刺五加中活性成分Liriodendrin的结构研究

刺五加是五加科植物Acanthopanax senticosus（Rupt.et Maxim.）Harms的根及根皮。经考证,《名医别录》记载的豺节五加即为当今刺五加。它具有"补中益精,坚筋骨,强志意""久服轻身耐劳"等功效。近代大量研究和应用电证实了上述作用。作者曾报道从刺五加根皮的甲醇提取物中采用硅胶柱层析分得9种单体成分。并鉴定其中8种单体分别为硬脂酸,β-谷甾醇,胡萝卜甙,芝麻素,丁香甙,白桦脂酸,苦杏仁甙和蔗糖。本文将单体Ⅸ的结构研究简报如下。单体Ⅸ为白色针状结晶（甲醇）,mp260～262℃,[α]D25-5.0（c,0.50,MeOH）。

Liriodendrin对多巴胺所致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用(英文)

目的用多巴胺诱导的SH-SY5Y细胞凋亡模型,研究从小蜡树皮提取的单体化合物liriodendrin的神经保护作用。方法应用MTT法检测liriodendrin对细胞存活率的影响。应用Annexin V-FITC与PI双染流式法检测liriodendrin对多巴胺诱导的细胞凋亡的影响。应用荧光染料DCFH-DA及Rhodamine 123对细胞内活性氧簇(ROS)及线粒体膜电位(ΔΨm)进行了检测。此外,应用RT-PCR方法,对细胞内P53基因的转录水平进行了检测。结果在经过10–8,10–7,10–6,10–5及10–4mol·L–1浓度liriodendrin处理后,细胞存活率与多巴胺处理组相比有显著性提高。流式细胞术结果显示liriodendrin具有显著的抗细胞凋亡作用。同时liriodendrin可明显改善多巴胺引起的ΔΨm下降,并可以逆转多巴胺诱导的ROS水平升高。此外,liriodendrin还可以降低多巴胺引起的P53基因转录水平的升高。结论Liriodendrin对多巴胺诱导的细胞损伤有明显保护作用。推测主要机制可能与其调节细胞氧化应激反应及细胞凋亡的信号转导通路有关,提示该化合物可以作为治疗退行性神经疾病如帕金森氏病等的候选化合物。

桑白皮化学成分的分离与鉴定

目的分离和鉴定桑白皮MorusalbaL .的脂溶性提取物中的化学成分。方法利用各种色谱进行分离纯化 ,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果得到 9个化合物 ,分别鉴定为liriodendrin(1)、β 谷甾醇(2 )、胡萝卜苷 (3)、3 乙酰基 α 香树脂醇 (4)、3 乙酰基 β 香树脂醇 (5 )、齐墩果酸 (6 )、熊果酸 (7)、3 甲氧基 4 羟基 苯甲酸 (8)、3 甲氧基 4 羟基 苯甲醛 (9)。纠正了文献中化合物 1的13 C NMR归属错误。结论化合物 1为首次从该属植物中分离得到。

鹅掌楸苷和光甘草定协同抗氧化作用研究

[目的]研究鹅掌楸苷和光甘草定协同抗氧化作用。[方法]采用1,1-二苯基-2-苦苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除实验,测定鹅掌楸苷和光甘草定单独及不同浓度配比的抗氧化活性,等辐射分析法(Isobologram)对协同作用结果进行分析。[结果]鹅掌楸苷和光甘草定配比为3∶1时对DPPH自由基清除表现为协同作用,1∶1表现为相加作用,1∶3表现为拮抗作用。ABTS实验结果显示复配为1∶1、1∶3和3∶1时均有协同作用,并且复配组合中协同作用强弱为:1∶3>1∶1>3∶1。[结论]鹅掌楸苷和光甘草定按一定比例复配后具有协同抗氧化作用。

中药红毛五加化学成分的高效液相色谱/电喷雾电离/质谱/质谱(HPLC/ESI/MS2)分析

建立了中药红毛五加化学成分的HPLC/ESI/MS2定性分析方法。液相色谱条件:ZorbaxSB C18色谱柱(250mm×4 6mmi d ,5μm);乙腈 水(用冰醋酸调pH为3 0)梯度洗脱,流量0 8mL/min;柱温30℃;二极管阵列检测器(DAD),检测波长254nm。质谱条件:Agilent离子阱质谱仪;电喷雾离子(ESI)源;正离子检出模式。采用该方法得到了红毛五加的紫外(UV)色谱图、总离子流色谱图(TIC)和萃取离子色谱图(EIC),以及相应色谱峰的EIC/MS2的质谱图,对其进行解析,鉴别出红毛五加中的鸟苷、腺苷和紫丁香树脂苷成分。方法简便、快捷和准确。

红藤化学成分研究

从红藤(Sargentodoxa cuneata(Oliv.)Rehd.et Wils.)水液部分分到二个结晶。结晶Ⅰ为白色长片状晶,mp161～162℃(d),原物及其衍生物经化学及谱学分析证明为毛柳甙(salidroside)(phydroxyl-β-phenyl-ethanol-β-D-glucoside)。结晶Ⅱ为白色簇晶状结晶,mp161～162℃。经分析证明为liriodendrin(d-syringaresinol bisglucosides),两者经药理试验对心脏均有作用。从脂溶性中性部分分到β-谷甾醇。

白皮锦鸡儿酚类化合物及其生物活性（英文）

从豆科植物白皮锦鸡儿（Caragana leucophloea Pojark.）地上部分分离到3个酚类化合物,经理化方法和波谱分析鉴定为鹅掌楸苷（1）、香草酸（2）和绿原酸（3）。化合物1和2表现出较好的抗细菌活性,半抑制浓度（IC50）为8.11~22.88μg/m L。2和3则表现出一定的抗真菌活性,对稻瘟菌孢子萌发的IC50值分别为105.04μg/m L和32.26μg/m L,对西瓜枯萎病菌生长的IC50值为108.45μg/m L和45.26μg/m L。2和3对秀丽隐杆线虫也有一定的抑制活性,当处理线虫48 h时,IC50值分别为46.57μg/m L和55.17μg/m L。此外,2具有一定的抗氧化活性,对羟基自由基清除的IC50值为67.96μg/m L;对Fe2＋表现出一定的螯合能力,IC50值为93.59μg/m L。上述酚类化合物均为首次从白皮锦鸡儿中分离得到。

基于液质联用技术结合化学计量法分析杜仲盐制前后差异性成分

目的通过超高液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)对杜仲盐制前后成分进行鉴定,分析差异性成分。方法利用UPLC-Triple-TOF/MS检测杜仲中的化学成分,液相采用Waters HSS-T3色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,柱温为50℃;检测波长254 nm;进样量3µL。质谱采用负离子扫描模式采集数据,根据一级准分子离子与二级碎片离子信息进行化合物的分析与鉴定。通过主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对杜仲盐制前后进行差异成分分析。结果共解析出杜仲中52种成分,结合OPLSDA筛选出14个影响杜仲盐制前后质量的潜在差异性成分,分别为京尼平苷、绿原酸、杜仲醇、桃叶珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸、京尼平、eucomoside B、异绿原酸C、teuhircoside硫酸脂、橄榄素二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、中脂素二葡萄糖苷和去氢二松柏醇葡萄糖苷。结论建立了杜仲盐制前后化学成分定性分析方法,筛选出盐制前后杜仲质量变化的潜在差异性成分,为杜仲盐制的增效物质基础的研究提供了科学依据,对杜仲质量控制提供更加全面的支撑。

广西刺楸茎皮中降血糖活性成分的研究

目的:从广西产的刺楸茎皮中提取分离具有降血糖活性的有效部位或有效成分。方法:经醇提、系统分离、硅胶和大孔树脂分离获得3个部分的提取物(A、B、C),分别进行降血糖药效试验,确定有效部位,并对有效部位再进行分离和单体成分的鉴定。结果:在有效部分提取物(A)中获得3个单体成分,分别为丁香脂苷[lirioden-drin(Ⅰ)],刺楸皂苷B(Ⅱ)和刺楸皂苷H(Ⅲ);经相应分离和药效试验证实,具有降血糖作用的部位存在于提取物(A)中,而在提取物(B)和提取物(C)未见明显的降血糖作用。结论:首次在刺楸中发现丁香脂苷成分,并且提取物(A)经药效实验证实是具有降血糖作用的有效部位。

鹅掌楸苷抑制心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的相关研究

目的探讨鹅掌楸苷对急性期心肌梗死(心梗)大鼠心肌凋亡的保护作用,并分析其作用的相关因子与机制。方法2019年1-12月选择SPF级雄性Wistar大鼠30只,体重(200±10)g,数字表法分为假手术组,心梗组、鹅掌楸组各10只。鹅掌楸苷组大鼠造模前5 d至术后3 d予以鹅掌楸苷溶液(10 ml/kg)灌胃1次/d,心梗组及假手术组大鼠生理盐水(10 ml/kg)灌胃1次/d。术后取静脉血检测3组大鼠超敏肌钙蛋白T水平。术后3 d应用超声心动图检测大鼠心功能。处死大鼠后取心肌组织行苏木素伊红(HE)染色和TUNEL染色,检测白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。提取心肌组织总蛋白检测相关凋亡因子(caspase3、BAX、BCL-2)的变化。分别应用免疫印迹(Western Blot)和实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术进行组织的凋亡相关蛋白表达和转录活性检测。结果术后2 h,鹅掌楸苷组较心梗组大鼠肌钙蛋白T降低,(1.74±0.63)μg/L比(3.54±1.60)μg/L(t=2.69,P<0.05)。心脏超声显示鹅掌楸苷组与心梗组大鼠比较,射血分数较高,左心室舒张末内径、左心室收缩末内径、左心室舒张末容积及左心室收缩末容积低(均P<0.05)。病理染色显示心梗组大鼠的心肌组织破坏严重,大量炎症细胞浸润。TUNEL半定量结果显示,给予鹅掌楸苷治疗后,大鼠心肌细胞凋亡指数(56.66±2.414)下降,与心梗组(76.55±1.843)大鼠比较差异有统计学意义(t=6.55,P<0.01)。心梗组大鼠心肌组织中IL-1β、TNF-α水平高于鹅掌楸苷组(P<0.05)。鹅掌楸苷组凋亡相关蛋白表达较心梗组降低(P<0.05),mRNA的转录活性也较心梗组低(P<0.05)。结论鹅掌楸苷可能通过抑制局部炎症反应和细胞凋亡,进而对大鼠心梗后的心肌细胞起到保护作用。

HPLC-ELSD法测定杜仲中绿原酸和鹅掌楸苷

目的建立HPLC-ELSD法同时测定杜仲中绿原酸和鹅掌楸苷的方法。方法奥泰C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.2%醋酸水,梯度洗脱;体积流量:0.9mL/min;柱温:35℃;漂移管105℃,气体流量:2.5L/min。结果绿原酸和鹅掌楸苷分别在0.0214～4.2800μg和0.0206～4.1200μg呈良好的线性关系;绿原酸和鹅掌楸苷紫的平均回收率分别为98.57%、103.37%,RSD值分别为2.23%、2.56%。结论本法简便、准确,可用于杜仲中绿原酸和鹅掌楸苷的测定。

杜仲不同提取物对帕金森病小鼠的治疗作用及谱效关系研究

目的探究杜仲不同提取物对帕金森病小鼠的治疗作用及其超高效液相色谱(UPLC)分析与治疗帕金森病的谱效关系。方法通过小鼠爬杆实验、脑内纹状体多巴胺(DA)含量,观察杜仲不同梯度的乙醇提取物对帕金森病小鼠的治疗作用;采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)对杜仲不同提取物进行分析;结合爬杆实验及DA水平结果,采用偏最小二乘法回归(PLSR)分析建立其谱效关系,明确杜仲治疗帕金森病的药效成分。结果杜仲50%、75%乙醇提取物均能明显缩短小鼠爬杆时间;杜仲75%乙醇提取物能显著增加小鼠脑内纹状体DA水平;PLSR分析结果显示,杜仲中杜仲醇苷、鹅掌楸苷、5-羟甲基糠醛、咖啡酸与爬杆实验结果和纹状体多巴胺含量密切相关。结论杜仲乙醇提取物具有抗帕金森病作用,其中75%乙醇提取物效果最显著;杜仲醇苷、鹅掌楸苷、5-羟甲基糠醛、咖啡酸可能是杜仲治疗帕金森病的主要有效成分。

正交实验优化金骨莲胶囊的提取工艺研究

目的:优化金骨莲胶囊的提取工艺。方法:设计正交实验,采用UPLC-MS测定提取液中富马酸、鹅掌楸苷、滇白珠苷A的含量,以各成分的转移率和流浸膏得率为评价指标,优选出金骨莲胶囊中透骨香、汉桃叶、大血藤和八角枫这4味药材的提取工艺;采用比色法测定金铁锁总皂苷的含量,以总皂苷转移率和总固体得率为指标,优选金铁锁的提取工艺。结果:透骨香等4味药材的优选提取工艺为加4倍水提取3次、每次2 h;金铁锁的优选提取工艺为加5倍水提取1次、每次2 h。结论:此方法简单可行、重复性好、提取效率高,可用于金骨莲胶囊的提取工艺。

金骨莲胶囊HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的建立金骨莲胶囊HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别方法对其进行质量一致性评价,为该制剂的质量控制提供参考。方法采用ACE Excel 5 C18-PFP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱进行检测;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,进行梯度洗脱;体积流量为0.8 mL/min;柱温为40℃;检测波长为210 nm;进样量为10μL;建立12批金骨莲胶囊指纹图谱。对12批金骨莲胶囊指纹图谱进行相似度评价、层次聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)和主成分分析(PCA),并结合正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)寻找不同批次金骨莲胶囊的差异成分。结果建立的金骨莲胶囊HPLC指纹图谱共标定了19个共有峰,其中2、8、11号峰归属于汉桃叶,5、7、10、12、15号峰归属于大血藤,16、17、19号峰归属于透骨香,1号峰为5味药材共有,3号峰归属于八角枫和大血藤,13号峰归属于大血藤和透骨香,4、9、14、18号峰归属于大血藤和汉桃叶,6号峰归属于大血藤、汉桃叶和透骨香。通过与对照品对比指认出2、3、6、7、9、12、13、15、16号峰分别为富马酸、没食子酸、原儿茶酸、红景天苷、绿原酸、香草酸、表儿茶素、鹅掌楸苷、滇白珠苷A。12批金骨莲胶囊指纹图谱相似度均在0.910以上,HCA、PCA 2种分析方法均把样品分为了3类,结合OPLS-DA筛选出了导致各批次之间产生差异的7个差异性标志物,分别为15(鹅掌楸苷)、14、6(原儿茶酸)18、16(滇白珠苷A)、19、9(绿原酸)号色谱峰。结论该分析方法简单可行、具有良好精密度、重复性和稳定性,建立的指纹图谱可为金骨莲胶囊的质量评价提供参考。

连花清瘟胶囊的化学成分研究(Ⅲ)

目的对连花清瘟胶囊化学成分进行系统研究,以期阐明该复方的物质基础。方法连花清瘟胶囊总浸膏经大孔树脂吸附,对30%乙醇洗脱部分采用中低压色谱和高压制备液相色谱对其进行分离和纯化,根据化合物的光谱数据对化学结构进行鉴定。结果连花清瘟胶囊总浸膏中分离得到18个化合物,分别鉴定为连翘酯苷A(1)、连翘酯苷I(2)、连翘酯苷H(3)、lugrandoside(4)、isolugrandoside(5)、ferruginoside A(6)、lianqiaoxinoside C(7)、calceolarioside C(8)、连翘酯苷E(9)、ferruginosideB(10)、D-苦杏仁苷(11)、L-苦杏仁苷(12)、sambunigrin(13)、cornoside(14)、4-hydroxy-4-methylenecarbomethoxy-cyclohexa-2,5-dienone(15)、鹅掌楸苷(16)、甘草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(17)、3,4-二羟基苯甲醛(18)。结论化合物2～8、10、13～18均为首次从连花清瘟胶囊总浸膏中分离得到,化合物4～6、10、15、16均未见从复方单味药中分离的报道;首次采用二维核磁波谱技术,对化合物8在DMSO-d6溶剂中的核磁数据进行了归属;系统地阐述了连花清瘟胶囊总浸膏大极性部位的化学组成,进一步丰富了连花清瘟胶囊的化学信息。