LncRNA MALAT1通过靶向miR-146a调节PI3K/Akt信号通路影响胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肺腺癌转移相关转录子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)通过调节miR-146a对胃癌(gastric cancer, GC)细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法 收集GC组织和配对正常胃上皮组织,将GC细胞MNK-45分为空白对照(blank control, BC)组(未转染)、MALAT1 siRNA-NC组(转染MALAT1 siRNA-NC)、MALAT1 siRNA组(转染MALAT1 siRNA)、miR-146a mimics-NC组(转染miR-146a mimics-NC)、miR-146a mimics组(转染miR-146a mimics)、MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor-NC组(共转染MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor-NC)、MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor组(共转染MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor)。定量荧光PCR(qRT-PCR)检测胃组织或细胞中MALAT1、miR-146a表达量;CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力;RNA pull down实验、双荧光素酶报告实验分析MALAT1和miR-146a的结合情况;Western blot检测磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路蛋白及c-Myc、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)蛋白表达量。结果 转染MALAT1 siRNA可明显降低MNK-45细胞的MALAT1表达量,敲低MALAT1或过表达miR-146a可降低细胞活力、克隆能力、迁移和侵袭,增加miR-146a表达,降低PI3Kp85α、PI3Kp85β、c-Myc、MMP9蛋白表达量及p-Akt/Akt水平;MALAT1可结合并靶向下调miR-146a表达;低表达miR-146a可逆转敲低MALAT1对MNK-45细胞增殖、迁移和侵袭的抑制效应。结论 MALAT1可能作为ceRNA吸附并降解miR-146a,敲低MALAT1可上调miR-146a表达,并通过PI3K/Akt通路抑制GC细胞增殖、迁移和侵袭。

血清LncRNA MALAT1和microRNA-124水平检测对非小细胞肺癌患者预后的评估价值

目的:探究长链非编码RNA-转移相关肺腺癌转录本1(LncRNA MALAT1)和微小RNA-124(microRNA-124)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的预测效能。方法:选取2020年06月至2022年06月我院收治的124例NSCLC患者作为研究对象,入院后,收集患者的病历资料,检测入院时外周血LncRNA MALAT1、microRNA-124的相对表达量。电话随访12个月记录患者的死亡率,分为生存组和死亡组,分析NSCLC患者预后的影响因素,评估血清LncRNA MALAT1、microRNA-124对NSCLC患者预后的预测效能。结果:死亡组患者的IV期占比及LncRNA MALAT1相对表达量高于生存组,microRNA-124相对表达量低于生存组。Logistic遂步分析显示,病理分期IV期(OR=12.342,95%CI:4.295~36.765)、LncRNA MALAT1(OR=5.371,95%CI:1.836~15.714)及microRNA-124(OR=0.257,95%CI:0.089~0.752)是NSCLC患者死亡的影响因素(P<0.05)。LncRNA MALAT1与microRNA-124呈负相关(P<0.05)。受试者工作特性曲线(ROC)分析显示,LncRNA MALAT1及microRNA-124单一及联合预测NSCLC患者预后的灵敏度分别为0.741(95%CI:0.601~0.846)、0.759(95%CI:0.621~0.861)、0.815(95%CI:0.682~0.903),特异度分别为0.825(95%CI:0.705~0.906)、0.762(95%CI:0.635~0.856)、0.841(95%CI:0.723~0.917),曲线下面积(AUC)分别为0.781、0.760、0.839。联合预测效能更高(P<0.05)。结论:LncRNA MALAT1及microRNA-124可用于预测NSCLC患者的预后,且预测效能良好。

血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与妊娠期糖尿病患者不良妊娠结局的相关性

目的:分析血清内脂素、长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平与妊娠期糖尿病(GDM)患者不良妊娠结局的相关性。方法:选取2021年4月至2023年4月该院收治的103例GDM患者为研究对象,纳入观察组,另选取同期于本院进行产检的103名健康孕妇为对照组,检测两组血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平,并随访至GDM患者分娩。比较两组、不同妊娠结局GDM患者血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平,并采用Pearson相关性分析血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与GDM患者不良妊娠结局的相关性。结果:观察组血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不良妊娠结局GDM患者血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平均高于正常妊娠结局GDM患者,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与GDM患者不良妊娠结局均呈正相关(r>0,P<0.05)。结论:血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与GDM患者不良妊娠结局均呈正相关。

LncRNA MALAT-1靶向microRNA-370-3p调节Akt通路对肺癌细胞生物学行为影响的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT-1(转染si-MALAT-1)或过表达miR-370-3p(转染miR-370-3p mimic),抑制LncRNA MALAT-1和干扰miR-370-3p(同时转染si-MALAT-1和antimiR-370-3p),观察A549细胞的生物学行为和Akt通路蛋白的表达。qRT-PCR检测LncRNA MALAT-1、miR-370-3p mRNA的表达;MMT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移与侵袭;Western blotting检测Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K蛋白相对表达量。构建MALAT-1野生型(MALAT-1WT_1uc)与突变型(MALAT-1MUT_1uc)荧光素酶报告基因质粒并分别与miR-370-3p、miR-NC转染至A549细胞,观察荧光结合强度并检测miR-370-3p的表达。结果 抑制LncRNA MALAT-1或过表达miR-370-3p能抑制A549细胞迁移、侵袭,促进细胞凋亡,减少A549细胞活性(P <0.05),并下调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。与单纯抑制LncRNA MALAT-1比较,抑制LncRNA MALAT-1并干扰miR-370-3p能促进A549细胞迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,增加A549细胞活性(P <0.05),并上调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。TargetScan靶基因预测发现LncRNA MALAT-1与miR-370-3p存在结合位点,荧光素酶报告基因实验验证发现,与MALAT-1WT_1uc+Control组和MALAT-1WT_1uc+miR NC组比较,MALAT-1WT_1uc+miR-370-3p组相对荧光强度下降(P <0.05),MALAT-1MUT_1uc+miR-370-3p荧光强度无变化(P>0.05),进一步qRT-PCR结果发现,与Control组比较,si-MALAT-1组的miR-370-3p mRNA相对表达量升高(P <0.05),与si-MALAT-1组比较,si-MALAT-1+anti-miR-370-3p组的miR-370-3pmRNA相对表达量降低(P <0.05)。结论LncRNA MALAT-1可以靶向负调控miR-370-3p。抑制LncRNA MALAT-1可以上调miR-370-3p的表达,抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,促进A549细胞的凋亡,并下调Akt通路蛋白的磷酸化。

白癜风患者血清LncRNA MALAT1及miR-211-5p表达水平与临床特征的相关性分析

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子1(long non-coding RNA metastasis associated transcription factor 1 in lung adenocarcinoma,Lnc RNA MALAT1),微小核糖核酸(micro RNA,miR)-211-5p表达水平变化与临床特征的相关性。方法选取2022年1~6月河北省沧州中西医结合医院皮肤科收治的白癜风患者80例为研究对象(白癜风组),同期于该院进行体检的健康者80例为对照组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)法检测受试者血清中Lnc RNA MALAT1,mi R-211-5p表达水平;两组间比较采用独立样本t检验;多组间(不同临床分期、临床分型、皮损面积及病程)比较进行单因素方差分析,组间多重比较采用SNK-q检验;白癜风患者皮损面积及病程与血清中Lnc RNA MALAT1和mi R-211-5p表达水平的相关性采用Pearson法分析。结果白癜风组患者血清Lnc RNA MALAT1(1.90±0.25)表达水平高于对照组(1.02±0.13),血清mi R-211-5p(0.53±0.07)表达水平低于对照组(1.05±0.10),差异均有统计学意义(t=27.933,38.103,均P=0.000)。进展期及快速进展期血清Lnc RNA MALAT1水平均高于稳定期(2.29±0.42,2.47±0.31 vs 1.54±0.12),差异有统计学意义(t=15.000,16.766,均P<0.001)。血清mi R-211-5p水平均低于稳定期(0.28±0.09,0.22±0.06 vs 0.74±0.11),差异有统计学意义(t=24.748,25.217,均P<0.001)。寻常型血清Lnc RNA MALAT1(2.06±0.26)表达水平高于节段型(1.50±0.16),寻常型血清mi R-211-5p(0.39±0.11)表达水平低于节段型(0.86±0.21),差异有统计学意义(t=9.768,13.127,均P<0.001)。泛发型血清Lnc RNA MALAT1相对表达水平高于肢端型、局限型及散发型(2.59±0.38 vs 2.02±0.19,1.98±0.44,1.89±0.30),差异有统计学意义(t=5.559,6.038,7.375,均P<0.001)。血清mi R-211-5p水平低于肢端型、局限型及散发型(0.17±0.04 vs 0.39±0.09,0.43±0.11,0.45±0.10),差异有统计学意义(t=7.651,9.177,10.520,均P<0.001)。皮损面积<1%,1%~50%和>50%的白癜风患者血清Lnc RNA MALAT1表达水平依次升高(1.69±0.19,1.92±0.21,2.56±0.26),差异有统计学意义(t=6.424,17.408,12.312,均P<0.001);皮损面积<1%,1%~50%和>50%的白癜风患者血清mi R-211-5p表达水平依次升高(0.70±0.09,0.41±0.10,0.21±0.03),差异有统计学意义(t=18.972,22.964,9.012,均P<0.001)。Pearson相关性分析显示,白癜风患者血清Lnc RNA MALAT1与皮损面积呈正相关(r=0.576,P<0.001),血清mi R-211-5p与皮损面积呈负相关(r=-0.475,P<0.001)。病程<1年、1~3年和>3年的白癜风患者血清Lnc RNA MALAT1表达水平依次降低(1.65±0.18,1.88±0.22,2.48±0.23),差异有统计学意义(t=5.984,20.581,13.291,均P<0.001);病程<1年、1~3年、>3年的白癜风患者血清mi R-211-5p表达水平依次降低(0.68±0.11,0.53±0.10,0.21±0.04),差异有统计学意义(t=8.352,24.942,15.170,均P<0.001)。Pearson相关性分析表明,血清Lnc RNA MALAT1与病程呈正相关(r=0.344,P<0.001),血清mi R-211-5p与病程呈负相关(r=-0.433,P<0.001)。结论白癜风患者血清中Lnc RNA MALAT1表达上调,mi R-211-5p表达下调,且与皮损面积及病程等临床特征显著相关。

肺癌骨转移患者血清lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达水平及临床价值

目的探究肺癌骨转移患者血清非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)和非编码RNAα-2-巨球蛋白反义RNA 1(lncRNA A2M-AS1)表达水平及临床价值。方法选取2021年9月至2022年9月在哈励逊国际和平医院经过病理学检查确诊为肺癌的164例患者为肺癌组,其中经骨骼ECT检查发现84例者骨转移为骨转移组,80例无骨转移者为无骨转移组。同期选取80例肺部良性疾病患者为对照组。采用qRT-PCR法检测血清lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达水平;Pearson法分析lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达的相关性;ROC曲线分析lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1对肺癌骨转移的诊断价值。结果与对照组相比,肺癌组血清中lncRNA MALAT1表达水平显著升高(P<0.001),lncRNA A2M-AS1表达水平显著降低(P<0.001)。与无骨转移组相比,骨转移组血清中lncRNA MALAT1表达水平显著升高(P<0.001),lncRNA A2M-AS1表达水平显著降低(P<0.001)。相关性分析显示,肺癌骨转移患者血清中lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达水平呈负相关(r=-0.369,P<0.001)。lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1联合诊断肺癌骨转移的AUC高于两者单独诊断(P<0.05)。结论肺癌骨转移患者血清中lncRNA MALAT1表达水平显著升高,lncRNA A2M-AS1表达水平显著降低,两者联合对肺癌骨转移具有一定的诊断价值。

归脾汤对沉默LncRNA MALAT1大鼠下丘脑胰岛素信号通路的影响

目的 探讨沉默肺腺癌转移相关转录本(MALAT)1配合应用归脾汤对胰岛素信号通路中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB)和糖原合成酶激酶(GSK)-3β表达的影响及对胰岛素抵抗的改善情况。方法 长期给予高脂饲料,后期注射链脲佐菌素(STZ)建立并筛选出糖尿病脑病(DE)大鼠模型;除对照组外,将筛选出的DE模型大鼠随机分为模型组、沉默LncRNA MALAT1配合归脾汤治疗(M归脾汤)组、归脾汤组、西药组。以氧化酶法测其血糖水平,以酶联免疫吸附试验(ELISA)测其胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数,以实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)法测其下丘脑中GSK-3β mRNA的相对表达;应用Western印迹测下丘脑中PI3K、PKB和GSK-3β蛋白的相对表达。结果 与模型组比较,归脾汤组和西药组胰岛素水平显著升高,M归脾汤组和西药组胰岛素敏感指数(ISI)显著升高(P<0.05),归脾汤组中GSK-3β mRNA和蛋白的相对表达显著降低(P<0.05),归脾汤组中PI3K蛋白的相对表达显著提高(P<0.05)。与归脾汤组比较,M归脾汤组GSK-3β mRNA的相对表达、血糖水平和ISI差异有统计学意义(P<0.05),而且PKB蛋白的相对表达明显高于模型组(P<0.05)。结论 归脾汤能够缓解DE大鼠模型的胰岛素抵抗情况,此作用可能通过调节胰岛素信号通路中PI3K、PKB和GSK-3β蛋白的相对表达来实现,并在沉默MALAT1后使归脾汤的作用效果更加明显。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1表达影响裸鼠骨肉瘤增殖的病理改变

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT-1)表达对裸鼠皮下植入的骨肉瘤增殖和病理学形态的影响。方法使用慢病毒感染构建MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤U2OS细胞系,qPCR法验证MALAT-1表达的改变。将12只4~6周龄的雄性裸鼠随机平均分为实验组和对照组,实验组皮下植入MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤U2OS细胞,对照组皮下植入空载慢病毒处理的骨肉瘤U2OS细胞。分别在植入后第3、6、9、12、15、18、21天测定并记录两组裸鼠皮下骨肉瘤的体积。植瘤后第21天处死裸鼠,完整取出骨肉瘤称重,通过H-E染色观察骨肉瘤病理学形态,免疫组织化学染色观察增殖细胞核抗原(PCNA)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果与对照组相比,实验组的肿瘤生长更慢,植瘤21 d后的体积、质量均小于对照组(P均<0.01)。H-E染色结果显示,实验组肿瘤基质成分增多,肿瘤细胞密集程度降低。免疫组织化学染色结果显示,实验组PCNA阳性染色积分光密度(IOD)中位数为8531.03、阳性细胞占比为29.3%(1758/6000),对照组IOD中位数为27548.23、阳性细胞占比为56.5%(3392/6000),实验组PCNA表达程度较对照组下降,差异均有统计学意义(P均<0.05);实验组VEGF阳性染色IOD为18179.490±18299.433、阳性细胞占比为51.0%(3063/6000),对照组IOD为15850.632±9341.063、阳性细胞占比为50.0%(3001/6000),两组VEGF表达程度差异无统计学意义(P均>0.05)。结论抑制骨肉瘤中长链非编码RNA MALAT-1的表达可以延缓肿瘤的生长,降低肿瘤的侵袭性,促进实体瘤中肿瘤细胞的坏死。

lncRNA-MALAT1表达与TSCC临床病理特征及预后的关系研究

目的探讨长链非编码核糖核酸-转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA-MALAT1)在舌鳞状细胞癌(TSCC)组织中的表达特征,分析其与临床病理参数以及预后的关系。方法将2018年1月至2020年1月该院收治的80例TSCC患者纳入研究,检测癌组织以及癌旁组织中lncRNA-MALAT1的表达情况,收集患者临床和随访资料。分析lncRNA-MALAT1表达情况与TSCC临床病理特征以及预后的关系。结果TSCC组织中的lncRNA-MALAT1表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。低中度分化、TNMⅢ期、淋巴结转移、浸润深度≥2/3的TSCC患者癌组织中lncRNA-MALAT1表达水平分别高于高度分化、TNMⅠ~Ⅱ期、无淋巴结转移、浸润深度<2/3的TSCC患者(P<0.05)。随访41(30~54)月,随访期间死亡48例。lncRNA-MALAT1高表达TSCC患者总生存率和无进展生存率均低于lncRNA-MALAT1低表达TSCC患者(P<0.05)。多因素COX风险比例回归结果显示TNMⅢ期、淋巴结转移、lncRNA-MALAT1高表达是TSCC患者死亡的危险因素(P<0.05)。结论TSCC组织lncRNA-MALAT1表达显著上调,且与分化程度、TNM分期、淋巴结转移、浸润深度和低生存率有关。

长链非编码RNA MALAT1对氧糖剥夺/复氧诱导的人脑微血管内皮细胞血管生成的影响

目的:探讨长链非编码RNA (lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1 (MALAT1)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的人脑微血管内皮细胞(HBMECs)血管生成的影响,并阐明其潜在的分子机制。方法:采用生物信息学方法预测MALAT1、不均一核糖核蛋白K (hnRNPK)和血管内皮生长因子A (VEGFA)的结合位点。HBMECs进行OGD/R处理构建脑缺血细胞模型,分为对照组、OGD/R模型组、OGD/R+siNC组、OGD/R+沉默MALAT1 (OGD/R+siMALAT1)组和OGD/R+siMALAT1+过表达VEGFA (OGD/R+siMALAT1+VEGFA)组。采用小干扰RNA (siRNA)沉默MALAT1的表达,采用pcDNA载体构建VEGFA过表达载体,将构建的siMALAT1和pcDNA VEGFA载体分别或同时转染至HBMECs中。利用管形成实验检测各组细胞血管形成能力,Western blotting法检测各组细胞中VEGFA蛋白表达水平。6周龄健康雄性C57BL/6 J小鼠20只,随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞(MCAO)模型组、MCAO+NC空载体(MCAO+NC)组和MCAO+过表达MALAT1 (MCAO+MATAL1)组,每组5只,除假手术组外,其余各组小鼠利用线栓法构建MCAO小鼠模型,MCAO+NC组和MCAO+MATAL1组小鼠右脑室内分别注射NC空载体和MALAT1过表达载体。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测各组小鼠脑梗死面积百分率,Western blotting法检测各组小鼠脑组织中VEGFA蛋白表达水平。结果:生物信息学预测,MALAT1与hnRNPK及hnRNPK与VEGFA均存在结合位点。管形成实验和Western blotting法检测,与对照组比较,OGD/R模型组细胞成管数明显增加(P<0.01),细胞中VEGFA蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与OGD/R模型组比较,OGD/R+siMALAT1组细胞成管数明显减少(P<0.01),细胞中VEGFA蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与OGD/R+siMALAT1组比较,OGD/R+siMALAT1+VEGFA组细胞成管数明显增加(P<0.01),细胞中VEGFA蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。在MCAO模型小鼠实验中,TTC染色和Western blotting法检测,与假手术组比较,MCAO模型组小鼠脑梗死面积百分率和脑组织中VEGFA蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与MCAO模型组比较,MCAO+MALAT1组小鼠脑梗死面积百分率明显降低(P<0.01),脑组织中VEGFA蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:LncRNA MALAT1可增强靶基因VEGFA的稳定性并上调其表达,进而促进缺血性脑卒中小鼠的脑血管生成,为缺血性脑卒中的治疗提供了新的思路。

四妙勇安汤对糖尿病足部溃疡患者血清lncRNA MALAT1表达量及足背血流动力学的影响

目的:分析四妙勇安汤对糖尿病足部溃疡患者血清长链非编码核糖核酸(lncRNA)肺癌转移相关转录本1(MALAT1)表达量及足背血流动力学的影响。方法:选取150例糖尿病足部溃疡患者进行回顾性研究,根据治疗方法将其分为两组,每组75例,对照组给予常规西药治疗,观察组在对照组基础上给予四妙勇安汤治疗,比较两组临床疗效、症状体征评分、血清lncRNA MALAT1表达量、血清炎性因子、足背血流动力学指标、肉芽组织形成时间、创面愈合时间。结果:观察组临床总有效率高于对照组(P<0.05)。观察组治疗后色泽、渗出、疼痛、面积积分低于对照组(均P<0.05)。观察组治疗后血清lncRNA MALAT1表达量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)水平低于对照组(均P<0.05)。观察组治疗后足背动脉血管内径高于对照组,足背动脉血流速度低于对照组(均P<0.05)。观察组肉芽组织形成时间、创面愈合时间短于对照组(均P<0.05)。结论:四妙勇安汤可有效缓解糖尿病足部溃疡患者坏疽、疼痛等症状,降低血清lncRNA MALAT1表达量,减轻炎症反应,改善足部血液循环,促进肉芽组织生长,缩短创面愈合时间。

lncRNA MALAT1调节miR-22-3p/NLRP3轴对LPS诱导的急性肺损伤的影响

目的探究长链非编码RNA MALAT1通过miR-22-3p/NLRP3信号轴促进脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的分子机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、ALI组、sh-NC组、sh-MALAT1组,每组9只。通过气管内灌注LPS法建立ALI大鼠模型,假手术组气管内灌注等量的PBS作为阴性对照,sh-NC组、sh-MALAT1组在LPS诱导前48 h,通过静脉分别注射2×10^(7) TU/mL的sh-NC慢病毒或相同剂量的sh-MALAT1慢病毒。通过HE染色法观察肺组织的组织病理学改变;通过TUNEL染色法观察肺组织的细胞凋亡情况。通过双荧光素酶报告基因系统验证MALAT1与miR-22-3p、NLRP3与miR-22-3p的调控关系;通过实时荧光定量PCR技术和免疫印记技术检测肺组织和细胞中MALAT1、miR-22-3p、NLRP3、ASC、caspase-1的表达水平;通过酶联免疫吸附试验检测支气管肺泡灌洗液和细胞培养基中白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌情况;通过CCK-8技术检测A549细胞增殖情况;通过流式细胞术检测A549细胞凋亡情况。结果与假手术组相比,LPS诱导的ALI大鼠肺组织和A549细胞中MALAT1、NLRP3、ASC、caspase-1的mRNA水平显著升高,miR-22-3p水平显著降低(P<0.05)。此外,与假手术组相比,LPS诱导的ALI大鼠肺组织的组织病理损伤水平、炎症反应和细胞凋亡率升高(P<0.05)。与ALI组、sh-NC组相比,抑制MALAT1表达可改善LPS诱导的ALI大鼠肺组织和细胞中的炎症反应和细胞凋亡(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,MALAT1与miR-22-3p、NLRP3与miR-22-3p存在相互调控关系。与ALI组、sh-NC组相比,sh-MALAT1组肺组织中MALAT1、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA水平降低(P<0.05),miR-22-3p水平升高(P<0.05)。同时,BALF上清液中IL-1β、IL-18、TNF-α水平降低(P<0.05)。此外,下调MALAT1的同时抑制miR-22-3p表达后,细胞中miR-22-3p和Bcl-2表达水平显著降低,细胞增殖水平亦显著降低(P<0.05)。结论降低MALAT1的表达可通过促进miR-22-3p的表达,从而抑制NLRP3的蛋白水平,并最终抑制LPS诱导的ALI模型中的炎症反应和细胞凋亡。

lncRNA MALAT1对肝星状细胞活化的调节作用及其机制

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)在肝纤维化进展过程中对肝星状细胞(HSC)活化的调节作用,并阐明其作用机制。方法:收集25例健康志愿者(健康组,n=25)和25例肝纤维化患者[轻度肝纤维化组(n=12)和重度肝纤维化组(n=13)]血清样本。小鼠HSC分为对照组、转化生长因子β1(TGF-β1)组、TGF-β1+si-NC组、TGF-β1+si-MALAT1组、TGF-β1+si-MALAT1+anti-miR-150-5p组和TGF-β1+si-MALAT1+CXCL14组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组研究对象血清和各组HSC中MALAT1 mRNA、miR-150-5p和CXC趋化因子配体14(CXCL14)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组研究对象血清中CXCL14蛋白表达水平和各组HSC中CXCL14、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)蛋白表达水平,CCK-8法检测各组HSC增殖活性,免疫荧光法检测各组HSC中α-SMA和COL1A1蛋白表达量,双荧光素酶报告系统检测miR-150-5p与MALAT1和CXCL143’-UTR基因的靶向关系。结果:RT-qPCR法检测,与健康组比较,轻度和重度肝纤维化组患者血清中MALAT1 mRNA和CXCL14 mRNA表达水平升高(P<0.05),miR-150-5p表达水平降低(P<0.05);与轻度肝纤维化组比较,重度肝纤维化组患者血清中MALAT1 mRNA和CXCL14 mRNA表达水平升高(P<0.05),miR-150-5p表达水平降低(P<0.05);与对照组比较,TGF-β1组HSC中MALAT1 mRNA和CXCL14 mRNA表达水平均升高(P<0.05),miR-150-5p表达水平降低(P<0.05);与TGF-β1+si-NC组比较,TGF-β1+si-MALAT1组HSC中MALAT1mRNA和CXCL14 mRNA表达水平均降低(P<0.05),miR-150-5p表达水平升高(P<0.05);与TGF-β1+si-MALAT1组比较,TGF-β1+si-MALAT1+anti-miR-150-5p组HSC中miR-150-5p表达水平降低(P<0.05),CXCL14 mRNA表达水平升高(P<0.05);与TGF-β1+si-MALAT1组比较,TGF-β1+si-MALAT1+CXCL14组HSC中CXCL14 mRNA表达水平升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与健康组比较,轻度和重度肝纤维化组患者血清中CXCL14蛋白表达水平升高(P<0.05);与轻度肝纤维化组比较,重度肝纤维化组患者血清中CXCL14蛋白表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,TGF-β1组HSC中CXCL14、α-SMA和COL1A1蛋白表达水平升高(P<0.05);与TGF-β1+si-NC组比较,TGF-β1+si-MALAT1组HSC中CXCL14、α-SMA和COL1A1蛋白表达水平降低(P<0.05);与TGF-β1+si-MALAT1组比较,TGF-β1+si-MALAT1+anti-miR-150-5p组和TGF-β1+si-MALAT1+CXCL14组HSC中CXCL14、α-SMA和COL1A1蛋白表达水平升高(P<0.05)。CCK-8法检测,与对照组比较,TGF-β1组HSC增殖活性升高(P<0.05);与TGF-β1+si-NC组比较,TGF-β1+si-MALAT1组HSC增殖活性降低(P<0.05);与TGF-β1+siMALAT1组比较,TGF-β1+si-MALAT1+anti-miR-150-5p组和TGF-β1+si-MALAT1+CXCL14组HSC增殖活性升高(P<0.05)。免疫荧光检测,各组HSC中α-SMA和COL1A1蛋白表达与Western blotting法检测结果一致。MALAT1和CXCL143’-UTR与miR-150-5p存在靶向关系。双荧光素酶报告基因测定,与miR-NC组比较,与MALAT1 WT或CXCL14 WT共转染的miR-150-5p组HSC中荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论:敲低MALAT1可抑制TGF-β1诱导HSC活化,其机制可能与miR-150-5p/CXCL14信号通路有关。

长链非编码RNA MALAT1对人肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响

目的探索长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasisassociated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)对人肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响。方法培养人肺成纤维细胞(human fetal lung fibroblast 1,HFL-1),按照有无转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)作用分为观察组和对照组,检测两组细胞中lncRNA MALAT1表达水平。在此基础上设置四个组别:空白组、TGF-β1组、转染对照组和siMALAT1组。空白组细胞不接受任何处理;TGF-β1组采用5 ug/L的TGF-β1处理;转染对照组在TGF-β1组的基础上应用siMALAT1阴性对照(negative control,NC)处理;siMALAT1组在TGF-β1组的基础上应用siMALAT1。比较其lncRNA MALAT1、Ⅰ型胶原(collagen 1,COL1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle activation protein,α-SMA)的mRNA表达水平,COL1和α-SMA的蛋白表达水平和细胞增殖情况。结果观察组lncRNA MALAT1相对表达量较对照组高(P<0.05)。四组细胞lncRNA MALAT1、α-SMA和COL1的mRNA及蛋白相对表达量有统计学差异(P<0.05);其中,转染对照组和TGF-β1组以上RNA和蛋白相对表达量均高于siMALAT1组和空白组(P<0.05),而TGF-β1组与转染对照组之间上述RNA和蛋白相对表达量则无差异(P>0.05)。四组细胞增殖活力的差异具有统计学意义(P<0.05);转染对照组和TGF-β1组细胞增殖活力较siMALAT1组和空白组高(P<0.05),而TGF-β1组与转染对照组之间则无差异(P>0.05)。结论lncRNA MALAT1可以促进人肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化,影响肺纤维化进程中COL1、α-SMA在肺组织中的沉积,靶向lncRNA MALAT1将有助于对肺纤维化过程的深入研究。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1在恶性肿瘤中作用和应用的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是内源性的长度超过200 nt的非编码RNA,其在细胞增殖、凋亡、代谢、迁移、血管生成、内皮功能障碍、内皮-间充质转化、细胞周期调节、细胞分化等诸多生物过程中发挥着重要作用。肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)是最早发现的lncRNA之一,本文主要从MALAT1的基本结构、功能作用及与肿瘤的关系几方面进行综述,总结了MALAT1在恶性肿瘤中作用和应用的研究进展。在肺癌患者中,MALAT1过表达与肺癌预后不良相关;在食管癌患者中,MALAT1可通过调节细胞周期增强食管癌的侵袭和转移能力;在宫颈癌患者中,MALAT1通过调节多种微小RNA促进肿瘤的增殖、迁移能力;目前MALAT1对乳腺癌的作用尚无定论,一些研究认为MALAT1促进乳腺癌细胞的增殖、转移能力,但另外一些研究认为MALAT1可以抑制乳腺癌的增殖、转移、侵袭能力。这些研究显示MALAT1有望成为有效的肿瘤生物标志物和未来的主要治疗靶点。

早产儿血清mi R-125b,LncRNA MALAT1表达水平与支气管肺发育不良的相关性研究

目的 探讨早产儿血清微小核糖核酸(micro RNA,mi R)-125b,长链非编码RNA(long non-coding RNA,Lnc RNA)转移相关肺腺癌转录本-1(metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)水平与支气管肺发育不良(broncho-pulmonary dysplasia,BPD)的关系。方法 选取2020年4月~2021年4月入住潍坊市妇幼保健院新生儿重症监护室(neonatal intensive care unit,NICU)的227例早产儿作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RQ-PCR)检测血清mi R-125b和Lnc RNA MALAT1的表达水平;绘制血清mi R-125b和Lnc RNA MALAT1预测早产儿BPD发生的ROC曲线;多因素Logistic回归分析影响早产儿BPD的有关因素。结果 BPD组早产儿给氧时间34.54±9.21天,机械通气时间23.97±1.30h长于非BPD组(17.28±5.22天,4.71±2.26h),差异具有统计学意义(t=17.387,60.047,均P<0.05)。进入NICU后第10和14天,BPD组早产儿血清mi R-125b水平(0.70±0.18,0.48±0.16)均低于无BPD组(0.99±0.12,1.02±0.16),差异具有统计学意义(t=13.683,21.787,均P<0.05);血清Lnc RNAMALAT1水平(1.52±0.41,2.02±0.61)均高于无BPD组(1.03±0.15,1.02±0.11),差异具有统计学意义(t=13.198,20.569,均P<0.05);血清mi R-125b水平在轻度BPD组、中度BPD组和重度BPD组中依次降低(0.60±0.16,0.47±0.12,0.36±0.10),血清Lnc RNA MALAT1水平在轻度BPD组、中度BPD组和重度BPD组中依次升高(1.54±0.42,1.99±0.51,2.45±0.62),差异具有统计学意义(F=15.872,14.084,均P<0.05)。ROC分析结果显示,血清mi R-125b预测早产儿BPD的曲线下面积(AUC)为0.820(0.765~0.875),最佳诊断截点为0.59,Lnc RNA MALAT1预测早产儿BPD的AUC为0.773(0.685~0.861),最佳诊断截点为1.71,两个指标联合预测的价值最高,AUC为0.902(0.855~0.948)。多因素Logistic回归分析结果显示,给氧时间(OR:2.135,95%CI:1.241~3.674,P=0.006)、机械通气时间(OR:2.187,95%CI:1.132~4.225,P=0.020)和Lnc RNA MALAT1(OR:2.016,95%CI:1.190~3.416,P=0.009)是早产儿BPD的独立危险因素,mi R-125b(OR:0.699,95%CI:0.552~0.884,P=0.003)是早产儿BPD的独立保护因素。结论 血清mi R-125b水平降低及Lnc RNA MALAT1水平升高与早产儿BPD及严重程度有相关,检测早产儿血清mi R-125b,Lnc RNA MALAT1可为临床早期诊断治疗BPD提供理论依据。

长链非编码RNA人肺腺癌转移相关转录本1在结直肠癌中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一种长度大于200个核苷酸,且不具备蛋白质编码能力的RNA,其在癌症的发生发展中起重要作用。lncRNAs涉及转录、转录后修饰、染色质修饰以及表观遗传学修饰等多种基因调控过程,其是细胞周期、细胞分化发育、细胞多能性等生物过程中最重要的参与者。肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)作为被广泛研究的lncRNAs之一,在结直肠癌中呈高表达。研究已表明,MALAT1及其单核苷酸多态性(SNPs)在结直肠癌的发生发展中起重要作用,可成为结直肠癌临床诊断、治疗与预后的靶标。本文就lncRNA MALAT1在结直肠癌中的相关研究现状进行综述。

血清Irisin、PTX3及MALAT1水平与糖尿病视网膜病变病情程度的关系及联合诊断价值

目的研究血清鸢尾素(Irisin)、长正五聚蛋白3(PTX3)、人肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)水平与糖尿病视网膜病变(DR)病情程度的关系及联合诊断的价值。方法选取2022年4月至2023年4月沧州市中心医院2型糖尿病(T2DM)合并DR患者85例设为DR组,85例单纯T2DM患者设为非DR组,同时期85例健康志愿者设为对照组。将DR组患者以是否处于增生型DR为标准分为增生型组(38例)与非增生型组(47例)。收集DR组患者病例临床资料,包括性别、舒张压、年龄、收缩压、病程、空腹血糖(FPG)、体质量指数、糖化血红蛋白(HbA1c)、吸烟史、甘油三酯(TG)、饮酒史、收缩期峰值流速、舒张末期峰值流速、阻力指数、空腹胰岛素(FINS)、糖尿病家族史、总胆固醇(TC)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。酶联免疫吸附法检测各组患者血清Irisin、PTX3水平,实时荧光定量PCR法检测血清MALAT1水平。采用Pearson相关性分析检测血清Irisin、PTX3及MALAT1水平与DR患者病情程度的相关性。Logistic回归分析DR患者病情程度的影响因素。受者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清Irisin、PTX3及MALAT1单独诊断DR的价值。ROC曲线、净重新分类指数(NRI)及综合判别改善指数(IDI)分析含与不含血清Irisin、PTX3及MALAT1方案诊断DR的价值。结果3组患者血清Irisin、PTX3、MALAT1水平比较,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。增生型组患者病程长于非增生型组,收缩期峰值流速、舒张末期峰值流速、血清Irisin水平均低于非增生型组,阻力指数、FPG、HbA1c、TG、FINS、HOMA-IR及血清PTX3、MALAT1水平均高于非增生型组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。DR患者血清Irisin水平与DR病情程度呈负相关(r=-0.512,P<0.001),PTX3、MALAT1水平与DR病情程度均呈正相关(r=0.497、0.573,均为P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,病程、FPG、HbA1c、TG、FINS、HOMA-IR、收缩期峰值流速、舒张末期峰值流速、阻力指数及血清Irisin、PTX3、MALAT1水平均为DR病情程度加重的影响因素(均为P<0.05)。血清Irisin、PTX3、MALAT1诊断DR的曲线下面积(AUC)分别为0.743、0.811、0.773。与常规诊断方案比较,含有血清Irisin、PTX3、MALAT1水平的新诊断方案的AUC明显增大(Z=2.708,P=0.007),NRI、IDI分别为0.039(95%CI:0.022~0.069)、0.026(95%CI:0.014~0.047)(均为P<0.05)。结论DR患者血清Irisin水平降低,PTX3、MALAT1水平升高,且与患者DR病情程度密切相关,含有血清Irisin、PTX3、MALAT1指标的诊断方案具有较高的诊断价值。

血清肺腺癌转录相关转录本1、微RNA-1水平与心肌梗死继发室性心律失常的关系研究

目的探讨血清肺腺癌转录相关转录本1(MALAT1)、微RNA-1(miR-1)水平与急性心肌梗死(AMI)继发室性心律失常(VA)的关系。方法选取2019年10月至2021年6月临汾市中心医院收治的AMI病人270例,均行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)治疗,术后进行24 h动态心电图监测,根据Lown分级将病人分为心律正常组(0级,166例)和心律失常组(1~5级,104例)。收集所有病人一般资料,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测血清MALAT1、miR-1水平,Pearson法分析AMI继发VA病人血清MALAT1水平与miR-1水平的相关性,采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清MALAT1、miR-1水平对AMI病人继发VA的诊断价值,并分析AMI病人继发VA的影响因素。结果心律失常组心肌标志物肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血清N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白(cTnI)、左心室舒张末期内径(LVEDD)水平、Gensini积分、右冠脉病变比例及血清MALAT1(1.28±0.34)、miR-1(1.24±0.33)水平明显高于心律正常组(1.01±0.12、0.99±0.10)(P<0.05),左心室射血分数(LVEF)水平明显低于心律正常组(P<0.05);心律失常5级、4级病人血清MALAT1(1.76±0.47、1.45±0.40)、miR-1(1.69±0.43、1.40±0.39)水平明显高于3级(1.12±0.30、1.09±0.31)、2级(1.08±0.29、1.05±0.26)、1级(1.04±0.27、1.02±0.25)病人(P<0.05),心律失常5级病人血清MALAT1(1.76±0.47)、miR-1(1.69±0.43)水平明显高于4级(1.45±0.40、1.40±0.39)病人(P<0.05);AMI继发VA病人血清MALAT1水平与miR-1水平呈正相关(P<0.05);血清MALAT1、miR-1水平诊断AMI继发VA的曲线下面积分别为0.77、0.81,灵敏度分别为69.2%、73.1%,特异度分别为81.9%、88.0%,最佳截断值分别为1.13、1.15;二者联合诊断AMI继发VA的曲线下面积、灵敏度、特异度分别为0.90、84.6%、86.7%,二者联合诊断的曲线下面积高于二者单独诊断(P<0.05);logistic回归分析结果显示,高CK-MB、高NT-proBNP、高cTnI、高LVEDD、高Gensini积分、右冠脉病变、低LVEF及血清MALAT1高表达、miR-1高表达为AMI病人继发VA的独立危险因素(P<0.05)。结论AMI继发VA病人血清MALAT1、miR-1水平升高,二者均为AMI病人继发VA的独立危险因素,可用于诊断AMI病人是否继发VA,联合检测诊断价值更高。

血清LncRNA MALAT1表达水平对EB病毒感染相关胃癌的诊断和预后价值研究

目的 探讨长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,LncRNAs)肺腺癌相关转录物1(metastasis-associated lung adenocarcinoma tran 1,MALAT1)在EB病毒相关胃癌(EBV-associated gastric carcinoma,EBVaGC)患者血清中的表达及与患者预后的关系。方法 选取2015年1月~2017年1月河北北方学院附属第一医院消化内科收治的233例胃癌患者为研究对象,根据EBV DNA结果将患者分为EBV DNA阳性组(n=123)和EBV DNA阴性组(n=110);同时选取在该院进行健康体检的志愿者100例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清LncRNA MALAT1水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析LncRNA MALAT1水平对EBVaGC患者诊断的敏感度及特异度;利用KaplanMeier法分析LncRNA MALAT1表达与患者生存时间的关系;采用多因素COX回归风险模型分析EBVaGC患者的预后影响因素。结果 EBV DNA阳性组EBVaGC患者血清中LncRNA MALAT1表达水平高于EBV DNA阴性组和健康对照组(1.27±0.03 vs 1.12±0.05,0.96±0.04),差异有统计学意义(F=1620.239,P=0.000);EBVaGC患者血清中LncRNA MALAT1表达与年龄、主癌位置、脉管癌栓、肿瘤直径、肿瘤组织学类型、神经侵犯、浸润深度无关(t=1.320~1.970,均P> 0.05),与性别、分化程度、淋巴结转移、TNM分期、Lauren分型有关(t=4.880~29.748,均P=0.000);ROC结果显示,LncRNA MALAT1预测EBVaGC患者的曲线下面积(AUC)为0.863(95%CI:0.811~0.906),敏感度和特异度分别为92.68%,81.00%;Kaplan-Meier分析结果显示,LncRNA MALAT1高表达组患者五年累积生存率34.62%(27/78)显著低于低表达组57.78%(26/45),差异有统计学意义(Log rankχ^(2)=6.944,P=0.008);COX结果显示,年龄、分化程度、淋巴结转移、TNM分期、LncRNA MALAT1高表达均是影响EBVaGC患者生存状况的危险因素。结论 EBVaGC患者血清中LncRNA MALAT1表达水平上调,与EBV感染相关胃癌的进展和预后密切相关,可作为诊断EBVaGC患者的潜在血清标志物。