Effects of low molecular weight polysaccharide from Sargassum thunbergii against palmitic acid-induced intracellular lipid accumulation in 3T3-L1 adipocyte and HepG2 cells

Low molecular weight polysaccharides can be isolated from Sargassum thunbergii(LMPST)and in vitro experiments were conducted to evaluate the inhibitory effects on lipids.Two natures of LMPST were attained from S.thunbergii and appraised their LMPST on palmitic acid(PA)induced lipid accretion in Hep G2,and 3T3-L1 cells.LMPST treatment lessened lipid deposition and intracellular free fatty acid and triglyceride intensities in PA-treated above mentioned cells.The mechanistic study publicized that LMPST2 significantly suppressed adipogenesis and stimulated the PA-treated 3T3-L1 cells occupied in the lipolysis pathway.Furthermore,in PA-treated Hep G2 cells,the free fatty acid oxidation was significantly increased by LMPST2.Given these constructive properties of LMPST2 from S.thunbergii,is a potential candidate for diminishing the intracellular lipids,and for a therapeutic agent in those conditions.

低分子量酶解灵芝硒多糖对小鼠肠道菌群的影响

目的研究低分子量灵芝硒多糖对肠道菌群紊乱小鼠的改善调节作用。方法利用生物发酵法培养富集灵芝硒多糖,采用热水浸提法提取灵芝硒多糖,并进一步酶解为低分子量多糖,以水解率为响应值,在单因素基础上,用响应面法优化酶解工艺条件。随后使用超滤膜截取10 kDa以下多糖,以头孢克肟诱导建立肠道紊乱小鼠模型,灌胃低分子量灵芝硒多糖,并测定小鼠体重及肠道内容物短链脂肪酸含量,利用16S rRNA高通量测序分析小鼠肠道菌群变化。结果灵芝硒多糖的富硒量为(327±26)mg/g,多糖含量为(6.14±0.18)%,低分子量多糖的酶解最优工艺为温度50℃、pH 5.5、时间121 min,该条件下的水解率为62.8%。研究表明低分子量多糖对小鼠体重无影响,高通量测序结果显示低分子量灵芝硒多糖能有效改善肠道菌群失调症状,调节肠道菌群的物种组成,显著上调厚壁菌门(Firmicutes)丰度,降低拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度,上调产酸菌乳杆菌属(Lactobacillus)、布劳特氏菌属(Blautia)、链球菌(Streptococcus)、样棒菌属(Allobaculum)、颤螺菌属(Oscillospira)等丰度,增加乙酸、丁酸含量,下调普雷沃氏菌(Prevotella)、拟杆菌属(Bacteroides)、梭菌属(Clostridium)、粪球菌属(Coprococcus)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)丰度,抑制丙酸分泌。结论低分子量灵芝硒多糖具有改善小鼠肠道菌群失调作用,可能是通过调整菌群组成来影响短链脂肪酸分泌达到保护肠道健康的目的。

酶法提取灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的工艺优化及分子量分布

为提高灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉胞壁水溶性糖的提取效率,以灵芝孢子粉胞壁残渣为研究对象,用单因素实验、响应面实验优化酶法胞壁水溶性糖提取工艺,并比较酶法和不同物理法处理的灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的分子量分布。结果表明:最佳提取工艺为溶壁酶加量2%,酶解时间5 h,料液比1︰10(g︰m L)、温度40℃、pH6.5,在此条件下提取的灵芝孢子粉胞壁水溶性糖含量达到17.86%。分子量分布分析结果表明,酶解后的水溶性糖以低聚糖为主。研究结果可为有效利用和开发灵芝孢子粉提供参考。

基于多糖及熵权-TOPSIS的灵芝药材质量评价研究

基于多糖及熵权-逼近理想解排序法(TOPSIS)建立灵芝药材综合定量评价模型,为灵芝药材质量评价及优选最佳批次提供参考。首先测定同产地多批次灵芝药材粗多糖得率、糖组成、总糖含量、蛋白含量和糖醛酸含量,其次将数据进行无量纲化,最后采用熵权-TOPSIS法综合评价不同批次灵芝粗多糖得率质量并建立优选标准。根据各批次灵芝粗多糖得率、成分含量检测及聚类热图分析得出不同批次间灵芝药材粗多糖得率、总糖、糖醛酸含量差异较大,糖组成、蛋白含量差异相对较小,灵芝药材粗多糖得率及内在指标与基源无关联。熵权法赋权分析计算粗多糖得率权重系数最大为23.68%,其次为总糖21.35%及糖醛酸含量13.24%。TOPSIS排序结果及分组显示,栽培灵芝子实体、赤灵芝多糖综合评分较优。综上,同产地不同批次间灵芝药材质量差异较大,基于多指标综合评价的熵权-TOPSIS法可实现对灵芝多糖提取物药材来源快速、高效且准确的优选,在生产和质量全面评价中有广泛的应用前景,也可为其他中药材或饮片质量评价提供参考。

利用大孔树脂对低分子量灵芝多糖脱色的研究

比较了7种树脂对低分子量灵芝多糖脱色的效果,从中筛选出D354-FD、AB-8和HPD4003种树脂,并通过单因素实验和正交实验对脱色条件进行优化,结果表明:采用AB-8树脂,在pH=4.0,温度60℃时,对低分子量灵芝多糖脱色率可达到87.38%,多糖保留率为89.24%,蛋白质去除率为77.11%。

破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的分析

目的研究灵芝孢子粉多糖的组成、相对分子质量及相对分子质量分布,比较破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的异同。方法用不同提取方法提取灵芝孢子粉多糖,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析灵芝孢子粉多糖的相对分子质量及其分布。结果不同提取方法所得灵芝孢子粉多糖的得率不同,破壁后灵芝孢子粉含的多糖是不破壁的1.7倍;灵芝孢子粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,破壁与不破壁的多糖组成完全相同,其相对质量分数略有区别;破壁灵芝孢子粉多糖的GPC有两个多糖峰,相对分子质量分别为7.80×104和1.17×104,而不破壁灵芝孢子粉多糖只有相对分子质量为7.80×104的一个峰。结论破壁与不破壁孢子粉多糖的单糖组成相同,但破壁灵芝孢子粉多糖较不破壁孢子粉的多糖高出70%,增加部分为相对分子质量较小的多糖。这可以解释破壁灵芝孢子粉的功效好于不破壁灵芝孢子粉的原因。

“沪农灵芝1号”品种子实体多糖分析

以水提醇沉法获得"沪农灵芝1号"子实体中的灵芝多糖,并对其结构特征和含量进行分析。高效凝胶尺寸排阻色谱-多角度激光光散射仪-示差折光检测仪联用分析结果表明,该多糖重均相对分子质量为2.28×106,均方根半径为150.1 nm,多分散系数(Mw/Mn)为1.14,在水溶液中呈棒状结构。单糖组成及甲基化分析结合酶解试验结果表明,该多糖为β-1,3/1,6-葡聚糖。经液相色谱法定量检测,段木栽培所得灵芝子实体中,该多糖质量分数为0.52 mg/g,显著高于袋料栽培所得子实体中相应组分的含量。

基于改进层次分析法的灵芝品质安全综合评价

中药材是中医药事业传承和发展的物质基础,灵芝是中国传统的中药材。该文通过改进的层次分析法(analytic hierarchy process,AHP)对灵芝质量安全进行综合评价,为灵芝种植"安全有效、质量可控"提供借鉴。根据中药材质量安全标准,基于样本波动大小和改进的AHP法,计算得到灵芝子实体质量安全指标(多糖、Pb、As、Hg、Cd)的权重;应用AHP综合加权指数法对关键生长期(4层、5层、6层)、典型种植区域(武夷山、长白山、大别山)灵芝子实体质量安全指标风险水平进行评价,并与目前广泛应用的内梅罗指数法计算得到的综合风险指数进行对比。结果表明:灵芝多糖、Pb、As、Hg、Cd等5种质量安全指标单项风险指数大致规律为:Cd>Hg>多糖>As>Pb,均低于中药材质量安全风险水平。改进AHP法得到灵芝质量安全风险指数范围是0.2376~0.7598,小于1,为安全级,内梅罗法得到的风险指数范围是0.2579~0.7292,也为安全级,2种方法比较总体差别不太明显,分析认为质量安全指标权重大的指标多糖、Hg、Cd,其单项风险指数也大。为了进一步对比2种方法优劣,将单项风险指数较大、权重较大的质量安全指标Hg、Cd分别跟单项风险指数较小、权重较小的质量安全指标Pb、As调换,对人体危害较大的质量安全指标Hg和Cd单项风险指数降低,对人体危害较小的Pb和As单项风险指数升高,结果显示综合质量安全风险指数显著降低,降低幅度达68.03%,采用改进AHP的加权综合指数法比内梅罗指数法更能准确反映灵芝质量安全风险状况。该研究不仅对灵芝质量安全评价具有较高借鉴价值,也为灵芝种植"产前、产中、产后"全程控制提供支撑。

赤灵芝多糖分离纯化及体外抗氧化性研究

对赤灵芝多糖进行分离、纯化和体外抗氧化性研究。从赤灵芝中提取粗多糖,通过离子交换色谱、葡聚糖凝胶色谱对粗多糖进行分离纯化,采用凝胶渗透色谱、气相色谱进行分子量和单糖组成测试,对GLPa-2、GLPb-1、GLPc 3个级分进行了体外抗氧化性研究。结果表明,3个多糖级分主要由葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖组成,但单糖的摩尔比不同;GLPa-2、GLPb-1、GLPc的重均分子量分别为3.65×10~5,3.87×10~4,1.38×10~4 Da;各样品对自由基的清除率随浓度升高而增大,呈量效关系,分子量最大的GLPa-2抗氧化活性最佳,表明赤芝多糖的抗氧化活性与其组成相关。

挤压膨化预处理技术对灵芝多糖提取的影响

以灵芝子实体为原料,在热水浸提前进行双螺杆挤压膨化预处理,以提高灵芝多糖的提取得率。分别采用单因素和正交实验对物料提取前的挤压膨化预处理条件进行优化,然后采用高效凝胶排阻色谱对比了挤压膨化预处理对水提灵芝多糖分子量分布的影响。在物料粒度60目时,通过优化得到了双螺杆挤压膨化预处理的最优工艺:套筒温度160℃,固液比1:3,螺杆转速150 r/min,采用上述条件进行预处理后,灵芝多糖的提取得率为7.92%,较未挤压膨化灵芝的多糖提取得率提高了92.7%,表明采用双螺杆挤压膨化技术对灵芝子实体进行预处理,可显著提高灵芝多糖的提取得率,同时双螺杆挤压膨化预处理会增加灵芝多糖提取物中低分子量多糖的比例。

不同标准品对HPGPC法测定多糖相对分子质量的影响

目的 :考察不同标准品对高效凝胶渗透色谱法 (HPGPC)测定多糖相对分子质量的影响。方法 :分别采用葡聚糖和肝素为标准品测定低分子海洋硫酸多糖药物CCS的相对分子质量及其分布。结果 :以葡聚糖和肝素为标准品测定的CCS的重均相对分子质量分别为 2 0 2 78和 7990 ,分布宽度分别为 1.35和 1.4 4。结论 :不同标准品对HPGPC法测定多糖相对分子质量结果影响较大。

灵芝菌丝体多糖的化学组成和溶液性质

用磷酸盐缓冲液在 80℃时从灵芝菌丝体中提取出多糖 -蛋白质缀合物 LM-A.成分分析表明 ,GLM-A主要由葡萄糖组成 ,蛋白质含量为 1 3 % . GLM-A在 1∶ 1水稀释的饱和镉乙二胺溶液中 3 0℃时的特性粘数 [η]和均方根旋转半径〈S2 〉1 /2 的分子量依赖关系分别为 [η]=5.1× 1 0 - 2 M0 .6 0w ( cm3· g- 1 )和〈S2 〉1 /2 =3 .9×1 0 - 2 M0 .5 0w ( nm) .按照 Yamakawa-Fujii-Yoshizaki蠕虫状圆筒模型的粘度理论和 Bohdanecky表达式 ,求得GLM-A的分子参数为 :单位围长摩尔质量 ML=( 53 0± 1 0 ) nm- 1 ,持久长度 q=( 2 .8± 0 .2 ) nm.链直径 d=0 .75nm.实验结果表明 。

微波辅助法提取赤灵芝孢子多糖及其相对分子质量分布分析

将微波辅助提取技术应用于灵芝孢子粉多糖的提取,结合HPGFC分析法检测其多糖相对分子质量的分布,研究了微波对灵芝孢子粉多糖提取率及提取的多糖相对分子质量分布的影响。结果表明:在试验条件限定的范围内,微波辅助提取法的优化提取条件为功率300W,温度125℃,提取时间15min,料液比1∶15(g∶mL),循环提取2次;此法提取的灵芝多糖产品中相对分子质量>10ku的多糖占多糖峰面积百分比50%以上。

不同生育期灵芝子实体水提物与其免疫活性

分析4个灵芝(Ganoderma)菌株不同生育期子实体水提物的提取得率、多糖含量、多糖分子量分布和其对巨噬细胞RAW 264.7 NO释放量的影响。结果表明,随着灵芝的生长发育,其子实体水提物得率呈逐渐降低的趋势,水提物中多糖含量差异显著。水提物经透析后其多糖的分子量分布主要集中在12 kDa至25 kDa之间,但不同生育期间的各分子量多糖的含量存在差异。芝蕾发育初期和成熟后期子实体水提物透析后的免疫活性较好。综合考量,认为成熟后期采收的灵芝子实体虽然多糖含量较低,但生物量较大,可获得较大量活性多糖,所以确定成熟后期为适宜采收期。

低分子量灰树花多糖的分离、纯化和抗肿瘤活性

目的:从灰树花菌丝体中分离纯化低分子量多糖并进行结构鉴定和抗肿瘤活性检测。方法:采用大孔吸附树脂和离子交换纤维素进行分离,SephadexG200柱层析纯化,HPGFC测定分子量,紫外光谱、红外光谱、薄层色谱和高效液相色谱和气相色谱等进行纯度和结构鉴定。用荷瘤小鼠检测抗肿瘤活性。结果:得到大、小两种多糖组分,其中低分子量多糖为白色粉末状,分子量约为2600,单糖组成为D葡萄糖,含α1,3,α1,6,α1,4糖苷键,对S180肉瘤、EAC腹水瘤、Heps实体瘤都有明显抑制作用。结论:分离得到一种灰树花菌丝体多糖,为低分子量的α葡聚糖,初步药效试验表明其具有抗肿瘤作用。

生物多糖超声波辅助提取研究进展

超声辅助提取技术具有提取条件温和、提取时间短和提取率高的优点,已广泛应用于多种生物多糖的提取。本文就超声辅助提取对多糖提取率、多糖结构、多糖加工特性及多糖生理活性的影响研究进行了综述,为生物多糖的超声辅助提取提供参考。

灵芝子实体水溶性多糖的分离和分子量测定

用磷酸盐缓冲液、热水、碱和热碱水分别从灵芝子实体分离出五种水溶性杂多糖ＧＬ１、ＧＬ２、ＧＬ３、ＧＬ４和ＧＬ５．紫外光谱、红外光谱、气相色谱及硫酸咔唑分析结果表明，它们主要由葡聚糖、木糖、甘露糖、半乳糖组成，ＧＬ３、ＧＬ４和ＧＬ５含葡萄糖醛酸．由粘度、光散射和膜渗透压法测定了特性粘度［η］、重均分子量Ｍｗ及数均分子量Ｍｎ，ＧＬ２、ＧＬ３和ＧＬ５多糖的Ｍｗ值分别为１２４×１０４、１２８×１０４和５８×１０４．实验结果表明这些杂多糖含水溶性Ｄ葡聚糖，并且初步推断。

灵芝多糖替代脂肪对猪肉灌肠品质特性影响

以猪肉糜为原料,用0.4%的灵芝多糖分别替代0.0%、2.0%、4.0%、6.0%、8.0%和10.0%的脂肪,考察对产品色泽、蒸煮损失率、保水性、质构以及感官品质的影响。结果显示,随着脂肪替代比的提高,L＊值、b＊值、硬度、咀嚼性和弹性均显著增大（P〈0.05）,a＊值显著降低（P〈0.05）,保水性和蒸煮损失率呈先上升后下降的趋势。过高的脂肪替代比对产品的感官评价带来负面影响,脂肪替代比例为4.0%~8.0%的产品较佳。这样产品脂肪含量低于10%,符合低脂肉制品需求,同时具有较好的品质特性。

不同来源灵芝孢子粉的多糖分子量分布分析与比较

以超声波辅助提取灵芝孢子粉多糖,采用高效体积排阻色谱法分析和比较不同产地和不同厂家的灵芝孢子粉多糖相对分子质量的分布。结果表明,不同来源的孢子粉样品的多糖含量和分子量分布均有较大差异,且多糖含量和相对分子量大小顺序明显不同,故多糖分子量分布也应作为孢子粉的主要质量指标之一。

基于人工神经网络和遗传算法优化灵芝液态发酵培养基

以灵芝(Ganoderma lucidum)胞内相对分子质量较高的多糖组分的峰面积为指标,采用单因素实验筛选液态发酵培养基的氮源及其浓度,按照Box-Behnken设计29个实验组,并进行发酵培养实验,建立数据集;将数据集随机分为训练集(24组)和测试集(5组),训练集用于构建BP神经网络模型,测试集用于评估模型,采用遗传算法对BP神经网络的拟合结果进行寻优。结果表明:模型拟合度可达0.9848;最佳培养基组成为29.0 g·L^(-1)无水葡萄糖、3.7 g·L^(-1)酵母自溶粉、0.3 g·L^(-1)MgSO_(4)·7H_(2)O,采用优化后的发酵培养基培养比未优化的基础培养基培养获得的相对分子质量较高的多糖峰面积提高40.8%。