lncRNA UCA1通过抑制miRNA-203a对乳腺癌细胞化疗耐药作用的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌相关1(UCA1)基因通过抑制微小RNA-203a(miR-NA-203a)对乳腺癌细胞化疗耐药性的影响.方法选取MCF7、MCF7/5-FU细胞,采用UCA1 siRNA对两种细胞进行转染,分为MCF7干扰组、MCF7未干扰组和MCF7/5-FU干扰组、MCF7/5-FU未干扰组;采用不同浓度奥沙利铂处理干扰后MCF7细胞,取最佳抑制浓度的奥沙利铂处理干扰后MCF7、MCF7/5-FU细胞,采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCF7、MCF7/5-FU细胞中lncRNA UCA1的表达情况及干扰后MCF7、MCF7/5-FU细胞中miRNA-203a的表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测干扰后MCF7、MCF7/5-FU细胞的活力.结果 MCF7/5-FU细胞中lncRNA UCA1的相对表达量明显高于MCF7细胞(P﹤0.01);MCF7干扰组MCF7细胞的存活率明显低于MCF7未干扰组,miRNA-203a的相对表达量明显高于MCF7未干扰组(P﹤0.01);MCF7/5-FU干扰组MCF7/5-FU细胞的存活率明显低于MCF7/5-FU未干扰组,miRNA-203a的相对表达量明显高于MCF7/5-FU未干扰组(P﹤0.01).结论 LncRNA UCA1可通过抑制miRNA-203a表达增强乳腺癌细胞的化疗耐药性,增加乳腺癌细胞的活力.

干扰UCA1及抑制miR-185-5p对非小细胞肺癌β-Catenin通路的活化、自噬和存活影响

目的探究在非小细胞肺癌中,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)尿路上皮癌抗原1(urothelial carcinoma associated 1,UCA1)敲降miR-185-5p对β-Catenin通路的影响。方法选取非小细胞肺癌A549细胞为研究材料,设置A549空白对照组、sh-scramble阴性对照组、sh-UCA1干扰组、miR-185 inhibitor组和sh-UCA1+inhibitor组。Western blot验证体系中增殖、凋亡和自噬相关分子表达;qRT-PCR鉴定体系中lncRNA UCA1和miR-185-5p的表达;生物信息学软件和荧光素酶实验检测lncRNA UCA1和miR-185-5p之间结合性。BrdU染色鉴定细胞增殖,免疫荧光染色检测细胞中LC3^+细胞含量。结果在A549细胞中,lncRNA UCA1干扰后,UCA1表达量显著下降并促进miR-185-5p表达,有效抑制肺癌细胞增殖和自噬,促进凋亡发生(P<0.01);经生物信息学和双荧光素酶报告系统验证lncRNA UCA1和miR-185-5p有较强结合性;并进一步验证lncRNA UCA1可以有效抑制β-Catenin/TCF-4及Beclin 1和LC3Ⅱ表达,降低miR-185-5p对肺癌细胞增殖和自噬效果,减少细胞内LC3含量(P<0.01)。结论 lncRNA UCA1干扰后,可以有效降低UCA1对miR-185-5p的抑制效果,进而解除β-Catenin/TCF-4、Beclin 1和LC3Ⅱ受到的抑制作用,从而减少肺癌细胞自噬发生和减缓增殖。