子宫内膜癌血清PDK1、Lin28B、HMGA2变化及意义

目的探讨子宫内膜癌患者血清磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDK1)水平、内膜组织Lin-28同系物B(Lin28B)、高迁移率族蛋白2(HMGA2)变化及意义。方法选取子宫内膜癌患者120例(观察组)和子宫良性病变80例(对照组),采用ELISA试剂盒检测血清PDK1水平,以免疫组织化学法检测子宫内膜癌组织及良性病变子宫内膜组织Lin28B、HMGA2阳性表达。比较两组血清PDK1水平及子宫内膜组织Lin28B、HMGA2阳性表达率,并观察不同临床病理特征子宫内膜癌患者PDK1、Lin28B、HMGA2表达特点,分析血清PDK1水平及子宫内膜组织Lin28B、HMGA2阳性表达对子宫内膜癌的诊断价值。结果与对照组比较,观察组血清PDK1水平及子宫内膜组织Lin28B、HMGA2阳性表达率升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。不同病理分期、分化程度、肿瘤直径、有无肌层浸润、淋巴结转移、脉管浸润子宫内膜癌患者血清PDK1水平及内膜组织Lin28B、HMGA2阳性表达比较差异有统计学意义(P均<0.05)。以血清PDK1≥47.88 U/mL、子宫内膜组织Lin28B、HMGA2表达阳性为诊断标准,三项联合检测诊断子宫内膜癌的特异度、阳性预测值分别为93.75%、95.24%,均高于PDK1、Lin28B、HMGA2单项检测(P均<0.05)。结论子宫内膜癌患者血清PDK1水平及子宫内膜癌组织Lin28B、HMGA2的阳性表达率增高,且与肿瘤病理分期、组织分级、肌层浸润、淋巴结转移、脉管浸润、肿瘤直径相关,三者联合检测对子宫内膜癌的诊断价值较高。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清FOXO3a、LIN28B水平及其预后价值

目的探究慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血清中叉头框转录因子O亚家族成员3a(FOXO3a)、Lin-28同系物B(LIN28B)表达水平及其对预后的评估价值。方法选取105例AECOPD患者为研究对象(加重组),选取同期收治的COPD稳定期患者60例作为稳定组,同期体检健康者60例作为对照组。检测血清FOXO3a、LIN28B水平;Pearson法分析血清FOXO3a、LIN28B水平相关性;根据加重组患者预后情况分为存活组(n=86)和死亡组(n=19);Logistic回归分析患者预后的影响因素;绘制AECOPD患者预后的受试者工作特征(ROC)曲线。结果对照组、稳定组及加重组白细胞计数(WBC)、血清降钙素原(PCT)、血清FOXO3a和LIN28B水平依次升高(P<0.05)。血清FOXO3a与LIN28B表达水平呈现正相关(r=0.548,P<0.05)。多因素Logistic回归分析发现FOXO3a和LIN28B是影响AECOPD的独立危险因素。血清FOXO3a、LIN28B、联合预测AECOPD患者预后的AUC分别是0.922、0.799和0.942;灵敏度分别为94.74%、84.21%和94.74%;特异性分别为84.88%、65.12%和86.05%;二者联合优于血清LIN28B和FOXO3a单独预测(Z_(联合-LIN28B)=2.321,Z_(联合-FOXO3a)=2.874;P均<0.05)。结论AECOPD患者血清FOXO3a、LIN28B水平显著高于稳定组和对照组,可有效预测AECOPD患者预后状况。

LIN-28B/Let-7/MYCN轴在神经母细胞瘤中的研究进展

神经母细胞瘤(NB)是儿童时期最常见的颅外实体肿瘤,高危患者临床进展迅速,治疗反应差,尤其晚期高危患儿对化疗及放疗不敏感,5年生存率非常低,严重影响儿童健康。MYCN癌基因、Let-7家族以及RNA结合蛋白(LIN-28B)在多种恶性肿瘤的发生发展中具有重要生物学功能,而且能够相互作用形成复杂的信号通路,在恶性肿瘤中所起的作用正日益受到重视。现有治疗对NB总体生存率的改善并不理想,MYCN癌基因、Let-7家族、LIN-28B以及LIN-28B/Let-7/MYCN轴可能在NB的发病机制中有重要作用,如果能够进一步明确NB的发病机制,或许能够为NB治疗提供新思路。

成人头颈部横纹肌肉瘤组织中lin-28同源基因B的表达及临床意义

目的探讨成人头颈部横纹肌肉瘤组织中lin-28同源基因B(LIN28B)的表达及临床意义。方法收集2009年1月至2015年12月我院22例年龄≥16周岁的头颈部横纹肌肉瘤患者的肿瘤组织,以及5例因其他实体肿瘤行手术切除患者的正常横纹肌组织(阴性对照)。采用免疫组织化学染色检测肿瘤组织中LIN28B蛋白的表达,并分析其表达与成人头颈部横纹肌肉瘤患者临床病理参数(性别、年龄、组织学类型、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、危险分组及颅底骨质破坏)和预后的关系。结果免疫组织化学染色结果显示LIN28B蛋白在正常横纹肌组织中呈阴性表达,而在成人头颈部横纹肌肉瘤组织中呈阳性表达,阳性表现为细胞质染色呈棕黄色。根据组织学评分,12例成人头颈部横纹肌肉瘤患者的LIN28B表达呈低表达(0~3分),10例呈高表达(≥4分)。LIN28B在非胚胎性横纹肌肉瘤、肿瘤大小>5 cm患者的肿瘤组织中表达水平较高(P=0.020、0.030);LIN28B表达与患者性别、年龄、淋巴结转移与否、TNM分期、危险分组及颅底骨质破坏与否无关(P均>0.05)。22例成人头颈部横纹肌肉瘤患者中位随访时间为78.4个月,中位无进展生存期及中位总生存期分别为12.4个月及17.9个月,5年无进展生存率及总生存率分别为11.4%及13.6%。LIN28B低表达成人头颈部横纹肌肉瘤患者的中位无进展生存期为17.9个月,长于高表达者的8.2个月(P=0.003);LIN28B低表达者的中位总生存期为23.5个月,长于高表达者的10.9个月(P=0.009)。结论LIN28B表达与成人头颈部横纹肌肉瘤肿瘤大小及组织学类型有关。LIB28B可能与成人头颈部横纹肌肉瘤的发生、发展有关,并且其高表达提示预后不良。

反式激活活性蛋白、lin-28同源基因B在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨反式激活活性蛋白(trans activator protein,c-Myc)、lin-28同源基因B(lin-28 homolog B,LIN28B)在胃癌组织中的表达及与预后(总生存期)的相关性。方法回顾性分析2015年3月至2017年4月于北京市隆福医院行手术切除治疗的134例胃癌患者的临床资料。收集所有胃癌患者胃癌组织与癌旁正常组织,检测其c-Myc、LIN28B表达水平(均采用免疫组织化学法测定),并采用单因素与多因素COX回归分析c-Myc、LIN28B在癌组织中的表达水平及胃癌患者预后的危险因素,通过绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic curve,ROC)曲线探讨胃癌患者术后生存情况。结果c-Myc、LIN28B在胃癌组织中的高表达比率76.86%(103/134)、82.84%(111/134)均明显高于癌旁正常组织14.93%(20/134)、21.64%(29/134)(P<0.05)。不同肿瘤淋巴结转移分类(tumor node metastasis classification,TNM)分期、分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移的胃癌患者癌组织中c-Myc、LIN28B表达率之间比较,差异有显著性(P<0.05)。多因素COX回归分析表明TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、c-Myc、LIN28B均为胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.05);c-Myc低表达胃癌患者5年生存率38.71%明显高于高表达患者18.45%(P<0.05),c-Myc低表达胃癌患者总生存期(27.04±3.11)个月明显大于c-Myc高表达患者(21.18±2.23)个月,差异有显著性(P<0.05),LIN28B低表达胃癌患者5年生存率39.13%明显高于高表达患者19.82%,差异有显著性(P<0.05),LIN28B低表达胃癌患者总生存期(28.65±3.24)个月明显大于LIN28B高表达患者(21.27±2.27)个月,差异有显著性(P<0.05)。结论TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、c-Myc以及LIN28B均为胃癌患者预后的独立危险因素,且c-Myc、LIN28B在胃癌组织中低表达的患者5年生存率较高、总生存期较长。

miR-4500通过转录后下调LIN28B表达抑制乳腺癌细胞的迁移和增殖

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-4500通过转录后下调LIN-28同系物B(lin-28 homolog B,LIN28B)基因表达对乳腺癌细胞HCC1937迁移和增殖的抑制作用。方法采用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测乳腺癌细胞系(MB-MDA-468、MCF7、SKBR3、HCC1937)中miR-4500的表达。以miR-4500表达最低的乳腺癌细胞系(HCC1937)为对象,分别转染miR-4500模拟物和miR-NC,命名为miR-4500组和miR-NC组。real-time PCR检测转染效果。Transwell实验和噻唑蓝(MTT)实验检测转染后乳腺癌细胞迁移和增殖能力。生物信息学软件预测和双荧光素酶报告实验验证miR-4500的靶基因。real-time PCR和Western blot检测乳腺癌细胞中靶基因的表达。结果miR-4500在乳腺癌细胞系的表达显著低于正常乳腺上皮细胞(P<0.05),并在HCC1937细胞中表达最低(P<0.01)。miR-4500组miR-4500的表达(11.60±1.08)显著高于miR-NC组(1.22±0.48),差异有统计学意义(P<0.01)。与miR-NC组比较,miR-4500组细胞迁移和增殖能力均显著降低(P<0.05)。生物信息学软件显示miR-4500的靶基因是LIN28B。双荧光素酶报告实验证明miR-4500可靶向结合LIN28B基因(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-4500组HCC1937细胞中LIN28B的表达显著降低(P<0.05)。结论LIN28B基因是miR-4500的靶基因,miR-4500可通过转录后下调LIN28B基因表达抑制乳腺癌细胞HCC1937的迁移和增殖能力。

miR-125a对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响及机制

目的探讨微小RNA-125a(miR-125a)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭等生物学行为的影响及机制。方法常规培养人EC细胞(JEC、HEC-1B、Ishikawa细胞)和子宫内膜上皮细胞(ECS细胞)。用RT-PCR法检测细胞中miR-125a表达,筛选miR-125a表达最低的细胞为实验细胞。取对数生长期miR-125a表达最低的EC细胞,并将其随机分为miR-NC组、miR-125a mimics组,分别转染miRNA阴性对照miR-NC、miR-125a模拟物miR-125a mimics。用RT-PCR法检测miR-125a表达,用CCK-8实验检测细胞增殖活性(OD值),用平板克隆实验检测细胞集落形成能力,用流式细胞术检测细胞凋亡能力(凋亡率),用Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法检测细胞内LIN28同系物B(LIN28B)蛋白表达。结果与ECS细胞比较,JEC、HEC-1B、Ishikawa细胞中miR-125a相对表达量均低(P均<0.05),且Ishikawa细胞miR-125a的相对表达量最低,将其作为实验细胞。与miR-NC组比较,miR-125a mimics组miR-125a表达高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-125a mimics组培养24、48、72 h后OD值低,集落形成数少,凋亡率高,迁移细胞数、侵袭细胞数少,LIN28B蛋白相对表达量低,比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论上调miR-125a表达可抑制EC细胞增殖、迁移及侵袭,并诱导其凋亡,该作用可能与其靶向调控LIN28B表达有关。

LIN-28B在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的检测不同恶性程度的原发性肝癌组织中LIN-28B的mRNA和蛋白的表达及其临床意义。方法应用荧光实时定量PCR（real-time quantitative PCR）技术和Western blot方法检测LIN-28B的mRNA及蛋白在36例肝癌（高分化10例，中分化14例，低分化12例）及相应的癌旁肝组织和10例正常肝脏组织中的表达，并分析与临床病理特点之间的相关性。结果荧光实时定量PCR分析显示，低分化的肝癌组织中LIN-28B阳性率为100％；中分化的肝癌组织阳性率为71．4％；高分化的肝癌组织阳性率只有20％。癌旁组织和正常肝组织中该基因低表达或不表达。Western blot检测的该基因蛋白质表达情况与mRNA的结果相似。结论LIN28B基因的过表达与肝癌细胞的恶性程度密切相关，表达量越高，其恶性程度愈大。