绵羊lipin2与lipin3蛋白表达研究

为了研究lipin2与lipin3蛋白在绵羊脂肪等不同组织中的表达差异性,试验应用Western-blot技术检测绵羊肝脏、肾脏、小肠、股二头肌、肾周脂肪、尾脂、睾丸组织中lipin2和lipin3蛋白表达量。结果表明：lipin2在睾丸、尾脂和肾周脂肪中的表达量较高,显著高于小肠（P〈0.05）,与肝脏、股二头肌、肾脏中的表达量差异不显著（P〉0.05）;lipin3在7种组织中均有较高的表达量,其中睾丸和尾脂中表达量较高,小肠中最低,各组织间表达量差异不显著（P〉0.05）。说明lipin2与lipin3在绵羊睾丸组织、肾周脂肪、肝脏中的高表达可能与其调控绵羊繁殖机能及脂肪沉积有关。

小于胎龄鼠肝脏肥胖基因Lipin2的表达及其意义

目的探讨小于胎龄(SGA)鼠肝脏中肥胖基因lipin2表达的动态变化及其意义。方法选取健康成年SD大鼠,建立孕期全程低蛋白SGA鼠模型,随机分为适于胎龄(AGA)组和SGA组,每组24只仔鼠。选择1 d、7 d、21 d和56 d作为观察点,测定其体质量及头臀长,留取肝脏组织,采用反转录(RT)-PCR和蛋白质免疫印迹技术(Western blot)检测其肝组织中lipin2 mRNA和蛋白的动态表达。结果 1.体质量指数(BMI):1 d SGA鼠BMI较AGA组降低(P<0.05);56 d SGA鼠的BMI较AGA组升高(P<0.01)。2.lipin2 mRNA和蛋白的表达:1 d SGA组低于AGA组(Pa<0.05),7 d和56 d SGA组均高于AGA组(Pa<0.05)。3.BMI与56 d大鼠lipin2蛋白表达量呈高度正相关(r=0.713,P=0.009)。结论 SGA鼠出生时体态瘦小,后出现追赶生长,青春期末期成年大鼠表现出肥胖倾向。lipin能敏感地反映不同阶段宫内发育迟缓仔鼠肝脏物质代谢情况,提示其参与了SGA鼠的糖脂代谢紊乱过程,lipin基因表达的改变可能为SGA鼠引起成年期代谢综合征发病机制之一。

Lipin基因表达与宫内发育迟缓大鼠肝脏脂肪含量的相关性研究

目的 探讨宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)大鼠肝脏Lipin2基因和内脏脂肪组织Lipin1基因的表达与肝脏脂肪含量的相关性。方法 使用母孕期低蛋白(10%蛋白)饮食法喂养孕鼠制造IUGR仔鼠模型,对照组孕鼠在孕期使用正常蛋白饲料喂养(蛋白含量21%)。分别在两组仔鼠生后1 d、1周、3周、8周和12周时称体重并留取仔鼠的肝脏组织,在生后3周、8周和12周留取两组仔鼠的内脏脂肪组织。采用3.0T氢质子磁共振波谱法检测两组大鼠生后3周、8周、12周时肝脏脂肪含量;采用Real-time PCR法检测两组大鼠各时间点肝脏组织Lipin2、内脏脂肪组织Lipin1基因的mRNA表达水平;采用Western blot法检测两组大鼠肝脏组织Lipin2、内脏脂肪组织Lipin1蛋白表达水平。采用Pearson相关分析Lipin mRNA及其蛋白表达与肝脏脂肪含量的相关性。结果 生后3周、8周、12周时,IUGR组仔鼠内脏脂肪组织Lipin1 mRNA及其蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05)。生后1 d时IUGR组肝脏组织Lipin2 mRNA及其蛋白表达水平低于对照组(P<0.05),而生后1周、3周、8周、12周时Lipin2 mRNA及其蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05)。生后3周时IUGR仔鼠和对照组肝脏脂肪含量比较差异无统计意义(P>0.05),生后8周、12周时IUGR组仔鼠肝脏脂肪含量显著高于对照组(P<0.05)。Lipin1蛋白和mRNA表达与肝脏脂肪含量呈正相关(分别r=0.628、0.521,P<0.05),Lipin2蛋白和mRNA表达与脂肪含量呈正相关(分别r=0.601、0.524,P<0.05)。结论 IUGR大鼠内脏脂肪组织Lipin1和肝脏组织Lipin2 mRNA及其蛋白表达上调可引起肝脏脂肪含量增加,可能与导致IUGR大鼠成年期肥胖有关。

基于SREBP-2/Lipin1轴调控的线粒体途径探讨糖尿病周围神经病变的发生机制

目的基于SREBP-2/Lipin1轴调控的线粒体途径探讨糖尿病周围神经病变的发生机制。方法 60只成年雄性SD大鼠,20只作为正常对照组,另外40只给予高糖高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,继续饲养6周,待大鼠尾部坐骨神经传导速度(SNCV)<30 m/s为糖尿病周围神经病变(DPN)模型成功。取正常对照组、DPN模型组大鼠各10只,取双侧坐骨神经,试剂盒法检测其活性氧(ROS)水平,Western blot检测SREBP-2、Lipin1蛋白表达。另外取10只正常对照组,30只DPN大鼠随机分为空白对照(NC)组、SREBP-2-siRNA(si-SREBP-2)组、Lipin1过表达(LV-Lipin1)组。si-SREBP-2组通过尾静脉注射SREBP-2-siRNA,LV-Lipin1组、NC组分别通过尾静脉注射Lipin1慢病毒载体、空慢病毒载体。取坐骨神经检测SREBP-2、Lipin1蛋白表达;8周后观察各组大鼠空腹血糖,测定SNCV;取坐骨神经检测线粒体膜电位、ROS、B淋巴细胞瘤2蛋白(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyto C)表达变化。结果与正常对照组比较,DPN模型组大鼠ROS含量、SREBP-2蛋白表达增加,Lipin1蛋白表达减少;调节SREBP-2、Lipin1表达后,与NC组大鼠比较,si-SREBP-2组、LV-Lipin1组大鼠坐骨神经SREBP-2蛋白表达下降,Lipin1蛋白表达升高,空腹血糖下降,SNCV加快,线粒体膜电位升高,ROS含量降低,Cyto C、Bcl-2水平升高,同时Bax蛋白水平下降。结论 DPN大鼠坐骨神经中存在SREBP-2、Lipin1表达异常,调节SREBP-2、Lipin1表达后可改善DPN大鼠坐骨神经病变,表明DPN的发生机制与SREBP-2、Lipin1调控的线粒体途径有关。