非小细胞肺癌组织中lncRNA FOXD2-AS1、miR-1913表达与患者生存期的关系

目的探究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中长链非编码RNA(lncRNA)FOXD2-AS1、miR-1913的表达与患者生存期的关系。方法选取2017年11月—2019年11月滨州医学院烟台附属医院肿瘤中心收治的NSCLC患者100例癌组织和癌旁组织作为研究对象。根据术后3年预后情况分为生存组58例和死亡组42例,采用实时荧光定量—聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定组织中lncRNA FOXD2-AS1、miR-1913表达水平;Pearson法分析NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1与miR-1913表达水平的相关性;用Kaplan-Meier法分析NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1、miR-1913表达与预后的关系;Cox分析NSCLC患者预后的影响因素。结果与癌旁组织比较,NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-1913表达水平降低(t/P=11.439/<0.001、17.709/<0.001);Target Scan Human网址预测lncRNA FOXD2-AS1与miR-1913间存在结合位点;NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1与miR-1913表达水平呈负相关(r=-0.406,P<0.001);与生存组比较,死亡组患者癌组织中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-1913表达水平降低(t/P=6.973/<0.001、6.307/<0.001);TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、发生淋巴结转移、低分化程度的NSCLC患者癌组织lncRNA FOXD2-AS1高表达比例高于TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、中/高分化程度的NSCLC患者(χ^(2)/P=5.962/0.015、5.104/0.024、6.150/0.013),而miR-1913低表达比例高于TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、中/高分化程度的NSCLC患者(χ^(2)/P=11.457/0.001、7.695/0.006、11.349/0.001);lncRNA FOXD2-AS1高表达NSCLC患者3年生存率低于lncRNA FOXD2-AS1低表达患者,miR-1913高表达患者3年生存率高于miR-1913低表达NSCLC患者(χ^(2)/P=7.830/0.005、6.125/0.013);多因素Cox分析显示,miR-1913高是NSCLC患者预后的保护因素[OR(95%CI)=0.864(0.774~0.964)],lncRNA FOXD2-AS1高、TNMⅢ+Ⅳ期、有淋巴结转移、分化程度低是NSCLC患者预后的危险因素[OR(95%CI)=2.544(1.481~4.370)、3.647(1.614~8.242)、2.544(1.481~4.370)、2.986(1.361~6.553)]。结论NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-1913的表达水平降低,两者与患者预后生存期有关。

lncRNA FOXD2-AS1靶向miR-1299抑制口腔鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究

目的探讨lncRNAFOXD2-AS1靶向miR-1299抑制口腔鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究。方法实验分为si-NC组、si-FOXD2-AS1组、pcDNA-NC组、pcDNA-FOXD2-AS1组、miR-NC组、miR-1299组、anti-miR-NC+si-FOXD2-AS1组、anti-miR-1299+si-FOXD2-AS1组。实时荧光定量PCR(qPCR)检测lncRNAFOXD2-AS1和miR-1299的表达水平。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖能力。流式细胞术检测细胞凋亡。双荧光素酶报告实验检测lncRNAFOXD2-AS1与miR-1299的靶向作用。Western blot法检测CyclinD1、Cleaved-caspase-3、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达。结果口腔鳞癌细胞CAL27、SCC-090、HSC-3中lncRNAFOXD2-AS1表达水平显著升高,miR-1299表达水平显著降低(P<0.05)。lncRNAFOXD2-AS1低表达或miR-1299高表达均可抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。lncRNAFOXD2-AS1靶向调控miR-1299,低表达miR-1299可以逆转lncRNAFOXD2-AS1低表达对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响。lncRNAFOXD2-AS1低表达抑制β-catenin蛋白表达,而低表达miR-1299逆转了lncRNAFOXD2-AS1低表达对β-catenin蛋白表达的抑制作用。结论干扰lncRNAFOXD2-AS1表达可能通过上调miR-1299抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

lncRNA FOXD2-AS1靶向miR-3194-3p对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡影响的体外研究

目的:探讨lncRNA FOXD2-AS1对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响及分子机制。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测口腔鳞癌细胞系中lncRNA FOXD2-AS1和miR-3194-3p的表达水平;将FOXD2-AS1干扰表达载体、miR-3194-3p模拟物、miR-3194-3p抑制剂+FOXD2-AS1干扰表达载体转染至CAL27细胞中,Western blot法检测蛋白表达;MTT检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA FOXD2-AS1和miR-3194-3p的靶向关系。结果:口腔鳞癌细胞系中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-3194-3p表达水平降低(P<0.01)。lncRNA FOXD2-AS1低表达或miR-3194-3p高表达,口腔鳞癌CAL27细胞中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平和细胞存活率降低,裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)表达水平和细胞凋亡率升高(P<0.01);且lncRNA FOXD2-AS1低表达降低了β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达。lncRNA FOXD2-AS1靶向调控miR-3194-3p,低表达miR-3194-3p逆转了FOXD2-AS1低表达对口腔鳞癌细胞CAL27增殖和凋亡及Wnt/β-catenin信号通路的影响。结论:下调lncRNA FOXD2-AS1表达可能通过上调miR-3194-3p抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达变化及其临床意义

目的探讨宫颈癌组织长链非编码RNA(lncRNA)FOXD2-AS1、微小RNA-506-5p(miR-506-5p)表达变化及其临床意义。方法选择宫颈癌患者91例,取手术切除的宫颈癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-qPCR法检测lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达。比较宫颈癌组织与癌旁正常组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达变化,分析宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达的关系以及二者表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1相对表达量明显高于癌旁正常组织,miR-506-5p相对表达量明显低于癌旁正常组织(P均<0.05)。宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1相对表达量与miR-506-5p相对表达量呈负相关关系(r=-0.621,P<0.01)。FIGO分期Ⅲ期、组织分化程度低分化的宫颈癌患者肿瘤组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达均高于FIGO分期Ⅰ、Ⅱ期和组织分化程度高中分化的宫颈癌患者(P均<0.05)。以宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p相对表达量的平均数为截断值,将患者分为lncRNA FOXD2-AS1高表达者46例与lncRNA FOXD2-AS1低表达者45例、miR-506-5p高表达者47例与miR-506-5p低表达者44例。lncRNA FOXD2-AS1高表达者3年总生存率低于lncRNA FOXD2-AS1低表达者(χ^2=22.864,P<0.05);miR-506-5p高表达者3年总生存率高于miR-506-5p低表达者(χ^2=18.485,P<0.05)。结论宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1高表达、miR-506-5p低表达,二者表达呈负相关关系;早期检测宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达可能有助于判断患者预后。

lncRNA FOXD2-AS1通过靶向miR-506-5p调控宫颈癌细胞增殖与凋亡

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)FOXD2-AS1是否通过靶向miR-506-5p调控宫颈癌细胞增殖和凋亡。方法:体外培养人宫颈癌细胞系HeLa、Siha、Caski与正常宫颈细胞株Ect1/E6E7,用qPCR检测细胞中FOXD2-AS1和miR-506-5p的表达水平。用脂质体转染技术分别构建抑制FOXD2-AS1表达和过表达miR-506-5p的宫颈癌细胞,用MTT实验和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡情况,WB实验检测细胞中增殖相关蛋白CyclinD1、p21和p27及凋亡相关蛋白Bcl-2、BAX和cleaved-capase-3的表达。用双荧光素酶报告基因实验验证FOXD2-AS1是否靶向miR-506-5p,并分析同时抑制FOXD2-AS1和miR-506-5p表达对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响。结果:与Ect1/E6E7细胞比较,宫颈癌HeLa、Siha和Caski细胞中FOXD2-AS1表达水平显著升高,miR-506-5p表达水平降低(均P<0.01)。抑制FOXD2-AS1表达可显著抑制宫颈癌细胞中CyclinD1蛋白和Bcl-2蛋白表达,并促进p21、p27和BAX、cleaved-capase-3蛋白的表达,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡(均P<0.01)。过表达miR-506-5p可显著抑制宫颈癌细胞中CyclinD1和Bcl-2蛋白表达,促进p21和BAX蛋白表达,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实宫颈癌细胞中FOXD2-AS1靶向负调控miR-506-5p的表达(P<0.01)。抑制miR-506-5p表达逆转了抑制FOXD2-AS1表达对宫颈癌细胞增殖和凋亡的作用(P<0.01)。结论:FOXD2-AS1通过靶向miR-506-5p的表达调控宫颈癌细胞的增殖和凋亡。

lncRNA FOXD2-AS1对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的机制研究

目的探讨lncRNA FOXD2-AS1对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)增殖和凋亡的影响及分子机制。方法培养正常滑膜成纤维细胞和RASFs,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA FOXD2-AS1和mi R-331-3p表达水平;将正常滑膜成纤维细胞转染至RASFs中随机分为对照(NC)组、si-NC组、si-lncRNA FOXD2-AS1组、miRNC组、mi R-331-3p组、anti-miR-NC+si-lncRNA FOXD2-AS1组、anti-miR-331-3p+si-lncRNA FOXD2-AS1组,细胞计数试剂盒8检测细胞活性;流式细胞术检测RASFs细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA FOXD2-AS1和mi R-331-3p的靶向关系。结果RASFs中lncRNA FOXD2-AS1表达较正常滑膜成纤维细胞升高,miR-331-3p表达较正常滑膜成纤维细胞降低(均P<0.05)。低表达lncRNA FOXD2-AS1或过表达mi R-331-3p的RASFs细胞活性降低,凋亡率升高(均P<0.05)。lncRNA FOXD2-AS1靶向调控miR-331-3p;抑制miR-331-3p表达可以逆转lncRNA FOXD2-AS1低表达对RASFs增殖和凋亡的影响。结论低表达lncRNA FOXD2-AS1通过靶向miR-331-3p抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖,促进凋亡。

LncRNA FoxD2-AS1靶向miR-324-5p对结肠癌SW480细胞增殖和迁移侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FoxD2-AS1是否通过靶向miR-324-5p影响结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭。方法RT-qPCR检测人正常结肠黏膜上皮细胞株NCM460及结肠癌细胞株SW480、HCT116和HT29中FoxD2-AS1和miR-324-5p表达水平;MTT法检测FoxD2-AS1和miR-324-5p表达对结肠癌SW480细胞增殖活力的影响;Transwell小室实验检测FoxD2-AS1和miR-324-5p表达对结肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响;双荧光素酶报告基因实验检测FoxD2-AS1是否靶向miR-324-5p。结果与NCM460细胞相比,结肠癌各细胞株中FoxD2-AS1表达明显上调(P<0.05),miR-324-5p表达明显下调(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实FoxD2-AS1靶向抑制miR-324-5p的表达;MTT和Transwell小室实验结果表明,干扰FOXD2-AS1和过表达miR-324-5p后结肠癌SW480细胞增殖活力均明显降低,细胞迁移和侵袭能力均明显减弱;与干扰FOXD2-AS1相比,同时干扰FOXD2-AS1和miR-324-5p后细胞增殖、迁移和侵袭能力明显增强(P<0.05)。结论lncRNA FOXD2-AS1通过靶向负调控miR-324-5p的表达影响结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力。

lncRNA FOXD2-AS1通过调控miR-185-5p/CCND2分子轴诱导胃癌细胞MGC-803对阿帕替尼的耐药性

目的:探讨lncRNA FOXD2-AS1(FOXD2-AS1)通过调控miR-185-5p/CCND2分子轴参与胃癌细胞对阿帕替尼耐药性的分子机制。方法:收集无锡市第五医院2016年4月至2017年12月间收治的资料完整的25例胃癌患者癌组织和相应癌旁组织标本,采用qRT-PCR检测FOXD2-AS1、miR-185-5p和CCND2在胃癌组织或细胞系中的表达水平;采用CCK-8、Transwell和Annexin V-FITC/PI双染流式术检测胃癌细胞对阿帕替尼药物的敏感性;采用双荧光素酶报告基因验证FOXD2-AS1、miR-185-5p和CCND2的靶向关系,并通过Western blotting和qRT-PCR检测其调控关系。结果:FOXD2-AS1在胃癌组织和阿帕替尼耐药细胞株中高表达;同时,过表达FOXD2-AS1可促进胃癌MGC-803/AP细胞对阿帕替尼的耐药性。双荧光素酶报告基因证实FOXD2-AS1靶向作用miR-185-5p并下调其表达水平。miR-185-5p通过抑制胃癌MGC-803/AP细胞增殖、侵袭和促进凋亡进而下调FOXD2-AS1对胃癌细胞阿帕替尼耐药性的促进作用。miR-185-5p可靶向负调控CCND2的表达,FOXD2-AS1通过下调miR-185-5p对CCND2的抑制作用进而促进胃癌MGC-803/AP细胞增殖、侵袭和抑制凋亡,从而上调胃癌细胞对阿帕替尼的耐药性。结论:FOXD2-AS1通过调控miR-185-5p/CCND2分子轴诱导胃癌细胞对阿帕替尼的耐药性。

LncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移能力的影响

目的研究lncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移的作用。方法利用脂质体转染小干扰RNA以沉默lncRNA FOXD2-AS1基因,通过MTT、平板克隆形成实验和transwell小室等实验方法检测胶质瘤细胞的增殖及迁移。结果对照组在96h增殖率为19.8%±1.09%、20.3%±1.12%,沉默lncRNA FOXD2-AS1基因后的增殖率为7.59%±0.615%、17.9%±0.720%,差异有统计学意义。对照组的克隆形成数为119.3±11.0、162.3±50.2,沉默lncRNA FOXD2-AS1基因后克隆形成数为90.33±7.51、21.00±2.65,差异有统计学意义。对照组的细胞迁移数为134.33±32.72、377.67±61.51,沉默lncRNA FOXD2-AS1基因后细胞迁移数为43.000±15.13、196.67±23.46,差异有统计学意义。结论 lncRNA FOXD2-AS1在胶质瘤细胞中可能起促癌作用,促进胶质瘤细胞的增殖及迁移。

lncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤患者预后的评估及对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA FOXD2-AS1在评估临床胶质瘤患者预后方面的意义,并研究FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖和侵袭能力的影响。方法 收集2012年1月至2015年1月间空军军医大学唐都医院神经外科收治的53例胶质瘤患者的标本组织,同期取脑外伤行开颅手术的30例患者的正常脑组织作为对照组。qRT-PCR法检测两组患者组织中FOXD2-AS1的表达。然后采用χ;检验分析FOXD2-AS1的表达水平与胶质瘤患者临床参数资料之间的关系,采用Kaplan-Meier法进行生存分析并用Log-rank检验。采用单因素和多因素分析观察影响胶质瘤患者预后的因素。应用qRT-PCR法检测FOXD2-AS1在U251人胶质瘤细胞株和HEB细胞中的表达水平。利用人工合成的shRNA在U251细胞中对FOXD2-AS1表达进行干扰,采用MTT实验和Transwell实验评估U251细胞的增殖和侵袭能力。结果 与正常脑组织相比,FOXD2-AS1在胶质瘤组织中的表达显著上调(P<0.001),且与Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤相比,Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤中FOXD2-AS1的表达显著上调(P=0.001 2)。χ;检验分析结果显示,胶质瘤组织中FOXD2-AS1的高表达与患者的KPS评分(P=0.022)、WHO分级(P=0.024)、患者术后复发(P=0.042)有关。生存分析结果提示,与低表达组相比,高表达组患者5年生存率明显降低(P=0.002 3)。此外,单因素及多因素分析结果证实,高FOXD2-AS1表达、KPS评分<80、高WHO分级以及术后复发均为影响胶质瘤患者预后的独立风险因素(P分别为0.002,0.010,0.007,0.004)。在体外实验中发现,较之于HEB细胞,FOXD2-AS1在胶质瘤细胞株中显著过表达(P=0.005)。MTT实验和Transwell实验结果表明转染sh-FOXD2-AS1可降低U251细胞的增殖和侵袭能力(P<0.05)。结论 FOXD2-AS1在胶质瘤中表达显著增高,并与胶质瘤患者生存率、预后密切相关,抑制其表达可降低胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力,其有望成为潜在的治疗靶点。

子宫内膜癌组织中lncRNA HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE的表达与患者临床病理特征及预后的关系

目的探讨子宫内膜癌组织中长链非编码RNA HOXA-AS2(lncRNA HOXA-AS2)、长链非编码RNA FOXD2-AS1(lncRNA FOXD2-AS1)、长链非编码RNA CRNDE(lncRNA CRNDE)的表达与患者临床病理特征及预后的关系。方法收集2017年10月至2020年2月于该院住院手术的119例子宫内膜癌患者术中切除的子宫内膜癌的癌组织及癌旁组织标本。回顾性分析组织中HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE相对表达水平,以及三者表达与患者临床病理特征、3年生存率的关系。结果子宫内膜癌患者癌组织HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE相对表达水平均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌患者癌组织HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE相对表达水平两两之间均呈正相关(r_(HOXA-AS2 vs.FOXD2-AS1)=0.384,P=0.001;r_(HOXA-AS2 vs.CRNDE)=0.576,P<0.001;r_(FOXD2-AS1 vs.CRNDE)=0.326,P=0.003)。HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE高表达组中国际妇产科学联合会分期为Ⅲ+Ⅳ期、发生淋巴结转移、浸润深度为深层、分化程度为低分化的患者所占比例高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌患者癌组织HOXA-AS2低表达组3年生存率(52/60,86.67%)高于子宫内膜癌患者癌组织HOXA-AS2高表达组(40/59,67.79%),差异有统计学意义(χ^(2)=6.039,P<0.05);子宫内膜癌患者癌组织FOXD2-AS1低表达组3年生存率(53/59,89.83%)高于子宫内膜癌患者癌组织FOXD2-AS1高表达组(39/60,65.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=10.456,P<0.05);子宫内膜癌患者癌组织CRNDE低表达组3年生存率(51/60,85.00%)高于子宫内膜癌患者癌组织CRNDE高表达组(41/59,69.49%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.079,P<0.05)。HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE是子宫内膜癌患者死亡的危险因素(P<0.05)。结论子宫内膜癌的癌组织HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE的表达与患者临床病理特征及预后密切相关。

咪达唑仑通过调控LncRNA NR2F2-AS1对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的 探讨咪达唑仑对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人肾癌细胞786-O,随机分组:咪达唑仑0、20、40、60μmol/L组、si-NC组、si-核受体亚家族2组F成员反义RNA(NR2F2-AS)1组、咪达唑仑+pcDNA组、咪达唑仑+pcDNA-NR2F2-AS1组;CCK-8法、流式细胞术与Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡及迁移;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LncRNA NR2F2-AS1表达量;Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关蛋白(Bax)表达量。结果 与咪达唑仑0μmol/L组比较,咪达唑仑20、40、60μmol/L组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bax蛋白水平明显升高,迁移细胞数和Bcl-2蛋白水平明显降低,长链非编码(Lnc)RNA NR2F2-AS1表达量明显降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);转染si-NR2F2-AS1可明显抑制细胞增殖及迁移,并可明显提高细胞凋亡率(P<0.05);与咪达唑仑+pcDNA组比较,咪达唑仑+pcDNA-NR2F2-AS1组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bax蛋白水平明显降低,迁移细胞数和Bcl-2蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论 咪达唑仑可通过抑制LncRNA NR2F2-AS1表达而减弱肾癌细胞增殖及迁移能力,并可诱导肾癌细胞凋亡。

lncRNA PSMA3-AS1调节miR-142-3p/HMGA2轴对卵巢癌恶性进展的影响

目的:探讨lncRNA PSMA3-AS1通过调节miR-142-3p/HMGA2轴对卵巢癌恶性进展的影响及其机制。方法:选择2019年3月至2022年7月期间在本院确诊的53例卵巢癌患者作为研究对象,收集患者卵巢癌组织及癌旁组织。体外培养人正常卵巢细胞HOSEpiC和卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3、A2780、COV362,RT-qPCR检测卵巢癌细胞中lncRNA PSMA3-AS1表达,筛选最佳干预细胞系。双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA PSMA3-AS1、HMGA2与miR-142-3p的靶向关系;将SKOV3细胞分为si-NC组、si-PSMA3-AS1组、si-PSMA3-AS1+anti-miR-NC组、si-PSMA3-AS1+anti-miR-142-3p组、miR-NC组、miR-142-3p mimics组、miR-142-3p mimics+pcDNA组、miR-142-3p mimics+HMGA2组,检测细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭;Western blot检测Ki67、Cyclin D1、Bcl-2、cleaved caspase 3、HMGA2蛋白表达;小鼠移植瘤实验验证lncRNA PSMA3-AS1对卵巢癌肿瘤生长的影响。结果:与癌旁组织比较,卵巢癌组织中lncRNA PSMA3-AS1和HMGA2表达升高,miR-142-3p表达降低(P<0.05);lncRNA PSMA3-AS1和HMGA2在SKOV3细胞中表达水平最高,miR-142-3p在SKOV3细胞中表达水平最低;下拉实验和双荧光素酶报告显示,lncRNA PSMA3-AS1、HMGA2与miR-142-3p存在靶向关系;敲低lncRNA PSMA3-AS1或过表达miR-142-3p后,细胞OD值、细胞克隆数、划痕愈合率、细胞侵袭数及Ki67、Cyclin D1、Bcl-2、HMGA2表达显著降低,细胞凋亡率、cleaved caspase 3表达显著增加(P<0.05);抑制miR-142-3p表达或过表达HMGA2可逆转敲低lncRNA PSMA3-AS1或过表达miR-142-3p对卵巢癌细胞恶性行为的抑制作用;体内实验表明,敲低lncRNA PSMA3-AS1表达可抑制小鼠肿瘤生长。结论:lncRNA PSMA3-AS1在卵巢癌中高表达,敲低lncRNA PSMA3-AS1可调节miR-142-3p/HMGA2轴抑制卵巢癌恶性发展。

子痫前期病人长链非编码RNA H19和长链非编码RNA HAND2-AS1表达水平与胰岛素抵抗的相关性研究

目的检测子痫前期病人胎盘组织、血清长链非编码RNA H19(LncRNA H19)与长链非编码RNAHAND2-AS1(Ln⁃cRNA HAND2-AS1)表达水平,并分析其与病人胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法将2021年1—12月在唐山市妇幼保健院建卡的子痫前期孕妇105例作为子痫前期组,根据子痫前期孕妇严重程度分为轻度子痫前期组与重度子痫前期组,另选取同期孕周、年龄相符的健康孕妇97例作为对照组,收集所有孕妇身体质量指数(BMI)、孕周、收缩压、舒张压、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)等一般资料,并计算稳态模型的IR指数(HOMA-IR);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定孕妇血清、胎盘组织中LncRNA H19,LncRNA HAND2-AS1水平;比较对照组与子痫前期组、轻度子痫前期组与重度子痫前期组间血清、胎盘组织LncRNA H19、LncRNA HAND2-AS1水平;Pearson法分析子痫前期孕妇血清、胎盘组织LncRNA H19、LncRNA HAND2-AS1与HOMA-IR的相关性。结果子痫前期组病人收缩压、舒张压高于对照组(P<0.05),且重度子痫前期病人收缩压、舒张压高于轻度子痫前期病人,孕周低于轻度子痫前期病人(P<0.05);与对照组相比,子痫前期组孕妇24 h尿蛋白、FBG[(5.84±0.97)mmol/L比(4.22±0.70)mmol/L]、FINS[(13.37±2.23)mU/L比(7.52±1.25)mU/L]、HOMI-IR水平(3.47±0.57比1.41±0.23)升高(P<0.05),且重度子痫前期孕妇24 h尿蛋白、FBG[(6.90±1.15)mmol/L比(5.24±0.85)mmol/L]、FINS[(13.97±2.32)mU/L比(13.05±2.17)mU/L]、HOMI-IR水平(4.27±0.71比3.03±0.50)高于轻度子痫前期孕妇(P<0.05);与对照组相比,子痫前期组孕妇血清、胎盘组织Ln⁃cRNA H19(2.52±1.42比1.01±0.15,3.75±0.62比1.02±0.17)与LncRNA HAND2-AS1水平(1.98±0.33比1.01±0.15,2.87±0.47比1.02±0.17)升高(P<0.05),且重度子痫前期孕妇血清、胎盘组织LncRNA H19(2.84±0.47比2.34±0.39,4.28±0.71比3.45±0.57)与LncRNA HAND2-AS1水平(2.59±0.43比1.63±0.27,3.56±0.59比2.49±0.41)高于轻度子痫前期孕妇(P<0.05);子痫前期病人血清与胎盘组织间LncRNA H19水平呈正相关(r=0.55,P<0.05),血清与胎盘组织间LncRNA HAND2-AS1水平呈正相关性(r=0.65,P<0.05)。子痫前期孕妇血清、胎盘组织LncRNA H19水平分别与HOMI-IR呈正相关(r=0.53、0.59,P<0.05);血清、胎盘组织LncRNA HAND2-AS1水平分别与HOMI-IR呈正相关(r=0.60、0.61,P<0.05)。结论子痫前期病人血清、胎盘组织LncRNA H19、LncRNA HAND2-AS1高表达,二者与IR密切相关,可能通过影响IR参与子痫前期发生发展。

lncRNA CTBP1-AS2靶向miR-205-5p影响髓核细胞凋亡及炎症反应的分子机制研究

目的:探讨lncRNA CTBP1-AS2对IL-1β诱导的大鼠髓核细胞凋亡及炎症反应的影响及可能作用机制。方法:采用IL-1β诱导大鼠髓核细胞建立细胞损伤模型,随机分为:对照组、模型组、si-NC+模型组、si-lncRNA CTBP1-AS2+模型组、miR-NC+模型组、miR-205-5p+模型组、si-lncRNA CTBP1-AS2+anti-miR-NC+模型组、si-lncRNA CTBP1-AS2+anti-miR-205-5p+模型组;qRT-PCR检测lncRNA CTBP1-AS2、miR-205-5p表达;流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA检测TNF-α、IL-6水平;双荧光素酶报告实验检测lncRNA CTBP1-AS2与miR-205-5p的靶向关系;Western blot检测Cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组lncRNA CTBP1-AS2表达、Cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达、TNF-α、IL-6水平及细胞凋亡率均明显升高,miR-205-5p表达降低(P<0.05);与si-NC+模型组比较,si-lncRNA CTBP1-AS2+模型组细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达、TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.05);与miR-NC+模型组比较,miR-205-5p+模型组细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、Cleavedcaspase-3、Bax蛋白水平明显降低(P<0.05);lncRNA CTBP1-AS2可负调控miR-205-5p表达;与si-lncRNA CTBP1-AS2+anti-miRNC+模型组比较,si-lncRNA CTBP1-AS2+anti-miR-205-5p+模型组细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、Cleaved-caspase-3、Bax蛋白水平均明显升高(P<0.05)。结论:干扰lncRNA CTBP1-AS2表达可通过促进miR-205-5p表达抑制细胞凋亡及炎症反应,从而减轻IL-1β诱导的大鼠髓核细胞损伤。

莪术醇通过调节lncRNA NR2F1-AS1/miR-145-5p表达抑制前列腺癌细胞增殖及转移

目的:探讨莪术醇对前列腺癌细胞增殖及转移的影响及其可能作用机制。方法:不同浓度的莪术醇处理人前列腺癌细胞LNCap,采用脂质体转染法将si-NC、si-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCap细胞,将pcDNA、pcDNA-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCap细胞后加入100μg/ml莪术醇处理;CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;qRT-PCR检测lncRNA NR2F1-AS1、miR-145-5p表达量;双荧光素酶报告实验验证lncRNA NR2F1-AS1与miR-145-5p的靶向关系。结果:莪术醇可降低细胞存活率,并可降低lncRNA NR2F1-AS1表达量,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而miR-145-5p表达量升高(P<0.05);lncRNA NR2F1-AS1可靶向调控miR-145-5p的表达(P<0.05);转染si-lncRNA NR2F1-AS1后细胞存活率降低(P<0.05),miR-145-5p表达量升高(P<0.05),克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05);转染pcDNA-lncRNA NR2F1-AS1可降低莪术醇对LNCap细胞增殖及转移的作用。结论:莪术醇可通过调节lncRNA NR2F1-AS1/miR-145-5p表达,抑制前列腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。

长链非编码RNA FOXD2-AS1在恶性肿瘤的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一种不编码蛋白质的RNA,其转录长度超过200个核苷酸,并且缺乏编码蛋白质的能力。近年来,越来越多的相关研究表明,lncRNA参与肿瘤细胞的多种恶性生物学过程,例如肿瘤的发生、增殖、侵袭、凋亡、分化和代谢。FOXD2相邻对链RNA 1(FOXD2-AS1)是lncRNA的一种,近年研究显示,FOXD2-AS1在多种恶性肿瘤中过表达,与肿瘤的形成、进展和转移密切相关,并且其表达水平与肿瘤患者的存活和预后有关。本文现将对FOXD2-AS1在恶性肿瘤发生发展的作用进行综述,以期寻找有效的肿瘤诊断与治疗靶点及预后标志物。

LncRNA FGD5-AS1调节miR-93-5p/BMP2轴促进人骨髓间充质干细胞成骨分化

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5-AS1调节微小RNA miR-93-5p/骨形态发生蛋白-2(BMP2)轴对人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs)成骨分化的影响。方法取对数增殖期的hBM-MSCs,分别检测成骨分化前、后lncRNA FGD5-AS1、miR-93-5p、BMP2 mRNA表达水平;将细胞分别转染或共转染pcDNA FGD5-AS1、miR-93-5p inhibitor、miR-93-5p mimics及相应阴性对照,分组为pcDNA NC组、pcDNA FGD5-AS1组、inhibitor NC组、miR-93-5p inhibitor组、pcDNA FGD5-AS1+mimics NC组、pcDNA FGD5-AS1+miR-93-5p mimics组,取未转染细胞作为空白组;CCK-8法检测细胞增殖;碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测其活性;茜素红染色鉴定细胞矿化结节形成;Western blot检测BMP2及成骨相关标志物--骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、成骨相关转录因子(OSX)水平;双荧光素酶报告基因实验分别验证miR-93-5p与FGD5-AS1、BMP2的靶向关系。结果miR-93-5p分别与FGD5-AS1、BMP2存在靶向关系。与分化前相比,hBM-MSCs成骨分化后lncRNA FGD5-AS1、BMP2 mRNA表达显著增加,miR-93-5p表达显著下降(P<0.05);与pcDNA NC组相比,pcDNA FGD5-AS1组FGD5-AS1表达显著增加(P<0.05),表明转染成功。后续实验发现矿化结节产生、细胞增殖、ALP活性及BMP2、OCN、OPN、OSX表达均显著增加(P<0.05);与inhibitor NC组相比,miR-93-5p inhibitor组miR-93-5p表达降低,表明转染成功。后续实验发现矿化结节产生、细胞增殖、ALP活性及BMP2、OCN、OPN、OSX表达均显著增加(P<0.05);miR-93-5p过表达可抑制FGD5-AS1对细胞成骨分化的促进作用(P<0.05)。结论上调FGD5-AS1可以促进细胞成骨分化,可能与miR-93-5p/BMP2轴有关。

lncRNA CERS6-AS1通过调控miR-138-2-3p抑制人胶质瘤细胞系增殖

目的探讨lncRNA CERS6-AS1对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其可能作用机制.方法qRT-PCR法检测胶质瘤组织、癌旁组织中CERS6-AS1和miR-138-2-3p的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中CERS6-AS1与miR-138-2-3p表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞T98G,将si-NC、si-CERS6-AS1、miR-NC、miR-138-2-3p mimics、si-CERS6-AS1与anti-miR-NC、si-CERS6-AS1与anti-miR-138-2-3p分别转染至T98G细胞;CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验检测CERS6-AS1和miR-138-2-3p的靶向关系.结果与癌旁组织比较,胶质瘤组织中CERS6-AS1的表达量升高(P<0.05),miR-138-2-3p的表达量降低(P<0.05);CERS6-AS1与miR-138-2-3p呈负相关(r=-0.8899,P<0.001);si-CERS6-AS1组细胞活力、克隆形成细胞数、迁移及侵袭细胞数均低于si-NC组(P<0.05);CERS6-AS1可靶向调节miR-138-2-3p的表达;miR-138-2-3p组细胞活力、克隆形成细胞数、迁移及侵袭细胞数均少于miR-NC组(P<0.05);si-CERS6-AS1+anti-miR-138-2-3p组细胞活力、克隆形成细胞数、迁移及侵袭细胞数均比si-CERS6-AS1+anti-miR-NC组增多(P<0.05).结论干扰CERS6-AS1表达可通过调控miR-138-2-3p而抑制胶质瘤细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭.

FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2联合诊断胃癌的临床价值及机制研究

目的:筛选胃癌中差异性表达的长链非编码RNA(lncRNA),探讨代表性lncRNA在胃癌诊断中的潜在价值及相关机制。方法:从TCGA数据库中筛选在胃癌中差异性表达的lncRNA,通过GSE179252和GSE184336数据集以及qRT-PCR检测胃癌患者血清中lncRNA的表达水平对结果进行验证。绘制ROC曲线评价代表性lncRNA单独及联合检测的诊断效能。分析HOXC-AS2与胃癌患者临床病理参数的相关性。利用在线数据库对HOXC-AS2进行下游靶基因预测以及PPI蛋白互作分析,构建HOXC-AS2-miRNA-mRNA调控网络。结果:从TCGA数据库中筛选出3个在胃癌中差异性表达的lncRNA。TCGA-STAD、GSE179252和GSE184336数据集中FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2联合检测胃癌的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.994、0.958和0.921。血清中检测结果发现与胃良性疾病患者相比,FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2在胃癌患者血清中表达升高(P<0.001),三者联合检测诊断胃癌的AUC为0.843,灵敏度和特异度分别为80%和86%。HOXC-AS2与胃癌肿瘤分级有相关性(P<0.05)。HOXC-AS2可与下游mRNA竞争miR-9-5p等miRNA结合位点,调控DLX6与HOXC蛋白家族之间的相互作用。结论:FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2的联合检测可用作胃癌的诊断标志物,HOXC-AS2可作为ceRNA促进胃癌进展。