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血清miR-218-5p、LncRNA OIP5-AS1在急性呼吸窘迫综合征患儿中表达及临床预后预测效能分析 被引量:1
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作者 李书秀 闫梦洋 杜志云 《临床和实验医学杂志》 2024年第7期706-710,共5页
目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清长链非编码RNA OIP5-AS1(LncRNA OIP5-AS1)、微小RNA-218-5p(miR-218-5p)表达情况及二者在临床预后预测中的价值。方法回顾性选择2020年7月至2022年2月秦皇岛市第一医院收治的104例ARDS患儿为A... 目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清长链非编码RNA OIP5-AS1(LncRNA OIP5-AS1)、微小RNA-218-5p(miR-218-5p)表达情况及二者在临床预后预测中的价值。方法回顾性选择2020年7月至2022年2月秦皇岛市第一医院收治的104例ARDS患儿为ARDS组。根据氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))将ARDS患儿分为重度亚组(PaO_(2)/FiO_(2)≤100 mmHg,n=32)、中度亚组(100 mmHg<PaO_(2)/FiO_(2)≤200 mmHg,n=38)、轻度亚组(200 mmHg<PaO_(2)/FiO_(2)≤300 mmHg,n=34)。根据ARDS患儿28 d院内死亡情况将其分为存活亚组(n=74)和死亡亚组(n=30)。另选择同期于本院进行健康体检的98例儿童作为对照组。比较各组血清LncRNA OIP5-AS1、miR-218-5p表达水平;收集患儿性别、年龄、气道峰值压、通气时间、入住ICU时间、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、动脉血氧分压(PaO_(2))、入院急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、入院序贯器官功能衰竭评分(SOFA)、平均气道压、潮气量、白蛋白等资料。采用Pearson相关分析ARDS死亡患儿中血清LncRNA OIP5-AS1与miR-218-5p表达水平的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA OIP5-AS1、miR-218-5p表达水平对ARDS患儿预后的预测价值;采用Logistic回归分析影响ARDS患儿死亡的因素。结果ARDS组血清LncRNA OIP5-AS1为2.04±0.38,显著高于对照组(1.01±0.21),miR-218-5p为0.45±0.16,显著低于对照组(1.02±0.20),差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组、轻度亚组、中度亚组、重度亚组ARDS患儿血清LncRNA OIP5-AS1表达水平依次升高,miR-218-5p表达水平依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡亚组血清LncRNA OIP5-AS1表达水平及入院APACHEⅡ评分、入院SOFA、平均气道压、潮气量均高于存活亚组,miR-218-5p表达水平及PaO_(2)、白蛋白均低于存活亚组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ARDS死亡患儿中血清LncRNA OIP5-AS1与miR-218-5p表达水平呈负相关(r=-0.503,P<0.05)。血清LncRNA OIP5-AS1、miR-218-5p及二者联合预测ARDS患儿死亡的曲线下面积分别为0.852、0.812、0.904。LncRNA OIP5-AS1是ARDS患儿死亡的独立危险因素(P<0.05),miR-218-5p是ARDS患儿死亡的保护因素(P<0.05)。结论ARDS患儿血清LncRNA OIP5-AS1>2.04,miR-218-5p<0.39,均与病情严重程度及预后不良有关。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 长链非编码RNA oip5-as1 微小RNA-218-5p 预后
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H3K27乙酰化修饰促进lncRNA OIP5-AS1转录并通过上调TLR4诱导过敏性鼻炎鼻黏膜上皮细胞凋亡
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作者 谢勇 佘志强 +3 位作者 李容华 吴荣华 王瑢 刘继远 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期419-427,共9页
目的本研究旨在探讨组蛋白3的27位赖氨酸(H3K27)乙酰化修饰对长链非编码RNA OPA相互作用蛋白5-反义RNA1(lncRNA OIP5-AS1)转录的促进作用,探讨其通过调控Toll样受体4(TLR4)对过敏性鼻炎(AR)中鼻黏膜上皮细胞(NEC)凋亡的影响。方法白细... 目的本研究旨在探讨组蛋白3的27位赖氨酸(H3K27)乙酰化修饰对长链非编码RNA OPA相互作用蛋白5-反义RNA1(lncRNA OIP5-AS1)转录的促进作用,探讨其通过调控Toll样受体4(TLR4)对过敏性鼻炎(AR)中鼻黏膜上皮细胞(NEC)凋亡的影响。方法白细胞介素13(IL-13)处理NEC以建立AR细胞模型。采用实时定量PCR检测OIP5-AS1和TLR4在AR患者鼻黏膜组织和体外细胞模型中的表达。ELISA检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、嗜酸性粒细胞趋化因子1(eotaxin-1)和黏蛋白5AC(MUC5AC)的浓度。原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法用于检测NEC的凋亡。双荧光素酶报告实验用于验证OIP5-AS1和TLR4的关系。染色质免疫沉淀(ChIP)实验分析用于验证OIP5-AS1启动子区组蛋白的H3K27乙酰化修饰。结果与健康对照和未处理的NEC相比,OIP5-AS1和TLR4在AR患者鼻黏膜组织和IL-13刺激的NEC中均表达升高。敲减OIP5-AS1可降低IL-13诱导的NEC的TLR4水平,而过表达OIP5-AS1可增加IL-13处理的NEC的TLR4水平。敲减OIP5-AS1可降低IL-13处理的NEC凋亡率及GM-CSF、eotaxin-1和MUC5AC的分泌,而过表达TLR4可部分逆转敲减OIP5-AS1对NEC凋亡及GM-CSF、eotaxin-1和MUC5AC表达的影响。此外,H3K27ac在OIP5-AS1的启动子区域显著富集,H3K27乙酰化可促进OIP5-AS1在IL-13诱导的NEC中的表达。结论H3K27乙酰化修饰促进OIP5-AS1转录并通过上调TLR4诱导AR中NEC凋亡。 展开更多
关键词 H3K27 oip5-as1 TLR4 鼻黏膜上皮细胞(NEC)
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LncRNA OIP5-AS1在高糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞上皮-间质转分化中的作用
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作者 陈璐 陈中腾 +1 位作者 杨佩浓 王莎莎 《中国中西医结合肾病杂志》 2024年第9期764-767,I0001,I0002,共6页
目的:腹膜纤维化是终末期肾病患者腹膜透析治疗引起的一种严重并发症。上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)是早期腹膜纤维化的一个促成因素。本研究旨在探讨长链非编码RNA(LncRNA)OIP5-AS1在高糖培养的大鼠腹膜... 目的:腹膜纤维化是终末期肾病患者腹膜透析治疗引起的一种严重并发症。上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)是早期腹膜纤维化的一个促成因素。本研究旨在探讨长链非编码RNA(LncRNA)OIP5-AS1在高糖培养的大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)中的作用及相关机制。方法:用OIP5-AS1 siRNA转染RPMC,然后用高糖(high glucose,HG)孵育。应用Transwell法测定RPMC的迁移能力。通过免疫荧光和α-SMA抗体评估RPMC的转分化能力。应用RT-qPCR分析OIP5-AS1、α-SMA、波形蛋白、E-钙黏蛋白、TGF-β_(1)、CTGF和Ⅰ型胶原的基因表达。结果:在HG孵育的RPMC中OIP5-AS1的表达升高。OIP5-AS1沉默降低了HG处理后RPMC的迁移能力,减弱了HG诱导的EMT和转分化。此外,OIP5-AS1沉默降低RPMC分泌的TGF-β_(1),并抑制TGF-β_(1)、CTGF和Ⅰ型胶原的mRNA表达。结论:LncRNA OIP5-AS1通过TGF-β_(1)途径调节EMT、转分化以及迁移。OIP5-AS1是一种新发现的LncRNA,可能与腹膜纤维化的EMT过程有关。 展开更多
关键词 腹膜纤维化 腹膜间皮细胞 lncrna oip5-as1 TGF-β_(1) 上皮-间质转化
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LncRNA OIP5-AS1调节miR-186a-5p促进肝细胞癌凋亡及糖酵解
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作者 臧书宁 杨正波 吴惧 《中国实验诊断学》 2024年第11期1351-1356,共6页
目的 探讨lncRNA OIP5-AS1在肝细胞癌(HCC)中的表达及其对肿瘤发展的影响,并揭示其潜在的分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别检测LncRNA OIP5-AS1和miR-186a-5p在肝癌组织、癌旁组织的表达以及肝癌细胞系HepG2、Hep3B、Hu... 目的 探讨lncRNA OIP5-AS1在肝细胞癌(HCC)中的表达及其对肿瘤发展的影响,并揭示其潜在的分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别检测LncRNA OIP5-AS1和miR-186a-5p在肝癌组织、癌旁组织的表达以及肝癌细胞系HepG2、Hep3B、Huh-7和正常肝细胞系LO2中的表达情况。Pearson相关分析评估LncRNA OIP5-AS1与miR-186a-5p表达水平的相关性。双荧光素酶报告实验检测LncRNA OIP5-AS1与miR-186a-5p的关系。si-OIP5-AS1转染HepG2和Huh-7细胞系,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blot检测糖酵解关键蛋白的表达。结果 与癌旁组织相比,OIP5-AS1在HCC组织中显著高表达,而miR-186a-5p表达则下调(P<0.05)。细胞实验中得到同样结果。Pearson相关分析显示OIP5-AS1的表达水平与miR-186a-5p的表达水平呈负相关(P<0.05);双荧光素酶报告实验显示,使用miR-186-5p模拟物共转染Huh7和HepG2细胞,可显著降低OIP5-AS1-WT的活性。而OIP5-AS1-MUT的荧光素酶活性无明显改变(P<0.05);流式细胞实验表明,与si-NC组相比,si-OIP5-AS1组的Huh-7和HepG2细胞凋亡率显著升高(P<0.05);Western blot结果显示,与si-NC组相比,si-OIP5-AS1组的GLUT-1和ALDH2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论 lncRNA OIP5-AS1在肝癌细胞中处于高表达状态,通过下调lncRNA OIP5-AS1可促进miR-186a-5p表达,进而促进细胞凋亡抑制细胞糖酵解,抑制HCC的进展。 展开更多
关键词 长链非编码RNA oip5-as1 HCC
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lncRNA OIP5-AS1通过海绵吸附miR-143-3p调控COL1A1促进胃癌发展
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作者 刘锐 褚伟伟 +1 位作者 余明军 王海明 《浙江中西医结合杂志》 2022年第9期805-810,815,共7页
目的探究长链非编码RNA(lncRNA)Opa相互作用蛋白5反义RNA1(OIP5-AS1)对胃癌发展的调控机制。方法qRT-PCR检测lncRNA OIP5-AS1在正常胃细胞系(GES-1)和胃癌细胞系(AGS和SGC7901)中的表达水平;构建OIP5-AS1敲低载体、miR-143-3p抑制剂(miR... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)Opa相互作用蛋白5反义RNA1(OIP5-AS1)对胃癌发展的调控机制。方法qRT-PCR检测lncRNA OIP5-AS1在正常胃细胞系(GES-1)和胃癌细胞系(AGS和SGC7901)中的表达水平;构建OIP5-AS1敲低载体、miR-143-3p抑制剂(miR-143-3p inhibitor)以及Ⅰ型胶原α1(COL1A1)敲低载体并转染胃癌细胞系,运用CCK-8实验、伤口愈合实验、Transwell实验检测lncRNA OIP5-AS1、miR-143-3p、COL1A1在胃癌细胞增殖、迁移、侵袭中的作用;采用双荧光素酶报告基因、qRT-PCR、Western blot实验检测lncRNA OIP5-AS1以及miR-143-3p、COL1A1之间的靶向调控作用。结果OIP5-AS1在胃癌细胞AGS、SGC7901中表达水平分别是GES-1细胞的6.10和5.53倍,差异有统计学意义(P<0.01)。同时,敲低OIP5-AS1会抑制胃癌细胞增殖[AGS:(0.71±0.07)比(1.20±0.11);SGC7901:(1.02±0.10)比(1.80±0.10),P均<0.05]、迁移[AGS:(29.01±3.68)%比(72.04±6.82)%;SGC7901:(23.97±2.24)%比(62.02±3.73)%,P均<0.01]和侵袭[AGS:(35.68±6.96)个比(278.33±11.85)个;SGC7901:(62.74±12.77)个比(248.65±12.03)个,P均<0.01]。双荧光素酶报告基因证实OIP5-AS1靶向作用miR-143-3p并下调其表达水平,miR-143-3p可负调控COL1A1的表达(P<0.01)。进一步研究发现,敲降OIP5-AS1通过靶向上调miR-143-3p对COL1A1的抑制作用,抑制胃癌细胞增殖[AGS:(0.73±0.05)比(1.14±0.10);SGC7901:(1.21±0.09)比(1.59±0.09),P均<0.01]、迁移[AGS:(28.00±4.32)%比(73.67±4.50)%;SGC7901:(24.33±2.05)%比(67.67±4.11)%,P均<0.01]和侵袭[AGS:(57.00±6.16)个比(261.33±16.42)个;SGC7901:(65.00±7.26)个比(249.33±10.66)个,P均<0.01]。结论lncRNA OIP5-AS1通过海绵吸附miR-143-3p进而上调COL1A1促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,为胃癌临床诊断与治疗提供了潜在的标靶。 展开更多
关键词 胃癌 增殖 迁移 侵袭 lncrna oip5-as1 miR-143-3p COL1A1
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干扰LncRNA OIP5-AS1对人乳腺癌细胞迁移、上皮间充质转化及Notch1表达的影响
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作者 刘金丽 秦福霞 +4 位作者 杜鹃 杨月 刘野 王红艳 郭素芬 《牡丹江医学院学报》 2022年第3期8-11,共4页
目的 探讨干扰LncRNAOIP5-AS1对人乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移、上皮间充质转化及Notch1表达的影响。方法 培养MDA-MB-231细胞,转染LncRNA OIP5-AS1 siRNA为LncRNA OIP5-AS1 siRNA组,转染NC siRNA的为NC siRNA组,未作任何处理的为Control... 目的 探讨干扰LncRNAOIP5-AS1对人乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移、上皮间充质转化及Notch1表达的影响。方法 培养MDA-MB-231细胞,转染LncRNA OIP5-AS1 siRNA为LncRNA OIP5-AS1 siRNA组,转染NC siRNA的为NC siRNA组,未作任何处理的为Control组;采用RT-qPCR方法检测各组细胞LncRNAOIP5-AS1的表达水平;采用细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力;Western blots法检测LncRNA OIP5-AS1被干扰后乳腺癌细胞上皮间充质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达变化;T-qPCR方法检测Notch1 mRNA的表达水平。结果 通过siRNA技术使LncRNA OIP5-AS1的表达受到抑制;LncRNA OIP5-AS1被干扰后,乳腺癌细胞的迁移能力降低,与Control组和NC siRNA组比,LncRNA OIP5-AS1 siRNA组细胞迁移能力受抑制更加明显(P<0.01);Western blots结果显示:与Control组和NC siRNA组相比,LncRNA OIP5-AS1 siRNA组细胞的E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),而Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05);Notch1 mRNA的表达也受到抑制(P<0.01)。结论 LncRNA OIP5-AS1很可能通过对Notch信号通路的调控,从而实现对乳腺癌细胞的迁移能力及上皮间充质转化的抑制作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 lncrna oip5-as1 迁移 上皮间充质转化 NOTCH
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lncRNA OIP5-AS1在脑缺血再灌注大鼠模型中的表达及对缺氧缺糖复供诱导的细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 林清江 魏冠 +1 位作者 杨锦锋 张国炳 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期454-460,共7页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)Opa相互作用蛋白5反义转录本1(OIP5-AS1)在脑缺血再灌注大鼠模型中的表达及其对缺氧缺糖复供(OGD/R)诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法构建脑缺血再灌注大鼠模型,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测脑... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)Opa相互作用蛋白5反义转录本1(OIP5-AS1)在脑缺血再灌注大鼠模型中的表达及其对缺氧缺糖复供(OGD/R)诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法构建脑缺血再灌注大鼠模型,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测脑组织中OIP5-AS1水平。PC12细胞分成Control组(空白对照)、OGD/R组(OGD/R处理)、Vector+OGD/R组(转染阴性对照载体,OGD/R处理)、OIP5-AS1+OGD/R组(转染OIP5-AS1过表达载体后以OGD/R处理)、OIP5-AS1+OGD/R+LY294002组[转染OIP5-AS1过表达载体,并以磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号抑制剂LY294002处理,之后进行OGD/R处理]。CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡变化,Western blot法检测细胞中Bax、Bcl-2、磷酸化的磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)、PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、Akt蛋白水平,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,DCFH-DA法检测活性氧(ROS)水平。结果脑缺血再灌注大鼠模型脑组织中OIP5-AS1表达水平降低。与Control组比较,OGD/R组PC12细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt降低,SOD活性降低,MDA和ROS水平升高(均P<0.05)。与Vector+OGD/R组比较,OIP5-AS1+OGD/R组PC12细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,细胞中Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt升高,SOD活性升高,MDA和ROS水平降低(均P<0.05)。与OIP5-AS1+OGD/R组比较,OIP5-AS1+OGD/R+LY294002组PC12细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt降低,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中Bax蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,SOD活性降低,MDA和ROS水平升高(均P<0.05)。结论OIP5-AS1在脑缺血再灌注大鼠模型中表达下调,上调OIP5-AS1可抑制OGD/R诱导的PC12细胞凋亡和氧化损伤,其机制与激活PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 oip5-as1 PI3K/Akt信号 脑缺血再灌注 细胞凋亡
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下调lncRNA OIP5-AS1可通过miR-217/USP7轴抑制肝癌细胞EMT及侵袭迁移 被引量:1
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作者 刘星 刘小梯 +1 位作者 符秋红 陈学东 《邵阳学院学报(自然科学版)》 2022年第3期94-103,共10页
目的探究lncRNA OIP5-AS1/miR-217/USP7分子轴对肝癌细胞EMT和侵袭迁移的调控作用。方法选取正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞系(MHCC97H,Hep3B,HepG2和HCCLM3),实时荧光定量PCR法检测正常肝细胞和肝癌细胞系中lncRNA OIP5-AS1的表达水平,Tr... 目的探究lncRNA OIP5-AS1/miR-217/USP7分子轴对肝癌细胞EMT和侵袭迁移的调控作用。方法选取正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞系(MHCC97H,Hep3B,HepG2和HCCLM3),实时荧光定量PCR法检测正常肝细胞和肝癌细胞系中lncRNA OIP5-AS1的表达水平,Transwell实验检测肝癌细胞在下调lncRNA OIP5-AS1的表达后其侵袭和迁移能力的变化,蛋白质印迹实验检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin,N-cadherin和Vimentin的表达情况。通过生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验预测并验证lncRNA OIP5-AS1、miR-217和USP7的靶向关系,蛋白质印迹和Transwell实验检测LncRNA OIP5-AS1/miR-217/USP7分子轴对肝癌细胞EMT和侵袭迁移能力的影响。结果lncRNA OIP5-AS1在肝癌细胞系中均明显高表达(P<0.05或P<0.01)。下调肝癌细胞中lncRNA OIP5-AS1的表达可明显抑制肝癌细胞EMT及侵袭迁移(P<0.05);lncRNA OIP5-AS1靶向结合miR-217,且USP7是miR-217的靶基因(P<0.05);进一步研究证实,IncRNA OIP5-AS1通过miR-217上调USP7的表达水平,从而促进肝癌细胞的EMT和侵袭迁移(P<0.05或P<0.01)。结论IncRNA OIP5-AS1通过靶向miR-217/USP7分子轴促进肝癌细胞的EMT和侵袭迁移。 展开更多
关键词 肝癌 lncrna oip5-as1 miR-217 USP7 侵袭迁移 上皮-间质转化(EMT)
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H3K27ac促进lncRNA OIP5-AS1的表达进而诱导食管鳞癌放射抵抗的产生 被引量:3
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作者 王绩钊 刘颖 +6 位作者 张升阳 张嘉伟 屈航英 付军科 张广健 张明鑫 张晓智 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期639-644,共6页
目的本研究旨在探索放射相关H3组蛋白修饰调控OIP5-AS1的分子机制,从而为逆转食管鳞癌放射抵抗提供依据。方法本研究纳入137例西安医学院第一附属医院食管鳞癌患者标本。qRT-PCR及Western blotting检测目的基因的表达。划痕实验及CCK8... 目的本研究旨在探索放射相关H3组蛋白修饰调控OIP5-AS1的分子机制,从而为逆转食管鳞癌放射抵抗提供依据。方法本研究纳入137例西安医学院第一附属医院食管鳞癌患者标本。qRT-PCR及Western blotting检测目的基因的表达。划痕实验及CCK8实验检测细胞迁移及增殖能力。应用ChIP检测OIP5-AS1与H3K27ac的结合情况。结果OIP5-AS1在食管癌放疗抵抗患者中高表达;且促进食管癌抵抗细胞的增殖及转移能力。H3K27ac在食管癌放射抵抗细胞中高表达,且富集于OIP5-AS1的启动子区域。CBP在食管癌放射抵抗细胞中高表达;其抑制剂C646可明显抑制H3K27ac在OIP5-AS1启动子区域的富集。结论OIP5-AS1参与调控食管鳞癌放射抵抗。CBP通过促进H3K27ac与OIP5-AS1的结合,进而激活OIP5-AS1的表达,从而促进放射抵抗的产生。 展开更多
关键词 食管鳞癌 放射抵抗 oip5-as1 H3K27ac CBP
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LncRNA OIP5-AS1调节miR-25-3p/SOX4轴对高糖诱导的人肾小管上皮细胞生物学过程的影响 被引量:3
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作者 杨娟 张厚芬 +2 位作者 吴松 陈莹 罗华荣 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第2期131-138,共8页
目的 探讨长链非编码RNA Opa相互作用蛋白5-反义转录物1(lncRNA OIP5-AS1)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞增殖、凋亡和氧化应激损伤的影响及分子机制。方法 体外培养人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2,分为正常葡萄糖组(NG组)、高糖组(HG组)... 目的 探讨长链非编码RNA Opa相互作用蛋白5-反义转录物1(lncRNA OIP5-AS1)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞增殖、凋亡和氧化应激损伤的影响及分子机制。方法 体外培养人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2,分为正常葡萄糖组(NG组)、高糖组(HG组)、HG+si-NC组、HG+si-OIP5-AS1组、HG+miR-NC组、HG+miR-25-3p组、HG+si-OIP5-AS1+inhibitor-NC组、HG+si-OIP5-AS1+miR-25-3p inhibitor组。转染48 h后,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中lncRNA OIP5-AS1、miR-25-3p和性别决定区Y框蛋白4(SOX4)m RNA水平;CCK-8法检测细胞活力;检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;流式细胞术分析细胞凋亡情况;检测细胞中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)的产生;Western blot实验检测细胞中SOX4、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)和裂解的Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验确认miR-25-3p与lncRNA OIP5-AS1和SOX4的靶向关系。结果 与NG组相比,HG组细胞中lncRNA OIP5-AS1和SOX4 mRNA和蛋白表达水平升高,miR-25-3p水平降低(P<0.05);敲低lncRNA OIP5-AS1可显著下调SOX m RNA和蛋白水平,上调miR-25-3p水平,增加HK-2细胞活力和SOD、CAT活性以及Bcl-2蛋白水平,降低细胞凋亡率、LDH活性、MDA、ROS水平、Bax蛋白水平及Cleaved-Caspase-3/Caspase-3比值(P<0.05);上调miR-25-3p表达与敲低lncRNA OIP5-AS1的作用一致;在敲低lncRNA OIP5-AS1的基础上,下调miR-25-3p可明显减弱lncRNA OIP5-AS1敲低对高糖诱导的HK-2细胞氧化应激损伤的保护作用(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示lncRNA OIP5-AS1和miR-25-3p,以及miR-25-3p和SOX4之间存在结合位点。结论 lncRNA OIP5-AS1可能通过miR-25-3p/SOX4轴促进高糖诱导的HK-2细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾小管 上皮细胞 细胞凋亡 细胞增殖 miR-25-3p oip5-as1 性别决定区Y框蛋白4
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LncRNA OIP5-AS1靶向miR-511-3p抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:6
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作者 张耀森 卢国杰 +3 位作者 钟惠铃 高建伟 陈亚勇 胡瑞娟 《分子诊断与治疗杂志》 2021年第2期229-233,共5页
目的研究LncRNA OIP5-AS1对肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响以及作用机制。方法采用qRT-PCR法检测OIP5-AS1和miR-511-3p的表达量;采用MTT法检测细胞增殖;采用Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭;蛋白免疫印迹法检测CyclinD1、MMP-2... 目的研究LncRNA OIP5-AS1对肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响以及作用机制。方法采用qRT-PCR法检测OIP5-AS1和miR-511-3p的表达量;采用MTT法检测细胞增殖;采用Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭;蛋白免疫印迹法检测CyclinD1、MMP-2蛋白表达量;双荧光素酶报告实验检测OIP5-AS1和miR-511-3p的靶向关系。结果与正常细胞肺上皮细胞BEAS-2B相比,肺癌细胞A549、NCI-H23和NCI-H2170中OIP5-AS1表达显著增加,miR-511-3表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);敲低OIP5-AS1或者过表达miR-511-3p显著抑制了肺癌细胞A549的增殖、迁移和侵袭;OIP5-AS1可以靶向负调控miR-511-3p的表达,抑制miR-511-3p可以部分回复敲低OIP5-AS1对肺癌细胞A549的增殖、迁移和侵袭的影响(P<0.05)。结论 LncRNA OIP5-AS1通过靶向调控miR-511-3p的表达抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 oip5-as1 miR-511-3p 肺癌细胞 增殖 迁移 侵袭
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上调lncRNA OIP5-AS1通过靶向miR-181d-5p减少脂多糖诱导的心肌细胞损伤
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作者 陈健佳 张小梅 +2 位作者 马文斌 黄玉梅 赵强 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第5期588-592,共5页
目的探讨长链非编码(long non-coding RNA,lncRNA)OIP5-AS1在脂多糖诱导心肌细胞损伤中的作用及内在机制。方法将大鼠原代心肌细胞分为两组,分别感染空载慢病毒(对照组)和载有OIP5-AS1序列的慢病毒(实验组),实时定量聚合酶链反应(qRT-P... 目的探讨长链非编码(long non-coding RNA,lncRNA)OIP5-AS1在脂多糖诱导心肌细胞损伤中的作用及内在机制。方法将大鼠原代心肌细胞分为两组,分别感染空载慢病毒(对照组)和载有OIP5-AS1序列的慢病毒(实验组),实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证感染效率。对照组和实验组细胞分别滴加100μl浓度为10μmol/L脂多糖诱导心肌细胞损伤,采用ELISA法检测培养基中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的表达水平。采用CCK-8法和流式细胞术分别检测OIP5-AS1对大鼠原代心肌细胞的活力和凋亡的影响。生物信息学技术和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证OIP5-AS1的靶基因。qRT-PCR检测靶基因的表达。Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果与对照组比较,实验组细胞中OIP5-AS1表达显著增加(P<0.01)。脂多糖处理后,与对照组相比,实验组培养基中TNF-α和IL-1β的表达明显降低(均P<0.05)。与对照组相比,实验组细胞活力明显增加(P<0.01),细胞的凋亡明显降低(P<0.01)。OIP5-AS1的靶基因可能是miR-181d-5p,OIP5-AS1可与miR-181d-5p互补配对(P<0.01)。与对照组相比,实验组细胞中miR-181d-5p的表达明显降低(P<0.01)。与对照组相比,实验组细胞中Bcl-2蛋白表达增加,Bax和Caspase-3蛋白表达降低。结论上调OIP5-AS1可通过靶向抑制miR-181d-5p表达,减少脂多糖诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 oip5-as1 miR-181d-5p 细胞活力 细胞凋亡
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不稳定型心绞痛患者血清长链非编码RNA OIP5-AS1和微小RNA-137水平与心功能及心血管不良事件的相关性分析
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作者 邹永伟 胡小恋 郑玉群 《中国医药》 2025年第1期7-11,共5页
目的探讨不稳定型心绞痛(UA)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)OIP5-AS1和微小RNA-137(miR-137)水平与心功能及心血管不良事件的相关性。方法选取2022年5月至2023年8月海南省第二人民医院收治的102例UA患者为观察组。另选取本院同期102名... 目的探讨不稳定型心绞痛(UA)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)OIP5-AS1和微小RNA-137(miR-137)水平与心功能及心血管不良事件的相关性。方法选取2022年5月至2023年8月海南省第二人民医院收治的102例UA患者为观察组。另选取本院同期102名体检健康者为对照组。UA患者根据随访6个月心血管不良事件发生情况分为发生组(n=35)和未发生组(n=67)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清lncRNA OIP5-AS1、miR-137水平;利用Pearson法分析UA患者血清lncRNA OIP5-AS1与miR-137的相关性及lncRNA OIP5-AS1、miR-137与心功能指标的相关性;Logistic回归模型分析影响UA患者发生心血管不良事件的潜在因素;受试者工作特征曲线评估血清lncRNA OIP5-AS1、miR-137水平预测UA患者发生心血管不良事件的效能。结果观察组患者血清miR-137水平、左心室舒张末期内径(LVEDD)均明显高于/大于对照组,血清lncRNA OIP5-AS1、左心室射血分数(LVEF)水平均明显低于对照组(均P<0.001)。发生组患者血清miR-137水平、LVEDD均明显高于/大于未发生组,血清lncRNA OIP5-AS1、LVEF水平均明显低于未发生组(均P<0.001)。血清lncRNA OIP5-AS1与miR-137呈负相关(r=-0.555,P<0.001)。血清lncRNA OIP5-AS1与LVEDD呈负相关(r=-0.441,P<0.001),与LVEF呈正相关(r=0.479,P<0.001);血清miR-137与LVEDD呈正相关(r=0.466,P<0.001),与LVEF呈负相关(r=-0.472,P<0.001)。miR-137、LVEDD升高是影响UA患者发生心血管不良事件的风险因素,而lncRNA OIP5-AS1、LVEF水平升高是其保护因素(均P<0.05)。血清lncRNA OIP5-AS1、miR-137水平单独预测与二者联合预测UA患者发生心血管不良事件的曲线下面积分别为0.845、0.832、0.924,二者联合优于血清lncRNA OIP5-AS1(Z=2.146、P=0.032)、miR-137(Z=2.114、P=0.035)各自单独预测。结论发生心血管不良事件的UA患者血清lncRNA OIP5-AS1水平降低、miR-137水平升高,血清lncRNA OIP5-AS1、miR-137是影响UA患者发生心血管不良事件的潜在因素,且二者联合在预测UA患者发生心血管不良事件方面展现出更高的效能。 展开更多
关键词 不稳定型心绞痛 长链非编码RNA oip5-as1 微小RNA-137 心功能 心血管不良事件
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LncRNA OIP5-AS1对卵巢上皮IOSE80表型转化的影响
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作者 宋琳琳 孟焕然 +2 位作者 周丽娜 刘瑞 殷利军 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期649-656,共8页
目的探索lncRNA OIP5-AS1对卵巢上皮细胞IOSE80发生增殖、迁移、凋亡、侵袭和周期的表型的变化及可能的机制。方法患者临床资料数据收集自TCGA数据库及GEO数据库,R包分析后可视化OIP5-AS1在卵巢癌组织中表达上调,生存率与OIP5-AS1的相... 目的探索lncRNA OIP5-AS1对卵巢上皮细胞IOSE80发生增殖、迁移、凋亡、侵袭和周期的表型的变化及可能的机制。方法患者临床资料数据收集自TCGA数据库及GEO数据库,R包分析后可视化OIP5-AS1在卵巢癌组织中表达上调,生存率与OIP5-AS1的相关性采用Kaplan-Meier分析。以慢病毒载体构建OIP5-AS1过表达和沉默的IOSE80细胞模型,采用RT-qPCR验证OIP5-AS1的表达,CCK-8检测细胞增殖,Transwell检测侵袭,划痕试验检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Western blotting检测细胞侵袭相关蛋白E钙黏着蛋白(E-cadherin)和N钙黏着蛋白(Ncadherin)的表达及细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)和细胞周期蛋白G相关激酶(cyclin-G-related kinase,GAK)的表达。结果RT-qPCR结果显示成功构建OIP5-AS1过表达和沉默的IOSE80细胞株。CCK-8结果显示过表达OIP5-AS1促进IOSE80细胞的增殖。划痕试验结果显示过表达OIP5-AS1促进IOSE80细胞迁移。Transwell结果显示过表达OIP5-AS1会引起IOSE80细胞的侵袭力增强。流式细胞术结果表明OIP5-AS1的过表达使IOSE80细胞凋亡减弱并推动了细胞周期的进展。Western blotting结果显示过表达OIP5-AS1会下调E-cadherin的表达并上调N-cadherin的表达,同时过表达OIP5-AS1可提高CDK及GAK蛋白的表达。结论lncRNA OIP5-AS1通过上调CDK及GAK的表达进一步干预了IOSE80细胞周期的调控,进而实现对卵巢上皮细胞恶性表型的间接调控作用。 展开更多
关键词 卵巢上皮细胞 lncrna oip5-as1 细胞周期 表型
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LncRNA OIP5-AS1对食管鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响
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作者 许俊凯 刘剑雄 +1 位作者 陈奇松 赵云辉 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1573-1577,共5页
目的探讨LncRNA OIP5-AS1对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法将TE-1细胞随机分为对照组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-OIP5-AS1组(转染si-OIP5-AS1)、si-OIP5-AS1+NC inhibitor组(转染si-OIP5-AS1、NC inh... 目的探讨LncRNA OIP5-AS1对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法将TE-1细胞随机分为对照组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-OIP5-AS1组(转染si-OIP5-AS1)、si-OIP5-AS1+NC inhibitor组(转染si-OIP5-AS1、NC inhibitor)、si-OIP5-AS1+miR-129 inhibitor组(转染si-OIP5-AS1、miR-129 inhibitor)、NC mimic组(转染NC mimic)、miR-129 mimic组(转染miR-129 mimic)、miR-129 mimic+Vector组(转染miR-129 mimic、Vector)、miR-129 mimic+KRAS组[转染miR-129 mimic、Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)]。用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞中OIP5-AS1、miR-129的表达水平,用蛋白质印迹实验检测细胞中KRAS、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白的表达水平,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞的增殖情况,用原位末端标记(TUNEL)实验检测各组细胞的凋亡情况。结果对照组、si-NC组、si-OIP5-AS1组、si-OIP5-AS1+NC inhibitor组和si-OIP5-AS1+miR-129 inhibitor组细胞OIP5-AS1表达量分别为1.00±0.13、0.98±0.12、0.25±0.04、0.25±0.02和0.89±0.08,miR-129表达量分别为1.00±0.15、0.97±0.07、2.06±0.17、2.04±0.11和1.22±0.15,72 h光密度(OD)分别为1.16±0.12、1.11±0.09、0.58±0.03、0.58±0.05和0.94±0.10。NC mimic、miR-129 mimic、miR-129 mimic+Vector、miR-129 mimic+KRAS组的KRAS蛋白相对表达水平分别为1.08±0.07、0.41±0.06、0.40±0.06和1.03±0.10,72 h OD值分别为1.17±0.10、0.59±0.03、0.60±0.04和0.90±0.05。si-NC组的上述指标与si-OIP5-AS1组比较,si-OIP5-AS1+NC inhibitor组的上述指标与si-OIP5-AS1+miR-129 inhibitor组比较,NC mimic组的上述指标与miR-129 mimic组比较,miR-129 mimic+Vector组的上述指标与miR-129 mimic+KRAS组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论OIP5-AS1可通过调节miR-129靶向KRAS,促进ESCC细胞增殖和上皮间质转化。 展开更多
关键词 长链非编码RNA oip5-as1 食管癌 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因 微小RNA-129 增殖 上皮间质转化
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LncRNA OIP5-AS1对膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响 被引量:1
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作者 丁上书 高文胜 赵华才 《肿瘤预防与治疗》 2023年第8期617-622,共6页
目的:探讨lncRNA OIP5-AS1对膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:实验选取人正常膀胱细胞系(SV-HUC-1)和膀胱癌细胞系(EJ、T24、BIU87)为研究对象,采用Real-time PCR检测细胞lncRNA OIP5-AS1的表达。选取lncRNA OIP5-AS1表达... 目的:探讨lncRNA OIP5-AS1对膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:实验选取人正常膀胱细胞系(SV-HUC-1)和膀胱癌细胞系(EJ、T24、BIU87)为研究对象,采用Real-time PCR检测细胞lncRNA OIP5-AS1的表达。选取lncRNA OIP5-AS1表达较高的T24细胞进行后续实验,设置组别为control组、siRNA-NC组、siRNAOIP5-AS1组、Vector组、OIP5-AS1组,通过CCK-8检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Real-time PCR检测细胞lncRNA OIP5-AS1的表达,Western blot检测细胞Vimentin、E-Cadherin蛋白表达。结果:与SV-HUC-1细胞相比,lncRNA OIP5-AS1在膀胱癌细胞中的表达明显升高,T24细胞表达量较高(P<0.05)。与control组相比,siRNA-OIP5-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力明显降低,Vimentin蛋白表达明显降低,E-Cadherin蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:降低lncRNA OIP5-AS1表达可能通过调节上皮间质转化抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 膀胱癌 lncrna oip5-as1 细胞侵袭 细胞迁移 细胞增殖
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长链非编码RNA OIP5-AS1促进结直肠癌细胞上皮-间质转化
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作者 孙健 俞建康 +1 位作者 段妍西 周建平 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第10期877-881,共5页
目的探究长链非编码RNA(lncRNA)OIP5-AS1对结直肠癌转移的作用及其机制。方法采用实时定量PCR检测结直肠癌细胞系(SW480、HCT116、HT-29、Caco-2)中OIP5-AS1的表达,选择高表达细胞系进行表达沉默。结直肠癌细胞系随机转染对照序列(NC组... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)OIP5-AS1对结直肠癌转移的作用及其机制。方法采用实时定量PCR检测结直肠癌细胞系(SW480、HCT116、HT-29、Caco-2)中OIP5-AS1的表达,选择高表达细胞系进行表达沉默。结直肠癌细胞系随机转染对照序列(NC组)、干扰序列1(OIP5-AS1 siRNA1组)或干扰序列2(OIP5-AS1 siRNA2组)。用Transwell实验检测细胞迁移能力;Western blotting检测OIP5-AS1对上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin表达的影响;免疫荧光分析OIP5-AS1对E-cadherin、N-cadherin蛋白表达和细胞定位的影响。结果与低侵袭性HT-29和Caco-2细胞相比,高侵袭性SW480和HCT116细胞中OIP5-AS1的表达显著增高(P<0.05)。OIP5-AS1表达沉默后,SW480和HCT116细胞迁移能力减弱。与对照组相比,沉默OIP5-AS1后SW480和HCT116细胞中E-cadherin蛋白表达增加,N-cadherin和Vimentin蛋白表达减少。结论OIP5-AS1可能通过诱导结直肠癌细胞上皮-间质转化和迁移,促进结直肠癌的转移。 展开更多
关键词 结直肠癌 oip5-as1 上皮-间质转化 转移
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LncRNA GAS5-AS1靶向miR-106a-5p调控结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭
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作者 余周 胡满溢 戴剑 《世界华人消化杂志》 CAS 2024年第7期525-533,共9页
背景长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)生长停滞特异性转录本5反义RNA(growth arrest specific transcript 5 antisense RNA,GAS5-AS1)被发现在多种癌症中扮演肿瘤抑制因子的作用.但是其在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)进... 背景长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)生长停滞特异性转录本5反义RNA(growth arrest specific transcript 5 antisense RNA,GAS5-AS1)被发现在多种癌症中扮演肿瘤抑制因子的作用.但是其在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)进展中的作用和机制尚不清楚.目的探讨LncRNA GAS5-AS1靶向miR-106a-5p在CRC进展中的作用.方法实时荧光定量聚合酶链反应分析LncRNA GAS5-AS1和miR-106a-5p在43对CRC组织和癌旁组织样本中的表达.分别转染pcDNA、pcDNA-LncRNA GAS5-AS1、anti-miR-NC、anti-miR-106a-5p、si-NC、si-LncRNA GAS5-AS1、pcDNA-LncRNA GAS5-AS1+miR-NC、pcDNA-LncRNA GAS5-AS1+miR-106a-5p mimics至HCT8细胞.细胞计数试剂盒-8法检测细胞活力;Transwell小室法检测迁移和侵袭细胞数.通过双荧光素酶报告实验确定LncRNA GAS5-AS1和miR-106a-5p的靶向关系.结果与癌旁组织比较,CRC组织中LncRNA GAS5-AS1表达降低(P<0.05),miR-106a-5p表达升高(P<0.05).与转染pcDNA比较,转染pcDNA-LncRNA GAS5-AS1后HCT8细胞活力、迁移、侵袭、miR-106a-5p表达显著降低(P<0.05).与转染anti-miR-NC比较,转染anti-miR-106a-5p后HCT8细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P<0.05).与转染si-NC比较,转染si-LncRNA GAS5-AS1后miR-106a-5p表达水平显著升高(P<0.05).与转染miR-NC比较,转染miR-106a-5p能显著降低LncRNA GAS5-AS1-WT载体的荧光素酶活性,表明miR-106a-5p是LncRNA GAS5-AS1的直接靶点.与转染pcDNA-LncRNA GAS5-AS1+miR-NC比较,转染pcDNA-LncRNA GAS5-AS1+miR-106a-5p mimics后HCT8细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著升高(P<0.05).结论LncRNA GAS5-AS1通过靶向miR-106a-5p来抑制CRC细胞增殖、迁移和侵袭. 展开更多
关键词 结直肠癌 lncrna GAS5-as1 miR-106a-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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LncRNA PSMA3-AS1调节miR-186-5p/SOX4轴对神经母细胞瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 安艳晓 焦晗亮 +1 位作者 祁艳卫 仲智勇 《中国癌症防治杂志》 CAS 2024年第6期715-721,共7页
目的探索长链非编码RNA人蛋白酶体α亚基3型的反义RNA1(long non-coding RNA PSMA3-AS1,lncRNA PSMA3-AS1)对神经母细胞瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及对微小RNA-186-5p(microRNA-186-5p,miR-186-5p)/性别决定区Y框蛋白4(sex determi... 目的探索长链非编码RNA人蛋白酶体α亚基3型的反义RNA1(long non-coding RNA PSMA3-AS1,lncRNA PSMA3-AS1)对神经母细胞瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及对微小RNA-186-5p(microRNA-186-5p,miR-186-5p)/性别决定区Y框蛋白4(sex determining region Y box protein 4,SOX4)轴的调控机制。方法利用LipofectamineTM3000试剂将si-PSMA3-AS1及其阴性对照、miR-186-5p inhibitor及其阴性对照分别转染至人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中,随机分为Control组(未转染质粒)、si-NC组(转染si-PSMA3-AS1阴性对照)、si-PSMA3-AS1组(转染si-PSMA3-AS1)、si-PSMA3-AS1+miR-NC组(共转染si-PSMA3-AS1和miR-186-5p inhibitor阴性对照)、si-PSMA3-AS1+miR-186-5p inhibitor组(共转染si-PSMA3-AS1和miR-186-5p inhibitor)。采用qRT-PCR法检测各组细胞中PSMA3-AS1、miR-186-5p和SOX4 mRNA的表达水平;Western blot检测各组转染细胞中SOX4蛋白的表达水平。采用CCK-8法、Transwell实验检测各组转染细胞的增殖、迁移及侵袭能力。采用生物信息学方法预测和双荧光素酶报告基因实验验证miR-186-5p与PSMA3-AS1和SOX4之间的靶向关系。结果相较于Control组和si-NC组,si-PSMA3-AS1组细胞中的PSMA3-AS1表达水平、细胞存活率、迁移及侵袭细胞数均降低(均P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,PSMA3-AS1能靶向负调控miR-186-5p,而miR-186-5p能靶向负调控SOX4。敲低PSMA3-AS1后细胞的miR-186-5p表达水平升高,而SOX4 mRNA和蛋白表达水平均降低(均P<0.001)。回补实验发现,相较于si-PSMA3-AS1+miR-NC组,si-PSMA3-AS1+miR-186-5p inhibitor组SOX4 mRNA及蛋白表达水平、细胞存活率、迁移及侵袭细胞数均升高(均P<0.001),而miR-186-5p表达水平降低(P<0.001)。结论敲低PSMA3-AS1可能通过调节miR-186-5p/SOX4轴抑制神经母细胞瘤细胞的增殖、迁移及侵袭行为。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 lncrna PSMA3-as1 miR-186-5p/SOX4轴 迁移 侵袭 增殖
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LncRNA IDH1-AS1 sponges miR-518c-5p to suppress proliferation of epithelial ovarian cancer cell by targeting RMB47
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作者 Juan Zhou Yiran Xu +8 位作者 Luyao Wang Yu Cong Ke Huang Xinxing Pan Guangquan Liu Wenqu Li Chenchen Dai Pengfei Xu Xuemei Jia 《The Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2024年第1期51-65,共15页
Long noncoding RNA(lncRNA)IDH1 antisense RNA 1(IDH1-AS1)is involved in the progression of multiple cancers,but its role in epithelial ovarian cancer(EOC)is unknown.Therefore,we investigated the expression levels of ID... Long noncoding RNA(lncRNA)IDH1 antisense RNA 1(IDH1-AS1)is involved in the progression of multiple cancers,but its role in epithelial ovarian cancer(EOC)is unknown.Therefore,we investigated the expression levels of IDH1-AS1 in EOC cells and normal ovarian epithelial cells by quantitative real-time PCR(qPCR).We first evaluated the effects of IDH1-AS1 on the proliferation,migration,and invasion of EOC cells through cell counting kit-8,colony formation,EdU,transwell,wound-healing,and xenograft assays.We then explored the downstream targets of IDH1-AS1 and verified the results by a dual-luciferase reporter,qPCR,rescue experiments,and Western blotting.We found that the expression levels of IDH1-AS1 were lower in EOC cells than in normal ovarian epithelial cells.High IDH1-AS1 expression of EOC patients from the Gene Expression Profiling Interactive Analysis database indicated a favorable prognosis,because IDH1-AS1 inhibited cell proliferation and xenograft tumor growth of EOC.IDH1-AS1 sponged miR-518c-5p whose overexpression promoted EOC cell proliferation.The miR-518c-5p mimic also reversed the proliferation-inhibiting effect induced by IDH1-AS1 overexpression.Furthermore,we found that RNA binding motif protein 47(RBM47)was the downstream target of miR-518c-5p,that upregulation of RBM47 inhibited EOC cell proliferation,and that RBM47 overexpressing plasmid counteracted the proliferation-promoting effect caused by the IDH1-AS1 knockdown.Taken together,IDH1-AS1 may suppress EOC cell proliferation and tumor growth via the miR-518c-5p/RBM47 axis. 展开更多
关键词 lncrna IDH1-as1 epithelial ovarian cancer miR-518c-5p RBM47
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