 .0 5和 P<0 .0 1) ;使用 L GT后 ,XO活性的异常变化显著减轻 ,其差异有显著性意义 (P<0 .0 5和 P<0 .0 1)。结论 :L GT可有效地抑制 HIRI时 XO活性而减少氧自由基的形成。

川芎嗪预处理对麻醉家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

川芎嗪 2 0mg/kg和 40mg/kg于冠状动脉结扎前连续静脉给药 5分钟 ,能降低麻醉家兔缺血再灌注时室颤 (VF)和室速 (VT)的发生率及心肌梗塞面积和血浆乳酸脱氢酶 (LDH)增高的程度 ,可使缺血再灌注后的左室内压 (LSVP)、左室压最大上升及下降速率 (±dp/dtmax)升高 ,这种保护作用与预适应产生的结果一致 。

川芎嗪对实验性缺血—再灌注损伤心肌能量代谢的干预

目的 探讨川芎嗪对心肌缺血—再灌注损伤 (MIRI)时心肌细胞能量代谢的影响。方法 实验兔 30只 ,随机分为正常对照组 (A组 )、MIRI组 (B组 )和MIRI+川芎嗪治疗组 (C组 )。复制MIRI模型 ,分别观察心肌组织内三磷酸腺苷 (ATP)、二磷酸腺苷 (ADP)、一磷酸腺苷 (AMP)含量、总腺苷酸量 (TAN)、能荷 (EC)及心肌超微结构的改变。结果 C组与B组比较 ,心肌组织内ATP、ADP、TAN含量及EC均明显增高〔ATP :C组为 (5 0 5± 1 34) μmol/g(湿重 ) ,B组为 (2 86± 1 2 2 ) μmol/g(湿重 ) ,P <0 0 1;ADP :C组为 (1 6 7± 0 4 0 ) μmol/g(湿重 ) ,B组为 (1 12± 0 2 5 ) μmol/g(湿重 ) ,P <0 0 1;TAN :C组为 (8 4 2± 1 90 ) μmol/g(湿重 ) ,B组为 (5 83± 1 5 5 ) μmol/g(湿重 ) ,P <0 0 1;EC :C组为 0 70± 0 0 3,B组为 0 5 8± 0 0 7,P <0 0 1〕 ;且与A组比较 ,ADP、AMP、TAN无明显差异〔ADP :A组为 (2 0 4± 0 5 3) μmol/g(湿重 ) ,P >0 0 5 ;AMP :A组为 (1 4 5± 0 2 9) μmol/g (湿重 ) ,P >0 0 5 ;TAN :A组为 (10 2 6± 2 0 5 ) μmol/g(湿重 ) ,P>0 0 5〕 ;心肌超微结构的异常改变显著减轻。结论 川芎嗪可改善缺血—再灌注损伤心肌的能量代谢。

川芎嗪预处理对心肌缺血再灌注所致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 :用心肌缺血预处理的整体动物模型 ,观察川芎嗪预处理对麻醉大鼠心肌缺血再灌注所致血管内皮细胞损伤的保护作用。方法 :动物麻醉后 ,在人工呼吸状态下 ,开胸 ,结扎左冠状动脉。单纯缺血再灌注组 :结扎冠脉 3 0min ,其后再灌 12 0min ;缺血预处理组 :冠脉结扎5min ,再灌 5min ;然后 ,再次结扎冠脉 3 0min ,其后再灌 12 0min ;药物预处理组 :川芎嗪 2 0mg·kg-1 连续静脉给药 5min ;5min后 ,结扎冠脉3 0min ,其后再灌 12 0min ;假手术组 :冠脉下穿线 ,不做任何处理。实验结束后 ,腹主动脉采血 ,分离血浆。用放免法 (RIA)测ET ,TXB2 /6 酮 PGF1α,降钙素相关基因肽 (CGRP)。结果 :川芎嗪预处理降低缺血再灌后ET及TXB2 的释放 ,而 6 酮 PGF1α的释放增加 ,对CGRP没有影响。结论

汉防已甲素、罗通定及川芎嗪对肿瘤细胞株KBV200多药耐药性逆转作用的研究

目的探讨中药汉防已甲素、罗通定及川芎嗪逆转肿瘤细胞株KBV200多药耐药性作用。方法用四唑盐比色法检测细胞株对药物敏感性,用逆转录多聚酶链反应检测耐药株用药前后肿瘤多药耐药基因的表达。结果在最适逆转浓度下,汉防已甲素(10-6mol/L),罗通定(10-5mol/L)对KBV200耐药性有明显逆转作用,川芎嗪(10-4mol/L)有一定作用,使长春新碱对耐药细胞株KBV200半数致死量由1 122nmol/L分别降至32 nmol/L、35.8nmol/L及541nmol/L。在上述浓度下,3种逆转剂分别与长春新碱(400nmol/L)合用,细胞存活率分别为0.32±0.1、0.29±0.05、0.56±0.1,较对照0.76±0.05有显著差异(P<0.001)。在同样浓度下,3种逆转剂都能使耐药株肿瘤多药耐药基因mRNA表达降低,但与对照比,无显著性差异。结论汉防已甲素、罗通定逆转肿瘤多药耐药性效果好,川芎嗪有一定逆转作用,它们不良反应小,有良好临床应用前景。

川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤时血浆TXA_2/PGI_2水平的影响

目的 :探讨川芎嗪对小肠缺血再灌注损伤 (IIRI)血浆血栓素A2 (TXA2 ) /前列环素 (PGI2 )水平的影响。方法 :19只实验兔随机分为 2组 :肠缺血再灌注组 (IIR组 ,n =9)和肠缺血再灌注 +川芎嗪治疗组 (LGT组 ,n =10 )。用放免法分别测定不同时间点血浆TXB2 、6 酮基 PGF1α含量及其比值。结果 :IIR组家兔缺血 6 0min后血浆TXB2 含量、TXB2 / 6 酮基 PGF1α比值显著升高 (P <0 .0 5和P <0 .0 1) ,再灌注 15min及 30min血浆TXB2含量升高、血浆 6 酮基 PGF1α明显下降 (P <0 .0 1)、TXB2 / 6 酮基 PGF1α比值升高 (P <0 .0 1) ;应用川芎嗪能降低血浆TXB2 水平 ,升高血浆 6 酮基 PGF1α水平 ,使TXB2 / 6 酮基 PGF1α保持正常 ;与IIR组比较 ,LGT组家兔缺血 6 0min、再灌注 15min及 30min时血浆TXB2 含量、6 酮基 PGF1α含量及其比值差异均有显著性 (P值分别 <0 .0 5和 <0 .0 1)。结论 :川芎嗪可纠正肠缺血再灌注损伤时血浆TXA2 /PGI2 的失调 ,通过遏制无复流现象 ,对肠缺血再灌注损伤起保护作用。

川芎嗪对肝缺血-再灌注损伤家兔血浆TXA_2/PGI_2水平的影响

目的:探讨川芎嗪对肝缺血-再灌注损伤家兔血浆TXA_2/PGI_2水平的影响.方法:制作家兔肝缺血-再注损伤模型,30只家兔平均分为川芎组、盐水组和对照组,应用放免法测定血浆TXB_z,6-酮基-PGF_(1(?))及其比值.结果:家兔肝缺血45min及再灌注45min血浆TXB_2.水平明显上升,6-酮基-PGF_(1(?))水平缺血45min时无明显变化,再灌注45min时显著下降,TXB_2/6-酮基-PGF_(1(?))水平增加;应用川芎嗪治疗能降低TXB_2水平,升高6-酮基-PGF_(1(?))水平,使TXB_2/6-酮基-PGF_(1(?))比值保持在正常水平.结论:川芎嗪可纠正肝缺血-再灌注后循环血中TXA_2/PGI_2的平衡失调,对肝缺血-再灌注损伤具有积极的防治作用.

川芎嗪对脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的 :探讨川芎嗪对脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响。方法 :对实验大鼠于脑缺血前应用川芎嗪进行干预 ,然后采用免疫组化法检测脑缺血再灌注不同时间内凋亡相关基因 c- fos及 bcl- 2蛋白表达的变化。结果 :川芎嗪组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小 ,川芎嗪组脑缺血再灌注时皮层和基底节区 c- fos的表达明显下降 ,而 bcl- 2的表达明显增高。结论 :川芎嗪可抑制脑缺血再灌注时细胞凋亡的发生 。

川芎嗪预处理对心肌缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

以低氧 3h/再给氧 1h期间心肌细胞的生存率、搏动频率、乳酸脱氢酶、丙二醛和超氧化物歧化酶释放为指标 ,观察了蛋白激酶C阻断剂staurosporine和Gi/o蛋白失活剂PTX在低氧预处理和川芎嗪预处理心肌保护中的作用 ,以探讨川芎嗪预处理对心肌缺血再灌注损伤保护作用的机制。结果表明 :分别用staurosporine和PTX处理细胞 10min和 5h后 ,给予低氧预处理和川芎嗪(2 0 μg/ml)预处理 ,心肌细胞在低氧 3h/再给氧 1h后期间 ,其细胞搏动频率、细胞生存率均下降 ;培养液中乳酸脱氢酶和丙二醛释放增多 ,而超氧化物歧化含量下降 ,与单纯低氧 /再给氧组相比均无显著性差异。表明PKC阻断剂和Gi/o蛋白失活剂可取消低氧预处理和川芎嗪预处理对心肌细胞的保护作用 。

盐酸川芎嗪注射液在常用输液中的稳定性考察

目的 :研究盐酸川芎嗪注射液在 6种常用输液中的稳定性。方法 :应用紫外分光光度计、酸度计、注射液微粒分析仪分别考察盐酸川芎嗪注射液与 6种输液配伍后在不同温度下的外观、含量、pH、微粒及紫外吸收光谱的变化。 结果 :盐酸川芎嗪注射液与 6种输液配伍后外观、pH、微粒、含量、紫外吸收光谱均无显著变化。 结论 :盐酸川芎嗪注射液可与6种输液配伍应用。

川芎嗪抑制内毒素致血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂的表达

纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）是一种重要促凝血因子。内毒素脂多糖（LPS）通过刺激血管内皮细胞（EC）分泌PAI-1且而导致血栓形成。采用ELISA的Northern印迹方法观察中药川芎嗪对EC及LPS致EC表达PAI-1的影响。结果表明川芎嗪不仅抑制LPS致EC PAI-1的分泌和mRNA表达,而且抑制 EC PAI-1基础水平mRNA表达。川芎嗪对LPS致 EC PAI-1分泌的抑制呈剂量效应关系。为川芎嗪抗感染性休克和治疗心血管疾病提供了重要的理论和实验依据。