沉默长链非编码RNA ANO1-AS1对食管鳞癌细胞迁移、侵袭的影响

目的研究长链非编码(Lnc)RNA ANO1-AS1对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法食管癌细胞株(EC109、TE)转染ANO1-AS1敲减慢病毒,沉默ANO1-AS1表达为LV-sh-ANO1-AS1组,阴性肿瘤对照为LV-Con组,未进行转染为空白对照(Blank)组。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组食管癌细胞中ANO1-AS1和ANO1的相对表达量。通过划痕实验和Transwell迁移实验检测各组细胞的迁移能力。通过Transwell侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力。通过Western印迹测定每组细胞中ANO1、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、上皮间质转化(EMT)相关蛋白及细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达。结果qRT-PCR结果显示,转染ANO1-AS1敲减慢病毒后,食管癌细胞EC109、TE中LV-sh-ANO1-AS1组LncRNA ANO1-AS1和ANO1 mRNA表达水平均显著低于LV-Con组和Blank组(P<0.05)。划痕实验结果表明,LV-sh-ANO1-AS1组细胞划痕愈合率显著低于LV-Con组和Blank组(P<0.05)。Transwell结果表明,LV-sh-ANO1-AS1组细胞迁移和侵袭能力显著低于LV-Con组和Blank组(P<0.05)。Western印迹结果显示,与LV-Con组和Blank组比较,LV-sh-ANO1-AS1组MMP2、MMP9、Vimentin、p-ERK及ANO1蛋白表达水平显著降低,E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论LncRNA ANO1-AS1在食管鳞癌细胞EC109、TE中高表达,并可能通过影响ERK/MAPK信号通路促进食管癌细胞的迁移和侵袭。

胃癌上皮间质转化相关LncRNA研究进展

上皮间质转化(EMT)被认为是肿瘤侵袭转移的关键步骤。LncRNA是一种不编码蛋白质的RNA,它的主要功能是通过调节基因转录相关的复合物活性及其他复杂机理控制下游基因的转录和表达,其中包括EMT过程中相关信号通路。EMT与胃癌的原发浸润、继发侵袭和转移关系密切。本文对胃癌EMT相关的LncRNA的研究进展进行综述。

血清miR-499a、lnc RNA MALAT1在系统性红斑狼疮中表达及其与预后的关系

目的 检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清微RNA(miRNA)-499a、长链非编码RNA(lnc RNA)肺癌转移相关转录本1(MALAT1)表达情况,并分析其与患者临床预后的关系。方法 选取2018年1月至2020年1月北大荒集团总医院收治的SLE患者152例作为SLE组进行回顾性研究,另选取同期无自身免疫性疾病的健康体检者155名作为对照组。根据SLE疾病活动指数评分(SLEDAI),将SLE患者分为静止期组(SLEDAI 0~4分,n=43)、轻度活动期组(SLEDAI 5~9分,n=41)、中度活动期组(SLEDAI 10~15分,n=38)、重度活动期组(SLEDAI>15分,n=30);根据是否发生肾损伤,将SLE患者分为非肾损伤组(n=71)与肾损伤组(n=81);以SLE患者血清miR-499a、lnc RNA MALAT1均值为标准,将SLE患者分为miR-499a高表达组(n=77)和miR-499a低表达组(n=75),lnc RNA MALAT1高表达组(n=79)和lnc RNA MALAT1低表达组(n=73);根据预后情况分为预后良好组(n=115)与预后不良组(n=37)。比较SLE组与对照组、SLE患者不同分组(静止期组、轻度活动期组、中度活动期组、重度活动期组;非肾损伤与肾损伤组;预后良好与预后不良组;miR-499a高表达组和miR-499a低表达组;lnc RNA MALAT1高表达组和lnc RNA MALAT1低表达组)组间血清miR-499a、lnc RNA MALAT1表达差异;分析SLE患者血清miR-499a、lnc RNA MALAT1水平与临床病理特征的相关性;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清miR-499a、lnc RNA MALAT1对SLE患者预后不良的预测价值。结果 SLE组患者血清miR-499a水平为0.24±0.07,低于对照组(1.01±0.18),lnc RNA MALAT1水平为3.75±0.82,高于对照组(1.02±0.19),差异均有统计学意义(P<0.05)。血清miR-499a水平在静止期组(0.52±0.11)、轻度活动期组(0.22±0.08)、中度活动期组(0.10±0.04)、重度活动期组(0.05±0.01)依次降低,lnc RNA MALAT1水平在静止期组(2.35±0.71)、轻度活动期组(3.72±0.83)、中度活动期组(4.44±0.85)、重度活动期组(4.95±0.95)依次升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后不良组SLE患者血清miR-499a水平为0.11±0.02,低于预后良好组(0.29±0.09),lnc RNA MALAT1水平为5.20±0.85,高于预后良好组(3.28±0.79),差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-499a高表达组抗dsDNA阳性、抗ANA阳性SLE患者占比均低于miR-499a低表达组,SLEDAI评分低于miR-499a低表达组,差异均有统计学意义(P<0.05);lnc RNA MALAT1高表达组抗dsDNA阳性、抗ANA阳性SLE患者中占比均高于lnc RNA MALAT1低表达组,SLEDAI评分高于lnc RNA MALAT1低表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SLE患者血清miR-499a、lnc RNA MALAT1呈负相关(r=-0.836,P<0.05);血清miR-499a水平预测SLE患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.815(灵敏度为86.5%,特异度为66.1%),血清lnc RNA MALAT1水平预测SLE患者预后不良的AUC为0.871(灵敏度为83.8%,特异度为74.8%)。结论 SLE患者血清miR-499a降低、lnc RNA MALAT1水平升高,二者可能共同参与SLE的进展,有望作为SLE预后不良的生物学标志物。

c-Myc通过lnc-TBL1XR1-5影响口腔鳞状细胞癌的发生发展

目的研究c-Myc调节的长链非编码RNA TBL1XR1-5(lnc-TBL1XR1-5)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)进展的影响。方法根据c-Myc的表达对TCGA数据库中头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)样本进行生物信息学分析,筛选出c-Myc表达密切相关的lnc-TBL1XR1-5。实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测c-Myc和lnc-TBL1XR1-5在OSCC癌组织和癌旁组织中的表达关系,分析其在HOK、HN6、CAL27细胞系中表达差异,c-Myc过表达和敲低对lnc-TBL1XR1-5的影响。双荧光素酶报告基因测定用于验证c-Myc与lnc-TBL1XR1-5启动子区的结合。RNA荧光原位杂交(RNA FISH)用于确定lnc-TBL1XR1-5在OSCC细胞系中的定位。通过qRT-PCR、细胞计数、CCK-8、集落形成等实验观察lnc-TBL1XR1-5的过表达或敲低对OSCC细胞增殖的影响,并通过划痕实验、Transwell实验等观察lnc-TBL1XR1-5的过表达或敲低对OSCC细胞迁移的影响,最后通过观察培养基颜色和pH变化观察lnc-TBL1XR1-5的过表达或敲低对OSCC细胞代谢的影响。结果c-Myc对lnc-TBL1XR1-5在OSCC细胞系和组织中的表达具有正调控作用。通过双荧光素酶报告基因测定验证了c-Myc与lnc-TBL1XR1-5启动子区的结合。RNA FISH显示lnc-TBL1XR1-5定位于OSCC细胞的细胞核。lnc-TBL1XR1-5的过表达促进了OSCC细胞系的迁移、代谢和增殖,而敲低则具有相反的作用。结论c-Myc在OSCC中正向调节lnc-TBL1XR1-5,lnc-TBL1XR1-5促进OSCC的迁移、增殖和代谢。

lnc-NONHSAT074080调控靶基因ARL6IP4参与RA-UIP发病的机制研究

目的 探讨lnc-NONHSAT074080在类风湿关节炎(RA)相关普通型间质性肺炎(UIP)发病中的作用及调控机制。方法 按是否合并UIP分为RA肺纤维化组4例及RA对照组4例。留全血,Affymetrix基因芯片筛选RA肺纤维化发病相关的长链非编码RNA(lncRNA)进行生物信息学分析,并对表达上调明显的10个lncRNA进行实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)验证。选择经qPCR验证,在RA肺纤维化组表达明显升高,且生物信息学分析与肺纤维化进程相关的lncRNA作为目标lncRNA。构建目标lncRNA的shRNA,荧光素酶基因报告验证目标lncRNA与靶基因的关系。以目标lncRNA shRNA转染转化生长因子(TGF)-β1诱导的人胚肺成纤维细胞系,CCK-8法检测细胞的增殖能力,细胞免疫荧光检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,qPCR检测细胞中目标lncRNA及靶基因的表达,酶联免疫吸附试验检测细胞中Ⅰ型胶原及纤连蛋白表达。结果 与RA对照组相比,RA肺纤维化组患者全血中存在192个表达明显上调的lncRNA,q PCR结果显示lnc-NONHSAT074080在RA肺纤维化组患者全血中的表达升高(P<0.05);生物信息学分析及荧光素酶基因报告表明lnc-NONHSAT074080与纤维化进程相关,作用的靶基因是ARL6IP4,可能通过分裂原激活蛋白激酶(MAPK)、信号转导子和激活因子(STAT)等纤维化相关信号通路发挥作用;与空白对照组相比,TGF-β1组细胞增殖水平、α-SMA、lnc-NONHSAT074080、ARL6IP4、Ⅰ型胶原和纤连蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与TGF-β1组比较,TGF-β1+NONHSAT074080 shRNA组上述变化趋势相反(P<0.05)。结论lnc-NONHSAT074080与RA-UIP的发病及纤维化进程相关,可能通过调控靶基因ARL6IP4参与纤维化进程。

Lnc-TMEM132D-AS1高表达明显降低非小细胞肺癌对奥希替尼的敏感性

目的建立奥希替尼获得性耐药非小细胞肺癌(NSCLC)细胞模型,筛选耐药前后差异表达的长链非编码RNA(lncRNAs),并探讨筛选的lncRNA在奥希替尼获得性耐药中的作用及分子机制。方法奥希替尼获得性耐药细胞株H1975_OR和HCC827_OR是由奥希替尼敏感的NSCLC细胞株H1975和HCC827(分别命名为H1975_S和HCC827_S)建立而来;通过CCK-8、克隆形成及流式凋亡实验检测细胞对奥希替尼的敏感性;RNA测序(RNA-seq)、实时荧光定量PCR(qPCR)技术筛选耐药前后差异表达的lncRNAs;采用CCK-8、克隆形成及Transwell实验检测所筛选的lncRNA在NSCLC细胞奥希替尼获得性耐药中的作用;通过核质分离、生物信息学分析及qPCR技术观察该lncRNA的亚细胞定位,并探索其下游互作分子。结果H1975_OR与HCC827_OR对奥希替尼的耐药指数分别为598.70和428.82(P<0.001)。耐药株的生长增殖与克隆形成能力显著提高,而凋亡率降低(P<0.01)。RNA-seq提示H1975_OR与H1975_S之间以及HCC827_OR与HCC827_S之间有共同差异表达的lncRNAs 34个。q PCR验证发现,lnc-TMEM132D-AS1在耐药性NSCLC细胞株中升高最为显著(P<0.01)。TCGA数据库分析提示,lnc-TMEM132D-AS1在NSCLC组织中的表达水平高于癌旁组织(P<0.001),且与患者预后不良相关(P<0.05)。LncTMEM132D-AS1过表达可提高奥希替尼处理下敏感株的生长增殖、克隆形成及迁移能力(P<0.05),而敲低其表达水平可部分恢复耐药株的奥希替尼敏感性(P<0.01)。lnc-TMEM132D-AS1主要定位在胞质,生物信息学分析提示hsa-miR-766-5p是其潜在靶点,两者表达水平呈负相关(P<0.01)。对hsa-miR-766-5p下游的靶mRNAs分析提示相关基因主要集中于Ras信号通路。结论Lnc-TMEM132D-AS1在奥希替尼获得性耐药NSCLC细胞株中表达显著上调,明显降低了NSCLC细胞对奥希替尼的敏感性,是NSCLC奥希替尼获得性耐药的潜在生物标志物及治疗靶标。

ZEB1-AS1及其相关基因ZEB1在肿瘤免疫微环境中的作用研究进展

锌指E-盒结合同源异形盒1-反义链1 (ZEB1-AS1)属于长链非编码RNA (Lnc RNA)家族,是E盒锌指蛋白1基因(ZEB1)的反义蛋白产物,可通过上调ZEB1的活性促进肿瘤浸润、转移,其表达的失调与多种肿瘤的发生、发展密切相关,有望成为肿瘤治疗的重要分子靶点。近年来,大量研究表明ZEB1-AS1及其相关基因ZEB1可通过调节肿瘤免疫微环境影响肿瘤恶性进展及治疗效果。本文主要阐述ZEB1-AS1及ZEB1与肿瘤相关免疫细胞、炎症相关细胞因子、炎性信号通路之间的相互作用,为肿瘤的靶向及免疫治疗提供新思路。

lncRNAMALAT1对人乳头状甲状腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的探究人乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞TPC-1中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasis associated in lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)的表达,及沉默MALAT1对TPC-1细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法体外培养PTC细胞系TPC-1和人正常甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-ori3-1,采用定量反转录PCR(quantitative reverse transcriptase-mediated PCR,qRT-PCR)检测MALAT1在TPC-1和Nthy-ori3-1细胞系中的表达水平;构建干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA),取对数生长期的TPC-1细胞,经脂质体瞬时转染技术干扰TPC-1细胞中MALAT1的表达,设置对照组(仅加入培养基)、MALAT1沉默对照组(si-NC组,加入空质粒载体)、MALAT1沉默组(si-MALAT1组,加入MALAT1-siRNA质粒),并采用qRT-PCR检测MALAT1的mRNA表达情况;CCK-8检测TPC-1细胞的增殖情况;Transwell小室实验检测TPC-1细胞侵袭能力;划痕试验检测TPC-1细胞迁移能力。结果与Nthy-ori3-1细胞相比,TPC-1中MALAT1的表达上调(P<0.01)。与对照组、si-NC组比较,si-MALAT1组MALAT1表达水平明显降低(均P<0.01),TPC-1细胞增殖、侵袭及迁移能力均显著减弱(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。结论沉默MALAT1可抑制人PTC细胞TPC-1的增殖、侵袭及迁移能力。

LncRNA H19的表达异常影响垂体腺瘤的细胞表型

目的以长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)H19为着力点,通过研究其对垂体腺瘤(pituitary adenoma,PA)细胞表型的影响,寻求解决临床中因PA侵袭性生长,导致其治疗困难的新途径。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测H19在PA组织中的表达水平。对HP75细胞系进行细胞培养,并构建高表达H19的HP75细胞模型,采用qRT-PCR检测其转染效率。然后分别采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法、流式细胞术和Transwell法,检测H19对HP75细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等功能的影响。结果与正常组织相比,lncRNA H19在PA组织中表达下调,差异具有统计学意义(P<0.001)。oe-H19组(转染H19质粒的HP75细胞)lncRNA H19表达量大于oe-nc组(未进行转染处理的HP75细胞),差异具有统计学意义(P<0.001),细胞模型构筑成功。CCK-8法中,oe-nc组具有更高的细胞增殖活性,差异具有统计学意义(P<0.001)。流式细胞术检测,oe-H19组凋亡细胞率高于oe-nc组,差异具有统计学意义(P<0.001)。Transwell小室实验中,oe-H19组Transwell小室上室底膜下表面细胞数,在迁移实验及侵袭实验中均低于oe-nc组,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论H19在垂体腺瘤组织中表达下调,高表达的H19可抑制垂体腺瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡。

c-Myc调控lnc-CCDC117-1对舌鳞癌进展的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNAs)lnc-CCDC117-1与致癌转录因子c-Myc之间的靶向调控关系及lnc-CCDC117-1敲低、过表达后对舌鳞癌细胞发展的影响。方法将携带有flag-c-Myc、plko.1-shc-Myc及其对照的慢病毒载体分别转染HN6、SCC9、CAL27细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测lnc-CCDC117-1的表达情况。此外,荧光原位杂交实验检测lnc-CCDC117-1在细胞内的定位。在此基础之上,构建lnc-CCDC117-1的表达载体、敲低载体并转染HN6、SCC9、CAL27细胞,CCK-8法、克隆形成等实验验证舌鳞癌细胞的增殖状况。结果通过基因芯片技术初步筛选出了受c-Myc正调控的lncRNAs,在舌鳞癌细胞HN6中过表达或敲低c-Myc后,验证了这些lncRNAs与芯片结果一致,并表明lnc-CCDC117-1的表达差异最显著。qRT-PCR实验表明c-Myc对lnc-CCDC117-1具有正性调节的作用,过表达c-Myc显著上调lnc-CCDC117-1;敲低c-Myc明显下调lnc-CCDC117-1水平。双荧光素酶报告基因显示c-Myc可靶向调控lnc-CCDC117-1,c-Myc可以参与调节并且增强lnc-CCDC117-1的转录活性。核质分离实验以及FISH定位显示lnc-CCDC117-1主要存在于细胞核当中。qRT-PCR结果显示shlnc-CCDC117-1显著降低lnc-CCDC117-1及c-Myc的表达;过表达lnc-CCDC117-1使lnc-CCDC117-1的表达明显上调。生长曲线实验、CCK-8法、克隆形成、细胞划痕等实验显示,过表达lnc-CCDC117-1明显促进舌鳞癌细胞增殖与迁移能力,敲低lnc-CCDC117-1抑制舌鳞癌细胞的生长增殖。结论Lnc-CCDC117-1受c-Myc正性调控,过表达lnc-CCDC117-1会促进细胞增殖,反之则抑制细胞生长。

长链非编码RNA MALAT1的研究进展

长链非编码RNA(Long noncoding RNAs,lnc RNAs)是一类转录本长度超过200 nt的RNA分子,它们并不编码蛋白质,而是以RNA的形式在转录水平、转录后水平、表观遗传学修饰等多种层面上调控基因的表达。肺癌转移相关转录本1(Metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)首先在非小细胞肺癌被发现,并引起学者关注。MALAT1定位于染色体11q13.1,具有高度保守性。近年来,研究发现,MALAT1能特异性招募SR蛋白家族成员,并参与表观遗传调控以及细胞周期调控等;MALAT1高表达于多种肿瘤中,促进肿瘤细胞的增殖、转移和侵袭。此外,最近发现MALAT1在血管生成过程中发挥重要作用。主要对MALAT1的特性、作用机制,以及在肿瘤和血管系统的作用作一系统综述。

lncRNA DGCR5在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨长链非编码RNA DiGeorge综合征临界区基因5(digeorge syndrome critical region gene 5,DGCR5)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancinoma,ESCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法:利用生物信息学方法对TCGA数据库中ESCC数据集的DGCR5表达进行分析。收集2016年8月至2017年3月河北医科大学第四医院手术切除60例ESCC患者的癌及癌旁组织标本,用qPCR检测ESCC组织中DGCR5的表达水平,分析DGCR5表达与ESCC患者临床病理特征和预后的相关性。结果:TCGA数据库分析结果显示,DGCR5在ESCC组织中的表达水平显著高于正常食管组织(P<0.01)。ESCC组织中DGCR5表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01)。DGCR5表达水平与ESCC患者TNM分期和淋巴结转移呈显著性相关(均P<0.05)。Kaplan-Meier单因素分析显示,高表达DGCR5的ESCC患者2年生存率显著低于低表达DGCR5患者(P<0.05)。结论:DGCR5在ESCC组织中呈高表达状态,共表达与TNM分期、淋巴结转移及预后不良密切相关,可能成为ESCC早期诊断及预后判断的分子标志物。

长链非编码RNA MALAT-1在肿瘤中的作用及其机制研究进展

近年来,长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)的研究逐渐成为热点,已证实某些lnc RNA的异常表达与肿瘤的发生、发展关系密切。其中,肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT-1)更是在多种肿瘤,尤其是肺癌的研究中受到关注。了解MALAT-1在调节肿瘤细胞生命活动中的具体作用十分必要。本文就MALAT-1的分子结构、生物学功能、在调节肿瘤细胞增殖、转移、周期及凋亡等方面中的作用和机制作一综述。同时对MALAT-1参与的表观遗传调控进行适当阐述,希望能为今后肿瘤的预防和治疗提供新的思路。

Linc00460通过下调miR-654-3p在食管癌中发挥促癌作用

目的探讨linc00460及miR-654-3p在食管癌中的表达水平及与食管癌预后和生物学功能的关系。方法将121例食管癌患者分为linc00460高表达组及linc00460低表达组,使用卡方检验分析两组患者间临床指标的差异,通过log-rank检验及COX回归模型进行生存分析。通过R软件绘制nomogram;使用C-index进行nomogram的内部检验。用CCK-8实验明确linc00460及miR-654-3p对Eca-109增殖的影响。使用双荧光素酶报告基因实验明确linc00460及miR-654-3p的调控关系。结果linc00460在食管癌中高表达,而miR-654-3p则为低表达;卡方检验结果提示二者表达相关。生存分析提示linc00460及miR-654-3p与食管癌预后相关。CCK-8实验提示linc00460可促进Eca-109的增殖。且linc00460通过与miR-654-3p直接结合发挥生物学功能。结论linc00460及miR-654-3p的表达水平与食管癌的预后有关;linc00460通过下调miR-654-3p在食管癌中发挥促癌作用。

在牙周炎样本中长链非编码RNA LINC00511表达增高并促进破骨细胞增殖

背景:LINC00511是一个较为全新的Lnc RNA,研究表明,lincRNA-ANRIL与牙周病的发生及发展密切相关。目的:观察LINC00511在牙周炎中的表达情况及对破骨细胞的增殖及分化的影响。方法:研究方案经沈阳市口腔医院伦理委员会批准,参与试验的患病个体及其家属对试验方案完全知情同意。取牙周炎患者及正畸拔牙患者的正常牙周膜组织(对照组),采用Realtime PCR检测牙周炎患者LINC00511、抗酒石酸酸性磷酸酶及cathepsinK的表达;取第3代的破骨前体细胞RAW264.7细胞进行破骨细胞诱导并鉴定。将LINC00511-si RNA转染破骨细胞,以未转染的破骨细胞为对照,Realtime PCR检测转染效率。采用100μg/L的脂多糖作用于RAW264.7细胞0,24和48h,检测LINC00511的表达;采用CCK8及抗酒石酸酸性磷酸酶检测LINC00511对破骨细胞的增殖及分化的影响。结果与结论:(1)人牙周炎样本中LINC00511、抗酒石酸酸性磷酸酶及cathepsinK表达均显著高于对照组;(2)脂多糖作用于RAW264.7细胞LINC00511的表达随着时间增加而增高;(3)荧光显微镜观察及Realtime PCR检测结果均显示,与对照组相比,LINC00511-si RNA转染后细胞LINC00511表达显著降低(P<0.05);(4)LINC00511促进破骨细胞的增殖及分化;(5)结果表明,在牙周炎样本中LINC00511表达增高,LINC00511可以促进破骨细胞的增殖。

长链非编码RNA与宫颈癌的相关性研究进展

宫颈癌的发病率和死亡率均位于女性肿瘤的第二位,早期诊断与治疗是降低其死亡率的有效途径。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)是一类长度大于200 nt且缺乏编码蛋白能力的RNA,其通过多种途径参与基因的表达调控,在个体正常发育和疾病发生中起着重要作用。越来越多的研究表明lnc RNA与肿瘤的发生、发展密切相关。本文将对lnc RNAs在宫颈癌中的作用及其分子机制进行综述。

上皮性卵巢癌中HOST2 lncRNA的表达及临床意义

目的:检测HOST2 lnc RNA在上皮性卵巢组织的表达水平,并分析其临床意义。方法:利用实时荧光定量PCR方法检测HOST2 lnc RNA在上皮性卵巢癌、上皮性交界性瘤和上皮性正常卵巢组织的表达水平,分析HOST2 lnc RNA在不同上皮性卵巢组织表达差异的临床意义。结果:HOST2 lnc RNA在上皮性卵巢癌组织和上皮性交界性瘤表达量明显高于上皮性正常卵巢组织的表达,差异均有统计学意义(P<0.01)。HOST2 lnc RNA在上皮性卵巢癌组织表达量与上皮性交界性瘤表达量比较无明显差异(P>0.05)。HOST2 lnc RNA在不同临床分期的上皮性卵巢癌中表达量无明显差异(P>0.05)。结论:在上皮性卵巢癌和交界性卵巢瘤中HOST2 lnc RNA均有表达,可作为上皮性卵巢癌早期诊断的一个分子诊断标志物。

LncRNA-SChLAP1在结直肠癌组织中高表达的预后评估意义

目的探讨长链非编码RNA-SChLAP1过表达对结直肠癌(CRC)预后的影响。方法选取符合严格随访标准的156例CRC患者和43例癌旁结直肠组织进行qRT-PCR检测,评估SChLAP1表达与CRC临床病理特征和总生存期(OS)、无病生存期(DFS)的关系,以及影响CRC患者OS和DFS的风险因素。结果CRC中SChLAP1水平明显高于癌旁结直肠组织,差异有统计学意义(P<0.01)。SChLAP1高表达与CRC的分化和分期有关,也与DFS和OS有关(P<0.01)。Cox比例风险回归模型发现SChLAP1表达是CRC患者OS和DFS下降的独立风险因素。结论SChLAP1在CRC进展中起着重要作用,SChLAP1可能作为独立的生物标志物用于CRC的预后评估。

LncRNA PCA3在甲基丙烯酸环氧丙酯诱导16HBE恶性转化细胞中的表达及意义

目的:探讨长链非编码RNA PCA3(LncRNA PCA3)在甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导的16HBE恶性转化细胞中的表达水平及意义。方法:收获经8μg/mL GMA诱导的第30代16HBE恶性转化细胞及同代龄DMSO溶剂对照组细胞,应用高通量LncRNA芯片比较两组样本表达谱的差异,通过差异倍数、邻近编码基因信息分析等策略初步筛选出16HBE恶性转化细胞中LncRNA PCA3及其最可能的相关蛋白编码基因PRUNE2,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和全基因组表达谱芯片分析LncRNA PCA3和PRUNE2的表达量,并与同代龄DMSO对照组细胞比较。结果:LncRNA芯片结果显示,与同代龄DMSO组相比,GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中LncRNA PCA3上调7.17倍,PRUNE2下调2.54倍;qPCR结果显示,与同代龄DMSO组[(1.36±0.44)×10^(-5)]相比,GMA诱导的恶性转化细胞[(2.67±0.63)×10^(-5)]中LncRNA PCA3表达上调(P<0.05);全基因组表达谱芯片显示,16HBE恶性转化细胞的PRUNE2表达量(10.95)较DMSO组(19.46)明显下调,与LncRNA芯片结果一致。结论:LncRNA PCA3可作为GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中相关特异分子标志之一。

长链非编码RNA RP11-110G21.1在结肠癌中的表达及其机制研究

目的分析结肠癌组织与癌旁组织中长链非编码RNA RP11-110G21.1(lncRNA RP11-110G21.1)差异表达及其作用机制。方法收集2011年8月-2015年12月上海市松江区中心医院消化外科诊治结肠癌患者120例临床资料,采用qRT-PCR法检测结肠癌及其癌旁组织中lncRNA RP11-110G21.1表达水平,观察lncRNA RP11-110G21.1表达与临床病理特征的关系,分析lncRNA RP11-110G21.1表达对患者预后的影响。采用脂质体Lipofectamin 2000介导的方法将lncRNA RP11-110G21.1 inhibitor转染结肠癌细胞系LoVo,通过CCK-8法检测下调lncRNA RP11-110G21.1表达对LoVo细胞增殖能力的影响,Transwell小室法检测下调lncRNA RP11-110G21.1表达对LoVo细胞迁移、侵袭能力的影响。通过Logistic回归分析影响结肠癌预后危险因素。结果与癌旁组织组比较,结肠癌组lncRNA RP11-110G21.1表达水平显著升高(t=27.868,P=0.000);LoVo细胞转染lncRNA RP11-110G21.1 inhibitor后,细胞增殖、迁移、侵袭能力降低(F=85.177,491.168,372.789,P<0.01);lnc RNA RP11-110G21.1在分化程度低、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者中表达量高于分化程度中高、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期患者(χ^2/P=4.360/0.035、26.407/0.000);Kaplan-Meier结果显示lncRNA RP11-110G21.1高表达亚组3年内存活率低于低表达亚组(27.6%vs.61.4%,χ^2=13.212,P=0.000);多因素Logistic回归分析显示,TNM分期高、分化程度低、lncRNA RP11-110G21.1高表达是影响结肠癌患者不良预后的危险因素(OR=2.726,2.492,1.576,P均<0.01)。结论结肠癌组织中lncRNA RP11-110G21.1高表达,与患者分化程度、TNM分期及预后有关,降低lncRNA RP11-110G21.1表达可抑制结肠癌增殖、侵袭、迁移能力。