在线固相萃取-二维液相色谱法同时测定特殊医学用途配方食品中VA、VD、VE的含量

采用在线固相萃取结合二维液相色谱技术,建立一种快速测定特殊医学用途配方食品中VA、VD(VD2、VD3)和VE(α-、β-、γ-、δ-VE)含量的方法。样品皂化处理后,经过在线固相萃取小柱自动完成VA、VD、VE的富集和净化,利用第一维色谱完成VA和4种VE的定量分析,通过中心切割,将VD转移至二维色谱系统完成分离和测定。考察不同填料固相萃取柱、上样溶剂及洗脱溶剂比例,并对二维色谱分离条件进行系统优化。结果表明,各类维生素在其范围内线性良好,相关系数R2均大于0.997,平均回收率在84.4%~109.0%之间,相对标准偏差为0.34%~6.55%(n=6)。该方法自动化程度高,有效降低检测误差,检测效率高,可用于特殊医学用途配方食品中脂溶性维生素的测定。

二维液相色谱法对特殊医学用途配方食品中维生素A、D、E含量的检测

特殊医学用途配方食品的基质较为复杂,且目标物含量较低,因此对其中维生素准确定量具有较大难度。本方法采用了一个同时测定维生素A、D、E的稳定高效的在线固相萃取-二维液相色谱方法。本方法利用SPE柱净化皂化液,通过六通阀的转化后注入一维色谱柱进行洗脱分离,利用阀切换模式进入二维系统再次分离。该方法的测定结果与国标方法基本一致,方法学满足国标要求。本方法采用三泵两个检测器,实现了皂化液定容后直接上样测定,简化了前处理步骤,提高了分析效率,对环境更友好。

二维液相色谱同时检测特医食品中维生素A、E、D_(3)含量

建立了一种二维液相色谱方法,以同时检测特医食品中维生素A、E、D_(3)的含量。该方法通过六通阀对样品溶液进行切换,维生素A、E、D_(3)经过在线过滤器过滤,随后进入一维色谱柱Poroshell 120 C_(18)(2.6×100 mm,2.7μm)分离,流动相为水+甲醇,流速1 mL/min,梯度洗脱,VWD检测器先对维生素A进行检测,波长325 nm,一维色谱柱确定阀切换时间,维生素A色谱峰在5.003 min出现后,在5.95 min时六通阀从位置1自动切换为位置2,维生素D_(3)则转入二维色谱柱Eclipse PAH(2.1×100 mm,3.5μm)分离,流动相为乙腈+甲醇,流速0.3 mL/min,梯度洗脱,DAD检测器对维生素D_(3)进行检测,波长264 nm,7.02 min时VWD检测器波长由325 nm转换为296 nm,继续检测维生素E,最终达到同时检测维生素A、E、D_(3)含量的目的。结果显示,维生素A、E、D_(3)在相应浓度范围内线性良好,相关系数r值均在0.9996以上,平均回收率为87.62%~103.10%,RSD为2.62%~8.26%。本研究建立的二维液相色谱方法具有高效、快速、准确、灵敏度高以及同时检测等特点,适用于同时快速检测特医食品中维生素A、E、D_(3)的含量。

钒钼黄分光光度法检测液态特殊食品中磷含量的优化

目的建立钒钼黄分光光度法检测低磷含量液态婴幼儿配方食品、液态特殊医学用途配方食品等特殊食品中磷含量的分析方法。方法试样经消解,磷在酸性条件下与钒钼酸铵生成黄色络合物钒钼黄,于440 nm测定试样溶液中钒钼黄的吸光度值,并与标准系列比较定量。对3种基质液态特殊食品的磷含量进行测定。结果增大称样量能满足方法准确度和精密度要求;称样量为4 g时,回收率范围为92.4%~107.0%,相对标准偏差为0.8%~3.7%;方法定量限为30 mg/100 g。结论该方法能够准确测定液态配方食品中较低含量的磷,适合液态婴幼儿配方食品、液态特殊医学用途配方食品等特殊食品中磷含量的测定。

高效液相色谱法测定特殊医学配方食品中的色氨酸

目的建立高效液相色谱法测定特殊医学配方食品中色氨酸的分析方法。方法样品加入4 mol/L的氢氧化锂溶液,在110℃恒温干燥箱中碱解16 h,用pH为4.5的乙酸钠缓冲溶液中和后,经Inertsil@ODS-SP(4.6 mm×150 mm,5μm)分离,以甲醇-0.1%乙酸溶液(95:5,V:V)为流动相等度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10μL,二极管阵列检测器277 nm波长采集数据,外标法定量。结果色氨酸在1~100 mg/L浓度范围内线性良好,相关系数r为0.9999,3个浓度水平的加标回收率在91.7%~94.5%之间,相对标准偏差(n=6)为2.2%~3.7%,精密度的相对标准偏差(n=6)为2.1%,方法检出限为20μg/g,定量限为65μg/g。结论该方法操作简便,灵敏度高,具有良好的准确度和精密度,适用于特殊医学配方食品中色氨酸的测定。

国标方法检测特殊医学用途婴儿配方食品中部分B族维生素的基质适用性

针对国标方法检测特殊医学用途婴儿配方食品中VB1、VB2、VB6、烟酸的适用性进行分析。7家实验室采用高效液相色谱法,分别对3类配方,8种特殊医学用途婴儿配方食品和婴幼儿配方奶粉质控样品中的VB1、VB2、VB6和烟酸进行测定,同时进行回收率测定。结果表明,国标方法适用于婴幼儿配方奶粉中VB1、VB2、VB6、烟酸的测定,适用于特殊医学用途婴儿配方食品中VB1、VB2和VB6的测定。VB1回收率偏低,VB2的深度水解配方和氨基酸配方的产品回收率偏低,烟酸检测的数据普遍不理想。本研究为特殊医学用途婴儿配方食品的检测方法建立起到了一定技术支撑。

超高效液相色谱–串联质谱法测定特殊医学用途配方食品中胆碱含量

目的 建立超高液相色谱–串联质谱法(ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定配方食品中胆碱的分析方法 ,为胆碱及其制剂的含量测定提供参考.方法样品中的胆碱经过盐酸水解,提取后,以0.1%甲酸-甲醇作为流动相经kinetex 5u XB-C18柱(4.6 mm×100 mm,5μm)梯度洗脱分离,流速0.45 mL/min,采用UPLC-MS/MS在正离子模式下检测,外标法定量.结果 在优化实验条件下,测得胆碱在浓度为0.1~0.5μg/mL有良好线性关系,线性相关系数为0.9993.方法的回收率为96.1%~103.4%,检出限为2.27 mg/100 g.结论 超高效高效液相色谱–串联质谱法简单快速、灵敏度高、准确性强,适用于特殊医学用途配方食品中胆碱的分析.

高效液相色谱法测定特殊医学用途全营养配方食品中烟酰胺

目的建立高效液相色谱法检测特殊医学用途全营养配方食品中烟酰胺含量的分析方法。方法样品加水溶解后经0.1 mol/L盐酸溶液和0.1 mol/L氢氧化钠溶液除杂后,定容至100 mL。经过Kinetex XB-C18柱,流动相为癸烷磺酸钠溶液:乙腈:磷酸=850:150:1(V:V:V),经等度洗脱30 min,波长为261 nm处检测。结果与GB5009.89-2016第二法相比,本方法目标峰与杂峰的分离度由0.73变为4.01,在0.001~0.020mg/mL浓度范围内呈现良好的线性关系,r2=1.0000,平均回收率为104.50%,相对标准偏差为4.0%。结论该方法操作简便,精密度和回收率高,重复性好,能实现目标峰与杂质峰完全分离,结果符合要求。

10岁以上全营养液态配方食品的开发及测试

对以牛奶为基底的10岁以上全营养液态特殊医学用途配方食品进行配方设计和工艺研究,并验证产品保质期内微量营养素的稳定性及人群试饮试验效果。依据《特殊医学用途配方食品通则》确定三大供能物质来源及含量,蛋白质4.0 g/100 mL,脂肪2.3 g/100 mL,碳水化合物8.9 g/100 mL。微量营养素在整个保质期内的含量符合通则的要求,维生素的损失率普遍高于矿物质,其中维生素B_(2)、维生素C、维生素E和叶酸的损失率最高。人群试饮试验结果显示,连续饮用2个月后受试者血压、心率、血常规、肝肾功能及心电图均与饮用前无统计学差异,说明产品安全性良好。

特殊膳食食品中生物素含量测定方法研究

目的建立超高效液相串联三重四极杆质谱法(UPLC-MS/MS)测定特殊膳食食品中生物素含量的方法。方法试样中加入内标物,采用40℃温水提取,振荡混匀后超声提取,冷却后用高氯酸调节pH至1.6±0.2,离心,上清用氢氧化钠溶液调节pH至4.5±0.2,再次离心,上清过0.22μm滤膜,经Kinetex RR-C_(18)(100 mm×2.1mm,2.6μm)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,以内标法定量。结果生物素在1~50 ng/ml范围内具有良好的线性关系(r>0.999),方法检出限为0.003μg/g,定量限为0.01μg/g。在10 h内样品提取液中生物素含量稳定,RSD为5.87%。在5,15,30 ng/ml加标水平下的平均回收率为90.7%~116.9%,RSD为1.71%~4.42%(n=6)。结论此法检测速度快、灵敏度高、重复性好,适用于特殊膳食食品中生物素含量的快速及准确测定。

不同提取液对特殊医学婴儿配方食品中黄曲霉毒素B_(1)的提取效果比较

目的比较5种不同提取液的提取效果,建立高效液相色谱-柱后光化学衍生法对特殊医学用途婴儿配方食品中黄曲霉毒素B_(1)的检测方法。方法样品采用不同浓度的提取液提取,经过滤、稀释、免疫亲和柱净化,通过C_(18)色谱柱分离,以55%水-35%甲醇-10%乙腈为流动相进行等度洗脱。优化色谱条件后,从操作步骤、样品检测、加标回收率等多个角度考察5种提取液对特殊医学用途婴儿配方食品中黄曲霉毒素B_(1)的提取效果的影响。结果黄曲霉毒素B_(1)含量在0.50 ng/ml~20.00 ng/ml内线性关系良好,其相关系数为0.9992,检出限为0.0289μg/kg,定量限为0.0964μg/kg。在0.50μg/kg、1.00μg/kg、5.00μg/kg加标水平下,黄曲霉毒素B_(1)加标回收率为20.60%~119.90%,3次重复测定的相对标准偏差不超过4.8%,符合一般痕量测定要求。结论实验所使用的5种提取液,甲醇-水溶液(80:20,V/V)的提取效果最好,加标回收率最优。该法前处理简单、灵敏度高、重现性好,适用于特殊医学用途婴儿配方食品中的黄曲霉毒素B_(1)的检测。

酸水解-酶水解-UPLC-MS/MS测定特殊医学用途配方食品中多种氨基酸和牛磺酸

利用酸水解与酶水解互补,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),建立了特殊医学用途配方食品中22种氨基酸和牛磺酸的检测方法。样品经酸水解或酶水解提取,采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺-氨基甲酸酯(AQC)衍生后,以乙腈-甲酸铵(10 mmol/L)为流动相梯度洗脱,通过AccQTag Ultra C18色谱柱进行分离,三重四极杆质谱电喷雾多反应监测模式检测,内标法定量。结果表明:22种氨基酸和牛磺酸线性关系良好,相关系数均大于0.9956;检出限在0.0028~0.0225 g/100 g之间,定量限在0.0094~0.0751 g/100 g之间。22种氨基酸和牛磺酸的平均加标回收率在90.1%~104.7%之间,相对标准偏差在1.1%~4.3%之间。该方法实现了GB 29922-2013和GB 25596-2010中规定的22种不同性质氨基酸以及牛磺酸成分的水解提取与准确测定,适用于特殊医学用途配方食品中氨基酸和牛磺酸的准确定性、定量分析。

特医食品中VC检测关键控制点及稳定性研究

根据特殊医学用途配方食品的基质特殊性,确定其维生素C检测的关键控制点,优化特医食品中维生素C的高效液相色谱检测方法,并考察特医液态产品中维生素C的稳定性。在前处理过程增加蛋白的沉淀步骤,对蛋白沉淀试剂种类、用量进行研究;对特医液态产品进行稳定性试验,以考其维生素C的稳定性。结果显示液态和固态产品样品前处理时分别加入2 mL和0.5 mL的200 g/L乙酸锌溶液对蛋白沉淀效果最佳;优化后的方法对不同基质特医食品适用性良好,准确度高。对液态产品进行稳定性测试发现,加速、长期、高温40℃、高温60℃、不透光包装光照、透光包装光照和使用中稳定性试验中维生素C衰减率分别为30.6%~80.3%,30.0%~78.4%,12.1%~18.2%,36.4%~43.6%,7.00%,12.55%~14.67%和18.1%~19.0%。高温、光照及空气接触均会造成维生素C的大量衰减;用高纯氮气将样品容器中的空气排空,并且采用不透明避光材料包装更有利于保持特医食品中维生素C的稳定性。