慢性心力衰竭患者外周血lncRNA SOX2-OT和miR-2355-3p表达水平及意义

目的 研究慢性心力衰竭(CHF)患者外周血长链非编码RNA(lncRNA)SOX2-OT和miR-2355-3p表达水平及意义。方法 选择90例CHF患者(CHF组)和100例体检健康者(对照组),CHF组按心功能分级分亚组。分析外周血lncRNA SOX2-OT、miR-2355-3p水平,及与超敏C反应蛋白(hs-CRP)、N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、左心室射血分数(LVEF)的相关性。比较不同lncRNA SOX2-OT和miR-2355-3p表达水平者主要不良心血管事件(MACE)。ROC曲线分析lncRNA SOX2-OT和miR-2355-3p对CHF患者MACE的预测价值。结果 与对照组比较,CHF组lncRNA SOX2-OT升高,miR-2355-3p降低,且NYHA分级越高,上述变化越明显(P<0.05)。lncRNA SOX2-OT、miR-2355-3p、hs-CRP、NT-proBNP、LVEF间存在相关性(P<0.05)。MACE发生率lncRNA SOX2-OT高表达者高于低表达者,miR-2355-3p低表达者高于高表达者(P<0.05)。lncRNA SOX2-OT、miR-2355-3p对CHF患者MACE具有良好的预测价值。结论 CHF患者外周血lncRNA SOX2-OT增加、miR-2355-3p降低,其变化对CHF预后具有预测价值。

lncRNA SOX2-OT通过调控miR-519e-5p影响乳腺癌细胞增殖及放射敏感性的分子机制研究

该研究探讨了lncRNA SOX2-OT对乳腺癌细胞增殖和放射敏感性的影响及可能机制。采用qRT-PCR法检测了正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和Bcap-37)中lncRNA SOX2-OT和miR-519e-5p表达。乳腺癌T47D细胞中lncRNA SOX2-OT和miR-519e-5p表达较MCF-10A细胞差异最显著(P<0.05),选择乳腺癌T47D细胞为研究对象。采用核质分离及RNA荧光原位杂交分析lncRNA SOX2-OT在T47D细胞内的定位。分别向T47D细胞转染lncRNA SOX2-OT小干扰RNA、miR-519e-5p模拟物、过表达RNA SOX2-OT、共转染lncRNA SOX2-OT小干扰RNA与miR-519e-5p抑制剂、共转染过表达RNA SOX2-OT与miR-519e-5p模拟物,即得si-lncRNA SOX2-OT组、si-NC组、miR-519e-5p组、miR-NC组、si-lncRNA SOX2-OT+anti-miR-519e-5p组、si-lncRNA SOX2-OT+anti-miR-NC组、RNA SOX2-OT+miR-519e-5p mimics组、si-lncRNA SOX2-OT+miR-NC组。采用CCK-8法观察细胞增殖活性,克隆形成实验计算细胞存活分数,并用单击多靶数学模型计算细胞增敏比,蛋白质印迹法检测细胞中CyclinD1和γ-H2AX蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SOX2-OT和miR-519e-5p的调控关系。结果显示,lncRNA SOX2-OT主要定位于T47D的细胞质。敲减lncRNA SOX2-OT或上调miR-519e-5p后,T47D细胞增殖活性和存活分数均降低(P<0.05),增敏比分别为1.195、1.343,细胞中CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05),γ-H2AX蛋白表达升高(P<0.05)。lncRNA SOX2-OT在T47D细胞中靶向负调控miR-519e-5p。下调或上调miR-519e-5p可分别逆转敲减或上调lncRNA SOX2-OT对T47D细胞增殖和放射敏感性的影响。总之,lncRNA SOX2-OT可能通过靶向负调控miR-519e-5p促进乳腺癌细胞增殖并降低乳腺细胞对放射的敏感性。

SOX2-OT/SOX2轴通过Gli1介导的上皮间质转化调控肺鳞癌H520细胞的迁移

目的 探讨SOX2-OT在肺鳞癌细胞H520迁移能力调控中的作用并阐明其机制。方法 选用肺癌细胞株中SOX2-OT高表达的肺鳞癌细胞H520,敲低其SOX2-OT转录水平,通过细胞划痕实验和穿膜实验对细胞迁移能力进行检测,qRT-PCR和免疫印迹方法检测上皮间质转化(EMT)相关因子的表达。通过过表达Gli1进一步分析SOX2-OT的作用机制;用miR-200c抑制剂或类似物转染细胞,分析SOX2-OT对Gli的正向调控机制。结果 敲低SOX2-OT抑制了H520细胞的侵袭和迁移能力,同时伴随着细胞EMT表型的变化。SOX2-OT能够正向调控转录因子Gli1,Gli1过表达可逆转SOX2-OT敲低对细胞迁移能力的抑制作用。miR-200c抑制剂可有效逆转SOX2-OT敲低导致的SOX2下调。结论 SOX2-OT/SOX2轴通过Gli1介导的EMT过程来调控肺鳞癌细胞H520的迁移和侵袭能力。

长链非编码RNA SOX2-OT通过靶基因miR-143-3p调控鼻咽癌增殖、迁移、侵袭及细胞周期的分子机制

目的探讨长链非编码RNA SOX2-OT(LncRNA SOX2-OT)对鼻咽癌细胞增殖、迁移、侵袭及细胞周期的影响及其作用机制。方法体外培养永生化鼻咽上皮细胞NP69与鼻咽癌细胞系6-10B、HNE-3、C666-1。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SOX2-OT与微小RNA-143-3p(miR-143-3p)的表达量;利用脂质体转染法分别将si-con、si-SOX2-OT、miR-con、miR-143-3p mimics、si-SOX2-OT与anti-miR-con、si-SOX2-OT与anti-miR-143-3p转染至HNE-3细胞。二苯基四氮唑溴盐(MTT)检测细胞增殖率;应用流式细胞仪检测细胞周期;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证SOX2-OT与miR-143-3p的靶向关系;Western印迹检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原(Ki)-67、细胞周期依赖蛋白激酶(CDK)2、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达量。结果SOX2-OT在鼻咽癌细胞中表达量明显升高,miR-143-3p的表达明显降低(P<0.05);转染si-SOX2-OT与miR-143-3p mimics可明显降低细胞增殖率、S期细胞比例及Ki-67、CDK2、MMP-2、MMP-9蛋白水平,提高G1期细胞比例,减少迁移及侵袭细胞数(均P<0.05);双荧光素酶报告实验证实SOX2-OT能够靶向结合miR-143-3p;共转染si-SOX2-OT与anti-miR-143-3p可明显降低转染si-SOX2-OT对细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论LncRNA SOX2-OT靶向调控miR-143-3p表达从而促进鼻咽癌增殖、迁移及侵袭,促进细胞周期进展,并可能作为鼻咽癌诊断及治疗的潜在靶点。

LncRNA SOX2OT对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症反应的影响及机制

目的探讨LncRNA SOX2OT对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症反应的影响及机制。方法以29例健康体检者为对照,采用qRT-PCR法检测51例肺炎患者外周血中LncRNA SOX2OT和miR-146a-5p表达。体外培养肺泡上皮细胞HEPApiC,分为对照(con)组和肺炎链球菌诱导组(model组),qRT-PCR法检测细胞中LncRNA SOX2OT和miR-146a-5p表达。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA SOX2OT和miR-146a-5p的调控关系。分别转染si-LncRNA SOX2OT或共转染si-LncRNA SOX2OT与anti-miR-146a-5p至HEPApiC细胞中,再用肺炎链球菌处理,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中IL-6、TNF-α和IL-10含量。结果肺炎患者外周血中LncRNA SOX2OT表达量高于健康对照组(P<0.05),miR-146a-5p表达量低于健康对照组(P<0.05)。model组HEPApiC细胞中LncRNA SOX2OT表达量高于con组(P<0.05),miR-146a-5p表达量低于con组(P<0.05)。LncRNA SOX2OT靶向结合miR-146a-5p,且下调LncRNA SOX2OT的HEPApiC细胞中miR-146a-5p表达升高(P<0.05)。下调LncRNA SOX2OT后,肺炎链球菌诱导的HEPApiC细胞凋亡率、细胞中Bax蛋白表达及细胞培养上清液中IL-6和TNF-α水平均降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达和IL-10水平均升高(P<0.05)。下调miR-146a-5p逆转了下调LncRNA SOX2OT对肺炎链球菌诱导的HEPApiC细胞凋亡和炎症反应的影响。结论下调LncRNA SOX2OT可能通过靶向上调miR-146a-5p抑制肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞HEPApiC凋亡和炎症反应。