急性肝衰竭大鼠血浆内毒素水平的检测及其与肝细胞生长素的关系

本实验采用鲎试验基质显色法检测D-氨基半乳糖(GaLN)形成急性肝衰竭(FHF)模型大鼠血浆内毒素(LPS)水平,并探讨了肝细胞生长素(HGF)对其影响。结果表明:FHF早期血浆LPS水平较正常对照组水平(49±6.94pg/ml)明显升高,且其水平随时间延长而自然降低。动态观察第9小时为高峰期(234±83.8pg/ml),30小时为最低水平(63.1±18.4pg/ml),与正常对照组比较分别具非常显著(P<0.01)或显著性差异(P<0.05)。结合肝组织病理学检查结果提示,内毒素血症出现在形成明显的肝损害之前。以HGF早期一次性腹腔注射治疗,发现9小时治疗组血浆LPS水平(149±41.9pg/ml)明显低于盐水对照组水平(234±83.8pg/ml,P<0.005)。相反,24小时HGF组LPS水平升高(266±55.9pg/ml)而明显高于盐水对照组水平(153±71.9pg/ml,P<0.001)。改变给药方式,则24小时两组LPS水平比较无显著性差异(115±14.5pg/ml与117±12.1pg/ml,P>0.05)。本研究进一步说明HGF、内毒素血症及肝损伤三者间紧密联系,并提示HGF治疗FHF所出现的内毒素血症以间歇或持续用药为宜。

西洛他唑对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞分泌TNF-α的影响及机制探讨

目的研究西洛他唑对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞分泌TNF-α的影响,探讨西洛他唑对单核细胞的炎症调控作用。方法体外培养人THP-1单核细胞,分为对照组(A组)、LPS组(B组)、西洛他唑组(C组)、西洛他唑+SQ22536组(D组),C组和D组加入LPS刺激24 h。应用ELISA法检测各组细胞培养上清TNF-α水平,并测定各组细胞内c AMP浓度。结果西洛他唑能抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞分泌TNF-α,同时升高细胞内c AMP浓度。结论西洛他唑可抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞分泌TNF-α,这种作用可能与升高细胞内c AMP浓度有关。

动态监测TOLL样受体4在多器官功能障碍综合征大鼠肝组织中的表达

目的 动态监测多器官功能障碍综合征（MODS）大鼠肝组织中Toll样受体4（TLR4）蛋白的表达变化,探讨TLR4在MODS早期肝损伤中的作用.方法 实验在三峡大学医学院实验中心完成.将40只成年雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为健康对照组（8只）、MODS模型组（32只）,模型组又分为造模后6 h,12 h,24 h,48 h不同时相,每组8只.采用＂二次打击＂即眼球失血加腹腔注射脂多糖（LPS）制备MODS模型：大鼠左眼球取血2 mL/100 g,在放血4 h后予无菌腹腔注射LPS 5 mg/kg.对照组予以腹腔注射等量的生理盐水,造模完成后在不同的时间点搜集标本.肉眼、光镜观察肝组织的形态结构变化;采用流式细胞技术（FCM）测定肝组织和外周血白细胞表面TLR4蛋白表达.所有数据以均数±标准差（（x-）±s）表示,组间比较采用单因素方差分析（SNK法）.结果 （1）健康对照组肝组织结构无改变;NODS组肝组织损伤较重.（2）流式细胞技术结果显示,与对照组比较,造模后6h肝组织TLR4的表达开始增高,12 h达到高峰（P〈0.01）,24 h开始下降（P〈0.01）,48 h与对照组比较,差异无统计学意义.与对照组比较,造模后外周血白细胞表面TLR4的表达6～48 h组均有明显增加（P〈0.01）.结论 在MODS的早期,大鼠肝组织TLR4表达迅速上调,高表达的TLR4可能参与了MODS肝损伤的病理生理过程,TLR4有可能成为防治MODS新的靶点.

西洛他唑对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞分泌白细胞介素-6的影响及机制

目的:研究西洛他唑对脂多糖(LPS)诱导的人THP-1单核细胞分泌白细胞介素(IL)-6的影响及机制,探讨西洛他唑对单核细胞的炎症调控作用。方法:体外培养人THP-1单核细胞,分为对照组、LPS组、西洛他唑低浓度组、西洛他唑中浓度组以及西洛他唑高浓度组,西洛他唑各组分别加入不同浓度(10、20、40μmol/L)西洛他唑干预12h,再加入LPS刺激24h。应用ELISA法检测各组细胞培养上清IL-6水平,Westernblot检测各组细胞质IκBα及细胞核因子(NF)-κBP65的表达。结果:西洛他唑呈浓度依赖性抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞IL-6水平,减少IκBα的降解及核内NF-κBP65水平表达。结论:西洛他唑可抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞分泌IL-6,这种作用可能与抑制NF-κB活化有关。