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LncRNA CCAT1调节miR-155表达增强CD8^(+)T细胞对食管癌抗肿瘤活性的机制研究 被引量:3
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作者 周立远 叶玉祥 +1 位作者 林琳 王东阳 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第3期79-85,共7页
目的 研究长链非编码RNA结肠癌相关转录本1(long non-coding RNA colon cancer-associated transcript-1,LncRNA CCAT1)对CD8^(+)T细胞抗食管癌肿瘤活性的影响及其作用机制。方法 分离食管癌患者和健康受试者外周血单个核细胞(periphera... 目的 研究长链非编码RNA结肠癌相关转录本1(long non-coding RNA colon cancer-associated transcript-1,LncRNA CCAT1)对CD8^(+)T细胞抗食管癌肿瘤活性的影响及其作用机制。方法 分离食管癌患者和健康受试者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用qRT-PCR法分别检测PBMC中CCAT1和miR-155的表达。分别下调CCAT1和miR-155表达,采用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞凋亡率,Western blot检测Cleaved Caspase 3蛋白表达,qRT-PCR检测IL-2 mRNA和IFN-γ mRNA基因表达,分析CD8+T细胞对食管癌细胞的杀伤作用。采用miRanda和双荧光素酶实验研究CCAT1与miR-155之间的相互作用。分析上调LncRNA CCAT1靶向miR-155对CD8^(+)T细胞凋亡率、杀伤作用及其Eca-109细胞增殖和迁移的影响。结果 食管癌患者PBMCs中CCAT1表达(2.58±0.28)高于健康受试者(1.35±0.34),miR-155表达(0.53±0.09)低于健康受试者(1.54±0.29),差异具有统计学意义(t=12.04,21.05,均P <0.05)。下调CCAT1后,CD8^(+)T细胞凋亡率(12.05%±0.28%)明显低于si-control组(19.86±0.45)%,CD8^(+)T细胞的细胞杀伤活性(0.49±0.05)%明显高于si-control组(0.34%±0.02%),差异具有统计学意义(t=9.82,-17.54,均P<0.05)。si-CCAT1组细胞内Cleaved Caspase 3蛋白表达(0.32±0.09)低于si-control组(1.37±0.72),IL-2 mRNA(2.38±0.47)和IFN-γ mRNA(3.28±0.26)表达高于si-control组(1.12±0.23,1.28±0.37),差异具有统计学意义(t=-20.05,-18.29,-19.86,均P<0.05)。CCAT1和miR-155之间存在互补碱基对,双荧光素酶实验结果显示CCAT1野生型和mi R-155模拟物共转染后miR-155 mimics组细胞荧光素酶活性(0.41±0.08)显著低于对照组(1.24±0.18),差异具有统计学意义(t=17.92,P<0.01)。下调miR-155后CD8^(+)T细胞凋亡率(24.87%±0.95%)明显高于inhibitor control组(18.24%±1.25%),CD8+T细胞的细胞杀伤活性(0.26%±0.06%)明显低于inhibitor control组(0.43%±0.05%),差异具有统计学意义(t=10.03,20.06,均P<0.05)。miR-155 inhibitor组细胞内Cleaved Caspase 3蛋白表达(1.07±0.23)高于inhibitor control组(0.42±0.02),IL-2 mRNA(0.73±0.26)和IFN-γ mRNA(0.54±0.18)表达低于inhibitor control组(1.39±0.08,1.16±0.24),差异具有统计学意义(t=18.75,19.27,18.35,均P<0.01)。上调CCAT1通过miR-155促进CD8^(+)T细胞凋亡并降低细胞杀伤活性,且促进了Eca-109细胞增殖和迁移。结论 LncRNA CCAT1在食管癌患者中表达显著上调,敲低CCAT1通过调节miR-155表达可抑制CD8^(+)T细胞凋亡,增强细胞的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 长链非编码rna结肠癌相关转录本1(Lncrna CCAT1) 微小核糖核酸-155(mir-155) CD8^(+)T 食管癌 抗肿瘤活性
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LncRNA CASC2与miR-155-5p的靶向关系及对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭能力的影响 被引量:6
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作者 冯双苗 杨贺佳 +1 位作者 袁银花 张化莲 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第2期243-247,共5页
目的:探讨LncRNA癌易感性候选基因2(CASC2)对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制。方法:qRT-PCR法检测人正常子宫内膜上皮细胞hEEC,人子宫内膜癌细胞HEC-1A、KLE、HHUA中CASC2、miR-155-5p的表达。利用双荧光素酶报告实验验证C... 目的:探讨LncRNA癌易感性候选基因2(CASC2)对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制。方法:qRT-PCR法检测人正常子宫内膜上皮细胞hEEC,人子宫内膜癌细胞HEC-1A、KLE、HHUA中CASC2、miR-155-5p的表达。利用双荧光素酶报告实验验证CASC2和miR-155-5p的靶向关系。将HEC-1A细胞分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1-CASC2,anti-miR-NC、anti-miR-155-5p,pcDNA3.1、pcDNA3.1-CASC2+miR-NC、pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p。48 h后Western blot法测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果:与hEEC细胞相比,HEC-1A、KLE、HHUA中CASC2表达降低,miR-155-5p表达升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,CASC2和miR-155-5p存在靶向关系。与未转染组和pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-CASC2组迁移细胞数和侵袭细胞数均降低,MMP-2、MMP-9蛋白表达亦降低(P<0.05)。与未转染组和anti-miR-NC组相比,anti-miR-155-5p组细胞中miR-155-5p表达降低,迁移细胞数和侵袭细胞数均降低,MMP-2、MMP-9蛋白表达亦降低(P<0.05)。与pcDNA3.1-CASC2和pcDNA3.1-CASC2+miR-NC组相比,pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p组细胞中CASC2表达降低,miR-155-5p表达升高,迁移细胞数和侵袭细胞数均升高,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平亦升高(P<0.05)。结论:CASC2可靶向负调节miR-155-5p,抑制子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码rna CASC2 子宫内膜癌 mir-155-5p
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类风湿性关节炎患者外周血单个核细胞MALAT1表达降低、 hsa-miR155-3p表达增加并参与Notch信号通路调节 被引量:9
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作者 万磊 刘健 +6 位作者 黄传兵 赵磊 姜辉 刘磊 孙玥 忻凌 郑力 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期535-541,共7页
目的观察类风湿性关节炎(RA)患者长链非编码RNA(lncRNA)转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)、hsa-miR155-3p表达及其与Notch信号通路关系,探讨RA可能发病机制。方法采取RA患者(RA组)、健康对照者(NC组)外周血,采用高通量基因测序筛选差异表... 目的观察类风湿性关节炎(RA)患者长链非编码RNA(lncRNA)转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)、hsa-miR155-3p表达及其与Notch信号通路关系,探讨RA可能发病机制。方法采取RA患者(RA组)、健康对照者(NC组)外周血,采用高通量基因测序筛选差异表达的lncRNA和mRNA。利用反转录PCR检测筛选的lncRNA MALAT1和hsa-miR155-3p及Notch信号通路受体配体表达。结果通过lncRNA测序分析发现,共有9158条差异表达的lncRNA。基因本体(GO)功能分类注释得出差异表达的mRNA参与免疫炎症反应、细胞转录调节等。通过通路(pathway)分析显示差异表达的mRNA与免疫炎症、应激、Notch通路等功能基因变化有关。经顺式(Cis)和反式(Trans)预测,Jagged1/2、Delta1/2、Notch1/2可能与RA发生密切相关。与NC组相比,RA组MALAT1降低,hsa-miR155-3p明显升高;Notch通路配体Delta1、Delta2、Jagged1、Jagged2及受体Notch1、Notch2表达升高。相关性分析显示,hsa-miR155-3p与MALAT1呈负相关,hsa-miR155-3p与Notch通路Delta1、Jagged1呈正相关,MALAT1与Jagged2呈负相关。结论RA患者lncRNA MALAT1降低、hsa-miR155-3p增加,共同调节Notch信号通路变化。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎(RA) 长链非编码rna(lncrna) 转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1) 微小rna155(mir-155) NOTCH信号通路
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喉鳞癌组织miR-155-5p及其宿主长链非编码RNA MIR155HG表达临床意义 被引量:12
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作者 崔卫娜 孟文霞 +4 位作者 赵雷 池伟伟 曹欢 兰丽丽 王宝山 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2018年第24期1693-1697,共5页
目的近年来非编码RNA在肿瘤中的作用逐渐被揭示,尤其是微小RNA(microRNA;miRNA)及长链非编码RNA(1ong noncoding RNAs,lncRNAs)与肿瘤的发生发展密切相关。本研究探讨微小RNA155-5p(microRNA-155-5p,miR-155-5p)及其宿主长链非编码RNA M... 目的近年来非编码RNA在肿瘤中的作用逐渐被揭示,尤其是微小RNA(microRNA;miRNA)及长链非编码RNA(1ong noncoding RNAs,lncRNAs)与肿瘤的发生发展密切相关。本研究探讨微小RNA155-5p(microRNA-155-5p,miR-155-5p)及其宿主长链非编码RNA MIR155HG在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)组织中的表达及临床意义,为探讨喉癌的发生机制提供新的思路。方法收集2016-09-01-2017-12-30河北医科大学耳鼻咽喉头颈外科生物样本库40例LSCC及癌旁正常组织标本,应用实时荧光定量反转录PCR技术(RT-qPCR)检测LSCC及癌旁正常组织中miR-155-5p及MIR155HG的表达水平,并分析其表达与LSCC患者临床病理参数间的关系,同时分析miR-155-5p及MIR155HG表达之间的相关性。结果 LSCC组织中miR-155-5p的相对表达量为3.158±1.049,显著高于癌旁正常组织1.058±0.636,差异有统计学意义,t=4.001,P<0.05;喉鳞癌组织中MIR155HG的相对表达量为3.865±1.012,显著高于癌旁正常组织1.686±0.456,差异有统计学意义,t=2.818,P<0.05;LSCC组织中miR-155-5p与MIR155HG的表达与年龄、吸烟和饮酒无关,差异无统计学意义,P>0.05;与TNM分期、肿瘤分化、淋巴结转移相关,差异有统计学意义,P<0.05;MIR155HG与miR-155-5p的表达呈正相关,r=0.654 3,P<0.05。结论 miR-155-5p及其宿主基因lncRNA MIR155HG表达上调与喉癌的发生和侵袭转移密切有关,而且MIR155HG与miR-155-5p的表达具有一致性,二者有可能成为新的喉癌靶向治疗肿瘤标志物。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 长链非编码rna mir155HG mir-155-5p 组织表达
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LncRNA RP11-307C12.11 promotes the growth of hepatocellular carcinoma by acting as a molecular sponge of miR-138 被引量:1
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作者 Yinan Deng Yusheng Cheng +6 位作者 Kaining Zeng Haibo Li Yiming Huang Yiquan Jiang Tingting Xia Tong Zhang Yang Yang 《Liver Research》 2019年第3期240-249,共10页
Background:Abnormal expression of long non-coding RNAs(lncRNAs)has been found in almost all tumors in humans,providing numerous potential diagnostic and prognostic biomarkers,and therapeutic targets.Materials and meth... Background:Abnormal expression of long non-coding RNAs(lncRNAs)has been found in almost all tumors in humans,providing numerous potential diagnostic and prognostic biomarkers,and therapeutic targets.Materials and methods:The Cancer Genome Atlas(TCGA)database was used to screen potential LncRNAs,and 30 paired hepatocellular carcinoma(HCC)tissues were used to investigate RP11-307C12.11 expression levels by qRT-PCR and another 105 HCC tissues by in situ hybridizsation(ISH).RP11-307C12.11 overexpression and knockdown experiments were performed to investigate the effects of RP11-307C12.11 on HCC growth through in vitro and in vivo assays(MTT assay,colony formation assay,EdU assay,and xenograft model).The molecular mechanism underlying these effects was confirmed by MS2-RIP-assay,RIP assay,luciferase assay,and rescue experiments.Results:RP11-307C12.11 expression level was significantly higher in tumor tissues than in the adjacent normal tissues.Elevated RP11-307C12.11 expression level was associated with poor prognosis of HCC patients,and it may be represented as an independent prognostic biomarker in patients with HCC.Functionally,RP11-307C12.11 overexpression promoted HCC growth both in vitro and in vivo;however,its knockdown reversed these effects.Mechanistically,we found that RP11-307C12.11 expressed predominantly in the cytoplasm and sponged microRNA(miR)-138 to regulate its common target CCND1 and PDK1.Conclusions:Thus,we found that RP11-307C12.11 acts as an oncogene in HCC by binding to miR-138,which might provide a novel target for HCC therapy. 展开更多
关键词 long non-coding rnas(lncrnas) Lncrna RP11-307C12.11 Hepatocellular carcinoma(HCC) GROWTH Microrna(mir)-138
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