γ-氨基丁酸对枇杷幼果耐寒性的影响

为了探索外源γ-氨基丁酸(GABA)对枇杷幼果耐寒性的影响,分别对五年生川早枇杷幼果喷施0、1、5、10、20 mmol/L GABA溶液,7 d后于人工气候箱-3℃处理24 h,研究GABA对低温胁迫下枇杷幼果相对电导率(REC)、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性及渗透调节物质含量的影响。结果表明,与常温对照相比,低温胁迫可使枇杷幼果的REC、MDA含量和冻害指数明显升高,而经外源GABA处理后枇杷幼果REC、MDA含量和冻害指数明显下降。经GABA处理后,枇杷幼果的超氧化物歧化酶活性、抗坏血酸过氧化物酶活性、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量和脯氨酸含量均较0 mmol/L GABA处理显著升高,并与REC和MDA含量成极显著负相关关系。外源GABA能够通过提高抗氧化酶活性和渗透调节物质含量来缓解冻害对枇杷幼果造成的不利影响,其中20 mmol/L GABA处理对枇杷幼果耐寒性的增强效果最好。

低温胁迫下枇杷幼果转录组的De novo组装和功能注释

【目的】分析低温胁迫下枇杷幼果的转录组,以探讨幼果冻害的分子基础,为深入鉴定枇杷果实生长发育、抗寒性基因和抗寒蛋白提供资料。【方法】以花后75d的"大五星"枇杷幼果为试材,研究低温胁迫(3℃条件下处理12h)下幼果转录组的De novo组装和功能注释,并对其进行生物学信息分析,探索基因表达差异。【结果】低温胁迫下枇杷幼果通过De novo组装产生116 723条contigs,并应用Illumina高能量测序技术得到64 814条unigenes,其中有42 830条被nr、KEGG、COG、GO注释。此外,组装和注释了4 017个枇杷幼果在低温胁迫下表达的差异基因。【结论】发现在枇杷低温耐性中起重要作用的油菜素甾醇生物合成和磷脂酰肌醇信号系统的基因表达上调。

外源NO对低温胁迫下枇杷幼果抗氧化能力的影响

采用0.2,0.5,1.0mmol·L-1的一氧化氮(NO)供体硝普纳(SNP)处理3年生"早钟6号"枇杷幼苗后于-3℃人工气候室内进行低温胁迫,研究SNP处理对枇杷幼果丙二醛(MDA)、脯氨酸(Pro)、过氧化氢(H2O2)、AsA,DHA,GSH和GSSG的含量以及过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏可血酸过氧化物酶(APX)活性的影响,探讨低温胁迫下外源NO对枇杷幼果抗寒性的调控机制。结果表明:SNP处理降低低温胁迫后枇杷幼果MDA和H2O2含量,不同程度上提高CAT,POD,SOD,APX活性和Pro含量,增加了AsA/DHA和GSH/GSSG比值。外源NO通过促进幼果保护酶活性的上升,降低膜质过氧化程度,增加渗透调节物质,可提高枇杷幼果的抗寒性,其中0.5mmol·L-1SNP处理的效果较理想。

SA对低温胁迫后枇杷幼果AsA-GSH循环酶系统的影响

研究水杨酸处理对"早钟6号"枇杷幼果AsA-GSH循环酶系统的影响,探讨SA对枇杷幼果抗寒性的作用机理。结果表明:采用40和70mg·L-1的SA处理可提高低温胁迫后枇杷幼果还原型谷胱甘肽(GSH)含量,降低氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量,导致GSH/GSSG比率的上升,同时也提高低温胁迫后枇杷幼果谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活性,启动细胞的解毒功能,从而降解低温胁迫后所产生的过量过氧化产物。此外,SA处理还可提高低温胁迫后枇杷幼果抗坏血酸过氧化物酶(APX)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)和单脱氢抗坏血酸还原酶(MDAR)活性以及还原型抗坏血酸(AsA)含量,降低氧化型抗坏血酸(DHA)、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量以及相对电导率(REC),导致AsA/DHA比率的上升,提高枇杷幼果组织内部的抗氧化能力,从而起到保护作用。SA处理可提高低温胁迫后枇杷幼果的抗氧化性,增强其抗寒能力,其中以70mg·L-1的SA处理效果较好。

冬春不同栽培环境下‘宁海白’枇杷幼果酚类物质含量与代谢的变化

以露地、套袋和大棚栽培的‘宁海白’枇杷为试材,测定了低温期间和低温解除后的幼果内总酚含量及与酚类物质代谢相关的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性变化。结果表明,在低温期间,露地栽培的枇杷幼果总酚含量显著高于套袋与大棚栽培的幼果;低温结束后露地栽培枇杷幼果的总酚含量虽然高于大棚与套袋果实,但比低温期间明显下降。酚类物质代谢相关酶分析显示,低温期间PAL活性显著高于低温解除后的果实,露地幼果活性高于套袋与大棚;PPO活性低温期间以露地栽培的果实为最低、套袋处理最高,低温结束后以大棚为最低、套袋为最高;POD活性低温期内以露地为最高、大棚最低,低温解除后活性显著下降,但大棚栽培要低于露地与套袋。以上结果表明,酚类物质积累和代谢与枇杷抵抗低温胁迫的响应有关。

低温胁迫对枇杷幼果抗氧化酶系统和组织结构的影响

【目的】研究低温胁迫下枇杷幼果果肉和种子的生理指标及组织结构的变化规律,探索幼果低温伤害的机制。【方法】以"大五星"枇杷最易受冻的幼果为试材,经不同低温胁迫(12,6,3,0,-3,-6℃)处理不同时间(12,24,36,48h),测定幼果果肉和种子的丙二醛(MDA)含量、相对电导率(REC)、抗氧化酶活性,并研究低温胁迫对其组织结构和低温半致死温度(LT50)的影响。【结果】枇杷幼果果肉、种子的LT50分别是-6.1和-4.9℃。果肉、种子分别在0和3℃以上的轻度低温胁迫下,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性上升,MDA含量和REC均较低;但果肉、种子分别在-3和0℃以下重度低温胁迫下,保护酶活性逐渐降低,REC和MDA含量上升。0℃时幼果外果皮细胞出现明显破裂和自溶现象,-3℃时中果皮(果肉)细胞破裂,果实受低温伤害严重。而种子在3℃时种皮细胞出现破裂,0℃时种皮与种胚开始分离,种胚细胞自溶明显,低温伤害较重。【结论】轻度低温胁迫时,过氧化酶系统协同作用可有效清除枇杷幼果果肉和种子细胞内的活性氧;重度胁迫时,酶失去保护功能;枇杷幼果中种子耐低温能力最差,3℃时即出现低温伤害,其次为外果皮,而果肉耐低温能力则最强。

枇杷幼果冻害低温等级指标的确定

根据福建省近5a枇杷幼果低温箱试验和低温过程山坡地枇杷冻害观测试验结果,以及主产省福建、浙江历史灾情资料,采用归纳分析和对比印证等方法,对枇杷幼果冻害的低温等级指标进行研究。结果表明:枇杷幼果冻害低温等级指标可用日最低气温(Tmin)和低温持续天数(DD)表示,各级冻害指标分别为,轻度:-2.5℃<Tmin≤-1.0℃,DD≤3d;中度:-3.5℃<Tmin≤-2.5℃,DD≤3d或-2.5℃<Tmin≤-1.0℃,DD>3d;重度:-4.5℃<Tmin≤-3.5℃,DD≤3d或-3.5℃<Tmin≤-2.5℃,DD>3d;极重:Tmin≤-4.5℃,DD≤3d或Tmin≤-3.5℃,DD>3d。历史灾情资料验证结果表明,冻害等级指标在福建莆田的推算准确率为61%,在浙江临海、黄岩为87.5%,说明枇杷幼果低温冻害等级指标可应用于低温冻害预测。

钙调素拮抗剂TFP对低温胁迫下枇杷幼果AsA-GSH循环的影响

以3年生"早钟6号"枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)容器苗为试材,采用100.0 mmol/L钙调素拮抗剂三氟拉嗪(Trifluoperazine,TFP)的Hoagland营养液砂培法预处理24 h后,于-3℃人工气候室进行低温胁迫,研究钙调素拮抗剂TFP对低温胁迫下枇杷幼果AsA-GSH循环的影响。结果表明:TFP处理导致低温胁迫下枇杷幼果H2O2含量高于单一低温胁迫的LTS处理(Low Temperature Stress,LTS),而AsA和GSH含量低于LTS处理,且两者差异达显著水平(p<0.05);同时GR、DHAR、MDAR、APX活性也受到不同程度的抑制,其中对APX和GR活性的抑制作用较为明显。TFP预处理削弱了枇杷幼果低温胁迫后的抗氧化能力,加重了低温胁迫对幼果的伤害,表明低温胁迫下枇杷幼果的AsA-GSH循环受Ca2+.CaM信使系统的诱导和调控。

冰核细菌对低温胁迫下枇杷幼果中果肉超微结构的影响

以"早钟6号"枇杷幼果为试材,采用人工降温的方法,观察接种冰核细菌后,果肉细胞超微结构在冻害胁迫下的变化过程。结果显示:冰核细菌不同程度地加重了冻害胁迫对枇杷果肉细胞壁、叶绿体和线粒体的破坏程度;冰核细菌对叶绿体的破坏最明显,其次是细胞壁、线粒体;冰核细菌使叶绿体在-1℃发生胞内结冰导致细胞冻害,而未感染冰核细菌的叶绿体则发生胞间结冰,冻害类型不同;与-1℃低温相比,-3℃低温条件下冰核细菌的破坏作用更强。表明冰核细菌的存在加重了低温对细胞的伤害。

水杨酸对低温胁迫下枇杷幼果若干生理生化指标的影响

以3年生枇杷容器苗为试验材料,研究在低温胁迫下水杨酸(SA)处理后枇杷幼果若干生理生化指标的变化。结果表明:SA能增强枇杷幼果的抗寒性,其中以70mg/LSA处理枇杷幼果的效果最好;SA处理枇杷幼果,能增强过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,提高还原型谷胱甘肽(GSH)和类胡萝卜素(Caro)的含量,降低丙二醛(MDA)含量,抑制叶绿素的降解。

不同低温胁迫下早钟6号枇杷幼果细胞超微结构的变化

以枇杷品种早钟6号幼果为试材,采用人工降温的方法,研究低温胁迫下枇杷幼果超微结构的变化.结果表明:6、3℃低温胁迫下,幼果果肉细胞质膜、液泡膜清晰,叶绿体、线粒体结构没有明显变化;0℃低温胁迫下,原生质膜、液泡膜结构完整,叶绿体结构受到较为严重的破坏,线粒体双层膜结构依稀可见,但已经没有明显的内脊,内部呈小泡化;-3℃低温胁迫下,原生质膜、液泡膜均破裂,原生质体浓缩,叶绿体扭曲变形、相互融合,线粒体膜结构受损,内脊消失.可见,一定的低温会对枇杷幼果产生不同程度的伤害,尤其在0℃以下的低温胁迫幼果冻害严重.

硝普钠对低温胁迫下枇杷幼果线粒体AsA-GSH循环代谢的影响

探讨外源一氧化氮供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)处理对低温胁迫下"早钟6号"枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.cv.Zaozhong No.6)幼果线粒体抗氧化系统的影响。以不同浓度的SNP处理"早钟6号"枇杷幼果后再经-3℃低温胁迫处理,测定幼果线粒体的抗氧化物质和抗氧化酶活性的变化。结果表明,低温胁迫下,经0.2和0.5 mmol/L SNP处理的枇杷幼果线粒体过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量均低于对照(CK),而还原型谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸(AsA)含量以及抗坏血酸过氧化物酶(APX,EC 1.11.1.11)、谷胱甘肽还原酶(GR,EC 1.6.4.2)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR,EC 1.8.5.1)和单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR,EC 1.6.5.4)活性均高于CK,但采用1.0 mmol/L较高浓度的SNP处理对提高枇杷幼果抗氧化能力的作用不明显。适当的外源NO处理可提高枇杷幼果线粒体GSH和AsA抗氧化剂的含量以及APX、GR、DHAR和MDHAR酶的活性,降低H2O2和MDA含量,减轻细胞的氧化损伤,增强枇杷幼果在低温胁迫下的抗寒能力。

低温胁迫对枇杷幼果细胞超微结构及膜透性和保护酶活性的影响

以解放钟枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)幼果为试验材料,采用人工降温的方法,研究低温胁迫下枇杷幼果超微结构及膜透性和保护酶活性的变化。结果表明,6和3℃低温胁迫时,枇杷幼果果肉细胞质膜、液泡膜清晰,叶绿体、线粒体结构没有明显的变化,PMP(Plasma Membrane Permeablity,细胞膜透性)、MDA (Malondialdehyde,丙二醛)含量先增加后减少,保护酶活性先增大后减小,且一直维持较高水平,表明有一定的低温适应能力;0℃低温处理原生质膜结构完整,少数叶绿体出现部分解体,双层膜有部分破裂现象,线粒体结构仍清晰可见,PMP、MDA含量、酶活性变化同6和3℃低温胁迫相类似,表明枇杷幼果对0℃低温有一定的适应能力;-3℃低温胁迫下,原生质膜、液泡膜均破裂,原生质体浓缩,叶绿体扭曲变形、相互融合,线粒体膜结构受损,脊消失,PMP、MDA含量均达到最高,保护酶活性受到极为严重的抑制,表明枇杷幼果已经受到冻害。

疏花疏果与套袋对枇杷果实生长与品质的影响

以13～14年生田中枇杷为材料,研究疏花疏果与套袋对枇杷果实生长及品质的影响,结果表明,疏花后可有效减少养分消耗,使座果率提高10.2%;枇杷疏果以每穗留3～5个果为宜,疏果后可使平均单果重和商品果率分别比对照提高13.4g和27.3%,锈斑果率、日灼果率和裂果率分别比对照降低12.4%,0.6%和9.7%;疏果后套袋可完全避免日灼的发生,锈斑果率由35.2%降低到0.9%,商品果率从57.8%提高到96.3%;同时可提高枇杷果实的可食率、可溶性固形物含量、总糖含量和糖酸比,有效改善果实品质、口感风味、色泽和贮藏性能。

枇杷幼果总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性分析

目的采用响应面法优化枇杷幼果总黄酮提取工艺,并考察其抗氧化活性。方法以总黄酮含量作为评价指标,以料液比、乙醇浓度、提取温度、提取时间为考察因素,采用单因素实验与响应面分析相结合的方法,探索最佳提取工艺,并采用总抗氧化能力检测试剂盒(total antioxidant capacity assay kit,ABTS)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和亚铁还原能力实验(fluorescence recovery after photobleaching,FRAP)法分析其抗氧化活性。结果枇杷幼果总黄酮的最佳提取工艺为:液料比为1:64(g:mL),乙醇浓度为49%,提取温度为65℃,提取时间为20 min。在此条件下,枇杷幼果总黄酮的实际得率为76.038 mg/g,与预测得率75.046 mg/g接近。提取的枇杷幼果总黄酮经AB-8大孔树脂纯化,其抗氧化活性明显高于维生素C(VC)。结论响应面法提取枇杷幼果总黄酮工艺可行,且提取物具有很好的抗氧化活性。

枇杷幼树产量与植株性状的相关性研究

对4年生洛阳青枇杷的产量与植株性状的相关性研究结果表明:冠幅、株高、干径、顶生枝数、总枝数之间呈极显著正相关,与结果枝数、坐果数、产量之间不呈正相关;而结果枝数、坐果数与产量之间呈极显著正相关.冠幅、株高、干径、顶生枝数、总枝数在一定范围内(如总枝数为200个)对结果枝数、坐果数、产量有促进作用,超过一定范围,则有抑制作用.通过试验研究认为,枇杷幼树的丰产树体结构为:冠幅250～380 cm,株高216～330 cm,干径6.68～8.48 cm,总枝数150～230个,顶生枝数65～112个,结果枝数16～24个,坐果数90～157个.

枇杷幼果总黄酮提取物对脂肪酶的抑制效应及机制

目的研究天然提取物枇杷幼果总黄酮对脂肪酶活性的抑制效应。方法采用抑制率、抑制动力学以及荧光淬灭等方法研究枇杷幼果总黄酮对脂肪酶的作用。结果枇杷幼果总黄酮对脂肪酶有较为显著的抑制作用,半抑制浓度为(54.51±4.07)μg/mL,以竞争性与非竞争性相混合的方式抑制脂肪酶活性,且枇杷幼果总黄酮能抑制脂肪酶的荧光强度。结论枇杷幼果总黄酮提取物能与脂肪酶结合,进而抑制脂肪酶的活性。

浙江丽水枇杷开花期及幼果期低温冻害时空分布特征

利用1971—2017年浙江丽水各县(市、区)枇杷开花、幼果期逐日最低气温观测资料,根据枇杷冻害等级划分指标,采用趋势分析法分析丽水枇杷开花、幼果期低温冻害的时空分布特征,并利用Mann-Kendall检验分析低温冻害的变化趋势和突变转折。结果表明:丽水枇杷开花、幼果期每年发生低温冻害日数分别为5.3 d和7.7 d;开花期12月下旬发生冻害日数最多,幼果期1月上旬发生冻害日数最多,且都以轻度冻害为主。枇杷开花、幼果期低温冻害日数由东南向东北递增,青田县发生低温冻害的几率最低(冻害日数分别为每年0.6 d和2.7 d),缙云县发生的几率最高(冻害日数每年分别为8.5 d和13.6 d)。枇杷开花、幼果期低温冻害的长期变化趋势表现为显著减少,且极端最低气温明显上升,即丽水枇杷开花、幼果期发生低温冻害的几率减小。枇杷开花、幼果期低温冻害减少发生突变点分别在1989年和1986年前后,且在21世纪初减少趋势最为显著。

防冻处理对枇杷幼果低温冻害的影响

在冷空气来临之前,采用灌水、套袋、熏烟、防冻剂1号等4种处理进行保护枇杷幼果试验.结果表明,4种处理在一定程度上对枇杷幼果均有不同程度的防冻效果,降低了冻害率和冻害指数,除灌水处理,其它处理的冻害率和冻害指数差异达显著水平,防冻效果以防冻剂1号最好.横径≤1.0cm、横径1.0~1.5cm、横径≥1.5cm的枇杷幼果对低温处理的响应存在差异,幼果冻害率和冻害指数随幼果横径增加而降低.

水分条件对陕西安康地区枇杷幼果期生理的影响

为研究不同水分条件对幼果期枇杷生理代谢的影响,以冬春季干旱的陕西安康地区(枇杷自然分布的北缘地区)14年生‘长崎早生’枇杷为材料,从2013年8月底(现蕾期)开始,分别每株树灌水0、10、20、30、40 kg,每月1次,共灌水5次,于2014年1月底采集叶片和幼果进行生理指标测定。结果显示,幼果期枇杷叶片总叶绿素和可溶性蛋白质含量随着灌水量的增加呈现先上升后下降趋势;MDA和可溶性糖含量以及PAL活性在叶片和幼果中均随着灌水量的增加而逐渐降低;脯氨酸含量和SOD活性均随着灌水量的增加呈现下降趋势;相对电导率的变化差异不明显。试验表明,当灌水量30 kg时,可使土壤水分保持在22.2%左右,有利于幼果期枇杷的生长。