Study on In vitro Bacteriostasis of the Different Extract from Ilex Kudingcha C.J.Tseng

[ Objective ] The aim was to study bacteriostatic activity of the different extract from Ilex Kudingcha C. J. Tseng. [ Method ] By using test tube 2 -fold dilution method and Kirby-Baueer Disc Diffusionto,we conducted inhibitory test on S. aureus and E, coil and determined the minimal inhibitory concentration （MIC） and minimum bactericidal concentration （MBC）and the diameter of inhibition zone. [ Result ] The extract 1 had fairly strong in vitro bacteriostasis activities and than the extract2 and extract3. The MIC and MBC was 3.91 mg/ml and 31.25 mg/ml on S. aureus and E. coil [ Conclusion] The result showed that the different extract from Ilex Kudingcha C. J. Tseng had varying amount of different bacteriostatic activities,the Ilex Kudingcha C. J. Tseng was developed new and safe bacteriostatic reagent to provide reference.

苦丁茶冬青多糖流变学特性研究

以苦丁茶冬青多糖(ICP)为对象,研究浓度、剪切力、温度、p H、冻融变化和盐离子浓度等因素对ICP溶液表观粘度和粘弹性的影响。结果显示,ICP溶液表现出"非牛顿流体"特性,具有良好的抗降解性能;ICP多糖溶液的表观粘度随p H的变化而变化;冷藏和冷冻对ICP溶液的粘度基本无影响,ICP溶液的粘度随着温度的升高而下降;高浓度的Na^+、K^+、Mg^(2+)和Ca^(2+)四种盐离子可使ICP溶液的粘度明显下降。动态流变实验结果显示,应变控制在100%以内时,ICP的弹性储能模量G'基本没有变化,ICP溶液的储能模量G'始终大于损耗模量G″,表现出凝胶特性,且G'和G″随Na^+、K^+和Mg^(2+)的添加呈降低趋势。因此,ICP溶液的流变特性受浓度、温度、盐离子等因素的影响。

土壤pH、Eh对土壤-苦丁茶树系统中铅分布的影响

以苦丁茶冬青(Ilex kudingcha C.J.Tseng)扦插苗(15个月生)进行盆栽实验,通过土施H2SO4、Ca(OH)2和复合肥,改变土壤pH和氧化还原电位(Eh),研究土壤pH、Eh条件对土壤-苦丁茶树系统中铅分布的影响。结果表明:在所研究的土壤pH范围内,从酸性到碱性变化,铅在土壤中含量分布趋于减少,在苦丁茶树根、茎、叶中的含量分布趋于增多,呈现出酸性增大有利于降低铅对苦丁茶树的污染风险。随pH的变化,铅在土壤各层中含量改变较大的是中层,在苦丁茶树的根、茎、叶中含量变化较大的是根。随pH增大,苦丁茶树中铅含量增大,但铅主要被富集在茶树根部。改变土壤的Eh条件,对苦丁茶树及其土壤中铅的分布均有明显影响,其中以土壤的表层和茶树的根、叶影响较大。从减少铅污染的角度,存在适宜的土壤Eh值,如在Eh=260.5时茶树土壤将铅富集在表层,从而降低铅在茶树叶中的含量,对茶叶的安全性有利。

苦丁茶冬青不同萃取组分降血脂活性的比较

本文通过高脂饲料诱导建立大鼠高血脂模型,比较研究苦丁茶冬青中石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4种萃取组分的降血脂活性。结果显示,苦丁茶冬青石油醚萃取物得率为1.83%,乙酸乙酯萃取物得率为1.65%,正丁醇萃取物得率为6.49%,水提物得率为6.97%。苦丁茶冬青不同萃取组分对高脂诱导高血脂大鼠体重增加、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高均具有改善作用,其中石油醚萃取物能显著抑制高血脂大鼠体重增加和显著降低高血脂模型大鼠血清中TC和TG含量(p<0.05)。结果表明苦丁茶冬青不同萃取物组分均具有一定调节血脂和调节高胆固醇血症的功效,本文可为苦丁茶冬青降血脂和调节胆固醇保健品的开发提供理论依据。

苦丁茶冬青叶多糖KPS Ⅲa的热分析研究

采用热重、热重-红外联用及差示扫描量热法研究苦丁茶冬青叶多糖KPSⅢa的热稳定性。结果表明,苦丁茶冬青叶多糖在225℃以下只失去吸附水,在225～625℃间发生剧烈的裂解反应,产生水和二氧化碳;与肝素、淀粉、半乳糖及甲壳素的热分析比较,含有硫酸酯的苦丁茶冬青叶多糖和肝素的热稳定性较低,含氨基的甲壳素的热稳定性最好。说明苦丁茶冬青叶多糖在225℃以下相对稳定,不同的基团对多糖的热稳定性有很大影响。

分光光度法测定湘产苦丁茶中熊果酸含量

用5%香草醛-冰醋酸、高氯酸显色,以熊果酸纯品为对照,在波长548nm处用分光光度法测定湘产3种苦丁茶中熊果酸的含量。方法线性范围为20—100μg/5mL,实验回收率为98.96%,RSD=1.67%;精密度、重现性好;对照品和样品溶液在1h内稳定。该方法操作方便、简单,可用于苦丁茶中熊果酸的定量检测。

苦丁茶多糖抗氧化活性研究

采用清除超氧阴离子自由基、清除羟自由基、清除DPPH自由基、双氧水诱导红细胞氧化溶血、红细胞自氧化溶血实验,对A、K_1、K_3三个苦丁茶多糖组分的抗氧化活性进行了研究,并与Vc进行了比较,结果表明:苦丁茶多糖对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基具有一定的清除作用;对H_2O_2诱导红细胞氧化溶血反应、对红细胞自氧化溶血反应都有显著的抑制作用。

苦丁茶多糖活性成分动态累积及其抑菌活性

目的:研究苦丁茶(Ilex kudingcha C.J.Tseng.)中主要抑菌活性成分多糖在不同采收月份的动态累积规律。方法:将不同采收期的苦丁茶叶水浴回流提取3次,用杯碟法分别测定其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌3种菌的抑菌圈直径,比较不同采收期苦丁茶水提物抑菌圈直径大小,确定最佳采收期。通过苯酚硫酸法测定不同采收期苦丁茶提取物中多糖含量,分析多糖含量与苦丁茶抑菌能力之间相关性;同时采集不同采收期红外光谱,分析与多糖相关的特征峰强度变化规律及其与抑菌活性之间的相关性。结果:在一年的不同月份生长期内,苦丁茶多糖含量在1—3月份逐渐增加,4月份达到最大值96.6 mg/g,然后呈缓慢下降的趋势,7—10月变化不大,11月份后含量显著降低,12月达到全年最低值47.7 mg/g。苦丁茶水提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌3种菌的抑制作用在4月份最大,12月份最小,与苦丁茶多糖含量的变化规律基本一致。结论:苦丁茶抑菌活性多糖成分4月份含量最高,为最佳采收期;苷类和多糖为苦丁茶抑菌活性成分。

苦丁茶多糖的提取分离纯化及部分理化性质研究

以多糖提取率为指标,采用单因素实验和正交实验对苦丁茶多糖的提取工艺条件进行优化,确定最佳提取工艺为:水料比20:1、80℃、提取50 min。在此条件下,苦丁茶多糖提取率为2.43%,先后采用Sevag法脱蛋白、分级醇沉法、DEAE—52纤维素离子交换柱层析法对其进行分离纯化,最后得到K_1和K_22个组分。同时对各苦丁茶多糖进行理化性质分析,结合Sevag法预实验所得出的结果,推测苦丁茶多糖可能为以某种方式结合蛋白的糖缀合物。

HPLC法测定苦丁茶中的熊果酸和齐墩果酸的含量

目的:建立 HPLC 法同时测定苦丁茶中的熊果酸和齐墩果酸的含量。方法:色谱柱为 Betasil C_(18)柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水(95:5),检测波长为210nm,灵敏度为1.000AUFS,柱温为35℃,流速为0.5 mL·min^(-1)。结果:熊果酸的进样量在0.20～4.0μg范围内,峰面积与进样量之间线性关系良好,平均回收率为95.9%;齐墩果酸的进样量在0.17～3.5μg范围内,峰面积与进样量之间线性关系良好,平均回收率为93.3%。结论:本方法可同时测定苦丁茶中熊果酸和齐墩果酸的含量,结果准确,重复性好。

苦丁茶冬青化学成分和药理作用研究进展

冬青属植物苦丁茶冬青(Ilex kudingcha C.J.Tseng)的叶或嫩叶,是民间常用的中草药,有清热解毒之功效。现代药理研究表明,苦丁茶冬青具有降脂减肥、降血糖、抗动脉粥样硬化、抗氧化和抗菌、抗病毒等活性。目前从苦丁茶冬青中已分离出大量的三萜及其皂苷类和酚酸类等化学成分,但其发挥功效的药效物质基础及其分子机制有待进一步研究。因此本文就近年来苦丁茶冬青叶化学成分及药理作用进行了分析和总结,为苦丁茶冬青药用资源的开发利用提供参考。

药用植物苦丁茶与近缘种的微形态研究——叶表皮特征的扫描电镜观察

在扫描电镜下对药用植物苦丁茶 (Ilex kudingcha C.J.Tseng)与 4个近缘种的叶表皮微形态进行了观察。结果显示这些材料的叶表皮仅远轴面有气孔器存在 ,气孔圆形至椭圆形 ,气孔外拱盖表面多平滑 ,拱盖内缘近平滑 ,浅波状或波状 ,外缘角质膜在气孔周围呈环形包着气孔。但各种间叶表皮的微形态特征具有较为明显的差异 ,有一定的分类鉴定意义。本研究结果支持将五棱苦丁茶 (I.pentagona S.K.Chen,Y.X.Feng et C.F.L iang)从苦丁茶中独立出来建立一新种 ,但因苦丁茶具有 2种类型气孔器外缘角质膜排列 ,而不支持对扣树 (I.kaushue S.Y.Hu)

反相高效液相色谱法测定苦丁茶中的熊果酸

建立反相高效液相色谱法测定苦丁茶中熊果酸的新方法。乙醇回流提取 ,酸碱沉淀分离制备样品溶液 ,在以甲醇 -水 -磷酸二氢钠 -二乙胺 (90∶ 10∶ 0 .10∶ 0 .0 2 )为流动相、hypersil- C18柱、检测波长 2 2 0 nm、流速为 0 .6 m L/min的条件下 ,熊果酸与其他三萜成分在 2 0 min内达到基线分离。熊果酸在 0 .16 0 8—0 .80 4 0 mg/m L范围内 ,浓度与峰面积呈良好的线性关系 ,加标回收率为 98.0 6 %— 10 1.8% ,RSD=1.73%— 2 .16 %。该法适用于苦丁茶药材及其他制剂中熊果酸的质量分析检验 ,为天然植物中熊果酸的开发提供了简便、准确的测定方法。

苦丁茶与近缘种的果皮微形态特征及其分类学意义

在扫描电镜下对药用植物苦丁茶 (IlexkudingchaC .J.Tseng)与 4个近缘种的果皮微形态进行了观察。结果显示这些材料的果皮上均有气孔器存在 ,气孔圆形至椭圆形 ,气孔外拱盖表面近平滑或有蜡质碎片 ,拱盖内缘近平滑稀浅波状 ,外缘角质膜在气孔周围呈环形包着气孔。但各种间果皮的微形态特征具有较为明显的差异 ,有一定的分类鉴定意义。本研究结果表明扣树(I .kaushueS .Y .Hu)的果实有指状毛附属物 ,不支持与苦丁茶的合并。五棱苦丁茶 (I.pen tagonaS .K .Chen ,Y .X .FengetC .F .Liang )的果皮特征与苦丁茶较近 ,但有明显差异 ,支持将其从苦丁茶中独立出来建立一新种。

苦丁茶不同提取物的体外抑菌作用研究

[目的]研究苦丁茶不同粗提物的抑菌效果。[方法]采用试管二倍稀释法和纸片扩散法,对金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌进行体外抑菌试验,并测定其最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和抑菌环直径。[结果]粗提物1抑菌效果较强,高于粗提物2和粗提物3,对金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌的MIC分别为3.91和31.25mg/ml。[结论]苦丁茶的不同粗提物均有不同程度的抑菌作用,为苦丁茶开发成新型、安全的抑菌剂提供参考。

广西天等县无公害苦丁茶园的卫生质量评价

采用污染指数法对广西天等县无公害苦丁茶园的土壤、灌溉水以及苦丁茶的卫生质量进行综合评价。结果显示:天等县无公害茶园土壤和茶园灌溉水的所有卫生指标的单项污染指数均小于1,茶园的土壤综合污染指数为0.73,灌溉水综合污染指数为0.43;苦丁茶所有检测项目仅检测出3项,其中铅的污染指数为0.06,铜的污染指数为0.26,八氯二丙醚的污染指数为0.7,其余指标的污染指数均为0。说明天等县无公害茶园的环境质量与产品质量均达到无公害的要求,该基地可作为生产无公害苦丁茶的示范基地。

脱蛋白工艺对苦丁茶冬青叶多糖提取率的影响

采用乙醇对苦丁茶冬青叶进行脱脂,水提醇沉方法得到苦丁茶冬青叶粗多糖。采用Sevag法去除多糖中的蛋白质,研究了除蛋白次数对多糖及蛋白质含量的影响。结果表明,苦丁茶冬青叶多糖采用Sevag法脱蛋白3次以后再继续脱蛋白意义不大。

超临界CO_2萃取技术分离和纯化苦丁茶中熊果酸的工艺

对超临界CO2萃取苦丁茶中熊果酸的工艺进行了研究,并采用酸碱沉淀法纯化萃取液。结果表明:在以无水乙醇作为夹带剂,CO2流量为20L·h-1,萃取温度为45℃,萃取压力为30MPa,萃取时间为3h的萃取条件下,萃取效果最好,萃取率可达0.453%,最终能得到w=21.44%纯度的熊果酸粗品。该工艺优于传统的熊果酸提取方法,适于产业化生产。

我国苦丁茶冬青种质资源的形态学研究 Ⅰ.茎叶的形态学研究

新种苦丁茶冬青(IlexkudingchaC.J.Tseng)自1981年发表以来,有关它与若干近缘种的主要形态差异及其分类学地位等问题一直存在着争议.本文系统地介绍了苦丁茶冬青不同种质材料的茎叶形态学研究结果.作者在分析和总结近年野外考察和种质资源普查过程中所积累资料的基础上,对200余份从各个省区和居群中引种并定植于海南大学苦丁茶种质资源库中的苦丁茶冬青种质材料的茎叶进行了一次系统的形态学研究.其中茎的形态学研究内容包括主干形态,分枝与主茎的夹角,一年生茎或小枝的形态以及幼茎(嫩芽中)的形态;叶的形态学研究包括叶序,叶形,叶尖,叶基,叶缘,叶柄,脉序,百叶重,叶片长度、宽度以及叶片长/宽比值等内容;对茎、叶及嫩芽等器官表面的毛被情况亦作了系统的观察。揭示了苦丁茶冬青不同种质材料在茎叶形态上的一些共同特征和变异规律,发现了少数种质材料之部分分枝上存在对生叶,并发现了若干份介于I.kudingcha和I.pentagona之间的中间型种质材料。根据形态学研究结果(以及将另文报道的RAPD分析结果)判断,这些中间型种质材料很可能是I.kudingcha和I.pentagona天然的种间杂交后代。作者对苦丁茶冬青的毛被及其分类学意义,以及苦丁茶冬青与五棱苦丁茶之间最主要的形态差异等有争议的问题提出了新的意见.

苦丁茶冬青扦插繁育技术研究

以苦丁茶冬青当年生半木质化的枝条作为扦插材料,通过对比试验研究植物生长调节剂、处理时间和营养土配方与组合等对苦丁茶冬青扦插生根和装袋移栽的影响。结果表明,使用300 mg/L、p H 6.5的萘乙酸(NAA)溶液处理8.0 h以上对苦丁茶冬青插穗的生根效果最佳,移栽的营养土采用黄泥、河沙、椰糠和牛粪并添加复合肥后混匀堆放熟化,对苦丁茶冬青种苗的装袋存活效果较好。