龙眼拟茎点霉(Phomopsis longanae Chi)的生物学特性研究

龙眼拟茎点霉（Phomopsis longanae Chi）是导致采后龙眼果实腐烂的主要病原菌,研究了温度、湿度、pH值、光照、营养、越冬越夏等条件对龙眼拟茎点霉菌丝生长、产孢和孢子萌发的影响。结果表明：龙眼拟茎点霉生长适温为25℃,最适pH6~7;产生子座的最适温度为22~25℃,最适pH6,还需要一定的光照;以蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉和D-果糖为碳源和以蛋白胨、硫酸铵和硝酸铵为氮源的培养基最有利于龙眼拟茎点霉的生长发育;分生孢子的大量萌发要求高湿度和营养刺激,最适萌发温度25~28℃,最适pH6~7,在分生孢子器中,分生孢子的存活时间长于1年;该菌菌丝的致死温度为59℃（10 min）,分生孢子为50℃（10 min）。

饥饿胁迫下龙眼果实脱落与果实不同组织能荷变化的关系

在龙眼果实发育过程中因碳水化合物供应不足而频繁发生采前落果。碳水化合物的代谢与能量代谢密切相关,而能荷的变化涉及到呼吸及碳水化合物消耗,是衡量果实生理机能的重要指标。为了揭示龙眼果实非正常脱落与能荷的关系,本研究以储良龙眼发育后期(花后80 d)果实为材料,采用果穗环剥处理阻断碳水化合物供应人为制造饥饿胁迫,可导致5 d内果实完全脱落。在此过程中,本研究分析了果实脱落过程中各组织ATP、ADP和AMP含量及能荷水平的变化。结果表明:果实各组织能荷值表现为种子>果皮>果肉,而伴随着饥饿胁迫加剧,果实脱落进程中,整个试验过程,ATP显著降低,AMP显著上升,各组织的能荷值呈现下降趋势,但种子能荷值降幅最小,种子是能荷最稳定的器官。这些结果表明,饥饿胁迫可导致果实能量水平降低,但是不同组织能量变化幅度不同,种子可维持相对稳定的能荷水平,暗示饥饿胁迫下,果实的资源优先供应种子,进而维持其能量状态。

反季节龙眼不同发育时期果实脱落响应差异与果实呼吸耗氧量的关系

反季节龙眼在果实发育过程中落果现象非常严重。前期的研究表明,果实中碳水化合物水平的下降与果实脱落密切相关。为了进一步了解不同发育时期果实的碳水化合物代谢变化与脱落差异的关系,以反季节储良龙眼为试材,果穗从树上剪下后迅速插入清水中并去除叶片诱发果实脱落,通过测定胁迫处理下3个发育时期果实落果率、呼吸耗氧量、果柄分离力变化,检测不同光强对3个时期果实呼吸的影响,发现不同发育时期龙眼果实对脱落的敏感性不同。饥饿胁迫迅速启动了各发育时期果实的脱落响应,但3个时期果实脱落响应差异较大,幼果期果实对饥饿胁迫的响应较中期和后期延后2 d,果实发育中期和后期脱落响应更剧烈;幼果期果实呼吸耗氧量较低,而果实发育中期和后期呼吸耗氧量较高;随着光强的增加,仅幼果期果实呼吸作用未造成氧气的下降,还出现了氧气的释放。幼果期果柄分离力下降也较果实发育中期和后期缓慢。因此,本研究结果表明,在胁迫条件下果实呼吸作用与果实脱落密切相关,果实呼吸强度越强;在饥饿胁迫条件下果柄分离力下降越快,果实脱落越快。龙眼幼果期可通过果皮进行光合作用部分代偿呼吸对碳水化合物的消耗。幼果期饥饿胁迫下落果慢的主要原因是低的呼吸消耗和具有一定的光合能力,因此,龙眼幼果是一个部分自养的器官。

拟茎点霉侵染对龙眼果实采后果皮褐变和活性氧代谢的影响

【目的】研究拟茎点霉侵染对龙眼果实采后果皮褐变和活性氧代谢的影响。【方法】采后龙眼果实用拟茎点霉孢子悬浮液(浓度为104个孢子/mL)浸泡接种5 min,以无菌水处理的龙眼果实为对照。经过处理的果实在(28 1)℃、相对湿度90%下贮藏,贮藏期间定期测定果实病害指数、果皮褐变指数、MDA含量、产生速率、活性氧清除酶(SOD、CAT、APX)活性和内源抗氧化物质(AsA、GSH)含量的变化。【结果】与对照果实相比,拟茎点霉侵染提高了龙眼果实病害指数和果皮褐变指数。同时,拟茎点霉侵染促进龙眼果皮产生速率增加,且在整个侵染过程维持较高水平;拟茎点霉侵染0—2 d内的果皮GSH含量和APX活性明显下降而SOD和CAT活性快速上升,侵染2—5 d内的果皮APX活性快速上升而SOD和CAT活性快速下降,侵染5 d后的果皮SOD和APX活性快速下降;在整个侵染过程的果皮AsA含量快速下降,而MDA含量增加。【结论】拟茎点霉侵染导致龙眼果皮活性氧清除能力下降而积累大量活性氧,大量的活性氧对细胞膜结构的破坏会引起细胞区室化功能的丧失,使多酚氧化酶与酚类物质接触,其结果引起酚类物质的酶促氧化和黑褐色高聚物的形成而导致龙眼果皮褐变。

热处理抑制采后龙眼果肉自溶及细胞壁物质降解

为了阐明热水处理抑制采后龙眼果实果肉自溶的作用机理,研究热水处理对采后龙眼果实果肉自溶和细胞壁组分含量、细胞壁降解酶活性的影响。将"福眼"龙眼果实经50℃热水处理10 min,用0.015 mm厚的聚乙烯薄膜袋密封包装,贮藏于(15±1)℃条件下。在贮藏期间定期测定龙眼果实果肉自溶指数、细胞壁组分含量和细胞壁降解酶活性。结果表明:与未经热水处理,相同贮藏条件下的对照果实比,热处理可显著(P<0.05)抑制龙眼果实果肉自溶指数的上升,降低果胶甲酯酶(pectinmethylesterase,PME)、多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)、β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-Gal)和纤维素酶(cellulase,CX)的活性,延缓水溶性果胶(water-soluble pectin,WSP)含量的上升和离子结合型果胶(ionic-soluble pectin,ISP)、共价结合型果胶(covalent-soluble pectin,CSP)、半纤维素和纤维素含量的下降。因此认为,热处理可通过降低采后龙眼果实果肉细胞壁降解酶的活性而减少细胞壁组分的降解,从而维持细胞壁结构的完整性,抑制果肉自溶的发生。研究结果为热处理技术在采后龙眼果实保鲜中的应用提供参考。

‘东壁’和‘福眼’龙眼果实果皮褐变差异的生理机制

比较研究在温度(8±1)℃、相对湿度85%贮藏条件下‘东壁’和‘福眼’龙眼果实的果皮褐变差异及其与活性氧及酚类物质代谢的关系。结果表明:贮藏期间,‘东壁’龙眼果实的果皮褐变指数、果皮O2-·产生速率、丙二醛含量、细胞膜透性都显著低于‘福眼’龙眼,而活性氧清除酶(超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸氧化酶(APX))活性和内源抗氧化物质(还原型抗坏血酸(As A)、还原型谷胱甘肽(GSH))含量都显著高于‘福眼’龙眼;‘东壁’龙眼果实的果皮多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性都低于‘福眼’龙眼,而果皮花色素苷、类黄酮和总酚含量则高于‘福眼’龙眼。因此,采后‘东壁’龙眼果实较不容易发生果皮褐变,与其具有较强的活性氧清除能力,能减少O2-·积累,减轻膜脂过氧化作用,较好地保持龙眼果皮细胞膜结构的完整性,延缓PPO、POD与酚类物质接触而减少酚类物质的酶促氧化褐变有关。

DNP和ATP对Phomopsis longanae Chi侵染的龙眼果实病害发生、能荷状态和呼吸代谢的调控

与拟茎点霉接种果实相比,DNP能提高拟茎点霉接种果实的病害指数和果皮褐变指数,提高果实呼吸速率和果皮COX、AAO、PPO活性及NAD和NADH含量,降低果皮NADK活性和NADP、NADPH含量及能荷值。而ATP则能降低拟茎点霉接种果实的病害指数和果皮褐变指数,降低果实呼吸速率和果皮COX、AAO、PPO活性及NAD和NADH含量,提高果皮NADK活性和NADP、NADPH含量,维持较高的果皮能荷值。据此认为,DNP处理促进拟茎点霉侵染所致龙眼果实采后病害发生,与DNP加剧能量亏缺、削弱磷酸戊糖呼吸代谢途径及增强COX、AAO和PPO等呼吸末端氧化酶活性有关;而ATP处理延缓拟茎点霉侵染所致龙眼果实采后病害发生,与ATP维持较高的能荷值、增强磷酸戊糖呼吸代谢途径及降低COX、AAO、PPO等呼吸末端氧化酶活性有关。

龙眼果实潜伏性病原真菌的初步研究

采用快速、简便的果肉分离法,从健康龙眼果实中分离潜伏侵染的真菌。经形态和致病性鉴定,2个分离频率较高的潜伏侵染真菌为龙眼拟茎点霉[Phomopsis longanae Chi]和可可毛色二孢[Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff. & Maubl.];不同发育阶段的龙眼果实分离结果表明,龙眼拟茎点霉在花期即可侵染,而可可毛色二孢主要在龙眼果实膨大期侵染。研究结果为制定龙眼果实采后病害综合防治策略提供依据。

过氧化氢对采后龙眼果实贮藏品质的影响

过量的活性氧是导致果蔬采后品质劣变的主要原因之一。以活性最为稳定的过氧化氢作为活性氧,研究活性氧对采后龙眼果实贮藏品质的影响。结果显示:与对照龙眼果实相比,过氧化氢处理的龙眼果实采后贮藏期间具较低的果皮叶绿素、类胡萝卜素和类黄酮等色素含量,较低的果肉可溶性糖、蔗糖和VC等营养物质含量,较高的龙眼果皮褐变指数和果肉自溶指数,及较低的龙眼果实商品率。据此认为,活性氧在采后龙眼果实品质劣变中起重要的促进作用,活性氧会促进采后龙眼果实外观品质劣变和果肉营养物质的降解,从而降低采后龙眼果实商品价值。

SO_2对龙眼冷藏效果及货架寿命的影响

ＳＯ２处理结合低温贮藏，显著降低了龙眼（ＤｉｍｏｃａｒｐｕｓｌｏｎｇａｎａＬｏｕｒ．）果实的呼吸强度和果皮ＰＰＯ（多酚氧化酶）活性出库后，仍能维持这种抑制效果，从而抑制了果皮褐变，改善了果实外观。

‘福眼’和‘东壁’龙眼果实贮藏性与采后品质变化比较

比较研究了福建省主栽品种‘福眼’和‘东壁’龙眼果实在(8±1)℃、85%相对湿度条件下贮藏的果实贮藏性和品质变化差异。结果表明:与‘福眼’龙眼相比,‘东壁’龙眼果实贮藏性较好,采后贮藏期间的‘东壁’龙眼果实好果率较高,而果实失重率、果皮褐变指数、果肉自溶指数、果肉褐变度较低。采收当天的‘东壁’龙眼果实的果肉可溶性固形物(TSS)、总糖和维生素C含量都高于‘福眼’龙眼。采后贮藏期间,‘东壁’龙眼果实的果肉TSS、可滴定酸、维生素C和总糖含量的变化比‘福眼’龙眼果实少;在同一贮藏时间,‘东壁’龙眼果实的果肉TSS、维生素C和总糖含量都高于‘福眼’龙眼果实。因此认为,‘东壁’龙眼果实的贮藏性较好。

缺镁胁迫对龙眼苗期氮代谢的影响

采用溶液培养方法研究了缺镁胁迫对龙眼苗期氮代谢的影响。结果表明 ,缺镁胁迫下 ,龙眼叶片硝酸还原酶 (NR)活性下降 ,游离氨基酸总量增加 ,水解氨基酸总量减少 ,蛋白质合成受阻而分解加剧 ;核酸酶 (RNase)活性提高 ,核糖核酸 (RNA)、脱氧核糖核酸 (DNA)含量降低 ,缺镁对RNA的影响比DNA大 ;活性氧 (O2 ·-)净产生速率增加。统计分析表明 ,缺镁胁迫下 ,龙眼核酸和蛋白质含量下降是其合成受阻。

龙眼果实加工技术研究进展

综述了龙眼干、龙眼罐头、龙眼汁、龙眼酒、龙眼膏等龙眼果实加工产品的现状和加工新技术,展望了龙眼果实加工产品的发展前景,旨在为龙眼加工业的发展和龙眼果实加工新产品的开发提供参考。

37份龙眼种质资源亲缘关系的ISSR分析

本研究利用ISSR技术对37份龙眼种质资源进行遗传多样性检测。研究结果表明,从100条ISSR引物中筛选出7条重复性好,条带清晰的引物对37份龙眼品种基因组DNA进行扩增,共扩增出54条带,其中43条具有多态性,比率为79.6%。不同龙眼品种间遗传相似系数变幅为0.69～0.97,平均达0.83,说明ISSR标记能够揭示材料间较高的遗传多样性。UPGMA聚类结果表明,ISSR标记能将37份龙眼品种完全区分开,并能将来源于中国、越南和泰国的37份龙眼品种分别聚类到中国、越南和泰国三大品种群,说明龙眼品种资源的亲缘关系与地理因素有关,三个国家的龙眼品种之间存在较大的遗传差异。本研究结果将为为龙眼品种资源的研究利用提供参考。

模拟酸雨对龙眼坐果的影响及钙调节

pH 4.5的酸雨处理的花粉萌发率比CK下降 9.38%,pH 3.5处理可观察到花粉受害的症状 ,花粉萌发率比CK下降 2 4.2 3%.pH 4.0的酸雨处理雌花 ,其坐果率显著下降 (P <0 .0 5 ) .0 .0 2～ 0 .0 4mmol/L的Ca(NO3 ) 2 溶液处理显著促进酸雨胁迫下花粉的萌发 ,当Ca(NO3 ) 2 的浓度超过 0 .0 8mmol/L时则促进作用开始减弱 .酸雨胁迫后用 2mmol/LCa(NO3 ) 2 溶液或清水喷洒可显著减少因酸雨对雌花和坐果的危害 .图 1表 6参 2

拟茎点霉侵染对采后龙眼果皮LOX活性和膜脂脂肪酸组分的影响

用拟茎点霉(Phomopsis longanae Chi)侵染福眼龙眼(Dimocarpus longan Lour.‘Fuyan’)果实,研究龙眼果皮脂氧合酶(LOX)活性、膜脂脂肪酸组分和细胞膜透性的变化及其与果皮褐变的关系。结果表明:拟茎点霉侵染导致龙眼果皮褐变指数、LOX活性和细胞膜透性增加,不饱和脂肪酸组分[亚油酸(C18:2)、亚麻酸(C18:3)和花生一烯酸(C20:1)]下降而饱和脂肪酸组分[棕榈酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)]增加,脂肪酸不饱和指数(IUFA)和脂肪酸不饱和度下降。拟茎点霉侵染提高龙眼果皮LOX活性和加速膜脂不饱和脂肪酸的降解,从而破坏细胞膜系统的完整性,导致膜系统区室化功能丧失,使多酚氧化酶与酚类物质接触,引起酚类物质的酶促氧化和黑褐色高聚物形成,导致龙眼果皮褐变。

采前喷施胺鲜酯对采后龙眼果实品质和耐贮性的影响

研究采前喷施胺鲜酯对采后龙眼果实品质和耐贮性的影响,为龙眼果实贮藏保鲜提供科学依据和生产指导。以‘福眼’龙眼为材料,在龙眼盛花期后70、90、110 d用浓度为10 mg/kg的胺鲜酯喷施龙眼果实3次,以蒸馏水喷施为对照。龙眼果实在盛花期后120 d采收,采后龙眼果实经过挑选、清洗和晾干后用0.015 mm厚的聚乙烯薄膜袋密封包装,在(28±1)℃、相对湿度85%下贮藏。贮藏期间取样测定果实呼吸强度、果皮色素含量、果肉营养物质含量和果实耐贮性指标。结果表明:与对照龙眼果实对比,采前喷施胺鲜酯可有效降低采后贮藏期间龙眼果实呼吸强度,保持较高的果皮叶绿素、类胡萝卜素、花色素苷和类黄酮含量,及较高的果肉TSS、可溶性总糖、蔗糖和维生素C含量,延缓果皮褐变和果肉自溶的发生,降低果实失重率,保持较高的好果率。因此认为,采前喷施浓度为10 mg/kg的胺鲜酯能有效延缓采后龙眼果实的品质下降、较好维持龙眼果实品质,提高龙眼果实耐贮性和保鲜效果。

保鲜功能微生物FJAT-0809-GLX对龙眼保鲜特性的研究

不同腐烂等级的龙眼果皮POD和PPO酶活性有所不同,0～3级,POD酶活性<12 000 U/min.g,而4级以后POD酶活性均大于12 000 U/min.g;0～3级,PPO酶活性均小于600 U/min.g,而4级和5级的PPO酶活性均大于600 U/min.g,说明随着龙眼果实腐烂程度的加深,烂果的果皮POD和PPO酶活性达到最高。使用保鲜功能微生物FJAT-0809-GLX处理后龙眼果皮的POD和PPO酶活性明显小于对照处理,且基本不影响龙眼果实的可溶性固形物含量,保鲜功能微生物FJAT-0809-GLX处理后龙眼的好果率最高为47.24%,而脱粒率最低,为10.95%,说明保鲜功能微生物FJAT-0809-GLX对龙眼果实具有较好的保鲜效果。

模拟酸雨对龙眼幼果纤维素酶活性和内源激素含量的影响

酸雨胁迫后 ,龙眼幼果IAA、GA1+ 3 、ZRs、DHZRs、iPAs含量下降 ,ABA含量升高 ,生长抑制物ABA和生长促进物(IAA、GA1+ 3 )的比值提高 ,酸雨胁迫还使纤维素酶活性上升 ,促进幼果脱落 .易脱落幼果的纤维素酶活性和ABA含量高于正常幼果 ,而IAA、GA1+ 3 、iPAs、ZRs、DHZRs含量低于正常幼果 .图 6表 1参

“储良”和“石硖”龙眼果实采后品质变化和贮藏性比较

以海南省龙眼主栽品种"储良"(CL)和"石硖"(SX)为试材,比较了两种龙眼种子的大小、果皮和果肉厚度、果皮色泽等外观品质特性。并分别在冷库(6±1)℃、相对湿度75%、内衬有孔塑料袋纸盒外包装的条件下贮藏17 d,测定和分析了2种龙眼的低温贮藏性能。结果表明,SX果实较小、果皮厚且粗糙、果肉清脆;CL果实较大,果皮薄且光滑,果肉绵软。采后低温贮藏期间,SX龙眼果肉可滴定酸(TA)含量变化较缓慢,贮藏17 d时,SX龙眼果实好果率、果肉可溶性固形物含量(SSC)、VC、还原糖含量显著高于CL果实(P<0.05),SX果实呼吸强度、果皮相对电导率、丙二醛(MDA)含量、果肉褐变度、多酚氧化酶(PPO)活性和过氧化物酶(POD)活性均低于CL果实。综上所述,SX龙眼果实在耐低温贮藏方面明显优于CL龙眼果实。