下调lncRNA LOXL1-AS1表达对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)类赖氨酰氧化酶1反义RNA1(LOXL1-AS1)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR检测lncRNA LOXL1-AS1、miR-28-5p和IGF-1在乳腺癌细胞(MCF-7细胞)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A细胞)及收集的55例乳腺癌组织和癌旁正常组织中的表达量。采用lncRNA LOXL1-AS1 siRNA、miR-28-5p inhibitor、IGF-1 siRNA分别转染MCF-7细胞,MTT法检测MCF-7细胞的增殖活力,Transwell分析MCF-7细胞的侵袭情况,流式细胞仪检测MCF-7细胞凋亡情况。生物信息学软件(miRanda)和双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA LOXL1-AS1和miR-28-5p之间的作用靶点及相关性,TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-28-5p与IGF-1之间的作用靶点及相关性;pcDNA-LOXL1-AS1与miR-28-5p mimics共同转染MCF-7细胞后,MTT法检测MCF-7细胞的增殖活力,Transwell分析MCF-7细胞的侵袭情况,流式细胞仪检测MCF-7细胞凋亡情况。结果MCF-7细胞内lncRNA LOXL1-AS1和IGF-1表达高于MCF-10A细胞(P<0.01),miR-28-5p表达低于MCF-10A细胞(P<0.01)。与癌旁组织相比,乳腺癌组织中lncRNA LOXL1-AS1和IGF-1表达明显升高(P<0.01),miR-28-5p表达明显降低(P<0.01)。转染lncRNA LOXL1-AS1 siRNA或IGF-1 siRNA后,MCF-7细胞增殖活力降低,细胞侵袭数目减少,细胞凋亡率增加(均P<0.01)。lncRNA LOXL1-AS1靶向miR-28-5p,miR-28-5p靶向IGF-1;miR-28-5p表达下调后,MCF-7细胞增殖活力提高,细胞侵袭数目增加,细胞凋亡率减少(P<0.05);pcDNA-LOXL1-AS1与miR-28-5p mimics共同转染MCF-7细胞后,MCF-7细胞增殖活力提高,侵袭数目增加,细胞凋亡率减少(均P<0.05)。结论lncRNA LOXL1-AS1在MCF-7细胞中表达上调,下调lncRNA LOXL1-AS1表达通过影响miR-28-5p/IGF-1轴抑制了乳腺癌增殖和侵袭。

绝经后骨质疏松症差异表达lncRNAs及其靶基因抑瘤素M在外周血的表达研究

目的探讨绝经后骨质疏松症差异表达lncRNAs及其靶基因抑瘤素M(oncostatin M,OSM)在绝经后骨质疏松症外周血的表达及其意义。方法在前期lncRNA-mRNA芯片检测绝经后骨质疏松症差异lncRNAs并进行共表达分析的基础上,利用blat软件分析lncRNA TTC28-AS1、linc-IRF2BP2-1、linc-FAM126B-1靶基因;RNAfold预测其二级结构;随机选择绝经后妇女受试者,检测骨密度,正常骨密度妇女25例为对照组,骨质疏松症患者25例为骨质疏松症组;定量PCR检测两组人群外周血lncRNA TTC28-AS1、linc-IRF2BP2-1、linc-FAM126B-1及抑瘤素M的表达。结果blat软件预测lncRNA TTC28-AS1、linc-IRF2BP2-1、linc-FAM126B-1的靶基因为OSM,相关系数分别为0.8506(P=0.0037)、0.9314(P=0.0003)及0.9222(P=0.0004);RNAfold预测3个lncRNAs均具有多个茎环、多分枝内部环结构;lncRNA TTC28-AS1、linc-IRF2BP2-1、linc-FAM126B-1及其靶基因抑瘤素M在骨质疏松症组中表达水平均显著低于对照组(P值均小于0.05)。结论lncRNA TTC28-AS1、linc-IRF2BP2-1、linc-FAM126B-1及其靶基因抑瘤素M表达下调可能与绝经后骨质疏松症存在相关性。