HPLC-ELSD法检测液态奶中的低聚半乳糖

建立一种检测液态奶中低聚半乳糖的方法。样品通过β-半乳糖苷酶、葡萄糖氧化酶-过氧化物酶处理,采用高效液相色谱-蒸发光散射检测水解溶液中的半乳糖含量,计算出样品中低聚半乳糖的含量。结果表明:该方法的检出限为0.10mg/mL,回收率为87.5%～108.3%。该方法适合于分析液态奶中低聚半乳糖含量的检测。

RP-HPLC法对乳制品中主要牛奶蛋白的分离及定量测定

建立一种基于反相高效液相色谱(RP-HPLC)的分析方法,对牛奶及其乳制品进行定量分析。此方法可一次分离牛奶及乳制品中的7种主要蛋白成分(κ-CN、αs2-CN、αs1-CN、β-CN、α-La、β-LgB、β-LgA),解决了加工后乳制品中变性蛋白定量不准确的问题和κ-CN、αs2-CN以及乳清蛋白中α-La、β-LgB和β-LgA难以分离的困难。各组分分离度均大于1,达到基线分离,回收率达88.9%～97.1%,相对标准偏差为0.8%～5.1%。该方法不需对样品进行离心,在测定清蛋白组分时,也不需提前去除优势蛋白酪蛋白,与传统的检测方法相比,具有准确、灵敏和快速等特点,可用于牛奶及其乳制品的质量控制和定量检测。

低乳糖发酵马乳的制备工艺研究及其对乳糖不耐受模型小鼠的影响

通过单因素实验和响应面实验筛选出低乳糖发酵马乳的处方组成及制备工艺。以琼脂添加量、甜菜纤维添加量、乳糖酶添加量、乳酸菌粉添加量为考察因素,分别以葡萄糖含量、酸度、pH和感官评分为评价指标,通过单因素及响应面法设计Box-Behnken响应面实验,筛选并优化低乳糖发酵马乳的最佳制备工艺参数;进一步对乳糖不耐受模型小鼠用低乳糖发酵马乳干预,ELISA试剂盒分别检测肝脏组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、DAO、D-乳酸、SOD、MDA等含量,进行动物试验考察。当琼脂添加量为0.4%、甜菜纤维0.3%、乳糖酶0.06%、菌粉1.5%时,产品各项指标最理想,筛选出的制备工艺参数稳定、可靠。使用低乳糖发酵马乳对乳糖不耐受小鼠未见加重症状的趋势,适宜乳糖不耐受人群使用。

HPLC-MS/MS测定氯羟吡啶在牛奶中的残留

建立了牛奶中氯羟吡啶残留检测的高效液相色谱-串联质谱方法（HPLC-MS/MS）。样品经乙腈提取,碱性氧化铝固相萃取柱（Alumina-B）净化,以乙腈＋0.1%甲酸水溶液作为流动相洗脱,采用电喷雾离子源（ESI）,多反应监测（MRM）方式进行采集,外标法定量。结果表明,氯羟吡啶在1-200ng·m L^-1浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数R2大于0.99,方法检测限为0.2μg·kg^-1,从5、10和50μg·kg^-13个水平添加浓度检测结果可以看出,方法回收率在93.4%-102.6%,相对标准偏差不大于6.5%。

牛奶中四环素类药物多残留分析方法研究——MSPD-HPLC-UV

本文建立了牛奶中四环素类药物的MSPD -HPLC -UV分析法。将C18、EDTA—Na2 、草酸和样品研磨混合 ,制成半固态装柱、淋洗、反相HPLC测定。在 0 10～ 0 5 0 μg/ml添加浓度范围内 ,4种四环素类药物的平均回收率为 78 7%～ 90 2 % ,变异系数在 2 4%～ 18 8%之间 ,方法检测限为 0 0 2 μg/ml～ 0 0 5 μg/ml。

SPE-HPLC法检测牛肉及牛奶中阿维菌素残留

为了建立一种可检测牛肉及牛奶中阿维菌素残留含量的方法，试验以流动相甲醇：水=90：10，检测波长为245nm，流速为0．8mL／min为检测条件的高效液相色谱法测定其含量。结果表明：17min内可将阿维菌素完全分离，线性范围为0．3～5．0μg／L，相关系数为0．9997，牛肉和牛奶中阿维菌素平均回收率分别为91．20％-100．32％、89．93％-99．15％，相对标准偏差分别小于7％、4％。该方法简便、灵敏、准确，适用于牛肉及牛奶中阿维菌素残留量的测定，并能满足国内和国外检测的要求。

HPLC法检测液态乳中的乙基麦芽酚

建立了高效液相色谱法检测液态乳中的乙基麦芽酚的方法。样品用乙腈提取,离心过滤膜检测。该方法简单、准确,适合液态乳中乙基麦芽酚的检测。该方法在0.5～100 mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.9999,回收率为87.81%～98.82%,RSD为1.03%～3.27%。符合定量检测的要求。

牛奶中头孢类药物残留的HPLC多联检测方法

采用高效液相色谱法(HPLC),建立了可同时检测牛奶中头孢哌酮、头孢噻肟、头孢曲松、头孢噻吩药物残留量的多联检测方法。样品经超声波振荡,先后加入乙腈除蛋白,正己烷去除脂肪,经0.45μm和0.22μm有机超滤膜过滤,使用Agilent-C18反相色谱柱,以甲醇和0.1%甲酸溶液为流动相(V∶V=4∶6),流速为1 m L/min,柱温35℃,检测波长为254 nm。该方法对头孢哌酮、头孢噻肟、头孢曲松、头孢噻吩4种头孢类药物的检出限均为1.0μg/kg,在质量浓度为1.0~50.0μg/L范围内具有良好线性关系,相关系数达到0.999,回收率为90%~105%,批内相对标准偏差≤15%,批间相对标准偏差≤20%。本方法具有分析时间短、检测限低、精密度高、多联检测的优点,对于准确监控牛奶中头孢类药物残留量具有重要意义。

液态奶中三聚氰胺HPLC检测法的不确定度评定

根据方法GB/T 22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》,建立高效液相色谱(HPLC)法测定液态奶中三聚氰胺含量不确定度评定的数学模型,通过对整个测定过程中各种不确定度因素的研究,分析该测定方法不确定度的来源并对其进行评定,确定不确定度分量,合成不确定度。结果表明:当三聚氰胺含量为24.1 mg/kg时,其扩展不确定度为2.2 mg/kg(k=2)。其中标准曲线拟合、回收率对测量不确定度影响较大。本方法适用于高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量的不确定度评定。

HPLC-MS/MS法测定婴幼儿配方乳粉中胆碱、左旋肉碱、牛磺酸与肌醇

建立了一种同时测定婴幼儿配方乳粉中4种可选择成分(胆碱、左旋肉碱、牛磺酸和肌醇)的高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。样品经温水溶解后用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白,上清液过滤后采用HSS T3色谱柱分离,三重四极杆质谱仪检测,胆碱和左旋肉碱使用内标法定量,牛磺酸和肌醇使用外标法定量。在最优化条件下,胆碱和左旋肉碱在0.01~2.0 mg/L范围内,牛磺酸和肌醇在0.1~2.0 mg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.997;胆碱和左旋肉碱的检出限均为1.5 mg/kg,牛磺酸和肌醇的检出限均为15 mg/kg。4种化合物的回收率为87.5%~102.4%,相对标准偏差(RSD,n=6)为3.0%~7.3%。该方法灵敏度高、净化效果好、定量准确,适用于婴幼儿配方乳粉中胆碱、左旋肉碱、牛磺酸和肌醇的同时快速检测。

HPLC-MS/MS法检测奶粉中酪蛋白磷酸肽的含量

研究了高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(High Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry,HPLC-MS/MS)对酪蛋白磷酸肽(Casein Phosphopeptides,CPP)的分析检测,建立了HPLC-MS/MS测定奶粉中CPP含量的分析方法。采用调节pH、超声提取、离心和过滤分离等方式进行样品前处理,经过C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液、乙腈为流动相,流速为0.6 mL·min^(-1),三重四极杆质谱仪检测,Q1、MS2扫描模式,使用外标法定量。结果表明,CPP在50~125 mg·L^(-1)具有良好的线性关系,相关系数大于0.998,加标回收率为98.7%~103.3%,相对标准偏差满足试验要求。该方法灵敏度高、净化效果好、定量准确,适用于奶粉中CPP含量的检测分析。

高效液相色谱法(HPLC)检测牛奶中阿维菌素残留研究

为了建立一种可检测牛奶中阿维菌素含量的方法,试验以流动相乙腈:水=90:10,荧光检测器,激发波长365nm,发射波长475nm,流速为1.0m L/min为检测条件的高效液相色谱法测定其含量。结果表明:15min内可将阿维菌素完全分离,线性范围为2.0~500.0μg/L,相关系数为0.9998,牛奶中阿维菌素平均回收率为102.0%~104.7%,相对标准偏差在2.8%~3.9%。该方法简便、灵敏、准确,适用于牛奶中阿维菌素残留量的测定,并能满足国内和国外检测的要求。

2010—2018年北京市人体中六溴环十二烷的残留特征与风险评估

六溴环十二烷(HBCDs)作为一种持久性有机污染物,具有生物累积性及多种生物毒性,以母乳、血清、头发及脂肪组织为介质,评价人体HBCDs的残留特征和健康风险受到广泛关注。本文以北京地区为研究区域,连续采集和分析2010—2018年母乳样品中的HBCDs,探究北京人体中HBCDs的残留特征与变化趋势,同时评估婴幼儿通过母乳喂养摄入HBCDs是否存在健康风险。研究共招募85名志愿者采集233份母乳样品,采用液液萃取-多级净化法进行样品处理,高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定样品中HBCDs及其异构体含量。样品的测定结果显示:①HBCDs的检出率为100%,浓度范围为0.46~93.5ng/g lw(脂重),均值和中值分别为7.27 ng/g lw和5.77ng/g lw,高端暴露量第95百分位值为15.6ng/g lw;②α-HBCD为主要异构体,3种非对映异构体的含量占比大小为:α-HBCD>γ-HBCD>β-HBCD;③婴幼儿HBCDs的每日估计摄入量EDI中值为20.5ng/kg bw/day,第95百分位值为71.4ng/kg bw/day,高于日本、加纳及中国的其他城市。2010—2018年北京地区母乳中HBCDs浓度与北京地区以往的研究数据相比较接近,与国内外其他地区相比水平较高,且存在个体差异。HBCDs总量从2010—2013年持续上升,而后小幅度下降并趋于平缓,可能与中国及全球HBCDs的使用及禁用有关。健康风险评估结果显示,99%的母乳样品的非致癌风险危害系数(HQ)小于1,表明婴幼儿通过母乳喂养摄入HBCDs不会带来显著的健康风险,但1%母乳样品HQ值大于1,表明研究区域存在高风险暴露婴幼儿个体。

高效液相色谱法测定液态奶中的叶酸

建立了HPLC二级管阵列检测器检测液态奶中叶酸的方法。该法相关系数为0.9996,平均回收率在81.8%～88.77%之间,最低检测限为1.5μg/L。本方法简单、快捷、灵敏,可用于液态奶中叶酸的日常分析。

高效液相色谱法测定牛奶中的胆固醇

目的:建立高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定牛奶中胆固醇的方法。方法:色谱柱为Shimadzu C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈,流速为1.0mL/min,检测波长为203nm,柱温为30℃。结果:胆固醇的线性范围为3.58～358μg/mL(r=0.9999),平均回收率为101.8%(n=6),相对标准偏差为1.14%。结论:该方法测定结果准确、重现性好,可作为测定牛奶中胆固醇含量的方法。

高效液相色谱法测定发酵乳中的乳糖、葡萄糖和半乳糖

利用高效液相色谱法测定发酵乳中乳糖、葡萄糖、半乳糖的含量。样品通过Carrez法处理沉淀蛋白,采用Aminex HPX 87H色谱柱,5mmol/L H2SO4溶液为流动相,流速0.6mL/min。结果表明:利用该法进行色谱分析各组分达到较好的分离,各糖组分在0.5～12mg/mL范围内呈现良好线性关系,相关系数为0.9986～0.9999(n=5),样品回收率为96.45%～101.78%;精密度实验表明,各组分峰面积RSD在0.62%～4.21%之间(n=5);重现性实验表明,各组分含量测定值RSD为1.86%～3.44%。该法测定样品快速、准确、可靠,为发酵乳贮藏过程中关键糖含量的测定提供参考依据。

浊点萃取-高效液相色谱法检测牛奶中的六种农药

建立了应用浊点萃取法对牛奶中的残留除草剂进行萃取富集后用高效液相色谱（HPLC）检测的方法。以60g／L的表面活性剂Tween 20或Triton X-100为萃取剂，在一定浓度的（NH4）2SO4或NaCl的存在下加热萃取。牛奶中6种不同的除草剂被胶束相富集后被HPLC分离检测。结果表明：肟草酮、嗪草酮和溴苯腈在20～10000μg／L、苯噻草胺在30～10000μg／L、苄嘧磺隆和烟嘧磺隆在50～10000μg／L时其浓度和检测信号呈线性关系，相关系数为0．9981～0．9997，平均加标回收率为85．09％～95．74％，相对标准偏差为1．90％-3．98％。6种农药的定量检测限均小于国家规定的农药残留限量（MRL）。该方法简便、快速、灵敏、污染少，实际应用性好。

高效液相色谱法测定乳粉及液态奶中牛磺酸含量

建立高效液相色谱法测定乳粉和液态奶中牛磺酸含量。样品用水溶解,超声提取10 min,提取液经亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白后,离心,上清液用异硫氰酸苯酯和三乙胺衍生化,室温衍生1 h,加入正己烷为衍生化终止剂,静置分层,下层溶液用水定容后过0.22μm微孔滤膜,过滤液经Diamonsil AAA氨基酸分析柱(4.6×250 mm,5μm)分离,以0.05 mol/L乙酸钠水溶液(pH值=6.50)和甲醇/乙腈(1/1,V:V)为流动相进行梯度洗脱。采用外标法定量,在5.0～40μg/mL线性范围内相关系数(r)大于0.999,线性关系良好,定量限为5 mg/100 g(S/N≥10),添加水平为5、10、25 mg/100 g时,回收率范围在90%～108%之间,相对标准偏差范围为1.16%～2.24%。结果显示,本方法准确、可靠,满足乳粉和液态奶中牛磺酸含量的有效确定,特别对于特膳奶粉比GB方法更适合样品中牛磺酸含量的有效检测。

高效液相色谱法测定牛奶中苯甲酸、山梨酸和糖精钠

建立了采用高效液相色谱法同时测定牛奶中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的分析方法,牛奶样品经水提取、离心后直接进样,于230 nm处检测,外标法定性、定量。结果表明:苯甲酸、山梨酸和糖精钠在15 min内能得到较好的分离,检出限分别为0.06、0.07、0.08 mg/kg,样品加标平均回收率在90%～105%之间。

乳及乳制品中多种防腐剂和甜味剂的同时测定

建立了高效液相色谱法同时测定乳及乳制品中安赛蜜、苯甲酸、糖精钠、山梨酸和阿斯巴甜的方法。通过加入适量沉淀剂除去样品中绝大部分蛋白质后,采用C18色谱柱分离,以甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱,用二极管阵列检测器于230nm波长处检测安赛蜜、苯甲酸和山梨酸,于210nm波长处检测糖精钠和阿斯巴甜。被测物的回收率为96.0%～103.5%,精密度(以相对标准偏差(RSD)计)为1.93%～2.76%,安赛蜜、苯甲酸、糖精钠、山梨酸和阿斯巴甜的检出限分别为1.0,1.0,0.5,1.0,1.5μg/g。该方法可用于乳及乳制品中这5种添加剂的同时测定。