69例再生障碍性贫血分型和中西医结合治疗的研究

取６９例再生障碍性贫血（再障）患者骨髓作红系祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ）和粒单祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）培养，同时测定红系祖细胞对雄性激素的敏感性和单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）对正常骨髓ＣＦＵ－ＧＭ的抑制率。６９例再障分成三型：干细胞缺乏型１０例，免疫介导型３０例和雄激素反应型２９例。按分型采取不同的中西医结合方案治疗，雄激素反应型主要用雄性激素和中药治疗，有效率高达９２．３％；免疫介导型中１７例谨慎使用免疫抑制剂和中药治疗，有效率为７０．６％；１０例于细胞缺乏型病情重，用综合治疗仅３例有效；５６例随访总有效率为７３．２％，以上结果提示针对分型治疗，可显著地提高疗效。

补肾泻肝方药对再生障碍性贫血患者骨髓造血祖细胞的影响

为研究补肾泻肝方药治疗再生障碍性贫血的机理 ,将 2 5例再障患者 (其中肾阴虚 14例 ,肾阳虚 11例 )的骨髓进行体外培养 ,观察不同中药复方 [滋肾阴 (Ⅰ )、泻肝火 (Ⅱ )、温肾阳 (Ⅲ )、补肾泻肝 (Ⅳ ) ]和细胞因子 (IL - 2、IFN -γ)对其红系、粒 -巨噬系造血祖细胞 (CFU -E、BFU -E、CFU -GM)集落形成的影响。结果 :Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ方对CFU -E、BFU -E、CFU -GM均有促进作用 ,Ⅳ方的作用尤其明显 ,而Ⅱ方无此作用 ;IL - 2、IFN -γ对上述指标有抑制作用 ;加入Ⅱ、Ⅳ方后能减除这种抑制 ,但Ⅰ、Ⅲ方无此作用。提示 :补肾泻肝方药是治疗再障的有效处方 ,减除IL - 2、IFN -γ对造血祖细胞的抑制、促进CFU -E、BFU -E、CFU

四物汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓细胞增殖的影响研究

目的-研究四物汤对再生障碍性贫血(AA)小鼠骨髓细胞体外增殖的影响,探讨其治疗AA的机制。方法-采用流式细胞仪、骨髓造血祖细胞培养等技术,检测四物汤对AA小鼠骨髓细胞的增殖变化。结果-四物汤能促进骨髓有核细胞进入G2/S期、增加CFU-GM、CFU-E、BFU-E集落数,且与自然恢复组有明显增强的差异。结论-四物汤在体内有促进AA小鼠骨髓细胞增殖的作用,为补血药治疗AA提供了实验与理论依据。

补肾活血方药对慢性再生障碍性贫血患者骨髓细胞体外影响的实验研究

目的 研究补肾活血方药对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者骨髓细胞体外增殖的影响 ,探讨其治疗CAA的机制。方法 采用细胞培养 ,光镜下观察补肾活血中药作用于CAA患者骨髓细胞后的形态学 ;3 H TdR掺入和液体闪烁技术方法 ,检测补肾活血中药对CAA患者骨髓细胞的增殖变化。结果 加入补肾活血中药组 ,CAA患者骨髓细胞培养第 4 8小时见细胞丛明显增多 ,72h见大量集落形成 ;3 H TdR掺入法显示 ,补肾活血中药组骨髓细胞的增殖 ,以每孔 75g L最有效。在 5 0～ 10 0g L范围内 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;2 5g L和 12 5g L组与对照组比较差异无显著性 (P <0 .0 5 )。结论 补肾活血方药在体外有促进CAA患者骨髓细胞增殖的作用 。

再生障碍性贫血患者骨髓中RCAS1水平的研究

目的分析RCAS1在再生障碍性贫血患者骨髓上清及骨髓基质细胞培养上清中的表达。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定17例再生障碍性贫血患者及18例正常对照骨髓上清及骨髓基质细胞培养上清中sRCAS1水平。结果①再生障碍性贫血患者骨髓上清中sRCAS1水平为(0.37±0.14)μg/L,正常对照为(0.09±0.11)μg/L(P<0.05)。②再生障碍性贫血患者基质细胞培养上清中sRCAS1水平为(1.00±0.08)μg/L,正常对照组为(0.81±0.05)μg/L(P<0.05)。结论再生障碍性贫血患者骨髓上清及骨髓基质细胞培养上清中sRCAS1水平明显高于正常对照组。

再生障碍性贫血患者骨髓CFU-GM及血清细胞毒试验18例临床分析

目的 :探讨再生障碍性贫血 (简称再障 )的体液免疫抑制发病机理。方法 :对 18例再障患者 (急性再障 6例、慢性再障 12例 )进行骨髓CFU GM培养及血清细胞毒试验。结果 :16例骨髓CFU GM培养集落数明显低于正常对照组(P <0 0 1) ,15例存在有造血干细胞缺陷、细胞和体液免疫异常及微环境异常 ,病人血清经 5 6℃ 30min水浴灭活前后对正常骨髓CFU GM的刺激作用明显不一 ,而且在同属于造血干细胞缺陷的病例中急性再障与慢性再障比较也有显著性差异。结论 :骨髓CFU GM及血清细胞毒试验在对再障体液免疫抑制发病机理研究中起有协同作用。

再生障碍性贫血与难治性贫血骨髓长期培养比较及其意义

比较正常人、再生障碍性贫血（ＡＡ）、难治性贫血（ＲＡ）患者的骨髓长期培养（ＬＴＢＭＣ）结果。正常人骨髓培养后３～４周融合并出现脂肪细胞和“鹅卵石区”；ＡＡ骨髓于３～４周后呈融合、部分融合和完全不融合３种；ＲＡ细胞易于聚集呈局灶性生长，１～２周内出现形态大小不一的脂肪细胞，于２～３周融合。培养４周时，正常、ＡＡ、ＲＡ的“鹅卵石区”（２２ｍｍ×２２ｍｍ）、每高倍视野的巨噬细胞数量分别为１２８．６±１２．８．１７．５±６．５，４３．０±６．０；２５．４±２．１，１３．４±２．８，４３．０±３．３。表明不同造血状态的ＬＴＢＭＣ存在明显差异。ＬＴＢＭＣ对慢性ＡＡ与ＲＡ有鉴别诊断价值。

再生障碍性贫血骨髓细胞体外长期培养

骨髓细胞体外长期培养(long-term marrow culture,LTMC)可了解基质细胞及其分子产物对造血干细胞分化全过程中各阶段的调节作用。本文报道利用长期液体培养,观察再生障碍性贫血(下称再障)患者骨髓细胞体外生长规律及其临床意义,证实正常骨髓培养3～4周后皆形成基质细胞层,而再障患者中,9/11例培养后虽然可形成基质细胞层,但“鹅卵石”样区域较少且形态亦较小。2例培养后一直未形成基质细胞层。计数上清液中未粘附细胞及CFU-GM总数,发现正常对照及再障骨髓培养一周后非粘附细胞即渐下降,两者的下降率类似。正常对照骨髓平均接种CFU-GM为415/10~6MNC,随培养时间延长CFU-GM数亦渐减少,但可维持5周以上。再障患者骨髓的CFU-GM生长极少,7/11例从接种起一直未见CFU-GM生长,而1例初治慢性、2例经治疗好转和1例复发病人的骨髓接种时含有一定量的CFU-GM,在培养过程中亦可维持2～4周。认为LTMC更适于对再障发病机理的分析,从而对指导临床治疗有重要意义。

严重型再生障碍性贫血患者骨髓造血祖细胞集落形成与免疫抑制治疗疗效的关系

目的：进一步阐明严重型再生障碍性贫血（ＳＡＡ）患者骨髓造血干细胞缺陷的实质；初步分析ＳＡＡ患者骨髓造血祖细胞集落的形成与免疫抑制治疗（ＩＳＴ）疗效的关系。方法：采用造血祖细胞甲基纤维素半固体培养法。结果：研究的３０例初诊ＳＡＡ患者中，９０％的患者ＣＦＵ－Ｅ，ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－ＧＭ的形成明显减少，５６．７％的患者治疗前无任何集落形成，然而，有１０％的患者，其ＣＦＵ－Ｅ，ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ中的１种或２种集落正常或接近正常；ＩＳＴ可使５９．１％的患者出现一系以上的集落形成或集落形成的增加，治疗前后比较，具有显著性差异（ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－ＥＰ＜０．０１，ＣＦＵ－ＧＭＰ＜０．０５），但多数患者集落的形成达不到正常水平，并有２２．７％的患者无集落形成；治疗前有集落形成患者的ＩＳＴ有效率为８０％，而无集落形成者为５０％，但差异不明显（Ｐ＞０．０５）；ＳＡＡ患者骨髓造血祖细胞集落形成的增加往往落后于ＩＳＴ疗效的出现，而骨髓象巨核细胞的出现常伴有造血祖细胞集落形成的明显增加。结论：多数ＳＡＡ存在造血干、祖细胞的缺陷且可能是由免疫损伤机制引起；ＩＳＴ可改善ＳＡＡ患者的体内、外造血；ＩＳＴ前后检测骨髓造血祖细胞集落的形?

再生障碍性贫血患者血浆对正常骨髓巨核系祖细胞体外增殖分化作用的研究

应用骨髓长期培养（ＬＴＢＭＣ）法研究了再生障碍性贫血（再障）患者血浆的巨核细胞集落刺激活性（ＭＫ－ＣＳＡ）。分别用再障血浆、正常ＡＢ混合血浆和特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患者血浆作为刺激正常骨髓巨核细胞生长的活性来源。结果显示三组培养贴壁层形成情况类似；再障组悬浮液中累积细胞数（３．１９±０．５４）×１０￣７高于对照组（２．４８±０．６０）×１０￣７，与ＩＴＰ组（２．６４±０．６４）×１０￣７比较，统计学差异不显著；再障组悬浮液中巨核系祖细胞（ＣＦＵ－ＭＫ）维持时间长。直接对正常骨髓细胞作半固体培养，发现再障组形成的巨核细胞集落数（９５．４±３５．２／２×１０￣５个细胞）高于对照组（４３．５±２０．６／２×１０￣５个细胞）。结果表明再障血浆具有较高ＭＫ－ＣＳＡ，推测再障患者可能存在着原发性ＣＦＵ－ＭＫ缺陷，血浆中ＭＫ－ＣＳＡ升高可能是机体的一种反馈性调节。