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沉默lncRNA XIST对阿霉素诱导的扩张型心肌病的影响及其机制
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作者 薛松妍 薛强 +3 位作者 王方圆 周倩 姜铭 马静 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第2期140-149,共10页
目的 探究长链非编码RNA X-无活性特异性转录物(lncRNA XIST)对阿霉素诱导的扩张型心肌病(DCM)大鼠心肌纤维化和心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法 采用阿霉素诱导法建立DCM大鼠模型,将DCM大鼠分为模型组、sh-NC组和sh-XIST组,每组10只... 目的 探究长链非编码RNA X-无活性特异性转录物(lncRNA XIST)对阿霉素诱导的扩张型心肌病(DCM)大鼠心肌纤维化和心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法 采用阿霉素诱导法建立DCM大鼠模型,将DCM大鼠分为模型组、sh-NC组和sh-XIST组,每组10只;另取10只健康SD大鼠设为对照组。采用超声影像系统检测各组大鼠心脏功能指数左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)和左室射血分数(LVEF),采用苏木素伊红染色和Masson三色染色检测大鼠心肌组织病理学变化,TUNEL检测大鼠心肌细胞凋亡水平。采用阿霉素诱导H9c2细胞系构建DCM细胞模型,将DCM细胞分为模型组、sh-NC组、sh-XIST组、sh-XIST+miR-NC组和sh-XIST+miR-149-5p inhibitor组,未经阿霉素处理的H9c2细胞作为对照组。采用双荧光素酶报告试验分析XIST、miR-149-5p和血小板源性生长因子C(PDGFC)的靶向关系。采用流式细胞术检测心肌细胞凋亡水平。采用RT-qPCR检测大鼠心肌组织和H9c2细胞中XIST、miR-149-5p和PDGFC表达水平。采用Western blot检测大鼠心肌组织和H9c2细胞中PDGFC、α-SMA、collagenⅠ和TGF-β1表达水平。结果 (1)与sh-NC组比较,sh-XIST组大鼠心肌组织中XIST水平及PDGFC的mRNA和蛋白水平均降低(P<0.01),LVESD、LVEDD、TUNEL阳性细胞率以及α-SMA、collagenⅠ和TGF-β1蛋白水平均降低(P<0.05),miR-149-5p水平和LVEF水平均升高(P<0.01);心肌细胞坏死和组织纤维化均减少。(2)与sh-NC组比较,sh-XIST组H9c2细胞凋亡率、XIST水平、PDGFC mRNA和蛋白水平以及α-SMA、collagenⅠ和TGF-β1蛋白水平均降低(P<0.05),miR-149-5p表达水平升高(P<0.05)。与sh-XIST+miR-NC组比较,sh-XIST+miR-149-5p inhibitor组H9c2细胞凋亡率、PDGFC mRNA和蛋白水平以及α-SMA、collagenⅠ和TGF-β1蛋白水平均升高(P<0.05),miR-149-5p表达水平降低(P<0.05)。结论 沉默lncRNA XIST通过上调miR-149-5p表达和抑制PDGFC表达,进而抑制阿霉素诱导的DCM大鼠心肌纤维化和心肌细胞凋亡水平,从而改善DCM的发展。 展开更多
关键词 lncrna xist 扩张型心肌病 心肌纤维化 细胞凋亡 大鼠
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LncRNA XIST靶向miR-543对胶质瘤细胞增殖凋亡的作用机制研究
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作者 兰伟途 王万宏 +2 位作者 武峰 兰文达 何建昌 《临床神经外科杂志》 2023年第2期158-162,共5页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)XIST通过miR-543对胶质瘤细胞增殖凋亡的作用及机制。方法RT-PCR检测胶质瘤细胞株U251、T98G、U87-MG、A172、SW1783中XIST表达水平及si-XIST转染U251细胞后XIST与miR-543表达;在胶质瘤细胞U251中敲低XIST... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)XIST通过miR-543对胶质瘤细胞增殖凋亡的作用及机制。方法RT-PCR检测胶质瘤细胞株U251、T98G、U87-MG、A172、SW1783中XIST表达水平及si-XIST转染U251细胞后XIST与miR-543表达;在胶质瘤细胞U251中敲低XIST后,MTT法、流式细胞术检测胶质瘤细胞的增殖和凋亡情况;用双荧光素酶报告基因验证LncRNA XIST与miR-543的靶向关系。结果XIST在U251细胞中表达水平(0.79±0.08)最高,故以U251细胞进行后续实验;与XIST组[(2.35±0.17)、(0.37±0.05)]相比,si-XIST组U251细胞XIST表达水平(0.25±0.19)较低,miR-543表达水平(3.15±0.36)较高(P<0.05);与XIST组[(0.57±0.09)、(0.81±0.01)、(1.15±0.04)]相比,si-XIST组胶质瘤U251细胞A570在24、48、72 h[(0.22±0.02)、(0.31±0.03)、(0.55±0.04)]明显降低(P<0.05)。与XIST组(1.12±0.56)%相比,si-XIST组细胞凋亡率(35.64±4.31)%较高(P<0.05)。共转染XIST-wt和miR-543处理组中相对荧光素酶活性显著下降[(1.15±0.22)vs(0.22±0.03)](P<0.05)。结论干扰LncRNA XIST可通过靶向负调控miR-543表达,抑制胶质瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 lncrna xist miR-543 胶质瘤细胞 增殖 凋亡
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血清lncRNA XIST和miRNA-130a表达与脓毒症患者病情严重程度及患者预后的关系
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作者 刘维娜 杨志勇 《检验医学与临床》 CAS 2023年第17期2537-2542,共6页
目的研究脓毒症患者血清长非编码RNA X非活性特异性转录本(lncRNA XIST)和微小RNA(miRNA)-130a表达与脓毒症患者病情严重程度及预后的关系,以探究其临床意义。方法选取2021年1月至2022年12月西安国际医学中心医院收治的脓毒症患者73例... 目的研究脓毒症患者血清长非编码RNA X非活性特异性转录本(lncRNA XIST)和微小RNA(miRNA)-130a表达与脓毒症患者病情严重程度及预后的关系,以探究其临床意义。方法选取2021年1月至2022年12月西安国际医学中心医院收治的脓毒症患者73例作为研究对象,根据症状严重程度分为脓毒症组(52例)和脓毒性休克组(21例),另选取30例同时期在该院接受体检的健康者作为对照组。采用反转录聚合酶链反应检测血清lncRNA XIST和miRNA-130a表达水平,全自动生化仪检测C反应蛋白、白细胞计数、降钙素原、乳酸水平,并记录序贯器官衰竭(SOFA)评分、急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分,采用多因素Logistic回归进行危险因素分析;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清lncRNA XIST和miRNA-130a表达水平对脓毒症的预测价值。结果与对照组比较,脓毒症组和脓毒性休克组血清lncRNA XIST表达水平均升高,且脓毒性休克组高于脓毒症组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,脓毒症组和脓毒性休克组血清miRNA-130a表达水平均降低,且脓毒性休克组低于脓毒症组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,脓毒性休克、SOFA评分≥7.85分、APACHEⅡ评分≥19.55分、lncRNA XIST表达水平升高、miRNA-130a表达水平降低是脓毒症患者预后情况的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清lncRNA XIST和miRNA-130a联合诊断ROC曲线下面积大于各项指标单独检测,诊断价值理想。结论lncRNA XIST在脓毒症患者血清中表达明显增加,miRNA-130a在脓毒症患者血清中表达明显下降,两者联合诊断灵敏度和特异性更高,对预测脓毒症发生具有一定临床参考意义。 展开更多
关键词 lncrna xist miRNA-130a 脓毒症 预测价值
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lncRNA XIST靶向miR-150对LPS诱导的小鼠肺上皮MLE-12细胞凋亡和炎症因子分泌的影响 被引量:2
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作者 王慧敏 蔡施霞 +1 位作者 周震 隋娜 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期522-528,共7页
目的研究lncRNA XIST靶向miR-150对脂多糖(LPS)诱导的MLE-12细胞凋亡和炎症因子分泌的影响及机制。方法小鼠肺上皮MLE-12细胞分成Control、LPS(LPS处理)、sh-NC+LPS(转染shRNA control,给予LPS处理)、sh-XIST+LPS(转染XIST shRNA,给予LP... 目的研究lncRNA XIST靶向miR-150对脂多糖(LPS)诱导的MLE-12细胞凋亡和炎症因子分泌的影响及机制。方法小鼠肺上皮MLE-12细胞分成Control、LPS(LPS处理)、sh-NC+LPS(转染shRNA control,给予LPS处理)、sh-XIST+LPS(转染XIST shRNA,给予LPS处理)组,采用qRT-PCR方法检测XIST表达水平,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,采用Western blotting方法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白表达,利用TBA法检测MDA含量,利用黄嘌呤氧化法检测SOD活性,利用DCFH-DA法检测ROS水平,利用ELISA法分析培养液上清中IL-1β、TNF-α水平。利用生物信息学软件Starbase分析XIST的可能靶基因(miR-150),然后利用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。在MLE-12细胞中将XIST shRNA、miR-150 inhibitor共转染,然后给予LPS处理,同样测定细胞凋亡、氧化损伤指标、炎症因子分泌变化。结果与Control组比较,LPS组MLE-12细胞中XIST水平升高,细胞凋亡率和Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,ROS和MDA水平升高,SOD水平降低,细胞分泌的IL-1β、TNF-α增多;与sh-NC+LPS组比较,sh-XIST+LPSMLE-12组细胞中XIST水平降低,细胞凋亡率和Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,ROS和MDA水平降低,SOD水平升高,细胞分泌的IL-1β、TNF-α减少。下调XIST靶向促进miR-150表达。miR-150 inhibitor能够逆转XIST shRNA对LPS诱导的MLE-12细胞凋亡、氧化损伤指标、炎症因子分泌的作用。结论下调lncRNA XIST靶向miR-150可抑制LPS诱导的小鼠肺上皮MLE-12细胞凋亡和炎症因子分泌作用。 展开更多
关键词 lncrna xist 凋亡 炎症因子 LPS 肺上皮MLE-12细胞
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长春新碱通过lncRNA XIST/miR-485-5p调控宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制 被引量:2
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作者 刘宇 李延 雷玉荣 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第10期1949-1955,共7页
目的:探讨长春新碱对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其对lncRNA XIST/miR-485-5p通路的调控作用。方法:采用不同浓度的长春新碱处理宫颈癌细胞HeLa;pcDNA-NC、pcDNA-lncRNA XIST、miR-NC、miR-485-5p mimics分别转染入HeLa细胞;pcD... 目的:探讨长春新碱对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其对lncRNA XIST/miR-485-5p通路的调控作用。方法:采用不同浓度的长春新碱处理宫颈癌细胞HeLa;pcDNA-NC、pcDNA-lncRNA XIST、miR-NC、miR-485-5p mimics分别转染入HeLa细胞;pcDNA-NC、pcDNA-lncRNA XIST、miR-NC、miR-485-5p mimics、miR-NC+pcDNA-lncRNA XIST、miR-485-5p mimics+pcDNA-lncRNA XIST分别转染入HeLa细胞后加入长春新碱处理细胞。采用MTT实验检测细胞活力,Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力,qPCR法检测lncRNA XIST、miR-485-5p表达,双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA XIST与miR-485-5p的靶向关系,Western blotting法检测CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达。结果:与NC组比较,长春新碱不同剂量组细胞活力显著降低,迁移及侵袭细胞数减少,CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白水平降低,lncRNA XIST表达水平降低,miR-485-5p表达水平升高(均P<0.05)。与pcDNA-NC组比较,pcDNA-lncRNA XIST组细胞活力及CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平升高,迁移及侵袭细胞数增多(均P<0.05),而lncRNA XIST过表达可明显逆转长春新碱对HeLa细胞增殖、迁移及侵袭的作用。与miR-NC组比较,miR-485-5p组细胞活力及CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低,迁移及侵袭细胞数减少(均P<0.05),而miR-485-5p过表达可增强长春新碱对HeLa细胞增殖、迁移及侵袭的作用。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA XIST可竞争性结合miR-485-5p。与miR-NC+pcDNA-lncRNA XIST+高剂量组比较,miR-485-5p+pcDNA-lncRNA XIST+高剂量组细胞活力及CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低,迁移及侵袭细胞数减少(均P<0.05)。结论:长春新碱可通过调控lncRNA XIST/miR-485-5p而减弱宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 长春新碱 lncrna xist miR-485-5p 宫颈癌 增殖 迁移 侵袭
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LncRNA XIST通过海绵吸附miR-133a调控甲状腺癌细胞的增殖和凋亡 被引量:3
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作者 张娜 易茂林 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第8期917-924,共8页
目的探究LncRNA XIST对甲状腺癌细胞增殖、凋亡的调控机制。方法收集49例甲状腺癌手术患者的癌组织和癌旁组织,培养甲状腺上皮细胞系Nthy-ori 3-1和甲状腺癌细胞系TPC-1、FTC-133、SW579、WRO,采用qRT-PCR检测甲状腺癌组织和癌旁组织及... 目的探究LncRNA XIST对甲状腺癌细胞增殖、凋亡的调控机制。方法收集49例甲状腺癌手术患者的癌组织和癌旁组织,培养甲状腺上皮细胞系Nthy-ori 3-1和甲状腺癌细胞系TPC-1、FTC-133、SW579、WRO,采用qRT-PCR检测甲状腺癌组织和癌旁组织及各细胞中LncRNA XIST和miR-133a的表达;培养TPC-1和FTC-13细胞,将细胞分为Control组、DMSO组、oe-NC组、oe-XIST组、si-NC组、si-XIST组、oe-NC+NC mimic组、oe-XIST+NC mimic组、oe-NC+miR-133a mimic组及oe-XIST+miR-133a mimic组,RNA pull down检测LncRNA XIST和miR-133a的结合情况,MTT检测各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡,qRT-PCR检测LncRNA XIST和miR-133a的表达。结果与癌旁组织比较,甲状腺癌组织中LncRNA XIST表达降低,miR-133a表达升高(P<0.05);与甲状腺上皮细胞系Nthy-ori 3-1比较,TPC-1、FTC-133、SW579、WRO细胞中LncRNA XIST表达显著升高,miR-133a表达降低(P<0.05);与oe-NC组比较,oe-XIST组细胞48 h和72 h时增殖能力增强(P<0.05);与si-NC组比较,si-XIST组细胞48 h和72 h时增殖能力降低(P<0.05)。与oe-NC组比较,oe-XIST组细胞凋亡比例降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-XIST组细胞细胞凋亡比例升高(P<0.05);与oe-NC+NC mimic比较,oe-XIST+NC mimic组细胞中XIST表达升高,oe-NC+miR-133a mimic组细胞中miR-133a表达升高,oe-XIST+miR-133a mimic组细胞中XIST和miR-133a表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与oe-XIST+NC mimic比较,oe-XIST+miR-133a mimic组细胞中miR-133a表达显著升高(P<0.05)。结论Ln cRNA XIST在甲状腺癌细胞中过表达,其通过海绵吸附miR-133a,进而促进甲状腺癌细胞增殖和凋亡。 展开更多
关键词 海绵吸附 甲状腺肿瘤 增殖 凋亡 lncrna xist miR-133a
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lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为 被引量:5
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作者 吴瑞平 陈冠阳 陈志康 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1363-1370,共8页
目的:探讨lncRNA XIST通过miR-32-5p/果蝇Zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog2,EZH2)分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为。方法:收集2014年7月至2018年8月中南大学湘雅医院直肠肛门外科资料完整的结直肠癌患... 目的:探讨lncRNA XIST通过miR-32-5p/果蝇Zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog2,EZH2)分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为。方法:收集2014年7月至2018年8月中南大学湘雅医院直肠肛门外科资料完整的结直肠癌患者28例癌组织和配对的癌旁组织标本,采用qPCR检测结直肠癌组织及细胞系中lncRNA XIST和miR-32-5p的表达水平,双荧光素酶报告基因验证1ncRNA XIST、miR-32-5p和EZH2的靶向关系,并进一步通过WB检测EZH2的表达水平。CCK-8、Transwell及Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测HCT-8细胞增殖、迁移及凋亡情况。结果:lncRNA XIST在结直肠癌组织及细胞系中高表达,且在HCT-8细胞中表达最高(P<0.05或P<0.01)。双荧光素酶报告基因证实,lncRNA XIST靶向负调控miR-32-5p(P<0.05),且EZH2是miR-32-5p的靶基因。敲降1ncRNA XIST抑制HCT-8细胞增殖和迁移并诱导其凋亡(P<0.05或P<0.01);进一步实验证明,敲降lncRNA XIST上调miR-32-5p的表达水平,从而下调EZH2表达水平,进而抑制HCT-8细胞增殖和迁移并诱导其凋亡。结论:lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2分子轴促进HCT-8细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 结直肠癌 lncrna xist miR-32-5p 果蝇Zeste基因增强子同源物2 增殖 迁移 凋亡
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lncRNA XIST通过调控miR-337-3p/HOXC8轴促进胃癌的发展进程 被引量:13
8
作者 徐龙健 高建超 +4 位作者 郑景珍 赵志娟 钟轩 孙敬国 李东坤 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1134-1141,共8页
目的:探讨lncRNA XIST(XIST)通过调控miR-337-3p/HOXC8分子轴介导胃癌发展进程的分子机制。方法:选取2013年3月至2018年1月河北省唐山市开滦总医院普通外科手术切除的58例胃癌组织和对应的癌旁组织标本,以及人胃癌细胞系AGS、MGC803、HG... 目的:探讨lncRNA XIST(XIST)通过调控miR-337-3p/HOXC8分子轴介导胃癌发展进程的分子机制。方法:选取2013年3月至2018年1月河北省唐山市开滦总医院普通外科手术切除的58例胃癌组织和对应的癌旁组织标本,以及人胃癌细胞系AGS、MGC803、HGC27和人胃黏膜细胞GES-1,用qPCR检测胃癌组织和细胞系中XIST和miR-337-3p的表达水平。将XIST敲降载体、miR-337-3p mimics/inhibitor和HOXC8过表达载体转染进AGS细胞,用CCK-8、Transwell实验检测AGS细胞的增殖及侵袭能力,用WB检测HOXC8及上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达水平。用双荧光素酶报告基因验证XIST、miR-337-3p和HOXC8的靶向关系。结果:XIST在胃癌组织和细胞系中高表达(均P<0.01)。敲降XIST显著抑制AGS细胞的增殖、侵袭和EMT(P<0.05或P<0.01)。XIST靶向作用miR-337-3p并下调其表达,HOXC8是miR-337-3p的靶基因。敲降XIST通过靶向上调miR-337-3p对HOXC8表达的抑制作用,从而抑制AGS细胞增殖、侵袭和EMT(P<0.05或P<0.01)。结论:敲降XIST可抑制AGS细胞增殖、侵袭和EMT,其作用机制是通过靶向miR-337-3p并下调HOXC8的表达。 展开更多
关键词 胃癌 AGS细胞 增殖 上皮间质转化 lncrnaxist miR-337-3p HOXC8
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LncRNA XIST对顺铂诱导的肝癌细胞活力和凋亡的影响 被引量:2
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作者 吴伟 杨耀辉 +2 位作者 王亚奇 王艳瑛 唐强 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2021年第6期823-827,共5页
目的:探讨LncRNA XIST对顺铂(CDDP)诱导的肝癌细胞活力和凋亡的影响及其可能的机制。方法:用miRanda预测XIST和miR-133a结合位点,用双荧光素酶报告实验分析二者之间的靶向关系。将肝癌HepG2细胞用10μmol/L的CDDP处理48 h后,分别转染siR... 目的:探讨LncRNA XIST对顺铂(CDDP)诱导的肝癌细胞活力和凋亡的影响及其可能的机制。方法:用miRanda预测XIST和miR-133a结合位点,用双荧光素酶报告实验分析二者之间的靶向关系。将肝癌HepG2细胞用10μmol/L的CDDP处理48 h后,分别转染siRNA-NC和XIST-siRNA,或miR-133a抑制剂和抑制剂NC,或pcDNA-3.1(+)+mimic-NC、pcDNA-XIST+mimic-NC和pcDNA-XIST+miR-133a mimic,48 h后CCK-8法检测细胞活力,Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白和Wnt/β-catenin通路蛋白的表达;实时荧光定量PCR法检测XIST和miR-133a表达水平。结果:miRanda预测XIST与miR-133a存在结合位点,双荧光素酶报告实验证实二者存在靶向关系。与siRNA-NC组比较,XIST-siRNA组细胞Bax、Caspase-3、Caspase-9、Wnt和β-catenin蛋白表达降低,Bcl-2表达升高,细胞活力升高(P<0.05)。与抑制剂NC组比较,miR-133a抑制剂组Bax、Caspase-3、Caspase-9、Wnt和β-catenin蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下降,细胞活力降低(P<0.05)。与pcDNA-3.1(+)+mimic-NC组比较,pcDNA-XIST+mimic-NC组Bax、Caspase-3、Caspase-9、Wnt和β-catenin蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,细胞活力升高(P<0.05)。与pcDNA-3.1(+)+mimic-NC组相比,pcDNA-XIST+miR-133a mimic组Bax、Caspase-3和Caspase-9、Wnt和β-catenin、Bcl-2蛋白表达水平及细胞活力无明显改变(P>0.05)。结论:XIST可能通过调节miR-133a-Wnt/β-catenin轴促进CDDP诱导的HepG2细胞凋亡。 展开更多
关键词 lncrna xist miR-133a WNT/Β-CATENIN 肝癌 细胞活力 细胞凋亡
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LncRNA XIST调控miR-200b/ZEB1轴参与儿童急性髓系白血病阿柔比星耐药的机制研究 被引量:1
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作者 金亚 张教国 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期2450-2454,共5页
目的:研究LncRNA XIST调控miR-200b/ZEB1轴参与儿童急性髓系白血病(AML)阿柔比星耐药的机制。方法:以阿柔比星浓度递增法诱导建立人AML阿柔比星耐药细胞株K562/ADM,检测人AML细胞K562及K562/ADM细胞中LncRNA XIST表达。体外培养K562/AD... 目的:研究LncRNA XIST调控miR-200b/ZEB1轴参与儿童急性髓系白血病(AML)阿柔比星耐药的机制。方法:以阿柔比星浓度递增法诱导建立人AML阿柔比星耐药细胞株K562/ADM,检测人AML细胞K562及K562/ADM细胞中LncRNA XIST表达。体外培养K562/ADM细胞,随机分为对照组、LncRNA XIST inhibitor组、阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor阴性对照组、阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor组,分组转染并以药物处理后,检测各组细胞增殖凋亡情况;检测各组细胞LncRNA XIST、miR-200b、ZEB1、MDR1 mRNA表达水平和ZEB1、耐药蛋白P-gp蛋白表达水平。结果:相比K562细胞,LncRNA XIST在K562/ADM细胞中表达明显升高(P<0.05)。与对照组相比,阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor组细胞存活率明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05);LncRNA XIST inhibitor组、阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor阴性对照组上述指标无明显改变(P>0.05)。与LncRNA XIST inhibitor组相比,阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor组细胞存活率明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05)。与对照组、阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor阴性对照组分别相比,阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor组、LncRNA XIST inhibitor组LncRNA XIST、ZEB1及MDR1 mRNA表达水平、ZEB1及P-gp蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),miR-200b表达水平均明显升高(P<0.05);阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor阴性对照组细胞上述各指标无明显改变(P>0.05)。结论:LncRNA XIST可使儿童AML细胞产生耐药性,下调其表达可促进miR-200b表达,降低ZEB1表达,抑制耐药基因MDR1、P-gp表达,提高阿柔比星对AML细胞的杀伤。 展开更多
关键词 lncrna xist miR-200b/ZEB1轴 儿童急性髓系白血病 阿柔比星 耐药
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LncRNA XIST在急性髓系白血病中的表达及其临床意义 被引量:7
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作者 刘军 郑慧敏 +5 位作者 丁洋洋 李曼曼 胡林辉 蒲莲芳 陶千山 熊术道 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第9期1439-1443,共5页
目的探讨在急性髓系白血病(AML)患者中长链非编码RNA X染色体失活特异性转录因子(LncRNA XIST)的表达情况及其临床意义。方法收集105例AML初治组(AML)、20例AML化疗后完全缓解组(AML-CR)和20例缺铁性贫血(IDA)对照组(CON)的骨髓标本,实... 目的探讨在急性髓系白血病(AML)患者中长链非编码RNA X染色体失活特异性转录因子(LncRNA XIST)的表达情况及其临床意义。方法收集105例AML初治组(AML)、20例AML化疗后完全缓解组(AML-CR)和20例缺铁性贫血(IDA)对照组(CON)的骨髓标本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LncRNA XIST的表达量,分析3组之间的表达差异,探讨其表达水平与患者的临床特征及预后的相关性。结果与对照组比较, LncRNA XIST在初治AML组中低表达( P <0.001)。与初治的AML组比较,其在AML-CR组中表达明显上调( P <0.001),而AML-CR 组与对照组中LncRNA XIST表达水平的差异无统计学意义( P >0.05)。AML初治组中,LncRNA XIST的表达水平与AML分型急性髓细胞白血病部分成熟型-急性早幼粒细胞白血病/急性粒单核细胞白血病-急性单核细胞白血病(M2-M3/M4-M5)、有无髓外浸润、白细胞数及乳酸脱氢酶水平存在相关性。LncRNA XIST低表达组患者的生存率明显低于高表达组患者( P =0.018)。通过COX回归分析显示,LncRNA XIST和白球比可以作为AML独立预后因素。结论 LncRNA XIST在初治AML患者中低表达,化疗完全缓解中表达上调,且与预后相关,提示其有作为AML患者的预后标志物及治疗靶点的可能。 展开更多
关键词 长链非编码RNA lncrna xist 急性髓系白血病 预后
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乳腺癌MCF-7细胞中LncRNA XIST的表达及功能研究
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作者 侯霞 周永安 +8 位作者 田树雄 李超 李敏 任蕊蕊 韩雅馨 程建萍 李星星 李哲 白园 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第12期1062-1067,共6页
目的探讨lncRNA XIST在乳腺癌MCF-7细胞中的表达及其对MCF-7细胞功能的影响。方法qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及人乳腺癌MCF-7细胞中XIST的表达水平;利用瞬时转染技术在MCF-7细胞中过表达XIST,MTT法和Transwell小室法检测XIS... 目的探讨lncRNA XIST在乳腺癌MCF-7细胞中的表达及其对MCF-7细胞功能的影响。方法qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及人乳腺癌MCF-7细胞中XIST的表达水平;利用瞬时转染技术在MCF-7细胞中过表达XIST,MTT法和Transwell小室法检测XIST过表达后MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化情况;生物信息学预测并用qRT-PCR检测与XIST有潜在结合位点的miRNA表达变化情况;并在MCF-7细胞中瞬时转染miR-130b-3p Inhibitor,qRT-PCR检测细胞中XIST的表达水平。结果乳腺癌MCF-7细胞中XIST低表达(P<0.001),miR-130b-3p高表达(P<0.001)。XIST过表达可显著抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.001)、促进MCF-7细胞的迁移和侵袭,而且XIST过表达后MCF-7细胞中miR-130b-3p表达水平显著降低(P<0.01),miR-130b-3p低表达后MCF-7细胞中XIST表达水平显著增加(P<0.001)。结论乳腺癌MCF-7细胞中XIST和miR-130b-3p的表达呈负相关,且XIST过表达可显著抑制MCF-7细胞的增殖、促进迁移和侵袭。 展开更多
关键词 lncrna xist 乳腺癌 增殖 迁移 侵袭
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lncRNA XIST通过靶向miR-3666调控胃癌细胞增殖、侵袭转移机制 被引量:6
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作者 范渊 吴海龙(指导) +1 位作者 竹梦 周锐 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期964-968,共5页
目的:探讨lncRNA XIST对胃癌细胞增殖、侵袭转移的影响及分子机制。方法:收集武汉市第四医院30例胃癌患者癌组织及癌旁组织,培养正常胃黏膜上皮细胞MRG-1、胃癌细胞SGC-7901和AGS,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA XIST和miR-366... 目的:探讨lncRNA XIST对胃癌细胞增殖、侵袭转移的影响及分子机制。方法:收集武汉市第四医院30例胃癌患者癌组织及癌旁组织,培养正常胃黏膜上皮细胞MRG-1、胃癌细胞SGC-7901和AGS,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA XIST和miR-3666表达水平;通过敲减胃腺癌细胞AGS中lncRNA XIST表达以及下调miR-3666表达水平,分析lncRNA XIST及miR-3666对胃癌细胞的调控作用,将细胞AGS分为si-NC组、si-XIST组、miR-NC组、miR-3666组、si-XIST+antimiR-NC组、si-XIST+anti-miR-3666组;MTT检测细胞增殖情况;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA XIST和miR-3666的靶向关系。结果:与癌旁组织和正常胃黏膜上皮细胞MRG-1比较,胃癌组织和AGS、SGC-7901细胞中XIST表达水平升高,miR-3666表达水平降低(P<0.05)。敲除lncRNA XIST或过表达miR-3666,AGS细胞增殖能力减弱,迁移和侵袭能力降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。lncRNA XIST靶向调控miR-3666,抑制miR-3666逆转了XIST基因敲除对胃癌AGS细胞增殖、运动性及凋亡的影响。结论:敲除lncRNA XIST可通过上调miR-3666抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 lncrna xist miR-3666 胃癌 增殖 迁移 侵袭
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LncRNA XIST通过调控miR-186-5p促进非小细胞肺癌的增殖和侵袭实验研究 被引量:17
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作者 才昊 韩亮 李晓飞 《陕西医学杂志》 CAS 2020年第7期781-787,803,共8页
目的:探究LncRNA XIST通过调控miR-186-5p促进非小细胞肺癌增殖和侵袭的作用机制。方法:选用非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549、H1299、Calu-3及人支气管上皮细胞系BEAS-2B进行研究。采用RT-PCR检测NSCLC细胞系中LncRNA XIST表达情况。构... 目的:探究LncRNA XIST通过调控miR-186-5p促进非小细胞肺癌增殖和侵袭的作用机制。方法:选用非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549、H1299、Calu-3及人支气管上皮细胞系BEAS-2B进行研究。采用RT-PCR检测NSCLC细胞系中LncRNA XIST表达情况。构建XIST siRNA转染敲降XIST表达,采用MTT法、Transwell实验及Western blot法验证其对NSCLC细胞增殖、侵袭及相关蛋白表达的影响。构建包含miR-186-5p结合位点的pmir GLO-XIST-Wt和pmir GLO-XIST-Mut基因片段报告载体,采用荧光素基因实验进行两者结合验证,并利用RIP实验及营救实验检测验证XIST和miR-186-5p靶向调控关系。结果:NSCLC细胞系A549、H1299、Calu-3中LncRNA XIST表达水平均显著高于人支气管上皮细胞系BEAS-2B(P<0.05)。敲降XIST表达后A549、H1299细胞中LncRNA XIST表达显著降低,miR-186-5p表达显著增高(P<0.05)。过表达miR-186-5p可显著降低A549、H1299细胞中XIST表达。敲降XIST显著抑制A549、H1299细胞增殖、侵袭能力,降低CCND1、PCNA、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05)。XIST是miR-186-5p的靶向基因。XIST与miR-186-5p存在于相同RISC复合物中,miR-186-5p以Ago2依赖的方式调控XIST。过表达miR-186-5p后A549细胞增殖、侵袭能力显著降低,逆转XIST过表达后促进A549细胞增殖、侵袭。结论:LncRNA XIST在非小细胞肺癌中高表达,LncRNA XIST通过调控miR-186-5p进而抑制XIST表达影响NSCLC的生物学行为。 展开更多
关键词 lncrna xist miR-186-5p 非小细胞肺癌 增殖 侵袭 作用机制
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LncRNA XIST负调控miR-196b对急性髓系白血病细胞KG1a生物行为的影响
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作者 王筝 马杏凡 +2 位作者 万春超 张岚 王静波 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1318-1323,共6页
目的:探讨lncRNA X染色体失活特异性转录因子(XIST)对急性髓系白血病细胞KG1a增殖和凋亡的影响及其相关作用机制。方法:收集北京航天中心医院2017年1月至2019年5月收治的41例急性髓系白血病患者,以及20例符合缺铁性贫血国际标准的患者... 目的:探讨lncRNA X染色体失活特异性转录因子(XIST)对急性髓系白血病细胞KG1a增殖和凋亡的影响及其相关作用机制。方法:收集北京航天中心医院2017年1月至2019年5月收治的41例急性髓系白血病患者,以及20例符合缺铁性贫血国际标准的患者作为对照组。将KG1a细胞分为pcDNA、pcDNA-XIST、pcDNA-XIST+miR-NC和pcDNA-XIST+miR-196b共4组。实时荧光定量PCR检测XIST和miR-196b表达水平,CCK-8检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot法检测cleaved-caspase3、pro-caspase3、Bax、Bcl-2蛋白表达,双荧光素酶报告实验检测XIST和miR-196b的靶向关系。结果:急性髓系白血病组患者骨髓细胞中lncRNA XIST表达水平明显低于缺铁性贫血组(P<0.001)。KG1a细胞pcDNA-XIST组lncRNA XIST表达水平、G_(0)/G_(1)期细胞所占比例、细胞凋亡率及cleaved-caspase3和Bax的表达水平较pcDNA组均明显升高(均P<0.001),而miR-196b表达水平、细胞活性、S期细胞比例、pro-caspase3和Bcl-2表达水平均明显降低(均P<0.001)。pcDNA-XIST+miR-196b组细胞活性、S期细胞所占比例、pro-caspase3和Bcl-2表达水平较pcDNA-XIST组均明显升高(均P<0.001),而G_(0)/G_(1)期细胞所占比例、细胞凋亡率、cleaved-caspase3和Bax表达水平均明显降低(均P<0.001)。结论:过表达lncRNA XIST通过下调miR-196b表达抑制急性髓系白血病细胞KG1a增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 lncrna xist miR-196b 急性髓系白血病 增殖 凋亡
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LncRNA XIST、miR-204及FN1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义
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作者 孙茂林 张文伟 +6 位作者 姜立伟 臧传善 秦作荣 王效军 孙彦 刘明波 邱杰 《临床医学进展》 2021年第7期3033-3046,共14页
目的:探讨LncRNA XIST,miR-204及FN1在PTC组织和癌旁组织及LncRNA XIST在PTC细胞系中的表达及意义。方法:应用Real-time PCR技术检测20例甲状腺乳头状癌和其癌旁组织中LncRNA XIST,miR-204及FN1的表达情况,应用QPCR检测3株甲状腺癌细胞... 目的:探讨LncRNA XIST,miR-204及FN1在PTC组织和癌旁组织及LncRNA XIST在PTC细胞系中的表达及意义。方法:应用Real-time PCR技术检测20例甲状腺乳头状癌和其癌旁组织中LncRNA XIST,miR-204及FN1的表达情况,应用QPCR检测3株甲状腺癌细胞系(BCPAP, TPC-1, KTC-1) LncRNA XIST、miR-204-5p的表达水平,应用荧光原位杂交(FISH)检测PTC细胞系BCPAP中LncRNA XIST的表达定位,应用双荧光素酶报告基因检测人293T细胞的LncRNA XIST、miR-204及FN1相互作用。结果:与癌旁组相比,PTC癌组织组的LncRNA XIST的表达水平显著上调(p 【0.05),PTC癌组织组的FN1的表达水平极显著上调(p 【0.01),而PTC癌组织组的miR-204-5p的表达水平极显著下调(p 【0.01),差异均具有统计学意义;BCPAP细胞的LncRNA XIST的表达水平最高,且miR-204-5p的表达水平最低;LncRNA XIST主要在细胞质中表达;LncRNA XIST与miR-204有相互作用(p 【0.05),FN1与miR-204有相互作用(p 【0.05)。结论:LncRNA XIST在甲状腺乳头状癌中高表达,miR-204在甲状腺乳头状癌中低表达,FN1在甲状腺乳头状癌中高表达;LncRNA XIST,miR-204及FN1相互作用,参与甲状腺乳头状癌的发生发展,并可为甲状腺乳头状癌潜在诊断标志物和治疗靶点的寻找提供理论依据,LncRNA XIST可能是甲状腺乳头状癌诊断和治疗的一个新靶点。 展开更多
关键词 lncrna xist基因 miR-204基因 FN1基因 甲状腺乳头状癌
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lncRNA XIST靶向miR-30b-5p调控高糖条件下肾小管上皮细胞损伤的机制 被引量:3
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作者 王婷 刘宗明 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第2期438-442,共5页
目的探讨lncRNA XIST对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及潜在的作用机制。方法肾小管上皮细胞HK-2分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-XIST组、高糖+miR-NC组、高糖+miR-30b-5p组、高糖+si-XIST+anti-miR-NC组、高糖+si-XI... 目的探讨lncRNA XIST对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及潜在的作用机制。方法肾小管上皮细胞HK-2分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-XIST组、高糖+miR-NC组、高糖+miR-30b-5p组、高糖+si-XIST+anti-miR-NC组、高糖+si-XIST+anti-miR-30b-5p组,qRT-聚合酶链反应(PCR)检测miR-30b-5p和XIST mRNA表达水平;Western印迹法检测蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的表达;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果相较于对照组,高糖组XIST mRNA表达水平显著升高,miR-30b-5p表达水平显著下降(P<0.05)。lncRNA XIST靶向调控miR-30b-5p的表达;下调XIST或miR-30b-5p过表达均可抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡和TNF-α和IL-6的释放(P<0.05)。抑制miR-30b-5p表达逆转了下调XIST表达对高糖诱导的HK-2细胞损伤的保护作用。结论lncRNA XIST可抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡,改善高糖诱导的HK-2细胞损伤,其机制可能与miR-30b-5p的表达有关。 展开更多
关键词 lncrna xist miR-30b-5p 肾小管上皮细胞 高糖 凋亡
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lncRNA XIST预警卵巢癌耐药和不良预后的应用价值探讨 被引量:4
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作者 陈翠兰 尹富强 《中国临床新医学》 2021年第5期497-502,共6页
目的探讨lncRNA XIST在预警卵巢癌耐药及临床不良预后的应用价值,为其作为肿瘤标志物应用于临床提供理论依据。方法基于Oncomine数据库卵巢癌表达谱芯片分析卵巢癌组织与正常卵巢组织的lncRNA XIST表达差异。基于GEO和TCGA数据库独立表... 目的探讨lncRNA XIST在预警卵巢癌耐药及临床不良预后的应用价值,为其作为肿瘤标志物应用于临床提供理论依据。方法基于Oncomine数据库卵巢癌表达谱芯片分析卵巢癌组织与正常卵巢组织的lncRNA XIST表达差异。基于GEO和TCGA数据库独立表达谱芯片,应用Kaplan-Meier plotter和ROC plotter分析lncRNA XIST与患者预后的关联性及其在预警化疗药物耐药的价值。应用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测lncRNA XIST在卵巢癌亲本细胞HeyA8及SKOV3、紫杉醇耐药细胞HeyA8-R及SKOV3-R和卡铂耐药细胞HeyA8-CBP和SKOV3-CBP中的表达情况。结果与正常卵巢组织相比,卵巢癌组织lncRNA XIST表达水平显著下调(P<0.05)。与lncRNA XIST高表达组相比,lncRNA XIST低表达组在总生存期(OS)、无进展生存期(PFS)和进展后生存期(PPS)方面的预后更差(P<0.05)。RT-qPCR检测结果显示,与卵巢癌敏感细胞HeyA8及SKOV3相比,lncRNA XIST在紫杉醇耐药细胞HeyA8-R和SKOV3-R及卡铂耐药细胞HeyA8-CBP和SKOV3-CBP中均显著下调(P<0.05)。与敏感组织相比,lncRNA XIST在耐药组织中的表达也显著下调,且其低表达潜在预警卵巢癌耐药(P<0.05)。进一步的ROC plotter分析结果显示,对于所有药物耐药,lncRNA XIST的预警截断值为8977;对于铂类药物耐药,lncRNA XIST的预警截断值为8977;对于紫杉醇耐药,lncRNA XIST的预警截断值为8245;对于铂类药物+紫杉醇耐药,lncRNA XIST的预警截断值为8245,均具有一定的预警价值(P<0.05)。结论lncRNA XIST有望作为卵巢癌化疗药物耐药和患者预后的预警标志物,具有临床应用价值。 展开更多
关键词 lncrna xist 卵巢癌 耐药 不良预后 肿瘤标志物
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Knockdown of lncRNA XIST prevents the epithelial-mesenchymal transition of TGF-β2-induced human lens epithelial cells via miR-124/Slug axis 被引量:1
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作者 XUE JIANG HONG ZHANG 《BIOCELL》 SCIE 2022年第3期785-794,共10页
Posterior capsular opacification(PCO)is linked to the pathological process of lens epithelial cells,which includes proliferation,migration,and epithelial-mesenchymal transition(EMT).Our goal was to investigate whether... Posterior capsular opacification(PCO)is linked to the pathological process of lens epithelial cells,which includes proliferation,migration,and epithelial-mesenchymal transition(EMT).Our goal was to investigate whether long noncoding RNA(lncRNA)XIST contributes to EMT via targeting miR-124/Slug axis in TGF-β2-induced SRA01/04 cells.EMT was induced by stimulating SRA01/04 cells with 10 ng/mL TGF-β2 for 24 h,and PCO microenvironment was simulated.The expressions levels of lncRNA XIST,miR-124,and Slug were measured by realtime polymerase chain reaction(RT-PCR)and western blot.The role and mechanism of lncRNA XIST in promoting EMT of TGF-β2-treated SRA01/04 cells were investigated by using cell transfection,cell counting kit-8(CCK-8),immunofluorescence staining,transwell assay,wound-healing assay,RT-PCR,western blot and dual-luciferase reporter assay.The expression of Slug and lncRNA XIST was markedly increased,while miR-124 was downregulated in TGF-β2-treated SRA01/04 cells compared with the control group.Knockdown of lncRNA XIST reduced EMT,migration,and cell viability in TGF-β2-induced SRA01/04 cells;moreover,it adversely modulated miR-124 and adjusted the expression of Slug in SRA01/04 cells,while these effects were diminished by co-transfection with AMOmiR-124.Our data demonstrated that lncRNA XIST functioned as a competitive endogenous RNA(ceRNA)of miR-124 to modulate the expression level of Slug,thereby modulating EMT,migration,and cell viability in SRA01/04 cells.In conclusion,lncRNA XIST has a crucial role in promoting TGF-β2-induced EMT via modulating the miR-124/Slug axis in SRA01/04 cells,and it may provide a novel therapeutic option for PCO treatment. 展开更多
关键词 lncrna xist miR-124 SLUG Posterior capsular opacification Epithelial-Mesenchymal Transition
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Prenatal Exposure to Perfluorooctane Sulfonate impairs Placental Angiogenesis and Induces Aberrant Expression of LncRNA Xist 被引量:1
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作者 CHEN Gang XU Lin Lin +7 位作者 HUANG Ye Fei WANG Qi WANG Bing Hua YU Ze Hua SHI Qiao Mei Hong Jia Wei LI Jing XU Li Chun 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2018年第11期843-847,共5页
Perfluorooctane sulfonate (PFOS) is a class of stable organic compounds with wide industrial,commercial, and consumer applications, such as in textiles, paper, pesticides, and shampoos;. It is readily absorbed, but ... Perfluorooctane sulfonate (PFOS) is a class of stable organic compounds with wide industrial,commercial, and consumer applications, such as in textiles, paper, pesticides, and shampoos;. It is readily absorbed, but poorly eliminated, with the elimination half-life of approximately 5 years;.Hence, there have been concerns regarding its potential damage to human health. Some studies 展开更多
关键词 In Prenatal Exposure to Perfluorooctane Sulfonate impairs Placental Angiogenesis and Induces Aberrant Expression of lncrna xist FIGURE
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