lncRNA SNHG4通过EP300-SNHG4-GPX4轴抑制乳腺癌细胞铁死亡

目的探讨lncRNA SNHG4在乳腺癌中的表达以及调控乳腺癌细胞铁死亡的作用机制。方法收集2017年1月—2018年12月于我院乳腺外科进行手术治疗的100例乳腺癌患者癌组织及距肿瘤边缘3~5 cm的癌旁组织,应用RT-PCR技术分析SNHG4在乳腺癌组织及配对癌旁组织中的表达。构建SNHG4敲降的乳腺癌MDA-MB-468细胞系及过表达SNHG4的乳腺癌Hs578T细胞系,CCK-8法测定SNHG4对乳腺癌细胞增殖能力的影响,应用铁含量测定试剂盒及MDA测定试剂盒检测铁及ROS改变,Western blot实验检测GPX4及EP300蛋白表达,分析EP300与SNHG4及SNHG4与GPX4表达的相关性。结果SNHG4在乳腺癌组织中表达高于癌旁组织(P<0.01),且在侵袭转移能力强的Basal-Like型及ER(-)乳腺癌中高表达(P<0.01),SNHG4高表达与乳腺癌患者的总生存期(OS)及无病生存期(DFS)短相关(P<0.01)。敲降SNHG4导致细胞活力降低(P<0.01),且该作用可被铁死亡抑制剂逆转。机制方面,SNHG4通过上调GPX4表达抑制铁死亡,SNHG4上游可受到组蛋白乙酰基转移酶EP300的正向调控,EP300与SNHG4的表达正相关(P<0.01)。结论SNHG4在乳腺癌中高表达且可通过EP300-SNHG4-GPX4轴抑制乳腺癌细胞铁死亡。

lncRNA SNHG4/miR-152-3p对HepG2细胞增殖、凋亡及免疫因子的影响

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)SNHG4调控miR-152-3p对肝癌细胞增殖、凋亡及免疫因子的影响。方法:qRT-PCR检测肝癌细胞(HepG2、SNU-398、Hep3B)及永生化正常肝细胞THLE-2中SNHG4和miR-152-3p表达水平。将HepG2细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-SNHG4组(转染si-SNHG4)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-152-3p组(转染miR-152-3p)、si-SNHG4+anti-miR-NC组(共转染si-SNHG4与anti-miR-NC)、si-SNHG4+anti-miR-152-3p组(共转染si-SNHG4与anti-miR-152-3p)。qRT-PCR检测SNHG4和miR-152-3p表达水平;CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blot法检测PCNA、Bcl-2、Bax蛋白表达;ELISA法检测TNF-α、IL-6表达水平;双荧光素酶报告实验验证SNHG4和miR-152-3p靶向关系。结果:与永生化正常肝细胞THLE-2比较,肝癌细胞HepG2、SNU-398、Hep3B内SNHG4表达水平增加(P<0.05),miR-152-3p表达水平降低(P<0.05);沉默SNHG4或过表达miR-152-3p可降低HepG2细胞活性,降低HepG2细胞中PCNA蛋白、Bcl-2蛋白、TNF-α、IL-6表达水平(P<0.05),增加细胞凋亡率,上调Bax蛋白表达(P<0.05)。SNHG4靶向负调控miR-152-3p的表达,抑制miR-152-3p可逆转沉默SNHG4对HepG2细胞增殖、凋亡和免疫因子表达的影响。结论:lncRNA SNHG4可靶向负调控miR-152-3p抑制HepG2细胞增殖和免疫因子表达,促进细胞凋亡。

利用生物信息技术分析LncRNA SNHG4与成人软组织肉瘤患者预后的相关性

目的使用公开数据研究LncRNA SNHG4与成人软组织肉瘤预后的相关性.方法根据LncRNA SNHG4表达将成人软组织肉瘤患者分为高表达组和低表达组,比较两组人群临床特征分布差异、生存分析及COX回归分析;使用基因组富集分析进行功能分析.结果成人软组织肉瘤中SNHG4表达分组中的残余肿瘤差异有统计学意义(P<0.01).生存分析显示SNHG4高表达组比低表达组的总生存低(P=0.001).单因素COX回归分析显示SNHG4表达与总生存正相关(P<0.001).多因素COX回归分析显示SNHG4是成人软组织肉瘤总生存独立相关因素(P=0.006).基因组富极分析表明,肌细胞生成、参与G2/M检查点、E2F转录因子的靶标、丝分裂纺锤体组装和被KRAS激活下调相关基因在SNHG4高表达组中富集.结论LncRNA SNHG4是提示成人软组织肉瘤患者不良预后的潜在分子标志物.

lncRNA SNHG4与miR-148a在肝癌患者中的表达及其对预后的影响

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)核仁小RNA宿主基因4(small nucleolar RNA host gene 4,SNHG4)与微小核糖核酸-148a(miR-148a)在肝癌患者中的表达量,并分析二者与预后的关系。方法 选取2016年9月—2019年4月河北省秦皇岛市第一医院收治的161例肝癌患者为研究对象,取肝癌组织、癌旁组织检测lncRNA SNG4、miR-148a表达水平,观察二者与肝癌病理特征的关系。随访24个月,记录患者的累积生存情况,并分成生存组与死亡组,比较两组lncRNA SNHG4、miR-148a表达水平,利用Pearson线性相关分析二者相关性,绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析二者评估肝癌预后的曲线下面积(area under the curve,AUC)。结果 患者肝癌组织中lncRNA SNHG4相对表达量高于癌旁组织[(7.93±2.15)vs(2.01±0.76),t=32.940,P<0.01]。肝癌组织中miR-148a相对表达量低于癌旁组织[(0.64±0.27)vs(1.37±0.31),t=22.532,P<0.01]。同lncRNA SNHG4低表达(lncRNA SNHG4<7.93)组比较,lncRNA SNHG4高表达(lncRNA SNHG4≥7.93)组肿瘤≥5 cm(56.82%vs 34.25%,χ^(2)=8.170,P=0.004)、肝内转移(32.95%vs 10.96%,χ^(2)=10.906,P=0.001)、临床分期Ⅲ期(42.04%vs 13.70%,χ^(2)=19.412,P<0.01)、低分化(39.68%vs 6.85%,χ^(2)=14.231,P<0.01)、多发肿瘤(56.82%vs 26.03%,χ^(2)=15.447,P<0.01)、微血管侵犯(32.95%vs 12.33%,χ^(2)=9.414,P=0.002)所占比例均高于lncRNA SNHG4低表达组。同miR-148a高表达(miR-148a≥0.64)组比较,miR-148a低表达(miR-148a<0.64)组肿瘤最大径≥5 cm(58.44%vs 35.71%,χ^(2)=8.339,P=0.004)、肝内转移(35.06%vs 11.90%,χ^(2)=12.175,P<0.01)、临床分期Ⅲ期(40.26%vs 19.05%,χ^(2)=16.284,P<0.01)、低分化(27.27%vs 13.10%,χ^(2)=5.071,P=0.024)、多发肿瘤(58.44%vs 28.57%,χ^(2)=14.636,P<0.01)、微血管侵犯(33.77%vs 14.29%,χ^(2)=8.455,P=0.004)所占比例均高于miR-148a高表达组。随访24个月内,死亡30例,占18.63%,生存组lncRNA SNHG4相对表达量低于死亡组[(7.53±0.95)vs(9.68±0.40),t=12.128,P<0.01]。生存组miR-148a相对表达量高于死亡组[(0.68±0.23)vs(0.45±0.08),t=5.392,P<0.01]。Pearson相关分析提示肝癌患者lncRNA SNHG4与miR-148a表达成负相关(r=-0.746,P<0.01)。肝癌组织中lncRNA SNHG4、miR-148a表达量单独与联合评估肝癌预后的AUC分别为0.784、0.770、0.888。结论 肝癌组织中lncRNA SNHG4呈过表达,miR-148a表达则降低,二者表达成负相关,且均对预后评估有一定价值。