液态与固态酵素理化成分及抗氧化活性的研究

为了对比分析液态酵素与固态酵素这2类市场上常见的酵素产品的差异,以3种液态酵素和3种固态酵素为原料,对其理化成分、生物活性物质及其体外抗氧化活性进行了分析与比较。结果显示,液态酵素产品的总酸、还原糖、可溶性固形物、总酚、总黄酮、花青素含量均显著高于固态酵素,液态酵素超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力较高,但差异很大,在193.23~1214.46 U/mL,显著高于固态酵素;2类酵素的蛋白酶、脂肪酶、α-淀粉酶活力均较低,液态酵素蛋白酶、脂肪酶活力显著高于固态酵素,而液态酵素几乎没有α-淀粉酶活力。不同酵素产品具有较强的抗氧化能力且差异较大,液态酵素1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力的IC 50值在5.65~21.08μL/mL,而固态酵素最小的IC50值为29.77μL/mL,液态酵素的抗氧化能力显著强于固态酵素。该研究为帮助人们了解不同状态的酵素产品品质,正确看待酵素产品提供了参考,对于促进酵素行业健康发展具有指导意义。

高效液相色谱法同时测定酵素原液中的乳酸和醋酸

建立了一种利用高效液相色谱法同时测定酵素原液中乳酸和醋酸的方法。通过对检测波长、流动相及其浓度和p H的筛选,建立利用高效液相色谱法同时测定酵素原液中乳酸与醋酸含量方法。结果表明,最优色谱条件为:色谱柱Sino Chrom ODS-BP(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为0.01 mol/L、p H2.88的KH2PO4溶液,流速0.8 m L/min,波长215 nm,进样量20μL,柱温25℃。该法可同时测定酵素中乳酸和醋酸,检测速度快,乳酸与醋酸的线性检测范围宽分别为0~2100、0~1800μg/m L。精密度和重复性好(乳酸和醋酸平行测定的RSD分别为0.99%、1.21%)并得到了良好的回收率(92.31%~102.20%)。

HPLC法同时测定食用植物酵素中12种有机酸

为研究食用植物酵素发酵过程中有机酸的变化规律,建立了同时检测12种有机酸含量的高效液相色谱法(HPLC),并检测了青梅酵素、沙棘酵素、火龙果酵素、博伊森莓酵素和黄金酵素5种食用植物酵素中有机酸的种类及含量,以有机酸为指标进行主成分分析和分层聚类热图分析。结果表明,优化后的色谱条件为:检测波长210 nm,流动相为甲醇:KH_2PO_4(0.01 mol/L,pH2.7)=2∶98(V/V),柱温:20℃。利用此方法,分别从上述5种酵素中检测到10、11、9、10和4种有机酸。基于R软件运用主成分分析法研究了影响5种食用植物酵素中有机酸含量的主要因子,提取了2个主成分,累计方差贡献率达77.00%。对不同原料食用植物酵素中的12种有机酸进行分层聚类热图分析,可将有机酸分成三类,一类以乳酸为主,一类以苹果酸为主,另一类主要以柠檬酸为主。本研究可以为食用植物酵素发酵过程中有机酸的检测方法提供依据。

高效液相色谱法测定酵素中γ-氨基丁酸

本实验旨在通过对衍生时间、衍生温度、检测波长、流动相比例与柱温条件的选择,建立一种灵敏检测酵素中γ-氨基丁酸的方法。以邻苯二甲醛为衍生化试剂,衍生时间2 min,衍生温度为室温,色谱条件为:检测波长334 nm,流动相为乙腈-20 mmol/L结晶乙酸钠溶液(体积比20:80),柱温25℃,流速0.8 mL/min。结果表明:在浓度为0.3μg/mL~1 mg/mL时线性关系良好(R2=0.9997),平均加标回收率为92.17%~104.29%,相对标准偏差为0.51%~3.99%(n=5),检出限为0.1μg/mL,并采用建立的方法测定了不同酵素样品中γ-氨基丁酸的含量。该方法操作简单、灵敏、准确可靠,适用于酵素中γ-氨基丁酸含量的检测。

火龙果酵素在发酵过程中功能成分变化规律及其与抗氧化相关性

对火龙果酵素发酵487 d过程中总酸、有机酸、总多酚等功能成分的变化及其与抗氧化的相关性进行研究,其中抗氧化能力通过ABTS自由基清除能力和还原力来检测;此外,利用主成分分析法、因子分析法对不同发酵时间的火龙果酵素总酸含量、p H、总多酚含量、ABTS自由基清除能力和还原力5个评价指标进行分析。结果表明：随着发酵时间的延长,火龙果酵素发酵液中总酸、总多酚含量总体上呈逐步增加的趋势,发酵液的p H呈缓慢降低的趋势,从3.75降到3.40;利用高效液相色谱（HPLC）法检测有机酸,从火龙果原料和火龙果酵素发酵液中分别检测到9种和8种有机酸,原料中苹果酸的含量较多,发酵液中乳酸和醋酸的含量较多。与原料相比,酵素发酵液中新检测到了莽草酸;富马酸和抗坏血酸在原料中含量极少,酵素发酵液中则未检测到;火龙果经发酵后,检测到的8种有机酸的含量均有所增加。抗氧化分析结果表明：火龙果酵素发酵过程中ABTS自由基清除能力、还原力总体上呈逐步增加趋势;火龙果酵素发酵过程中总多酚含量、总酸含量、莽草酸和醋酸与ABTS自由基清除能力之间呈中度相关,总多酚含量还原力之间呈中度相关。主成分分析和因子分析结果显示：从检测指标中提取出2个因子,代表了抗氧化因子和环境因子;发酵至359 d时,综合评价指标达到最高值且趋于稳定。