灵芝蛋白质的分离及其免疫活性研究

利用凝胶层析法对灵芝子实体和破壁孢子粉的蛋白初提液进行了分离,通过体外免疫反应初步检测了各蛋白质成分的免疫调节活性。小鼠脾淋巴细胞转化试验表明其中有三种灵芝蛋白体外具有较强的促进淋巴细胞增殖的活性,分别命名为LZP-1,LZP-2和LZP-3,其中来自于灵芝孢子粉的LZP-2和LZP-3用量为50μg/ml时,它们体外促进淋巴细胞的增殖率可达（41.3±3.1）％和（38.7±4.8）％,并且呈现出一定的剂量依赖效应,而来自于灵芝子实体的LZP-1促进淋巴细胞的增殖率较低（18.2±3.9％,使用剂量为50μg/ml）。SDS-PAGE测得它们的相对分子质量分别为67,000,43,000和45,700。该蛋白有可能是灵芝中具有免疫调节活性的成分之一,具有潜在的临床应用价值。

黑灵芝与赤灵芝提取物的抗氧化作用比较

分别用DPPH法、邻苯三酚自氧化法测定了赤灵芝和黑灵芝提取物的抗氧化作用。结果表明:不同溶剂灵芝提取物对DPPH自由基均有清除作用,对邻苯三酚自氧化也均有抑制作用。不同溶剂提取物的抗氧化活性强弱为:95%乙醇>丙酮>去离子水>氯仿,提取物用量与抗氧化性成正相关,而黑灵芝的抗氧化作用相对赤灵芝要强。同BHT和抗坏血酸进行了比较,黑灵芝的丙酮提取物浓度达到1mg/ml时已超过10mg/mlBHT的抗氧化效果,相当于0.5mg/ml浓度抗坏血酸的抗氧化效果。

灵芝原生质体融合HH系列菌株的选育研究

以灵芝菌株韩芝和红芝为亲本,进行原生质体融合,获得125株再生菌株,其中有锁状联合的菌株103株。与亲本的拮抗结果显示,在与双亲均有拮抗的20株中,10株能正常形成子实体,但菌株间性状差异显著,其中HH55、HH58和HH87具有突出的农艺性状,具有进一步开发应用的价值。

灵芝降血脂作用的实验研究

以大鼠为实验动物 ,研究了灵芝对大鼠血脂水平的影响 ,结果表明 ,灵芝可有效降低血清中甘油三脂 (TG)、胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白 (LDL C)含量及LDL C/HDL C比值 ,具有明显的降血脂作用 .

12味中药对灵芝菌液体培养的影响

观察中药对灵芝菌液体培养中生物量和胞外多糖的影响。采用将 1 2味中药的水提取液分别加入培养基中接种培养 ,培养 7d后测定生物量和胞外多糖。结果显示 ,板蓝根、茵陈、垂盆草3味中药能增加灵芝生物量和胞外多糖量 ;丹参、半枝莲、苦参对灵芝多糖没有大的影响 ,而对生物量有明显地增加 ;虎杖、黄芩、甘草、金银花、白花蛇舌草和连翘

利用板栗苞壳栽培灵芝的试验

分别以板栗苞壳、甘蔗渣、杂木屑、桑枝屑等为原料,设置4个配方进行灵芝栽培试验,从菌丝生长状况、出芝性能和商品性状等方面进行对比分析。结果表明:灵芝在以板栗苞壳为主料的培养基上长势良好,出芝性能较佳,商品性状较好,综合指标与以甘蔗渣为主料栽培的相当,而高于杂木屑和桑枝屑。

灵芝菌丝体大豆固态发酵条件优化

采用大豆、紫云豆、扁豆、白豌豆、青豆、黑豆、青豌豆、绿豆、花云豆、红云豆、白云豆等11种豆类作为灵芝发酵的天然固态培养基,通过接种灵芝进行发酵,对这些天然豆类培养基进行了筛选,并且对培养基厚度、接种量、培养时间以及培养温度等发酵条件进行了优化。结果表明:在所有豆类中,以大豆作为培养基进行灵芝固态发酵时,所获得的游离氨基酸的含量最高,达1 695.5μg/g;灵芝菌丝体降解大豆产游离氨基酸最佳发酵条件为:培养基装量50 g/250mL、接种量10%、培养温度30℃、发酵时间6 d。

径向流色谱脱除灵芝多糖中蛋白质和色素的工艺优化

径向流色谱是一种新型色谱分离纯化技术,在生物工程领域具有很大的应用潜力。文中利用径向流色谱法对灵芝粗多糖进行纯化,以脱除其中的蛋白质和色素。通过单因素及响应面试验,确定了纯化过程的最优化条件:上样流速2 mL/min,洗脱流速40 mL/min,上样量100 mL。在此条件下,蛋白脱除率、色素脱除率和多糖回收率分别达到80.35%、88.52%、85.06%。径向流色谱法与Sevag法、三氯乙酸法、活性炭法及双氧水法等传统化学方法比较的结果表明:径向流色谱脱蛋白、脱色及多糖保留效果均优于其他方法,且在处理过程中未使用有机试剂,突出了径向流色谱法高效、经济、安全、环保等优势。

灵芝孢子对原发性肝癌术后复发影响的研究

目的探究灵芝孢子预防原发性肝癌根治术后复发的作用。方法采用完全随机对照的前瞻性临床研究,60例行根治切除的原发性肝癌患者随机分为术后常规治疗组和灵芝孢子治疗组,随访2年,观察术后无瘤生存率(DFS)、总体生存率(OS)和灵芝孢子的安全性。结果两组患者年龄、性别构成比、肿瘤大小以及术前AFP>20ng/ml、微血管侵犯、肿瘤卫星结节、乙肝感染、肝硬化患者比例的差异无统计学意义;术后抗病毒治疗患者比例以及术中输血、住院时间比较,差异无统计学意义(P<0.05)。术后常规治疗组和灵芝孢子治疗组的2年无瘤生存率分别为53.3%和70.0%(P=0.034),2年总生存率分别为60.0%和83.3%(P=0.023),差异有统计学意义。术后两组患者的并发症和药物副反应发生率无显著性差异(P=0.371)。结论灵芝孢子可以减少肝癌根治术后复发,安全有效。

灵芝提取物对果蝇寿命的影响

以果蝇为试验材料 ,研究了灵芝提取物对果蝇寿命的影响 ,结果表明 :灵芝提取物能有效的降低唾液腺细胞脂褐素及过氧化脂质 ( LPO)含量 。

灵芝提取物对红细胞膜磷脂成分及电泳率的影响

采用家兔红细胞和血小板 ,以薄层色谱扫描法和显微 (细胞 )电泳法 ,探讨灵芝对家兔红细胞膜磷脂成分及电泳率的影响 ,结果显示 :实验组红细胞膜磷脂成分中磷脂酰胆碱显著增多 (p <0 .0 1) ,而鞘磷脂类、磷脂酰乙醇胺都程度不同的减少 (p <0 .0 5 ) ,特别是磷脂酰丝氨酸含量、鞘磷脂类 /磷脂酰胆碱及磷脂酰丝氨酸 /磷脂酰胆碱比值显著减小 (p <0 .0 1) .血小板及红细胞的电泳率显著高于对照组 .表明灵芝对维持细胞膜的稳态有重要作用 .

四种中草药醇提取物降血糖作用的比较研究

以小鼠为实验动物,研究了人参、灵芝、何首乌和枸杞4种中草药的乙醇提取物对实验性糖尿病小鼠血糖水平的影响.结果表明,4种中草药的乙醇提取物均能降低实验性糖尿病小鼠的血糖浓度,以何首乌和灵芝的降糖效果最为明显,而人参和枸杞次之.

不同中药提取液对灵芝摇瓶培养的影响

实验采用将9味中药的水提取液浓度0.125 g/mL分别加入灵芝二级摇瓶发酵培养基中接种培养,观察中药对灵芝菌液体培养中生长量及产灵芝胞外多糖的影响,并初步研究了四味中药板蓝根、茵陈、垂盆草、茯苓不同浓度对灵芝液体培养的影响。结果显示:茵陈、垂盆草、火巷、桔梗、黄苓、板蓝根、连翘7味中药能抑制胞外多糖的分泌,茯苓可明显地促进灵芝的生长,增强胞外多糖的分泌。茯苓浓度在0.045 g/mL-0.165 g/mL能增加灵芝生物量,而在浓度0.045 g/mL-0.085 g/mL时能促进灵芝胞外多糖量,茵陈在浓度0.045 g/mL-0.165g/mL范围内时对灵芝的生长具有促进作用,但对胞外多糖存在抑制作用,垂盆草、板蓝根对灵芝胞外多糖量和生物量有一定程度的抑制作用。

Intraoperative Bleeding Associated with Preoperative Use of <i>Ganoderma lucidum</i>Supplements

Reishi mushroom, also known as Ganoderma lucidum, is a type of edible medicinal fungi that is found throughout Asia. Recent research has shown that it may also have antiplatelet activity that is similar to aspirin. Likewise simvastatin has been shown to inhibit platelet aggregation. In addition, montelukast has anecdotally related to one case of acquired thrombopathia and may interfere with platelet aggregation. We report a case of intraoperative hemorrhage with laparoscopic trocar placement and dissection in a patient concomitantly taking Ganoderma lucidum supplements, simvastatin and montelukast. The hemorrhage only responded to a transfusion of platelets. We believe this is the first report associating Ganoderma lucidum products with an intraoperative hemorrhage. We recommend that patients who are on simvastatin, montelukast or an anticoagulant should refrain from taking Ganoderma lucidum products for seven days prior to surgery.

灵芝孢子促进大鼠受损伤脊髓运动神经元存活及其轴突再生相关蛋白质组学的初步研究

目的:寻找与灵芝孢子促进受损伤脊髓运动神经元存活及其轴突再生相关的蛋白质。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和灵芝孢子治疗组。模型组和灵芝孢子治疗组大鼠行脊神经腹根切断术。灵芝孢子治疗组大鼠胃饲灵芝孢子14 d。取各组大鼠脊髓灰质组织蛋白质,行双向电泳,采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱仪鉴定各组之间有明显差异表达的蛋白质。结果:各组之间共有6种蛋白质的表达存在差异,分别是塌陷反应介导蛋白2(collapsin response mediator protein 2,CRMP-2)、纤维型肌动蛋白加帽蛋白β(F-actin capping protein beta subunit,FCP-β)、异柠檬酸脱氢酶β(isocitrate dehydrogenase[NAD]subunit beta,IDH-β)、三磷酸腺苷酶(ATPase)、谷氨酸草酰乙酸氨基转移酶1(glutamate oxaloace-tate transaminase-1,GOT1)和丙酮酸激酶-M2(M2 pyruvate kinase,M2-PK)。灵芝孢子治疗组CRMP-2、IDH-β、ATPase和GOT1的表达高于模型组,而FCP-β和M2-PK的表达则低于模型组。结论:灵芝孢子可能通过上调或下调上述蛋白质的表达,参与促进大鼠受损伤脊髓运动神经元存活及其轴突再生作用。

灵芝免疫调节蛋白LZ-8基因的克隆与表达

灵芝能够调节和增强机体免疫力,具有极高的药用价值;LZ-8蛋白是最早被分离研究的免疫调节蛋白,它不仅是灵芝生命活动的重要物质而且具有独特免疫原性.实验采用CTAB法提取灵芝基因组DNA,PCR扩增全长lz-8基因;利用XbaⅠ,XhoⅠ位点将lz-8编码基因片段克隆到原核表达载体pET-28 a中,构建原核重组表达质粒pET-lz8,转化BL21（DE3）并进行SDS-PAGE及Western-blot分析.结果表明：克隆的lz-8基因与GenBank报道的序列同源性达到87.5%-100%;重组菌株经IPTG诱导后,lz-8基因得到了高效表达,目的蛋白表达量可达菌体总蛋白的36.52%.

灵芝孢子主要活性成分及其功能研究进展

以灵芝孢子为试材,结合近10年的研究现状,以期明确灵芝孢子主要活性成分种类及功能机制。结果表明:灵芝孢子为灵芝喷射的生殖细胞,含有多糖、蛋白质、三萜类化合物、脂肪酸、矿物质等活性成分。灵芝孢子具有免疫调节、抗肿瘤、治疗神经系统疾病、保肝护肝等多种功能。灵芝孢子活性成分及功能与产地及培养基种类呈现出一定的相关性。该研究可为关于不同地区、不同品种的灵芝孢子的研究明确其主要活性成分、功能的构效关系及在药品、食品等大健康领域的应用提供参考依据。

遂道式微波对灵芝孢子粉的灭菌实验研究

目的优选遂道式微波对灵芝孢子粉灭菌的工艺参数。方法以灭菌效果、灵芝孢子粉质量为指标,采用单因素试验对润湿剂、物料粒度、物料厚度、微波时间进行考察。结果获得较佳遂道式微波对灵芝孢子粉的灭菌工艺,其工艺参数为:75%乙醇润湿剂,30目筛粒度,1cm物料厚度,10min微波灭菌时间。结论优选的工艺灭菌效果佳,且灵芝孢子粉质量达标,该工艺可应用于工业化生产。

灵芝孢子粉对帕金森病大鼠氧化应激反应和神经炎症反应的影响

目的研究灵芝孢子粉对帕金森病(PD)模型大鼠的氧化应激反应和神经炎症反应的影响,探讨灵芝孢子粉治疗帕金森病的潜在作用机制。方法采用脑内定位注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立PD大鼠模型,在模型建立成功后给予灵芝孢子粉治疗(25 g/kg)。给药30 d后,测定大鼠脑组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)和α-肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果灵芝孢子粉治疗组可明显降低PD模型大鼠脑组织中MDA、NO和TNF-α含量,增加GSH含量,提高SOD、GSH-PX的活性。结论灵芝孢子粉对PD模型大鼠具有保护作用,其机制可能与灵芝孢子粉减轻6-OHDA所致的氧化应激损伤和神经炎症反应有关。

灵芝孢子粉对Lewis肺癌小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及血清IL-2的影响

目的探讨灵芝孢子粉对肺癌模型小鼠腹腔巨噬细胞(MΦ)吞噬功能和血清IL-2的影响。方法将昆明种小鼠40只,随机分为4组。正常对照组用0.4 mL NS灌胃,模型组于造模后第一天用0.4 mL NS灌胃,灵芝孢子粉大、小剂量组于造模后第1 d起分别用浓度为100%和50%的灵芝孢子粉0.4 mL灌胃。1次/d,连续灌胃14 d后测定小鼠腹腔MΦ吞噬活性、血清IL-2水平和抑瘤效应。结果灵芝孢子粉可使肺癌小鼠腹腔MΦ吞噬功能及血清IL-2水平明显增强(P<0.01),并明显提高抑瘤率。结论灵芝孢子粉能明显提高肺癌小鼠的抗肿瘤免疫水平,对肺癌具有一定的抑制作用。