洛伐他汀对醛固酮诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

目的:探讨洛伐他汀对醛固酮诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用胰酶消化法分离培养SpragueDawley大鼠心肌成纤维细胞,以3H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)掺入法、四氮唑蓝比色法和流式细胞仪观察洛伐他汀对醛固酮诱导心肌成纤维细胞增殖的DNA合成、细胞数目和细胞周期的影响。结果:(1)0.1,1,10μmol·L-1浓度的洛伐他汀抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞3HTdR掺入率和A490值,其中1,10μmol·L-1组的3HTdR掺入率[(1292±s152),(1030±163)counts·min-1]和A490值[(0.287±0.008),(0.231±0.007)]显著低于对照组、0.1和0.01μmol·L-1组(P<0.01);(2)洛伐他汀可增加G0/G1期细胞百分率,降低S期细胞百分率、增殖指数和DNA含量;(3)甲羟戊酸可逆转洛伐他汀的上述作用。结论:洛伐他汀可抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞增殖及DNA合成,阻止其由G1期进入S期,其机制可能与甲羟戊酸代谢途径有关。

高产洛伐他汀红曲霉复合诱变育种

为了提高洛伐他汀的产量,对红曲霉进行了紫外线与硫酸二乙酯复合诱变处理,并利用粗糙脉孢菌对洛伐他汀的敏感性进行初筛,再通过HPLC法测定其发酵液中洛伐他汀的产量进行复筛。最终得到一株稳定高产的目的菌株,命名为Monascus sp.UV-D-9。其洛伐他汀产量达到(0.289±0.02)mg/m L,相对于出发菌株提高了82.9%。Monascus sp.UV-D-9是一株优良的洛伐他汀生产菌株,有一定的应用价值。

洛伐他汀高产菌株的选育

为了提高红曲霉发酵生产洛伐他汀的能力,分别采用紫外线、亚硝酸、硫酸二乙酯对出发菌株(Monascus sp.)进行诱变处理。结果表明:3种诱变剂对Monascus sp.的诱变效果有较大差异,其中紫外线诱变效果最好,硫酸二乙酯次之,亚硝酸最差。通过筛选,得到2株高产突变株,分别命名为:Monascus sp.UV-5、Monascus sp.DE-8,其产量分别为0.239 mg/m L、0.223 mg/m L,比原始菌株分别提高了42.3%、32.7%。遗传稳定试验结果显示,Monascus sp.UV-5、Monascus sp.DE-8遗传性能较稳定,可应用于生产。