猪lncRNA TCONS00791383对骨骼肌卫星细胞增殖分化的影响

为了探究lncRNA TCONS_00791383对猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。本研究利用qRT-PCR技术检测出生7 d内大白仔猪6种组织(心、脾、肺、肾、背肌和腿肌)以及猪骨骼肌卫星细胞增殖分化前后TCONS_00791383的表达水平;通过设计反义核苷酸(antisense oligonucleotides,ASO)片段在猪骨骼肌卫星细胞中对TCONS_00791383进行敲低,检测敲低TCONS_00791383之后增殖分化标志基因的表达量变化;通过trans(co-expression)对TCONS_00791383进行靶基因预测,使用DAVID对其进行GO富集和KEGG通路分析。结果显示,TCONS_00791383在猪心脏中表达量最高,在脾和肾组织中不表达。在骨骼肌卫星细胞从增殖到分化的过程中,TCONS_00791383的表达量逐渐上升,且在分化后30 h表达量达到最高。在使用ASO片段敲低TCONS_00791383之后,与对照组相比,在分化24 h,增殖标志基因Pax3、Pax7表达量显著或极显著降低(P<0.05,P<0.01),分化标志基因MyoG表达量极显著降低(P<0.01),在分化48 h,增殖标志基因Pax3表达量极显著降低(P<0.01),Pax7表达量显著降低(P<0.05),分化标志基因MyHC表达量显著降低(P<0.05)。预测得到的相关靶基因富集到AMPK、ATP等多个与骨骼肌卫星细胞增殖和分化过程相关的重要信号通路。本研究表明,lncRNA TCONS_00791383可能促进猪骨骼肌卫星细胞的增殖和分化。

Lnc RNA TCONS_00022381在胃癌组织中的表达及其对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响

目的检测LncRNA TCONS_00022381在胃癌组织中的表达,探讨其对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法qPCR法检测Lnc RNA TCONS_00022381(TCONS)在胃癌和癌旁组织中的表达;将胃癌细胞系SGC-7901细胞分为siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,采用脂质体2000转染法将靶向TCONS的siRNA和阴性对照si RNA分别转染,空白对照组不予任何处理。转染48h后采用q PCR法进行抑制效率的鉴定;MTT法检测各组细胞增殖情况;Western blot法检测各组细胞增殖核抗原PCNA的表达情况。结果LncRNA TCONS_00022381在胃癌组织中的相对表达显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Lnc RNA TCONS_00022381的si RNA能够显著抑制其在SGC-7901细胞中的表达(P<0.05)。MTT实验可见siRNA干扰组较阴性和空白组相比,增殖活力显著下调(P<0.05),PCNA的表达显著下调(P<0.05)。结论LncRNA TCONS_00022381在胃癌组织中显著高表达,对胃癌细胞具有促进增殖的作用。

LncRNA TCONS_00003757在甲状腺乳头状癌中的作用

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)TCONS_00003757在甲状腺乳头状癌中的表达意义以及对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、侵袭能力的影响。方法收集2017年10月至2018年3月于唐山市工人医院手术切除的甲状腺乳头状癌标本以及对应的癌旁正常组织共60例,采用实时定量PCR技术检测甲状腺乳头癌组织中LncRNA TCONS_00003757的表达水平,并分析其与患者临床病理资料的关系。应用小干扰RNA(siRNA)沉默TPC-1细胞中LncRNA TCONS_00003757和ST3GAL5的表达,通过MTT、细胞侵袭实验、划痕实验检测LncRNA TCONS_00003757和ST3GAL5对甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响,应用Western印迹法检测LncRNA TCONS_00003757对ST3GAL5表达的影响。结果LncRNA TCONS_00003757在甲状腺乳头状癌组织中表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05),并与有无淋巴结转移和腺外侵犯显著相关(P<0.05)。LncRNA TCONS_00003757在TPC-1细胞中的表达水平显著高于正常人甲状腺滤泡上皮Nthy-ori 3-1细胞(P<0.05);沉默LncRNA TCONS_00003757和ST3GAL5的表达,抑制了甲状腺癌TPC-1细胞的增殖、侵袭和迁移,并且沉默LncRNA TCONS_00003757可降低ST3GAL5的表达(P<0.05)。结论LncRNA TCONS_00003757在甲状腺乳头状癌中表达显著增加,且与甲状腺乳头状癌的发生发展相关。沉默LncRNA TCONS_00003757可能通过降低ST3GAL5的表达抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。