LINC01296调控Wnt/β-catenin信号通路影响SK-N-SH细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭

该研究探讨长链非编码RNA LINC01296(lncRNA LINC01296)是否通过调控Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路而调节人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH增殖、凋亡、迁移及侵袭。采用qRT-PCR法检测神经母细胞瘤组织与瘤旁组织中LINC01296的表达水平;体外培养SK-N-SH细胞,随机分为Control组(正常培养SK-N-SH细胞)、si-NC组(si-NC转染至SK-N-SH细胞)、si-LINC01296组(si-LINC01296转染至SK-N-SH细胞)、LiCl组(Wnt/β-catenin信号通路激活剂处理SK-N-SH细胞)、si-LINC01296+LiCl组(si-LINC01296与LiCl共同处理SK-N-SH细胞);采用甲基噻唑基四唑(MTT)与克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki67)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase3)、Wnt1、β-catenin蛋白表达量。结果显示与瘤旁组织比较,神经母细胞瘤组织中LINC01296的表达水平降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-LINC01296组细胞活力显著降低(P<0.05),克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数显著减少(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05),Wnt1、β-catenin、Ki67、N-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05),E-cadherin、cleaved-caspase3蛋白水平显著升高(P<0.05);激活Wnt/β-catenin信号通路可部分逆转干扰LINC01296表达对SK-N-SH细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响(P<0.05);与LiCl组比较,si-LINC01296+LiCl组细胞活力显著降低(P<0.05),克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数显著减少(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05),Wnt1、β-catenin、Ki67、N-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05),E-cadherin、cleaved-caspase3蛋白水平显著升高(P<0.05)。该研究得出,干扰LINC01296表达可抑制SK-N-SH细胞增殖、迁移、侵袭及诱导细胞凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。