羟基乙酸乙基纤维素微球经肝动脉栓塞治疗兔肝肿瘤

目的评价羟基乙酸乙基纤维素微球对兔VX2肝肿瘤的介入治疗作用。方法将30只新西兰大白兔制作成VX2兔肝肿瘤模型,造模后13 d行CT检查,计算荷瘤兔肿瘤体积,按肿瘤体积大小进行编号,采用随机数字表法分为A、B、C 3组,每组10只。所有动物经右侧股动脉插管至肝动脉,行造影后向肿瘤供血动脉给药:A组注入羟基乙酸乙基纤维素微球1 ml(0.023 g),B组注入碘油1 ml,C组注入生理盐水1 ml。记录实验动物介入治疗前后肝功能、肝脏肿瘤体积变化,观察各组治疗后肝肿瘤病理变化,从每组中随机选择5只观察生存期。结果介入治疗前各组肝功能、肿瘤体积无统计学差异;介入治疗1周后,A、B组丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平均高于C组(P<0.05);CT测量显示A、B组肿瘤生长率低于C组(P<0.01),且A组较B组更低(P<0.01)。H-E染色显示A组及B组肿瘤纤维组织包膜增厚,癌巢中央大片坏死,癌细胞排列松散,细胞核明显固缩,病理性核分裂减少;免疫组化染色显示A组的VEGF表达和PCNA增殖活性弱于B组。A组生存时间较B、C组延长(P<0.05,P<0.01)。结论羟基乙酸乙基纤维素微球肝动脉栓塞对VX2兔肝肿瘤有良好的治疗效果,使用安全。

去甲斑蝥素微球介入治疗大鼠肝癌疗效及其机制研究

目的探讨去甲斑蝥素-海藻酸/聚酸酐微球(norcantharidin-alginicacid/polyacidanhydridemicro-spheres,N-MS)介入治疗大鼠肝癌的作用及其机制。方法采用乳化-化学交联法制备N-MS。建立大鼠肝癌模型,将荷瘤大鼠随机分为空白对照组、去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)组、空白微球(blankmicro-sphere,B-MS)组、NCTD-碘油组和N-MS组。各组荷瘤大鼠分别经肝动脉注入生理盐水、NCTD、B-MS、NCTD-碘油和N-MS。治疗后,观察各组大鼠生存时间、肝肿瘤体积和肝肿瘤坏死程度;采用TUNEL法检测各组大鼠肝肿瘤细胞凋亡指数;采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(streptavidin-biotinperoxidasemethod,SP)检测各组大鼠肝肿瘤细胞Ki-67的表达。结果治疗后,N-MS组大鼠的生存期较其他各组明显延长;肝肿瘤体积小于其他各组;肿瘤生长率和肝肿瘤细胞Ki-67的表达明显低于其他各组;肿瘤坏死程度和肝肿瘤细胞凋亡指数均高于其他各组,差异均有统计学意义。结论N-MS经肝动脉介入对大鼠肝癌具有较好的治疗作用,其作用机制与栓塞肿瘤微血管、缓慢释放NCTD、诱导肿瘤细胞凋亡和下调Ki-67的表达,从而抑制肿瘤细胞增殖有关。

紫杉醇PLGA微球制备及荷Hep-2喉癌裸鼠体内疗效评估

目的以乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]为载体,制备紫杉醇缓释微球,并评估紫杉醇微球瘤内直接注射对裸鼠Hep-2移植瘤的疗效。方法采用改良溶剂蒸发法制备紫杉醇PLGA缓释微球,考察微球的体外性质,并对Hep-2移植瘤分别采用紫杉醇针剂腹腔内多次注射、紫杉醇针剂瘤内一次注射和紫杉醇微球瘤内一次注射治疗。结果制得的微球形态圆整,载药量、包封率、平均粒径和跨距分别为1.53%、97.29%、42.72μm和0.95。药物体外释放30d累计释放达到53.53%。给药3周后,与生理盐水瘤内注射组相比,紫杉醇治疗各组的肿瘤体积和重量均明显减小(P<0.05),肿瘤体积3倍增时间(TT)均明显延长(P<0.01);低剂量紫杉醇微球瘤内注射组的TT明显大于紫杉醇针剂瘤内和腹腔注射组(P<0.05);高剂量紫杉醇微球瘤内注射组的TT明显大于其它紫杉醇治疗各组(P<0.01)。紫杉醇针剂腹腔给药组、紫杉醇针剂瘤内注射组、低剂量和高剂量微球瘤内注射组的抑瘤率分别为35.99%,39.37%,47.83%和59.90%。PLGA空白微球不影响肿瘤的生长。实验未发现明显的毒性反应。结论紫杉醇PLGA微球满足缓释长效的要求,肿瘤内直接注射该多聚物给药系统可提高紫杉醇抗喉鳞状细胞癌的疗效。

聚乙烯醇载药微球介入栓塞治疗原发性肝癌的临床分析

目的探究聚乙烯醇载药微球介入栓塞治疗原发性肝癌的有效性及安全性。方法收集接受经导管动脉栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治疗的原发性肝癌患者。接受聚乙烯醇载药微球治疗的48例为观察组,接受碘化油+化疗药治疗的56例为对照组。比较两组患者术后肝功能情况、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)浓度、肿瘤坏死率、近期疗效及不良反应。结果观察组和对照组术后肝功能指标一过性增高。两组术后AFP浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05),但均低于术前AFP浓度(均P<0.01)。观察组肿瘤坏死率高于对照组[(85.20±12.83)%vs(49.07±15.24)%,P=0.027]。治疗后1个月,观察组和对照组疾病缓解率分别为77.0%(37/48)和48.2%(27/56),两组比较差异具有统计学意义(P=0.003)。观察组术后不良反应发生率较对照组少(P<0.05)。结论聚乙烯醇载药微球治疗原发性肝癌效果明显,术后不良反应少。

载VEGF-ASODN PLGA纳米粒抑制大鼠肝癌新生血管生成的作用

目的研究VEGF-ASODN PLGA纳米粒对大鼠肝癌血管生成的抑制作用。方法建立大鼠Walker-256肝癌模型。48只大鼠随机分为4组,均采用肝动脉插管方法注射药物。A组生理盐水组,B组PLGA组,C组单纯反义ODN组,D组VEGF-ASODN PLGA纳米粒组。每组3只大鼠于治疗后1周行组织学及免疫组化检查,以抗CD34单克隆抗体显示血管内皮细胞,根据CD34阳性血管内皮细胞记数来测定肿瘤微血管密度(MVD)。结果常规病理检查,A、B组组织形态学相似,C组癌细胞巢减小,部分癌细胞核固缩,出现小片坏死灶,而D组癌细胞核固缩和核碎裂现象明显增多、核染色质浓缩、细胞体积缩小,并出现多个片状和灶性坏死;MVD测定显示:D组MVD值为(18.1±6.15),明显低于其他各组,相差非常显著(P<0.01)。结论载VEGF反义寡核苷酸纳米粒能更有效抑制肿瘤血管生成,降低肿瘤微血管密度。

载紫杉醇缓释微球的制备及其体外抑瘤效果的观察

目的应用乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载紫杉醇(PTX)PLGA微球,探讨其理化性质及其体外抑瘤效果。方法采用双乳剂挥发法制备PTX-PLGA微球,扫描电镜及光学显微镜观察其外观形态,测定微球径线。高效液相色谱法评价PTX-PLGA微球载药率及其包封率。培养卵巢癌SKOV3细胞株,并设空白对照组、生理盐水组、PLGA微球悬液组、紫杉醇注射液组和PTX-PLGA微球悬液组,应用MTT法检测不同处理组在不同时间细胞的生长抑制情况,倒置显微镜下观察肿瘤细胞凋亡形态。结果 PTX-PLGA微球大小均匀,表面光滑无粘连,平均直径为(2.00±0.19)μm,载药率约为5.68%,包封率为81.10%。给药72 h后药物浓度为1×105mol/L时,PTX-PLGA组的卵巢癌细胞增殖明显受到抑制(P<0.05)。结论本法制备的PTX-PLGA微球性质稳定,对卵巢癌细胞的抑制作用具有一定缓释效果。

携SiRNA的聚乳酸羟基乙酸微球对Bel-7402/5-Fu细胞MDR1基因沉默作用的研究

目的探讨携SiRNA的聚乳酸羟基乙酸(PLGA)微球通过沉默肝癌耐药细胞多药耐药基因(MDR1)基因,实现肝癌耐药的逆转。方法合成针对MDR1的RNA干扰小片段(SiRNA),通过超声复乳法制备携药微球,转染肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu。运用Real-timePCR与Westernblot方法,通过检测其mRNA及P糖蛋白表达水平,评价RNA干扰对MDR1表达的影响。MTT法检测RNA干扰逆转Bel-7402/5-Fu细胞耐药性的效果,通过实验组细胞和对照组细胞之间的半数抑制剂量(IC_(50)),计算RNA干扰组细胞的耐药逆转倍数。结果在肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu中,RNA干扰明显抑制了MDR1mRNA和蛋白产物P糖蛋白的表达水平,且出现了P糖蛋白的持续低表达。MTT法显示,相同药物浓度下,实验组细胞生长明显受到抑制,表明其耐药性明显下降,其耐药逆转倍数为11.56。结论携SiRNA的PLGA微球能够有效减少肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu的MDR1mRNA及P糖蛋白的表达水平,降低其耐药性。

载紫杉醇PLGA微球在Skov3卵巢癌荷瘤小鼠体内的治疗效果

目的应用乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载紫杉醇(PTX)PLGA微球,评价PTX-PLGA微球对荷瘤小鼠治疗效果。方法采用4周龄雌性BALB/c-nu裸小鼠建模,将卵巢癌Skov3细胞株注射于裸鼠背部一侧,制备裸小鼠皮下移植瘤。设空白对照组、生理盐水组、PLGA微球悬液组、PTX注射液组和PTX-PLGA微球悬液组。分别对成瘤后荷瘤鼠进行治疗、观察记录、绘制肿瘤生长曲线。对Skov3移植瘤裸小鼠瘤内直接注射药物并应用免疫组化法检测移植瘤微血管密度(MVD)、相关死亡促进因子(Bad)。结果给药6周后,PTX-PLGA微球组瘤内注射抑瘤效果明显大于其他各组(P<0.05),肿瘤体积明显减小,癌细胞增殖受到抑制。结论 PTX-PLGA微球瘤内直接注射对卵巢癌的治疗有明显体内抑瘤效果。