lncRNA MALAT1通过海绵吸附miRNA-141-3p调控Wnt/β-catenin促进卵巢癌的生长及转移

目的 研究长链非编码RNA MALAT1(lncRNA MALAT1)在卵巢癌中的作用及调控机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测MALAT1在人正常卵巢上皮细胞系IOSE80及人卵巢癌细胞系SKOV3、OVCA429和HO-8910PM中的表达,选取SKOV3及HO-8910PM细胞进行后续研究。利用siRNA干扰SKOV3和HO-8910PM细胞中MALAT1表达,CCK-8法检测细胞增殖,划痕及Transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力,并通过Western blot法检测上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation, EMT)相关指标E-cadherin、N-cadherin的表达。利用生物信息学分析MALAT1与miRNA-141-3p的靶向关系,并利用双荧光素报告基因验证。MALAT1敲低及miRNA-141-3p抑制剂共同作用细胞,检测其对SKOV3及HO-8910PM细胞增殖、侵袭及迁移的影响,并通过Western blot法分析其对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达调控。结果 与人正常卵巢上皮细胞系IOSE80比较,卵巢癌细胞系内MALAT1表达明显上调(P<0.05);而在SKOV3及HO-8910PM中下调MALAT1表达,细胞增殖、侵袭迁移及EMT均受到抑制,同时miRNA-141-3p表达上调(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果证明MALAT1和miRNA-141-3p具有靶向关系。而在下调MALAT1表达的同时使用miRNA-141-3p抑制剂,则可逆转下调MALAT1的所产生的抑制效应(P<0.05)。进一步的研究发现,MALAT1/miRNA-141-3p轴可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响卵巢癌进展。结论 MALAT1可能通过海绵吸附miRNA-141-3从而调控Wnt/β-catenin影响卵巢癌的发生和发展。

栀子醇提物下调lncRNA MALAT1影响帕金森病模型细胞增殖和凋亡

目的 探讨栀子醇提物对帕金森病进展的影响,并探讨其机制是否与调控长链非编码RNA(lncRNA)肺癌转移相关转录本(MALAT)1表达有关。方法 1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP~+)处理SK-N-SH构建模型帕金森病细胞模型。将SK-N-SH细胞分为对照组、模型组、实验1组(25μg/ml栀子醇提物)、实验2组(50μg/ml栀子醇提物)、实验3组(100μg/ml栀子醇提物)、si-NC组(转染si-NC)、si-MALAT1组(转染si-MALAT1)、实验3+pcDNA组(转染pcDNA联合100μg/ml栀子醇提物)、实验3+pcDNA-MALAT1组(转染pcDNA-MALAT1联合100μg/ml栀子醇提物)。细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞术和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)用于检测细胞活力、凋亡及lncRNA MALAT1表达。结果 与对照组比较,模型组细胞活力显著降低,lncRNA MALAT1表达、凋亡率显著升高(P<0.05)。与模型组比较,实验2组、实验3组细胞活力显著升高,lncRNA MALAT1表达、凋亡率显著降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-MALAT1组细胞活力显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05)。与实验3+pcDNA组比较,实验3+pcDNA-MALAT1组细胞活力显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05)。结论 栀子醇提物可促进帕金森病模型细胞增殖,抑制细胞凋亡,其机制与下调lncRNA MALAT1表达有关。

JAG1影响单核-巨噬细胞重塑三阴性乳腺癌转移前微环境:基于外泌体中的LncRNA MALAT1

目的探讨JAG1对单核-巨噬细胞在三阴性乳腺癌(TNBC)中肿瘤转移前微环境(PMN)中作用的影响及其可能的调控机制,以期为TNBC诊疗提供新的思路和靶点。方法人TNBC细胞MDA-MB-231,MDA-MB-231B体外培养,qRT-PCR检测JAG1的表达。动物实验将雌性裸鼠分为MDA-MB-231组和MDA-MB-231B组,5只/组,分别往乳腺脂肪垫注射细胞5×10^(6),6周取肿瘤组织进行免疫组化分析。人源单核细胞THP-1为研究对象,分别经人源JAG1重组蛋白(rhJAG1)直接处理或经TNBC条件培养基(CM)处理,通过单核-内皮粘附、Transwell、qRT-PCR和Western blot实验检测JAG1对单核细胞的直接作用和在PMN中的影响。实验分为5组:Control组:THP-1正常培养;231-CM组:THP-1+231-CM;231-JAG1-CM组:THP-1+rhJAG1处理后231-CM;231B-CM组:THP-1+231B-CM;231-DAPT-CM组:THP-1+DAPT处理后231-CM。透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)检测JAG1对TNBC外泌体分泌影响。生物信息学筛选与LncRNA MALAT1相互作用的miRNA并行qRT-PCR验证。结果与MDA-MB-231相比,侵袭株MDA-MB-231B的JAG1表达更高(P<0.01),肝转移面积更大;rhJAG1直接处理和TNBC条件培养基处理均能促进单核细胞的黏附、迁移,并影响其分化(均P<0.05);透射电镜和NTA检测显示JAG1能促进MDA-MB-231外泌体分泌数量增多(P<0.01),外泌体中LncRNAMALAT1含量升高(P<0.0001)。生物信息学分析得到与LncRNA MALAT1和JAG1相关的5个候选miRNA,实验证实miR-26a-5p在TMN中的单核-巨噬细胞中受到MALAT1的靶向调控(P<0.0001)。结论JAG1能促进TNBC的外泌体分泌并影响其中Lnc MALAT1的表达,从而靶向PMN中单核-巨噬细胞miR-26a-5p的表达,从而使单核-巨噬细胞中JAG1表达升高,进而影响单核-巨噬细胞在PMN中的黏附、迁移和破骨分化作用。

人参皂苷Rg1通过LncRNA MALAT1相关通路对脊髓损伤后神经再生修复的影响

目的探讨人参皂苷Rg1通过LncRNA MALAT1通路对脊髓损伤大鼠神经再生修复的影响。方法30只大鼠随机分为Rg1治疗组、假手术组、脊髓损伤对照组。将成年雌性鼠随机分为假手术组,脊髓损伤对照组和Rg1治疗组,建立大鼠脊髓损伤模型。Rg1治疗组大鼠每天腹腔注射Rg1溶液(100 mg/kg),脊髓损伤对照组和假手术组每天腹腔注射等量生理盐水。采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估大鼠脊髓损伤后的运动恢复情况。连续治疗28 d后处死老鼠。取脊髓组织,通过Western blot检测细胞黏附分子层粘连蛋白(Laminin,LN)、纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)以及神经营养因子胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNF)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的表达。实时荧光定量PCR测LncRNA MALAT1,采用免疫组化分析LAMC1的表达水平。结果BBB评分显示,Rg1治疗组BBB评分显著优于假手术组、脊髓损伤对照(P<0.05)。免疫组化及免疫荧光显示:Rg1治疗组LN、FN、GDNF、NGF、LAMC1表达与对照组相比显著升高。结论Rg1能够上调LncRNA MALAT1表达,进一步调控LAMC1而促进大鼠脊髓损伤修复。

肢体骨肉瘤患儿外周血中LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1表达及与预后的关系

目的:探讨肢体骨肉瘤患儿外周血中LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1表达及与预后的关系。方法:选择我院于2016年09月至2021年09月肢体骨肉瘤患儿93例作为研究对象;另选择我院2016年09月至2021年09月健康体检儿童50例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定外周血LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1相对表达量。随访至2022年08月31日,记录患儿总生存期(OS)。比较2组外周血LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1相对表达量;骨肉瘤不同病理特征LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1相对表达量;预后与LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1相对表达量的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响骨肉瘤患儿预后的独立危险因素。结果:骨肉瘤组外周血LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1相对表达量高于对照组(P<0.05)。不同性别、年龄、组织学分型和发病部位外周血LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1相对表达量比较无显著差异(P>0.05);Ⅲ期外周血LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1相对表达量高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05)。肢体骨肉瘤患儿随访12~72个月,中位随访时间43个月。LncRNA ANRIL高表达OS时间短于LncRNA ANRIL低表达(P<0.05);LncRNA MALAT1高表达OS时间短于LncRNA MALAT1低表达(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析显示,Enneking分期Ⅲ期、LncRNA ANRIL高表达和LncRNA MALAT1高表达为影响骨肉瘤患儿预后的独立危险因素。结论:肢体骨肉瘤患儿外周血中LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1高表达,且与患儿Enneking分期和预后密切相关,Enneking分期Ⅲ期、LncRNA ANRIL和LncRNA MALAT1高表达为影响肢体骨肉瘤患儿预后的独立危险因素。

LncRNA MALAT1通过调控miR-181d-5p对脂多糖诱导的库普弗细胞增殖活性和炎性因子表达的影响

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)对脂多糖(LPS)诱导的库普弗细胞(kupffer cells,KCs)存活和炎性因子表达的影响及其可能作用机制。方法采用LPS诱导KCs建立细胞损伤模型,随机分组为对照(Con)组、LPS组、LPS+si-NC组、LPS+si-MALAT1组、LPS+miR-NC组、LPS+miR-181d-5p组、LPS+si-MALAT1+anti-miR-NC组、LPS+si-MALAT1+anti-miR-181d-5p组;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测LncRNA MALAT1、miR-181d-5p的表达量;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-6、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;双荧光素酶报告实验检测LncRNA MALAT1与miR-181d-5p的靶向关系。结果与Con组比较,LPS组LncRNA MALAT1的表达量升高(P<0.05),IL-6、IL-12、TNF-α的水平升高(P<0.05),miR-181d-5p的表达量降低(P<0.05),细胞增殖活性降低(P<0.05)。与LPS+si-NC组比较,LPS+si-MALAT1组细胞增殖活性升高(P<0.05),IL-6、IL-12、TNF-α的水平降低(P<0.05)。LncRNA MALAT1可负向调控miR-181d-5p的表达;与LPS+miR-NC组比较,LPS+miR-181d-5p组细胞增殖活性升高(P<0.05),IL-6、IL-12、TNF-α的水平降低(P<0.05)。与LPS+si-MALAT1+antimiR-NC组比较,LPS+si-MALAT1+anti-miR-181d-5p组细胞增殖活性降低(P<0.05),IL-6、IL-12、TNF-α的水平升高(P<0.05)。结论干扰LncRNA MALAT1表达可通过促进miR-181d-5p表达而促进LPS诱导的KCs存活及抑制细胞炎性因子表达。

老年克罗恩病血清lncRNA MALAT1和LUCAT1表达情况及其与肠道菌群数量的相关性

目的探讨老年克罗恩病(CD)患者血清lncRNA MALAT1和LUCAT1表达及其与肠道菌群数量的相关性。方法选取2021年1月~2022年1月浙江省丽水市第二人民医院收治的老年CD患者120例为CD组,另外选择同期正常健康体检者80例为对照组。应用qRT-PCR法检测血清中lncRNA MALAT1、LUCAT1表达水平;通过革兰染色对菌群鉴定并计算肠道菌群数量;采用Pearson相关性分析血清lncRNA MALAT1、LUCAT1表达水平与肠道菌群数量的相关性。结果(1)CD组血清中lncRNA MALAT1的表达水平显著低于对照组(P<0.01),LUCAT1的表达水平显著高于对照组(P<0.01);lncRNA MALAT1和LUCAT1CD在CD组三个不同活动期中差异有统计学意义(P<0.01),其中,重度活动期血清lncRNA MALAT1的表达水平显著低于中度活动期和缓解期,中度活动期表达水平显著低于缓解期(P<0.01);重度活动期血清LUCAT1的表达水平显著高于中度活动期和缓解期,中度活动期表达水平显著高于缓解期(P<0.01)。(2)相关性分析显示,缓解期、中度活动期和重度活动期CD患者血清lncRNA MALAT1的表达水平与普氏菌、双歧杆菌的数量呈正相关,与肠球菌、大肠杆菌的数量呈负相关(P<0.01);LUCAT1表达水平与普氏菌、双歧杆菌的数量均呈负相关,与肠球菌、大肠杆菌的数量呈正相关(P<0.01)。结论CD患者血清lncRNA MALAT1表达水平显著降低,而LUCAT1表达水平显著增高,两者与肠道菌群数量有相关性。

lncRNA MALAT1调节miR-106b-5p/TLR4轴对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织炎性损伤的影响

目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)调节miR-106b-5p/Toll样受体4(TLR4)轴对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织炎性损伤的影响。方法以气管滴注脂多糖溶液并联合烟熏法构建COPD模型大鼠,随机分成5组(每组12只模型大鼠):模型组、lncRNA MALAT1敲低组、miR-106b-5p antagomir组、阴性对照组、lncRNA MALAT1敲低+miR-106b-5p antagomir组,选12只正常大鼠气管内滴注与造模大鼠等剂量的生理盐水,且不进行烟熏,作对照组,分组干预处理后,检测大鼠肺功能,比较各组用力肺活量(FVC)、呼气峰流值(PEF)、吸气阻力(Ri)、潮气量(VT);实时荧光定量PCR实验检测肺组织lncRNA MALAT1、miR-106b-5p及TLR4 mRNA表达;Giemsa染色对肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数;HE染色观察各组大鼠肺组织炎性损伤,并做Holfbauer评分;酶联免疫吸附测定(ELASA)法测量各组大鼠BALF和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素-10(IL-10)水平;双荧光素酶报告基因实验检测L2细胞中lncRNA MALAT1对miR-106b-5p、miR-106b-5p对TLR4的靶向调节。结果与对照组比较,模型组大鼠肺组织发生炎性损伤,FVC、PEF、肺组织miR-106b-5p表达、BALF和血清中IL-10水平降低(P<0.05),Ri、VT、肺组织lncRNA MALAT1及TLR4 mRNA表达、Holfbauer评分、BALF中白细胞计数、BALF和血清中TNF-α、PGE2水平升高(P<0.05)。与模型组比较,lncRNA MALAT1敲低组大鼠肺组织肺炎性损伤减轻,FVC、PEF、肺组织miR-106b-5p表达、BALF和血清中IL-10水平升高(P<0.05),Ri、VT、肺组织lncRNA MALAT1及TLR4 mRNA表达、Holfbauer评分、BALF中白细胞计数、BALF和血清中TNF-α、PGE2水平降低(P<0.05);miR-106b-5p antagomir组大鼠肺组织肺炎性损伤加重,FVC、PEF、肺组织miR-106b-5p表达、BALF和血清中IL-10水平降低(P<0.05),Ri、VT、肺组织TLR4 mRNA表达、Holfbauer评分、BALF中白细胞计数、BALF和血清中TNF-α、PGE2水平升高(P<0.05);阴性对照组大鼠各指标无显著差异(P>0.05)。与lncRNA MALAT1敲低组比较,lncRNA MALAT1敲低+miR-106b-5p antagomir组大鼠肺组织肺炎性损伤加重,FVC、PEF、肺组织miR-106b-5p表达、BALF和血清中IL-10水平降低(P<0.05),Ri、VT、肺组织lncRNA MALAT1及TLR4 mRNA表达、Holfbauer评分、BALF中白细胞计数、BALF和血清中TNF-α、PGE2水平升高(P<0.05)。L2细胞中lncRNA MALAT1可靶向下调miR-106b-5p,且miR-106b-5p可靶向下调TLR4表达。结论下调lncRNA MALAT1可通过促进miR-106b-5p分泌而降低TLR4表达,进而减少促炎因子产生,增加抗炎因子产生,阻止炎症发生发展,最终减轻COPD大鼠肺组织炎性损伤。

lncRNA MALAT1、miR-146b-5p膀胱癌组织的表达变化

目的分析lncRNA MALAT1、miR-146b-5p膀胱癌(BC)组织的表达变化。方法选取2017年1月6日至2020年1月6日本院收治的90例膀胱癌病患为研究样本,病患接受手术治疗疾病,留取膀胱癌组织、癌旁组织。应用荧光实时定量PCR法对于以上组织内的lncRNA MALAT1、miR-146b-5p进行测定,分析以上物质在BC组织内的表达变化。结果癌旁组织和BC内miR-146b-5p、lncRNA MALATI相对表达量对比具有统计学意义(P<0.05);BC淋巴结转移和miR-146b-5p、lncRNA MALATI表达存在相关性;BC组织内的miR-146b-5p、lncRNA MALAT1表达情况呈负相关(P<0.05)。结论膀胱癌组织内的miR-146b-5p表达降低,lncRNA MALAT1表达上升。以上两者负相关。这种情况的出现和病患淋巴结转移有关联性,日后其可能成为诊治膀胱癌疾病的重要标记物。

基于lncRNA MALAT1/Slug/Smad通路调控上皮间质转化探讨白花蛇舌草抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭

目的研究白花蛇舌草(HDW)通过lncRNA MALAT1/Slug/Smad通路调控上皮间质转化(EMT)对结肠癌细胞迁移和侵袭的抑制作用。方法取对数生长期人结肠癌HCT-116细胞,分为空白组、药物组、病毒组和药物联合病毒组。空白组和药物组加入不含lncRNA MALAT1的空载慢病毒液,病毒组和药物联合病毒组加入含lncRNA MALAT1过表达慢病毒液,获得稳定转染的细胞系。空白组和病毒组用0 mg/mL HDW药液干预,药物组和药物联合病毒组用0.5 mg/mL HDW药液干预,均干预24 h。RT-qPCR法检测细胞lncRNA MALAT1 mRNA相对表达水平;MTT法检测细胞活力;划痕实验检测细胞划痕愈合能力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞锌指转录因子Slug、锌指转录因子Snail、转化生长因子-β(TGF-β)、Smad2/3、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达量以及p-Smad/Smad。结果与空白组比较,药物组lncRNA MALAT1 mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05),细胞活力明显降低(P<0.05),细胞划痕愈合能力与迁移、侵袭能力明显降低,Slug、Snail、TGF-β、N-cadherin、Vi⁃mentin蛋白表达量和p-Smad/Smad明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量明显提高(P<0.05);病毒组lncRNA MALAT1 mRNA相对表达水平明显升高(P<0.05),细胞活力明显升高(P<0.05),细胞划痕愈合能力与迁移、侵袭能力明显提高,Slug、Snail、TGF-β、N-cadherin、Vimentin蛋白表达量和p-Smad/Smad明显提高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量明显降低(P<0.05)。与病毒组比较,药物联合病毒组lncRNA MALAT1 mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05),细胞活力明显降低(P<0.05),细胞划痕愈合能力与迁移、侵袭能力明显降低,Slug、Snail、TGF-β、N-cadherin、Vimentin蛋白表达量和p-Smad/Smad明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量明显提高(P<0.05)。结论HDW可通过抑制lncRNA MALAT1/Slug/Smad信号通路,减少EMT,进而抑制大肠癌细胞的迁移和侵袭。

lncRNA MALAT1通过miR-124-3p/SOX7分子轴促进视网膜血管内皮细胞增殖及迁移和血管生成

目的:探讨lncRNA MALAT1对视网膜血管内皮细胞增殖、迁移及血管生成的影响及其分子机制。方法:qPCR检测正常对照组、糖尿病患者无视网膜病变组、糖尿病视网膜病变患者组血清中lncRNA MALAT1的表达水平以及葡萄糖培养对lncRNA MALAT1的表达水平的影响。qRT-PCR检测miR-124-3p表达水平;Western blotting检测SOX7表达水平;双荧光素酶报告系统检测lncRNA MALAT1与miR-124-3p、miR-124-3p与SOX7的靶向作用关系;CCK-8实验检测细胞的增殖活力;Transwell实验检测细胞的迁移能力;体外成管实验检测hRMECs血管形成能力。结果:lncRNA MALAT1在糖尿病视网膜病变患者血清中的表达水平显著高于糖尿病患者无视网膜病变组和正常对照组(P<0.001);体外葡萄糖培养显著促进lncRNA MALAT1在hRMECs细胞的表达,并显著促进hRMECs细胞的增殖、迁移和血管形成(均P<0.05)。敲低lncRNA MALAT1显著抑制hRMECs细胞的增殖、迁移和成管能力(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验表明,lncRNA MALAT1与miR-124-3p、miR-124-3p与SOX7之间存在靶向结合作用。过表达miR-124-3p显著抑制hRMECs细胞的增殖、迁移和成管能力(均P <0.05);过表达lncRNA MALAT1+miR-124-3p,同时过表达miR-124-3p+SOX7,敲低lncRNA MALAT1+过表达SOX7均显著消除了过表达miR-124-3p对hRMECs细胞增殖、迁移和血管形成的抑制作用(均P<0.05)。结论:lncRNA MALAT1通过下调miR-124-3p对SOX7的负调控作用促进糖尿病视网膜病变中视网膜内皮细胞增殖、迁移和血管形成。lncRNA MALAT1在糖尿病视网膜病变患者的异常上调可能是微血管功能障碍的潜在生物标志。

LncRNA MALAT-1对弥漫性大B细胞淋巴瘤增殖和耐药性的影响

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)MALAT-1对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)增殖和耐药性的影响。方法:收集2015年3月至2018年11月我院81例DLBCL患者的淋巴组织标本作为研究对象,另选取60例健康淋巴组织标本作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测MALAT-1在DLBCL组织和健康淋巴组织中的mRNA表达水平;构建NC-shRNA和MALAT-1-shRNA慢病毒稳定细胞系,CCK-8法检测MALAT-1下调对DLBCL细胞增殖的影响;在耐药性分析中,NC-shRNA和MALAT-1-shRNA细胞用200 ng/ml阿霉素分别处理48 h。采用Western blot检测NC-shRNA和MALAT-1-shRNA细胞耐药基因MDR1和MRP1的蛋白表达水平。结果:DLBCL组织中MALAT-1的mRNA相对表达水平显著高于健康淋巴组织,差异有统计学意义(1.46±0.11 vs 0.41±0.08,P<0.05);CCK-8结果显示,与NC-shRNA组相比,MALAT-1-shRNA组细胞在24 h、36 h、48 h、72 h时的增殖能力均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);耐药性检测结果表明,与NC-shRNA组、MALAT-1-shRNA组和NC-shRNA+Adriamycin组比较,MALAT-1-shRNA+Adriamycin组增殖曲线的平均斜率下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,与NC-shRNA组比较,MALAT-1-shRNA组细胞中MDR1和MRP1的蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。结论:LncRNA MALAT-1在DLBCL组织中呈高表达,下调MALAT-1的表达可显著抑制DLBCL细胞的增殖能力和耐药性。

芍药苷上调lncRNA MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进人类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞凋亡

目的探讨芍药苷(PAE)对体外培养类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养RA-FLS,噻唑蓝(MTT)法检测(20、40、80)μmol/L PAE培养24、48、72 h的细胞生存率,流式细胞术检测细胞凋亡率;合成3条长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1的小干扰RNA(si-MALAT1)片段,脂质体转染48 h后,实时定量PCR检测筛选出敲除效果最佳si-MALAT1。将细胞分对照组、PAE组、si-NC组、si-MALAT1组、PAE联合si-MALAT1组。敲低MALAT1表达后,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测各组Wnt1、β联蛋白(β-catenin)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的mRNA表达;Western blot法检测各组Wnt1、β-catenin、caspase-3、caspase-9、Bcl2、BAX的蛋白表达。结果不同浓度PAE对RA-FLS均有抑制作用,相同浓度RA-FLS活力呈时间依赖性下降;与FLS对照组相比,RA-FLS组MALAT1表达下调,经PAE处理后细胞凋亡率增加;RA-FLS中si-MALAT1组细胞凋亡率最低,而PAE联合si-MALAT1组显著增高;PAE组较对照组Bcl2、Wnt1、β-catenin的mRNA表达降低,caspase-3、caspase-9、BAX的mRNA表达则升高;si-MALAT1组的Bcl2表达显著增高,PAE联合si-MALAT1组的Bcl2表达则显著下调,BAX、caspase-3、caspase-9表达显著升高。结论PAE通过上调MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进RA-FLS凋亡。

LncRNA MALAT1在2型糖尿病患者中的表达及临床意义

目的探讨LncRNA MALAT1在2型糖尿病患者中的表达及临床意义。方法收集正常健康体检者25例,糖尿病患者69例,Real-time PCR法(qPCR)测定两组血清白细胞中LncRNA MALAT1的表达。结果糖尿病组血清白细胞中LncRNA MALAT1表达水平较对照组明显升高(P<0.05)。二元回归分析显示LncRNA MALAT1及超氧化物歧化酶(SOD)是2型糖尿病发病的危险因素。Spearman相关分析提示LncRNA MALAT1表达与糖化血红蛋白、SOD、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)中胰岛素分泌(60 min)及血糖(60、120、180 min)存在相关性。受试者工作特征(ROC)曲线结果显示ROC曲线下面积(AUC)为0.807,敏感度为78.3%,特异度为84.0%。结论LncRNA MALAT1在2型糖尿病患者中高表达,可作为糖尿病诊断的潜在生物标志物。

多发性骨髓瘤患者血清LncRNA MALAT1表达水平及临床意义

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者长链非编码RNA(LncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)在血清中的表达水平与MM类型的关系,探讨其在MM中的诊断价值。方法收集我院2018年1月至2020年10月MM患者60例(MM组),健康体检者60例(对照组),检测两组患者血清中LncRNA MALAT1的表达水平,分析其与MM疾病分型和分期的关系。同时研究MM患者血清LncRNA MALAT1表达水平与患者血红蛋白和生化指标的关系。结果MM组与对照组血清LncRNA MALAT1表达水平显著不同,差异有统计学意义(t=21.157,P<0.05)。MM组患者血清LncRNA MALAT1表达水平与患者的年龄、性别无关(t=1.512,t=1.396,P>0.05)。不同DS分期和ISS分期LncRNA MALAT1表达水平不同,Ⅲ期高于Ⅱ期和Ⅰ期,差异有统计学意义(P<0.05);MM组患者血清LncRNA MALAT1表达与血钙、β2微球蛋白、血轻链、乳酸脱氢酶呈正相关(r=0.619、0.871、0.809、0.746,P<0.05),而与血红蛋白水平呈负相关(r=-0.756,P=0.000)。MM患者血清LncRNA MALAT1表达轻链型高于其他类型(P<0.05),而IgG型和IgA型差异无统计学意义(q=1.512,P>0.05)。血清LncRNA MALAT1在MM诊断中的AUC为0.977,敏感度88.3%,特异度85%。MM患者治疗有效,治疗前后MM患者血清LncRNA MALAT1表达水平比较,差异有统计学意义(t=4.386,P=0.000)。未缓解患者治疗前后比较,差异无统计学意义(t=0.538,P=0.6)。结论MM患者血清MALAT1可以作为诊断和判断预后的指标。

人参皂苷Rb1对脑缺血再灌注损伤小鼠LncRNA Malat1表达的调控作用

目的探讨人参皂苷Rb1是否可以增加脑缺血再灌注损伤小鼠脑梗死半暗带区LncRNA Malat1的表达。方法将30只C57/B6小鼠按随机数字表法分成假手术组、模型+生理盐水对照组、模型+人参皂Rb1组,每组10只。采用大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型。人参皂苷Rb1组和模型组大鼠在制模后即刻分别腹腔注射人参皂苷Rb1(40 mg/kg)和等量生理盐水。再灌注损伤后24 h观察各组小鼠的神经行为学评分、脑梗死体积、Bcl-2蛋白表达量和LncRNA Malat1含量。结果与假手术组相比,模型组小鼠神经行为学评分和脑梗死体积明显增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达量和LncRNA Malat1表达水平明显增加(P<0.05);与模型组相比,人参皂苷Rb1组小鼠神经行为学评分和脑梗死体积明显减少(P<0.05),Bcl-2蛋白表达量和LncRNA Malat1表达水平进一步增加(P<0.05)。结论人参皂苷Rb1可以改善MCAO小鼠的神经行为学评分、减小脑梗死体积和增加Bcl-2蛋白表达量。人参皂苷Rb1具有脑保护作用,其可能的机制与增加小鼠脑梗死半暗带区LncRNA Malat1的表达有关。

lncRNA MALAT1靶向miR-150对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制

目的:研究MALAT1对口腔鳞癌细胞SCC-25增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法:运用qRT-PCR检测人口腔鳞癌细胞SCC-25、人永生化口腔上皮细胞HIOEC中MALAT1和miR-150的mRNA表达;将si-con组(转染si-con)、si-MALAT1组(转染si-MALAT1)、miR-150组(转染miR-150 mimics)、miR-con组(转染miR-con)、si-MALAT1+anti-miR-con组(si-MALAT1和anti-miR-con共转染)、si-MALAT1+anti-miR-150组(si-MALAT1和anti-miR-150共转染),均以脂质体法转染至SCC-25细胞;MTT法检测各组细胞的增殖;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性。结果:与人永生化口腔上皮HIOEC细胞(Normal组)相比,口腔鳞癌SCC-25细胞(Tumor组)中MALAT1表达显著上调,miR-150显著下调(P<0.05);敲减MALAT1、过表达miR-150均可抑制SCC-25细胞增殖,促进凋亡;MALAT1靶向miR-150。抑制miR-150逆转了敲减MALAT1对口腔鳞癌细胞的增殖抑制和凋亡促进作用。结论:MALAT1可促进口腔鳞癌细胞增殖并抑制凋亡,其机制可能与靶向miR-150有关,可为口腔鳞癌的治疗提供新靶点。

基于lncRNA MALAT1/TGF-β通路调控EMT探讨白花蛇舌草抑制大肠癌细胞的迁移和侵袭

目的探究白花蛇舌草(HDW)通过长非编码RNA肺癌转移相关转录本1(lncRNA MALAT1)/转化生长因子β(TGF-β)通路调控上皮间质转化(EMT)对大肠癌细胞的迁移和侵袭的抑制作用。方法取对数生长期的SW620细胞分为0 mg/mL组、0.5 mg/mL组、1 mg/mL组、2 mg/mL组,各组分别加入0、0.5、1、2 mg/mL HDW药液干预24 h,24 h后采用倒置显微镜观察细胞数量、形态变化,CCK-8法检测细胞活力,划痕实验和Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,RT-qPCR检测lncRNA MALAT1相对表达量,Western blot检测TGF-β、Smad4、Vimentin、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达。结果与0 mg/mL组比较,各药物组随着HDW药物浓度的增加,SW620细胞数量减少,形态皱缩变圆,细胞活力逐渐下降(P<0.05),细胞迁移和侵袭能力逐渐降低,细胞lncRNA MALAT1相对表达量逐渐下调(P<0.05),细胞TGF-β、Smad4、Vimentin、N-cadherin蛋白表达逐渐降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达逐渐增高(P<0.05)。结论HDW可通过抑制SW620细胞lncRNA MALAT1/TGF-β通路调控EMT,进而抑制大肠癌SW620细胞的迁移和侵袭。

长链非编码LncRNA Malat1在糖尿病肾病患者血清中的表达及临床意义

目的探讨LncRNA人肺腺癌转移相关转录本(MALAT1)在2型糖尿病(T2DM)、糖尿病肾病(DKD)患者血清中的表达及意义。方法Real-time PCR法(qPCR)法测定LncRnA MALAT1在14例健康对照组,27例DKD患者和20例T2DM患者中的表达,分析其临床意义。结果T2DM组及DKD组LncRNA MALAT1表达水平较对照组明显升高。LncRNA MALAT1的表达与尿微量白蛋白/尿肌酐(ACR)、尿β2微球蛋白(β2-MG)、尿α1微球蛋白(α1-MG)、肌酐(Cr)、糖化血红蛋白(HbA1c)存在正相关性,与超氧化物歧化酶(SOD)存在负相关。在T2DM和DKD患者中LncRNA MALAT1作为DKD患者血清标志物受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.727,敏感度为53.6%,特异度为90.0%,DKD与对照组患者中LncRNA MALAT1作为DKD的AUC为0.952,敏感度为82.1%,特异度为100.0%。结论LncRNA MALAT1在DKD患者中高表达,有望成为预测DKD患者预后的生物标志物。

糖络宁通过调控lncRNA MALAT1减轻高糖诱导的雪旺细胞炎症反应机制研究

目的以lncRNA MALAT1为切入点,观察糖络宁对体外高糖诱导的大鼠雪旺细胞炎症反应的影响,探讨其保护雪旺细胞的可能机制。方法以大鼠雪旺细胞作为研究对象,采用高糖刺激构建细胞损伤模型,分为正常组(空白血清培养)、高糖组(150 mmol/L葡萄糖+空白血清培养)、糖络宁组(150 mmol/L葡萄糖+糖络宁含药血清培养)、MALAT1基因敲除组(150 mmol/L葡萄糖+MALAT1抑制剂)4个组,48 h后,收集各组细胞并进行相关检测。以CCK-8法检测各组细胞活力,酶联免疫法检测各组细胞上清液中炎症因子(IL-6、MCP-1、TNF-α)的蛋白表达情况,实时荧光定量聚合酶链式反应检测各组细胞lncRNA MALAT1和炎症因子(IL-6、MCP-1、TNF-α)的表达情况。结果与正常组比较,高糖组细胞活力下降(P<0.05),炎症因子(IL-6、MCP-1、TNF-α)的基因和蛋白表达均增加(P<0.05),MALAT1表达水平明显升高(P<0.05);而与高糖组相比,糖络宁组和MALAT1基因敲除组细胞活力有所升高(P<0.05),各炎症因子的基因和蛋白表达均有所下调(P<0.05),且糖络宁组MALAT1的表达水平较高糖组明显减少(P<0.05)。结论糖络宁能减轻高糖诱导的大鼠雪旺细胞炎症反应,其部分机制是通过抑制lncRNA MALAT1的水平实现的。