Protective mechanism of Paeoniae Radix Alba against chemical liver injury based on network pharmacology,molecular docking,and in vitro experiments

Objective:To explore and validate the potential targets of Paeoniae Radix Alba(P.Radix,Bai Shao)in protecting against chemical liver injury through network pharmacology,molecular docking technology,and in vitro cell experiments.Methods:Network pharmacology was used to identify the common potential targets of P.Radix and chemical liver injury.Molecular docking was used to fit the components,which were subsequently verified in vitro.A cell model of hepatic fibrosis was established by activating hepatic stellate cell(HSC)-LX2 cells with 10 ng/mL transforming growth factor-β1.The cells were exposed to different concentrations of total glucosides of paeony(TGP),the active substance of P.Radix,and then evaluated using the cell counting kit-8 assay,enzyme-linked immunosorbent assay,and western blot.Results:Analysis through network pharmacology revealed 13 key compounds of P.Radix,and the potential targets for preventing chemical liver injury were IL-6,AKT serine/threonine kinase 1,jun protooncogene,heat shock protein 90 alpha family class A member 1(HSP90AA1),peroxisome proliferator activated receptor gamma(PPARG),PTGS2,and CASP3.Gene Ontology(GO)enrichment analysis indicated the involvement of response to drugs,membrane rafts,and peptide binding.Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)enrichment analysis revealed that the main pathways involved lipid and atherosclerosis and chemical carcinogenesis-receptor activation.Paeoniflorin and albiflorin exhibited strong affinity for HSP90AA1,PTGS2,PPARG,and CASP3.Different concentrations of TGP can inhibit the expression of COL-I,COL-III,IL-6,TNF-a,IL-1β,HSP-90a,and PTGS2 while increasing the expression of PPAR-γand CASP3 in activated HSC-LX2 cells.Conclusion:P.Radix primarily can regulate targets such as HSP90AA1,PTGS2,PPARG,CASP3.TGP,the main active compound of P.Radix,protects against chemical liver injury by reducing the inflammatory response,activating apoptotic proteins,and promoting the apoptosis of activated HSCs.

赤芍-附片对慢加急性肝衰竭大鼠PI3K/AKT信号通路及相关炎症因子表达的影响

目的:探讨赤芍-附片对慢加急性肝衰竭(ACLF)大鼠的保护作用及其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法:48只SD大鼠随机分为空白组(6只)和ACLF造模组(42只)。ACLF造模组大鼠用牛血清白蛋白皮下及尾静脉注射联合腹腔注射D-氨基半乳糖+脂多糖制备ACLF大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组、阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组,各组大鼠予相应药物干预1周。检测肝功能、凝血酶原时间(PT),ELISA法检测肝组织白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),HE染色观察大鼠肝组织病理改变,Western blotting法检测肝组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT(Ser473)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR技术检测PI3K mRNA、AKT mRNA表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠肝组织出现肝细胞形态变化,呈融合性坏死、点状或灶状坏死,纤维组织增生,汇管区见大量炎症细胞浸润;与模型组比较,阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组大鼠肝组织肝细胞排列相对整齐,坏死程度改善,纤维组织减少,炎症细胞浸润减少。模型组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA、PT水平及肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于空白组(P<0.05),肝组织中p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量及PI3K mRNA、AKT mRNA相对表达量均低于空白组(P<0.05)。阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA、PT水平及肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于模型组(P<0.05),肝组织p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量及PI3K mRNA、AKT mRNA相对表达量均高于模型组(P<0.05);且赤芍-附片组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA、PT水平及肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于阳性组、赤芍组、附片组(P<0.05),肝组织p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量及PI3K mRNA、AKT mRNA相对表达量均高于阳性组、赤芍组、附片组(P<0.05);各组大鼠PI3K、AKT蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:赤芍-附片可能通过调节PI3K/AKT信号通路,下调相关炎症因子的表达,以减轻ACLF大鼠免疫炎症反应,从而发挥对肝脏的保护作用。

基于网络药理学研究白芍治疗肝纤维化的作用机制

目的基于网络药理学方法探讨白芍治疗肝纤维化的可能作用机制。方法使用TCMSP数据库筛选出白芍的活性成分。借助PubChem和Swiss Target Prediction数据库预测白芍有效成分的潜在作用靶点。运用GeneCards及OMIM数据库筛选肝纤维化对应靶点,利用Venn2.1.0获得白芍与肝纤维化疾病的共同靶点。使用Cytoscape3.9.0软件构建“白芍-有效成分-交集靶点-肝纤维化”网络图,预测主要活性部位,使用String数据库绘制PPI网络。利用DAVID数据库对有效作用靶点进行GO分析及Pathway中的KEGG进行富集分析。结果筛选得到白芍有效成分6个,作用靶点213个;肝纤维化靶点155个;白芍治疗肝纤维化的靶点49个;主要活性成分是山萘酚、芍药苷、白桦脂酸及β-谷甾醇。GO富集分析显示269个生物过程、30个细胞组成、64个分子功能,KEGG通路富集分析共67条通路。结论通过网络药理学方法初步研究白芍抗肝纤维化的作用机制,表明白芍具有多成分、多通路、多靶点等的作用特点,为进一步相关实验研究提供参考。

基于数据挖掘探析岭南地区肝衰竭患者中药治疗的用药规律

【目的】基于数据挖掘探讨岭南地区肝衰竭患者的用药规律。【方法】对中国知网、中国生物医学文献库、万方数据库等中文数据库中采用中药方剂治疗岭南地区肝衰竭患者的文献进行检索,建立岭南地区肝衰竭用药数据库。采用频数统计、关联规则分析、复杂网络分析方法探析岭南地区肝衰竭患者中药治疗的用药规律。【结果】共纳入合格文献58篇,涉及处方58首,中药142味。岭南地区肝衰竭治疗以清热凉血解毒药、利水渗湿药、益气健脾药、活血化瘀药为主,注重顾护中焦脾胃;其核心药物为茵陈、赤芍、大黄、栀子、白术、甘草、丹参、白花蛇舌草、茜草、郁金,常用药对为赤芍-茵陈、大黄-茵陈、栀子-茵陈;清热药与利水渗湿药常配伍使用。此外,常使用岭南地区道地药材白花蛇舌草、田基黄、鸡骨草、溪黄草等。【结论】岭南地区肝衰竭患者的中药治疗具有一定的地域特色,这与肝衰竭的病因病机及岭南地区多湿多热的特点密切相关。挖掘得到的用药规律可为岭南地区肝衰竭的中医治疗提供参考。

重用赤芍治疗慢性肝炎纤维化前后肝穿组织学的比较

应用以赤芍、丹参、葛根为基本方的中药治疗１０例慢性乙型活动性肝炎纤维化患者，疗程３个月，疗程结束时进行第２次肝穿刺活检。治疗前后的肝穿组织学对比表明，中药促进肝纤维重吸收的有效率为７７．８％。

赤芍水提物对四氯化碳致肝损伤大鼠的保护作用

目的 :探讨赤芍水提取物对四氯化碳 (CCl4 )中毒性肝纤维化大鼠的治疗作用。方法 :复制大鼠CCl4 肝纤维化模型 ,以马洛替酯为阳性对照 ,采用光镜观察组织学改变 ,测定血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)、一氧化氮 (NO)、透明质酸 (HA)、层粘蛋白 (LN) ,肝组织羟脯氨酸 (Hyp)、丙二醛 (MDA)以反映肝细胞损伤及肝纤维化的程度。结果 :赤芍水提物能降低实验性肝纤维化大鼠血清中升高的ALT、AST、NO、HA、LN水平和肝组织中过高的Hyp、MDA的含量。病理组织学检查亦表明 ,赤芍水提物明显改善实验性肝纤维化。结论 :赤芍水提物对实验性肝纤维化具有治疗作用。

大黄、赤芍注射液调控JAK/STAT信号通路促进急性肝衰竭大鼠肝再生的机制研究

观察大黄、赤芍注射液介导JAK/STAT信号通路在急性肝衰竭大鼠中的作用及对肝再生的影响。选用60%肝切除术后+20 mg/100g D-GalN+1μg/100 g LPS腹腔注射构建ALF大鼠模型,将造模成功的大鼠随机选取100只,按体质量随机均分为造模阳性对照组、促肝细胞生长素组、大黄、赤芍(低、中、高)剂量组。采用qPCR、Western Blot技术验证造模后24、48 h各组大鼠JAK2、JAK3、STAT3、STAT2表达。结果表明:大黄、赤芍注射液能够上调JAK2/JAK3、STAT2/STAT3蛋白表达,活化JAK/STAT信号通路,促进肝细胞再生,与对照组比较差异具有统计学意义P<0.05;其中低剂量组的各项检测结果优于(中、高)剂量组,差异具有统计学意义,P<0.05。大黄、赤芍注射液可改善急性肝衰竭大鼠肝功能,提高大鼠存活率,其机制可能与大黄、赤芍注射液降低炎症因子水平,活化JAK/STAT信号通路,诱导肝细胞再生有关。

黄芪、赤芍对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:探讨黄芪、赤芍注射液对卡介苗(Bacillus Calmette Guerin,BCG)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤模型的保护作用。方法:采用静脉注射BCG和LPS制备小鼠免疫性肝损伤模型,观察黄芪、赤芍注射液单用及两药配伍对小鼠免疫性肝损伤的影响,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)及小鼠肝组织超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量。结果:黄芪、赤芍注射液及二者配伍应用均显著降低免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST、LDH含量,明显提高肝组织SOD活性,降低MDA活性,配伍用药的小鼠ALT、AST、LDH、SOD、MDA五项指标变化均优于黄芪注射液单用(P<0.05、P<0.05、P<0.05、P<0.01、P>0.05)、优于赤芍注射液单用(P<0.01、P>0.05、P<0.05、P<0.01、P<0.05)。结论:黄芪、赤芍注射液对BCG和LPS所致免疫性肝损伤有保护性作用,黄芪注射液配伍赤芍注射液对免疫性肝损伤保护性作用优于两药单用。

大黄、赤芍注射液对急性肝衰竭模型大鼠肝功能、肝再生指标的影响及机制研究

目的:观察大黄、赤芍注射液对急性肝衰竭(ALF)模型大鼠肝功能及肝再生指标的影响,并探讨相关机制。方法:构建ALF大鼠模型后,选取100只随机分为五组,每组20只。比较造模后24、48 h各组大鼠血清肝功能指标[天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及总胆红素(TBIL)]及肝再生指标[有丝分裂指数(MI)、增殖指数(PI)和增殖细胞核抗原(PCNA)]。结果:造模后,对照组大鼠精神萎靡、行动迟缓,药物干预组大鼠总体表现较对照组好。造模后24、48 h,对照组ALT、AST、TBIL水平高于其他四组;对照组MI和PI低于其他四组,生长素组与低剂量组高于中剂量组与高剂量组;低剂量组、高剂量组和生长素组PCNA阳性细胞数高于对照组(均P<0.05)。干预药物均能够促进肝细胞活化和增殖,且以低剂量组与生长素组效果最佳。结论:大黄、赤芍注射液可改善ALF大鼠肝功能,提高大鼠存活率,其机制可能与提高大鼠肝细胞MI、PI、PCNA水平,促进肝细胞再生有关。

大黄赤芍注射液对急性肝衰竭大鼠治疗作用及机制探讨

目的观察大黄赤芍注射液对肝衰竭大鼠炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]及抑制肝细胞凋亡因子[C-X3-C趋化因子配体1(CX3CL1)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(BCL-2)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)]表达变化的影响。方法将2月龄大鼠随机分为空白组,造模阳性对照组,大黄赤芍注射液低、中、高剂量组及促肝细胞生长素组。除空白组外,其余各组采用D-氨基半乳糖(D-Gal)800 mg/kg,脂多糖(LPS)8μg/kg腹腔注射,制造急性肝衰竭模型。造模前3 d至实验结束大黄赤芍注射液低、中、高剂量组分别以大黄赤芍注射液低、中、高剂量[0.25、0.5、0.75 mL/(100 g·d)]尾静脉注射给药(1次/d);空白组及造模阳性对照组均予0.9%氯化钠注射液1 mL/(100 g·d);促肝细胞生长素组参照文献给予促肝细胞生长素10 mL/(kg·d)。造模48 h后处死大鼠取肝组织病理标本,HE染色后在光镜下观察肝组织的病理改变,采用qPCR、Western Blot技术验证不同组间的TNF-α、IL-6、CX3CL1、BCL-2、CyclinD1是否存在表达差异。结果药物干预组可缓解肝组织病理损伤,同时降低了TNF-α、IL-6表达量,提高了CX3CL1、BCL-2、CyclinD1表达量,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论大黄赤芍注射液对肝衰竭的疗效作用机制可能与减轻炎性反应、抗肝细胞凋亡、促进肝细胞再生相关。

赤芍甘草煎剂抗肝癌肝动脉化疗栓塞术后疼痛的观察

目的：探索肝癌经肝动脉化疗栓塞术后疼痛的中医药疗法。方法：以大剂量赤芍加甘草治疗肝癌经肝动脉化疗栓塞术后出现右上腹剧痛的患者３０例（治疗组），并与１５例未用赤芍加甘草治疗的同类患者（对照组）比较。结果：治疗组３０例患者平均止痛时间为（２．７１±０．７０）日，对照组为（４．００±０．８５）日，２组比较有非常显著性差异（ｔ＝４．５０６，Ｐ＜０．００１）。结论：赤芍加甘草对治疗肝癌经肝动脉化疗栓塞术后疼痛确有一定的疗效。

赤芍对大鼠脂肪肝模型胰岛素抵抗及瘦素影响的实验研究

目的 :通过研究赤芍对大鼠脂肪肝模型瘦素及胰岛素抵抗的影响 ,探讨其抗脂肪肝的作用机制。方法 :用高脂饮食联合四环素腹腔注射致大鼠肝脂肪变性造模 ,并分为赤芍高剂量组、赤芍低剂量组、东宝肝泰组 ,分别灌胃给药 4 9d后检测血清瘦素及胰岛素抵抗指数 ,并设模型组及空白组作对照。结果 :赤芍高低剂量组及东宝肝泰组体重及肝指数均较模型组低 ,瘦素水平及胰岛素抵抗指数与模型组比较明显下降 (P <0 .0 5 )。提示赤芍有改善瘦素及胰岛素抵抗作用。结论

赤芍与藜芦配伍对小鼠肝脏及肾脏损伤的影响

目的观察赤芍与藜芦不同比例配伍对小鼠肝脏及肾脏损伤的影响,并探讨其机制。方法赤芍与藜芦按照单药使用及4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4不同比例配伍水煎对小鼠灌胃22 d,取外周血检测血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶活性及血清肌酐、尿素氮含量,取肝脏及肾脏组织检测组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果不同比例赤芍、藜芦配伍使用对小鼠肝脏损伤作用不明显,但导致血清AST活性增高;不同比例赤芍、藜芦配伍使用对小鼠肾脏损伤作用明显,其中赤芍-藜芦2∶1比例配伍损伤最严重,同时肾脏组织GSH-Px活性降低伴MDA含量升高。结论赤芍、藜芦不同比例配伍使用可引起小鼠肾脏损伤,其原因与肾脏组织氧化-抗氧化平衡紊乱相关。

白芍多糖对化学性肝损伤肝阴虚证病证结合模型的影响和作用机制

目的:在建立肝阴虚证病证结合实验模型的基础上,研究白芍多糖对大鼠化学性肝损伤肝阴虚证候模型的影响和作用机制。方法:将40只无特定病原体(Specific Pathogen Free,SPF)级雄性SD大鼠,按体质量随机区组法分为空白组、模型组、阳性药组、白芍多糖组。除空白组外,其余各组大鼠腹腔注射浓度20%CCl 4橄榄油溶液,后期给予附子、干姜、肉桂温热中药复方灌胃,同时给药,连续6周。6周后观察大鼠体质量,易激惹程度,毛发光泽度,小便颜色,大便颜色质地,肛温。测定血清及肝组织转氨酶活性、细胞因子水平、脂肪代谢相关酶活性、抗氧化酶活性并取肝脏进行HE病理切片检查。结果:与模型组比较,多糖组可改善大鼠大便的干燥程度(P<0.05),血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘连蛋白(LN)水平显著降低(P<0.05),丙二醛水平显著下降(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著升高(P<0.05),病理切片有所改善。白芍多糖组大鼠TNF-α、IL-6水平显著下降(P<0.05),磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)mRNA表达量显著下降(P<0.05)。结论:白芍提取物白芍多糖具有保护化学性肝损伤肝阴虚证的功效,其作用机制可能与抗肝纤维化、减轻氧化应激水平、调节细胞因子平衡有关。

大黄赤芍对肝衰竭大鼠肝组织增殖抗原PCNA表达的影响研究

目的:探讨大黄赤芍对肝衰竭大鼠肝组织增殖细胞核抗原PCNA表达的影响。方法:SPF级Wistar雄性大鼠45只随机分为3组:空白组、模型对照组、大黄赤芍处理组各15只大鼠。采用D氨基半乳糖联合LPS复制肝衰竭大鼠模型,在造模成功后48 h收集各组大鼠肝组织样本,在高倍光镜下记录1000个肝细胞中PCNA标记阳性的肝细胞数量。结果:大黄赤芍干预处理后的肝衰竭大鼠肝组织PCNA表达显著增强,与模型对照组比较差异具有统计学意义。结论:大黄赤芍可促进肝衰竭大鼠肝组织再生分裂。

白术-白芍药对防治肝纤维化的网络药理学研究

[目的]运用网络药理学方法分析白术-白芍药对治疗肝纤维化的有效活性成分,预测其作用靶点,并分析其可能的作用机制,为肝脾同治理论提供网络药理学依据。[方法]利用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)筛选白术-白芍药对的活性成分及其对应靶点,结合人类基因组注释数据库(Human Genome Annotation Database,GeneCards)、人类孟德尔遗传在线(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)数据库筛选治疗肝纤维化的潜在作用靶点。利用网站Venny 2.1.0绘制韦恩图,然后通过Cytoscape 3.7.2软件和String数据库构建成分-靶点-疾病网络图和靶点间的蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络,通过Metoscape平台对靶点进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路与基因功能富集分析。[结果]经过筛选,共获得白术-白芍的20个有效药物成分,与肝纤维化相关的关键化学成分9个,药对-肝纤维化的共同靶点53个,PPI关键靶点11个,蛋白激酶B1(protein kinase B1,AKT1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、丝裂原激活蛋白激酶8(mitogen activated protein kinase 8,MAPK8)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)是白术-白芍作用的关键靶点。GO富集分析结果包括生物过程(biological process,BP)条目20条、细胞组分(celluar component,CC)11条、分子功能(molecular function,MF)18条;KEGG富集分析发现相关信号通路18条,涉及糖尿病并发症中的晚期糖基化终末产物-糖基化终末产物受体(advanced glycosylation end product-receptor of advanced glycosylation end product,AGE-RAGE)信号通路、癌症信号通路、流体剪切应力和动脉粥样硬化通路、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路、铂剂耐药通路、大肠癌通路、小细胞肺癌通路、肝细胞癌通路等。[结论]白术-白芍药对治疗肝纤维化具有多组分、多靶点、多途径的调控特点,本研究为深入探索肝纤维化的防治提供了新的思路。

CRAE对百草枯中毒大鼠肺纤维化的保护作用机制

目的观察复方赤芍黄芪提取物(CRAE)对百草枯中毒大鼠肺纤维化的保护作用,并探讨其可能机制。方法采用百草枯诱导大鼠肺纤维化模型,分成正常对照组、模型组、阳性药组、CRAE 0.6 g/kg组、CRAE 1.2 g/kg组、CRAE2.4 g/kg组。观察CARE对模型大鼠肺脏重量、肺脏脏器指数,血清透明质酸(HA)、Ⅲ型胶原蛋白(PC-Ⅲ)、层粘连蛋白(LN)含量,肺组织中金属基质蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素17(IL-17)、白介素6(IL-6)、转化生长因子1(TGF-β1)、Ⅰ型纤溶酶原激活抑制因子(PAI-1)含量。Western blot分析P-Smad2、Smad2、P-Smad3、Smad3、Smad7和PAI-1蛋白的含量。QPCR法检测PAI-1 mRNA的含量。结果 CRAE 1.2 g/kg组和CRAE 2.4 g/kg组能显著减少模型大鼠肺脏重量、肺脏脏器指数、血清HA、PC-Ⅲ、LN含量及肺组织中TIMP-1、Hyp、MDA、TNF-α、IL-17、IL-6、TGF-β1、PAI-1的表达水平,增加肺组织中SOD、GSH-Px和MMP-9的含量;下调P-Smad2、PSmad3、PAI-1水平,上调Smad7蛋白的表达。结论 CRAE对百草枯诱导的大鼠肺纤维化具有一定的抑制作用,其机制可能与TGF-β1/Smad信号通路有关。

赤芍治疗肝纤维化网络药理学机制探讨

目的:探讨赤芍治疗肝纤维化(HF)潜在的作用机制。方法:在中药系统药理学分析平台数据库(TCMSP)中检索赤芍活性成分,筛选口服生物利用度(OB)≥30%且类药性(DL)≥0.18的化合物,收集赤芍的活性成分及其可能的作用靶标,借助Uniprot数据库查询靶点蛋白对应的基因名称。从人类基因数据库(GeneCards)和人类孟德尔遗传数据库(OMIM)中查询HF相关靶点。将赤芍的疾病靶点基因与HF的靶点基因取交集,获得赤芍治疗HF的靶点基因,交集所得的基因通过Cytoscape 3.7.1软件构建赤芍有效成分治疗HF靶点网络。将交集得到的基因应用STRING数据库构建蛋白相互作用网络。采用R语言对关键靶点进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:共筛选出赤芍活性成分29个,与疾病靶点相关的有效成分12个,共获得靶标41个,与HF疾病相关的共同靶点33个。蛋白质-蛋白质相互作用结果显示IL6、VEGFA、ESR1、FOS、CASP3、RELA、AR、CYCS、CASP8、PGR、CASP9、HIF1A、CCNB1等基因处于核心地位。GO功能分析显示赤芍治疗肝纤维化主要影响核受体活性、DNA转录、复制,细胞生长、凋亡功能活动中。KEGG通路富集分析,赤芍治疗肝纤维化密切程度高的信号通路有细胞凋亡、Th17细胞分化、IL-17信号通路、HIF-1信号通路、p53信号通路。结论:赤芍多种活性成分通过多靶标、多通路治疗HF,网络药理学可有效预测赤芍治疗HF的作用靶标及机制。

应用网络药理学预测白芍抗血吸虫病及肝纤维化的作用机制

运用网络药理学方法预测白芍抗血吸虫病及肝纤维化的作用机制。通过TCMSP数据库对白芍主要活性成分及靶点进行筛选,通过GeneCards数据库检索血吸虫病及肝纤维化相关靶点,利用Cytoscape 3.8.2软件构建药物-成分-靶点-疾病网络图,利用STRING数据库构建蛋白质相互作用网络,采用R语言对药物-疾病共同靶点进行GO和KEGG富集分析。筛选得到白芍中的活性成分有13个,白芍抗血吸虫病及肝纤维化的靶点有16个,PPI网络包含15个蛋白质,涉及JUN、PTGS2和CAT等。白芍抗血吸虫病及肝纤维化的通路主要有脂质和动脉粥样硬化,糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路,肿瘤坏死因子信号通路和NF-kappa B信号通路等。初步预测白芍抗血吸虫病及肝纤维化的作用机制,为其深入研究提供新思路及理论依据。

基于HGF/PI3K/Akt信号轴研究赤芍-附子药对促进慢加急性肝衰竭肝细胞再生的作用机制

基于肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号轴研究赤芍-附子药对对慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)大鼠的治疗作用及对肝细胞再生的影响。采用牛血清白蛋白皮下及尾静脉注射联合脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)+D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)腹腔注射构建ACLF大鼠模型,实验设置正常对照(NC)组、模型(vehicle)组、赤芍-附子药对(SFYD,5.85 g·kg^(-1))组、促肝细胞生长颗粒(HGFG,4.05 g·kg^(-1))组。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察大鼠肝组织病理变化。全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(alanineamino transferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transa-minase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)。ELISA法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)炎症因子水平。免疫荧光染色检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、细胞增殖相关抗原(antigen identified by monoclonal antibody,Ki67)及细胞周期蛋白(cell cycle protein B1,CyclinB1)阳性表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测HGF、结合蛋白Gab1(grb2 associated binding protein 1,Gab1)、PI3K、Akt、磷酸化PI3K(phosphorylation PI3K,p-PI3K)、磷酸化Akt(phosphorylation Akt,p-Akt)mRNA及蛋白表达水平。结果显示,与vehicle组比较,SFYD组大鼠肝组织病理评分降低,肝功能及炎症反应改善,PCNA、Ki67、CyclinB1荧光表达增强。同时与模型组相比,SFYD组HGF、Gab1蛋白表达上调,PI3K、Akt磷酸化激活。以上研究表明赤芍-附子药对通过减轻肝细胞炎症损伤以及促进肝细胞再生来达到抗肝衰竭的效应,其具体调控机制可能与激活HGF/PI3K/Akt信号通路有关。