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Inhibitory Effects of Natural Compound Alantolactone on Human Non-small Cell Lung Cancer A549 Cells
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作者 ZONG Min-ru ZHAO Ying-hao +3 位作者 ZHANG Kun YANG Long-fei ZHENG Yong-chen HE Cheng-yan 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期241-244,共4页
Alantolactone is a natural compound identified from the roots of Inula helenium L. that has multiple bio-activities. We examined its inhibitory effects on human non-small cell lung cancer(NSCLC) A549 cells. The an-t... Alantolactone is a natural compound identified from the roots of Inula helenium L. that has multiple bio-activities. We examined its inhibitory effects on human non-small cell lung cancer(NSCLC) A549 cells. The an-tiproliferative effect of alantolactone on A549 cells was investigated via MTT[3′-(4,5dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyl tetrazolium bromide] assay and its apoptosis-inducing effect was determined by Hoechst staining and flow cytometry. We found that alantolactone significantly inhibited the proliferation of A549 cells and induced morphological changes typical for apoptosis. Flow cytometry analysis indicates dose-dependent cell cycle retardation at G0/G1 and S stages. The results indicate that alantolactone could be an attractive small-molecular natural compound for further development as a therapeutic drug against NSCLC. 展开更多
关键词 ALANTOLACTONE Non-small cell lung cancer(NSCLC) a549 PROLIFERATION APOPTOSIS
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MRPL21调控YAP1/TAZ通路对非小细胞肺癌A549细胞活性的影响
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作者 方汉林 潘华光 +1 位作者 陈宇 张仁泉 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第4期329-333,共5页
目的探究MRPL21与YAP1/TAZ通路对非小细胞肺癌A549细胞活性的影响,以期为非小细胞肺癌的治疗提供新思路。方法非小细胞肺癌组织及癌旁的组织取自2021年6月~2023年9月于安徽医科大学第一附属医院接受手术治疗的9例非小细胞肺癌患者,通过... 目的探究MRPL21与YAP1/TAZ通路对非小细胞肺癌A549细胞活性的影响,以期为非小细胞肺癌的治疗提供新思路。方法非小细胞肺癌组织及癌旁的组织取自2021年6月~2023年9月于安徽医科大学第一附属医院接受手术治疗的9例非小细胞肺癌患者,通过免疫组化实验方法分析非小细胞肺癌组织中MRPL21的表达水平。将非小细胞肺癌A549细胞分为随机分为3组:siNC组、siMRPL21组以及BPDMA组。CCK-8实验与Hoechst染色检测A549细胞增殖情况;Transwell实验分析A549细胞的侵袭能力;TUNEL染色实验检测A549细胞的凋亡情况;蛋白质印迹实验检测A549细胞中MRPL21、YAP1、TAZ蛋白的表达水平。结果免疫组化实验结果显示,与癌旁的组织比较,非小细胞肺癌组织中的MRPL21表达上调(P<0.05)。与siNC组的A549细胞比较,CCK-8实验与Hoechst染色实验结果显示,siMRPL21组以及BPD-MA组的A549细胞增殖能力减弱(P<0.05)。Transwell实验结果显示,siMRPL21组以及BPD-MA组的A549细胞侵袭能力减弱(P<0.05)。TUNEL染色实验结果显示,siMRPL21组以及BPD-MA组的A549细胞凋亡率增加(P<0.05)。蛋白质印迹实验结果显示,siMRPL21组以及BPD-MA组的A549细胞的YAP1、TAZ蛋白水平表达均明显降低(P<0.05)。结论MRPL21在非小细胞肺癌组织中高表达;抑制MRPL21的表达后,A549细胞的增殖活性、侵袭能力减弱,细胞凋亡率增加,并且这一结果与调控YAP1/TAZ信号通路相关,MRPL21有望成为治疗非小细胞肺癌的新靶点。 展开更多
关键词 MRPL21 YAP1 TAZ 非小细胞肺癌 a549细胞 增殖 凋亡 侵袭
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肺复方通过PI3K/Akt/Nrf2信号通路对A549/DDP细胞耐药性的影响
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作者 谭小宁 梁子成 +1 位作者 柳卓 邱云 《中国中医急症》 2024年第6期963-967,共5页
目的观察肺复方对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的作用及对PI3K/Akt/Nrf2信号通路的影响。方法选用A549/DDP细胞设立不含药血清的空白对照组、肺复方组、顺铂组、联合组,流式细胞术检测各组细胞周期分布和细胞中活性氧(ROS)的变化... 目的观察肺复方对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的作用及对PI3K/Akt/Nrf2信号通路的影响。方法选用A549/DDP细胞设立不含药血清的空白对照组、肺复方组、顺铂组、联合组,流式细胞术检测各组细胞周期分布和细胞中活性氧(ROS)的变化,Western blotting和RT-PCR检测PI3K/Akt/Nrf2信号通路及下游血红素氧合酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达变化。结果与空白对照组、顺铂组相比,联合组引起细胞G1期阻滞,增加细胞内活性氧的累积,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与空白对照组比,肺复方组和联合组能减少Nrf2核转位,下调p-Akt、HO-1、NQO1、MRP1蛋白表达和mRNA表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论肺复方能够通过调控PI3K/Akt/Nrf2信号通路增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 肺癌 肺复方 a549/DDP细胞 PI3K/Akt/Nrf2信号通路 耐药性
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基于Hedgehog通路探讨理肺消积丸对NSCLC A549细胞周期、增殖和迁移的影响
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作者 刘素晓 张丛丛 +6 位作者 孔德琪 黄慧敏 毛静 王元元 刘学芳 冯素香 李亚 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第2期320-327,共8页
目的探讨理肺消积丸对A549细胞的影响作用及对Hedgehog通路的调控作用。方法采用MTT实验筛选理肺消积丸含药血清对A549细胞最佳干预浓度后,将细胞分为6组:对照组、理肺消积含药血清组、Hedgehog通路抑制剂组(Vismodegib组)、顺铂组、理... 目的探讨理肺消积丸对A549细胞的影响作用及对Hedgehog通路的调控作用。方法采用MTT实验筛选理肺消积丸含药血清对A549细胞最佳干预浓度后,将细胞分为6组:对照组、理肺消积含药血清组、Hedgehog通路抑制剂组(Vismodegib组)、顺铂组、理肺消积含药血清+Vismodegib组、理肺消积含药血清+顺铂组。不同干预后,分别采用CCK-8实验检测细胞增殖能力,采用克隆形成实验观察细胞克隆形成能力,采用Transwell实验观察A549细胞迁移能力,采用流式细胞术观察细胞周期比例的变化,采用qRT-PCR和Western blot技术检测Hedgehog通路中Gli1、Ptch1、Smo和CyclinD1 mRNA和蛋白表达的变化。结果浓度为10%的理肺消积丸含药血清能显著抑制A549细胞增殖(P<0.05),降低细胞克隆形成和迁移能力(P<0.05),阻滞细胞周期从G1期到S期转变,同时抑制Gli1、Ptch1、Smo和CyclinD1 mRNA和蛋白表达(P<0.05),且与Vismodegib有良好的协同作用。结论理肺消积丸可显著抑制A549增殖和迁移能力,作用机制可能与其调控Hedgehog通路阻滞细胞周期有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 理肺消积丸 a549细胞 HEDGEHOG通路 细胞周期
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马钱苷抑制NF-κB通路对A549肺癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响
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作者 肖琳 宣立功 +3 位作者 甄伟 张静 冯妍 屈扬扬 《临床肺科杂志》 2024年第8期1234-1239,共6页
目的 探讨马钱苷对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其作用机制。方法 不同浓度马钱苷处理A549细胞后,CCK-8实验检测细胞增殖抑制作用及半数抑制率(IC50);将A549细胞分为对照组、马钱苷低剂量组、马钱苷中剂量组、马钱... 目的 探讨马钱苷对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其作用机制。方法 不同浓度马钱苷处理A549细胞后,CCK-8实验检测细胞增殖抑制作用及半数抑制率(IC50);将A549细胞分为对照组、马钱苷低剂量组、马钱苷中剂量组、马钱苷高剂量组和Diprovocim组,显微镜下观察A549细胞形态,细胞划痕实验检测迁移能力,Transwell实验测定细胞的侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot技术验证环氧合酶(COX)-2、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷酸化(p)-p65、p65蛋白表达。结果 马钱苷抑制A549细胞的增殖(P<0.05);与对照组相比,马钱苷低、中、高剂量组可见悬浮细胞、大部分细胞脱落、细胞皱缩变圆且丝状伪足减少,细胞迁移和侵袭能力以及COX-2、MMP-2、MMP-9、p-p65/p65蛋白表达水平显著下降,凋亡率显著提高(P<0.05);与马钱苷高剂量组相比,Diprovocim组细胞生长状态良好,细胞迁移和侵袭能力以及COX-2、MMP-2、MMP-9、p-p65/p65蛋白表达水平显著提高,凋亡率显著降低(P<0.05)。结论 马钱苷通过抑制核因子-κB通路抑制A549细胞的增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 马钱苷 人非小细胞肺癌a549细胞 核因子-κB通路 增殖 凋亡
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黄芩苷通过抑制IL1R2表达对A549肺癌细胞增殖、迁移及凋亡的作用及机制研究
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作者 陈静 韦小白 +1 位作者 卫海民 高洪元 《临床肺科杂志》 2024年第7期1042-1048,共7页
目的探究黄芩苷通过抑制IL1R2在A549肺癌细胞增殖、迁移及凋亡中的作用,并探究可能作用机制。方法体外培养A549肺癌细胞,转染si-IL1R2质粒分为对照组、低表达IL1R2组、黄芩苷+低表达IL1R2组、过表达IL1R2组、黄芩苷+过表达IL1R2组,对照... 目的探究黄芩苷通过抑制IL1R2在A549肺癌细胞增殖、迁移及凋亡中的作用,并探究可能作用机制。方法体外培养A549肺癌细胞,转染si-IL1R2质粒分为对照组、低表达IL1R2组、黄芩苷+低表达IL1R2组、过表达IL1R2组、黄芩苷+过表达IL1R2组,对照组正常培养细胞,含有黄芩苷的实验组采用200mol/L的黄芩苷处理24h。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定IL1R2表达;采用CCK-8法、Transwell、流式细胞法分别观察细胞增殖、迁移能力及凋亡情况;采用Western Blotting法观察各组白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)表达。结果IL1R2低表达组干扰后A549细胞的增殖受到抑制,IL1R2过表达组则明显促进细胞增殖;低表达IL1R2组较对照组细胞迁移个数降低,过表达IL1R2组细胞迁移个数较对照组升高,与低表达IL1R2组细胞迁移个数相比,黄芩苷+低表达IL1R2组细胞迁移个数降低明显;与过表达IL1R2组迁移个数相比,黄芩苷+过表达IL1R2组细胞迁移个数降低;与对照组相比,过表达IL1R2组、黄芩苷+过表达IL1R2组细胞凋亡率均降低;黄芩苷+过表达IL1R2组较过表达IL1R2组细胞凋亡率升高;低表达IL1R2组IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子表达明显下降,过表达IL1R2组各组细胞因子表达明显升高,黄芩苷+过表达IL1R2组各组细胞因子表达较过表达IL1R2组降低。结论黄芩苷通过抑制IL1R2表达抑制肺癌细胞的A549肺癌细胞增殖、迁移,促进肺癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 黄芩苷 IL1R2 肺癌a549细胞 增殖 迁移
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Highly Efficient Labeling of Human Lung Cancer Cells Using Cationic Poly-L-lysine-Assisted Magnetic Iron Oxide Nanoparticles 被引量:4
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作者 Xueqin Wang Huiru Zhang +1 位作者 Hongjuan Jing Liuqing Cui 《Nano-Micro Letters》 SCIE EI CAS 2015年第4期374-384,共11页
Cell labeling with magnetic iron oxide nanoparticles(IONPs)is increasingly a routine approach in the cellbased cancer treatment.However,cell labeling with magnetic IONPs and their leading effects on the biological pro... Cell labeling with magnetic iron oxide nanoparticles(IONPs)is increasingly a routine approach in the cellbased cancer treatment.However,cell labeling with magnetic IONPs and their leading effects on the biological properties of human lung carcinoma cells remain scarcely reported.Therefore,in the present study the magnetic c-Fe2O3nanoparticles(MNPs)were firstly synthesized and surface-modified with cationic poly-L-lysine(PLL)to construct the PLL-MNPs,which were then used to magnetically label human A549 lung cancer cells.Cell viability and proliferation were evaluated with propidium iodide/fluorescein diacetate double staining and standard 3-(4,5-dimethylthiazol-2-diphenyl-tetrazolium)bromide assay,and the cytoskeleton was immunocytochemically stained.The cell cycle of the PLL-MNPlabeled A549 lung cancer cells was analyzed using flow cytometry.Apoptotic cells were fluorescently analyzed with nuclear-specific staining after the PLL-MNP labeling.The results showed that the constructed PLL-MNPs efficiently magnetically labeled A549 lung cancer cells and that,at low concentrations,labeling did not affect cellular viability,proliferation capability,cell cycle,and apoptosis.Furthermore,the cytoskeleton in the treated cells was detected intact in comparison with the untreated counterparts.However,the results also showed that at high concentration(400 lg m L-1),the PLL-MNPs would slightly impair cell viability,proliferation,cell cycle,and apoptosis and disrupt the cytoskeleton in the treated A549 lung cancer cells.Therefore,the present results indicated that the PLL-MNPs at adequate concentrations can be efficiently used for labeling A549 lung cancer cells and could be considered as a feasible approach for magnetic targeted anti-cancer drug/gene delivery,targeted diagnosis,and therapy in lung cancer treatment. 展开更多
关键词 Magnetic labeling Iron oxide nanoparticles POLY-L-LYSINE Human a549 lung cancer cells cancer treatment
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基于mTOR/STAT3信号轴探讨桑色素诱导非小细胞肺癌A549细胞自噬的机制
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作者 赵新月 田颖颖 +7 位作者 刘闯 李依林 吕英楠 于尚玥 田时秋 裴海鸾 左泽平 王志斌 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期317-324,共8页
目的基于mTOR/STAT3信号轴探讨桑色素诱导非小细胞肺癌A549细胞自噬的机制。方法将A549细胞分为空白组及30、60、90、120、150μg·m L^(-1)桑色素组,培养24、48、72 h后采用CCK-8法检测细胞增殖活性,计算细胞抑制率。将A549细胞分... 目的基于mTOR/STAT3信号轴探讨桑色素诱导非小细胞肺癌A549细胞自噬的机制。方法将A549细胞分为空白组及30、60、90、120、150μg·m L^(-1)桑色素组,培养24、48、72 h后采用CCK-8法检测细胞增殖活性,计算细胞抑制率。将A549细胞分为空白组及30、90、150μg·m L^(-1)桑色素组,培养细胞14 d后通过克隆形成实验检测细胞增殖情况;培养细胞24 h后,采用Beyo ClickTMEd U-488检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;吖啶橙染色检测细胞自噬情况;透射电镜观察细胞自噬体形成情况;Western Blot法检测细胞中凋亡、自噬及m TOR/STAT3信号轴相关蛋白的表达水平。将A549细胞分为空白组、空白+氯喹(10μg·m L^(-1))组、桑色素(30、150μg·m L^(-1))组、桑色素(30、150μg·m L^(-1))+氯喹(10μg·m L^(-1))组,干预48 h后采用CCK-8法检测细胞活性,计算细胞存活率。结果与空白组比较,干预24 h后60、90、120、150μg·m L^(-1)桑色素组的A549细胞抑制率显著升高(P<0.05,P<0.001);干预48、72 h后桑色素30、60、90、120、150μg·m L^(-1)组的A549细胞抑制率显著升高(P<0.001);30、90、150μg·m L^(-1)桑色素组的A549细胞集落数及绿色荧光的增殖阳性细胞数均显著减少(P<0.01,P<0.001),细胞凋亡率均显著升高(P<0.01,P<0.001),cleaved-PARP蛋白表达水平显著升高(P<0.001);90、150μg·m L^(-1)桑色素组A549细胞的p-P38/P38MAPK蛋白表达水平显著升高(P<0.01,P<0.001);30、90、150μg·m L^(-1)桑色素组A549细胞中出现不同程度的橙黄色荧光,以90、150μg·m L^(-1)桑色素组的橙黄色荧光显著;150μg·m L^(-1)桑色素组A549细胞胞浆中分别出现了自噬体和自噬溶酶体;150μg·m L^(-1)桑色素组A549细胞的LC3-Ⅱ蛋白表达明显上调(P<0.05),90、150μg·m L^(-1)桑色素组A549细胞的Atg16L1-Ⅱ蛋白表达显著上调(P<0.001),p-m TOR/m TOR及p-STAT3/STAT3蛋白表达显著下调(P<0.001)。与桑色素(150μg·m L^(-1))组比较,桑色素(150μg·m L^(-1))+氯喹(10μg·m L^(-1))组的A549细胞存活率明显升高(P<0.05)。结论桑色素能够抑制肺癌A549细胞的增殖,促进其凋亡,并诱导自噬,其作用机制可能与m TOR/STAT3信号轴有关。 展开更多
关键词 桑色素 非小细胞肺癌 a549细胞 增殖 凋亡 自噬 mTOR/STAT3信号轴
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苍术素通过激活RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路诱导非小细胞肺癌A549细胞程序性坏死并抑制裸鼠移植瘤生长
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作者 王乙波 焦斌 +2 位作者 王小强 陈歭行 曾慈梅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期146-153,共8页
目的:探讨苍术素(ATR)通过调节受体相互作用蛋白激酶(RIPK)1/RIPK3/混合谱系激酶结构域样(MLKL)信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞程序性死亡及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:使用0~160μmol/L的ATR处理A549细胞,MTT法检测细胞存活... 目的:探讨苍术素(ATR)通过调节受体相互作用蛋白激酶(RIPK)1/RIPK3/混合谱系激酶结构域样(MLKL)信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞程序性死亡及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:使用0~160μmol/L的ATR处理A549细胞,MTT法检测细胞存活率以确定后续实验给药浓度。使用ATR和/或RIPK1抑制剂Nec-1(necrostatin-1)、caspase抑制剂Z-VADFMK处理A549细胞,验证ATR是否诱导A549细胞发生程序性坏死。将A549细胞分为对照组、ATR-L组、ATR-M组、ATR-H组(分别用0、10、20、40μmol/L ATR处理)、ATR+Nec-1组(40μmol/L ATR+50μmol/L Nec-1处理),处理24 h后,采用PI单染及Hoechst33342/PI双染法检测细胞死亡情况、透射电镜观察细胞死亡形态、DCFH-DA荧光探针法检测细胞内ROS水平、JC-1染色法检测线粒体膜电位、WB法检测细胞中RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路相关蛋白质的表达水平。构建A549细胞裸鼠移植瘤模型,用10 mg/kg ATR(溶于玉米油中)对裸鼠灌胃给药5周,观察ATR对移植瘤生长的影响,WB法检测移植瘤组织中RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路相关蛋白质的表达水平。结果:10~160μmol/L的ATR可显著抑制A549细胞增殖,选择10、20、40μmol/L的ATR进行后续实验。ATR组A549细胞存活率显著低于对照组(P<0.01)和ATR+Nec-1组(P<0.01),而ATR+z-VAD组细胞存活率显著低于z-VAD组(P<0.01),说明ATR可诱导A549细胞发生程序性坏死而非凋亡。与对照组比较,ATR处理组A549细胞发生肿胀,线粒体内脊消失呈空泡化,细胞内容物向外泄漏,细胞核聚集,表现为坏死特征,ATR-L组、ATR-M组、ATR-H组A549细胞死亡率、ROS水平及p-RIPK1、p-RIPK3、p-MLKL表达水平均显著升高,线粒体膜电位显著降低(均P<0.01),且呈药物浓度依赖性;与ATR-H组比较,ATR+Nec-1组细胞死亡率、ROS及p-RIPK1、p-RIPK3、p-MLKL表达水平降低,线粒体膜电位显著升高(均P<0.01)。裸鼠移植瘤实验结果显示,与对照组比较,ATR组裸鼠移植瘤体积、移植瘤质量均降低(P<0.05,或P<0.01),而与瘤组织中p-RIPK1、p-RIPK3、p-MLKL蛋白表达水平均显著升高(均P<0.01)。结论:ATR可能通过激活RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路诱导A549细胞发生程序性坏死,抑制A549细胞及其裸鼠移植瘤的生长。 展开更多
关键词 苍术素 RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路 非小细胞肺癌 a549细胞 程序性坏死
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沉默MPZL1调控β-catenin对A549/Tax细胞干性及耐药性的影响
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作者 臧超 戈巧 +6 位作者 李超 洪海宁 李伟 苏君 黎传奎 陈力维 王安生 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第1期99-105,共7页
目的探讨髓磷脂蛋白零样蛋白1(MPZL1)沉默后是否通过调控β-catenin表达对A549/Tax耐药性和细胞干性产生影响。方法采用不同浓度阿霉素和紫杉醇处理A549和A549紫杉醇耐药性(A549/Tax)细胞,观察两种细胞的耐药性差异。实时荧光定量聚合... 目的探讨髓磷脂蛋白零样蛋白1(MPZL1)沉默后是否通过调控β-catenin表达对A549/Tax耐药性和细胞干性产生影响。方法采用不同浓度阿霉素和紫杉醇处理A549和A549紫杉醇耐药性(A549/Tax)细胞,观察两种细胞的耐药性差异。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和Western blot检测A549和A549/Tax细胞中MPZL1的表达量差异。对A549/Tax细胞沉默或者过表达MPZL1,进一步将细胞分为对照(control)组、短发卡RNA阴性对照(sh-NC)组、MPZL1沉默(sh-MPZL1)组、过表达阴性对照(OE-NC)组、MPZL1过表达(OE-MPZL1)组,运用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和平板克隆实验分别检测MPZL1的表达变化对A549/Tax细胞增殖和克隆形成能力的影响。Western blot检测Wnt/β-catenin抑制剂XAV939和激活剂CHIR-99201处理细胞后,不同蛋白的表达变化。结果A549/Tax细胞对阿霉素和紫杉醇的半数抑制浓度(IC 50)较A549细胞明显增加(P<0.01)。MPZL1在A549/Tax中呈更高的表达趋势。MPZL1敲除后A549/Tax对阿霉素和紫杉醇的IC 50分别为2.731 mg/ml和4.939μg/ml,较阴性对照组的4.541 mg/ml和13.55μg/ml降低(P<0.01)。CCK-8和克隆形成实验结果显示,MPZL1敲除抑制肺癌A549/Tax细胞的增殖活力和克隆形成能力(P<0.05);Western blot结果显示,与阴性对照组相比,MPZL1、肿瘤干性相关蛋白(CD44和CD133)、多药耐药蛋白1(MDR1)、肺耐药相关蛋白(LRP)和β-catenin在sh-MPZL1中的表达水平明显减少(P<0.01)。此外,XAV939可抑制MPZL1、CD44、CD133、MDR1、LRP和β-catenin的表达。CHIR-99201处理细胞后部分逆转敲除MPZL1对上述蛋白的抑制作用。结论MPZL1在肺癌A549/Tax细胞中高表达。敲除MPZL1可抑制肿瘤干性和细胞增殖,增强肺癌A549/Tax细胞对阿霉素和紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 MPZL1 肿瘤干性 a549/Tax肺癌细胞 多药耐药 紫杉醇
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基于生信分析探索STARD8表达对肺癌A549细胞生物学功能的影响
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作者 贺敏 马飞 王秀青 《宁夏医科大学学报》 2024年第6期577-585,共9页
目的探讨STARD8对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡生物学功能的影响。方法从美国国家生物技术信息中心(NCBI),获取两份公开的基因芯片数据集(GSE18842和GSE68571),运用limma R包识别差异表达基因(DEGs)。采用最小绝对收缩和选择算子... 目的探讨STARD8对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡生物学功能的影响。方法从美国国家生物技术信息中心(NCBI),获取两份公开的基因芯片数据集(GSE18842和GSE68571),运用limma R包识别差异表达基因(DEGs)。采用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归法结合SVM-RFE算法对候选基因进行筛选,构建受试者工作特征(ROC)曲线,应用CIBERSORT工具进行免疫浸润分析。通过RT-qPCR和Western blot分析STARD8在对照组及肺癌组的mRNA及蛋白水平,通过细胞平板克隆、Transwell、细胞划痕及流式细胞实验分析STARD8对A549细胞的增殖、侵袭、迁移及凋亡能力的影响。结果共筛选出285个上调基因和377个下调基因,取交集得到1个诊断标志物基因STARD8,免疫分析显示CD4 T细胞、NK细胞出现免疫抑制。肺癌组中STARD8的mRNA及蛋白表达均下调(P均<0.05)。STARD8过表达时肺癌A549细胞的增殖、侵袭及迁移能力降低,凋亡能力增加(P均<0.05)。结论STARD8可抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺癌a549细胞 生物信息学 GTP酶激活因子 增殖 侵袭 迁移 凋亡
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Efficiency of combining pomegranate juice with low-doses of cisplatin and taxotere on A549 human lung adenocarcinoma cells 被引量:1
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作者 Nasser Mohamad Hijazi Akram +5 位作者 Sayed Ahmad Bouchra Jamal Eddine Zeinab Ibrahim Sajida Rammal Hassan Al Rekaby Abd-El-Ameer Nasser Mouhamad 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2018年第1期19-24,共6页
Objective: To test the coalescence effect of two chemotherapy drugs at low effective dose(cisplatin and taxotere) combined with pomegranate juice on A549 cancer cells. Methods: Infrared spectroscopy method is a qualit... Objective: To test the coalescence effect of two chemotherapy drugs at low effective dose(cisplatin and taxotere) combined with pomegranate juice on A549 cancer cells. Methods: Infrared spectroscopy method is a qualitative test that was performed to ensure the existence of the phytochemicals providing the antioxidant activity through the presence of the hydroxyl group(-OH). The viability of A549 cell line and normal MCs was tested using the neutral red uptake, Clonogenic survival, XTT and Cell migration assays. Results: Our results showed that this combination firstly led to a greater decrease in the viability of cells comparing to those treated with chemotherapy drugs alone, and secondly led to a significant reduction in cell migration. Conclusions: These data suggest a synergistic effect between the pomegranate and cisplatin which makes probably this combination a powerful option for treating lung adenocarcinoma and in parallel minimizing the systemic side effects. 展开更多
关键词 lung cancer Chemotherapy CISPLATIN TAXOTERE POMEGRANATE a549 cells
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苦参碱通过Hedgehog信号通路对肺癌A549细胞顺铂化疗敏感性的影响
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作者 赵迎杰 夏松长 +1 位作者 聂书慧 王继芳 《西北药学杂志》 CAS 2024年第5期61-67,共7页
目的探讨苦参碱通过Hedgehog信号通路对肺癌A549细胞顺铂(cisplatin,DDP)化疗敏感性的影响。方法用噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)检测苦参碱的浓度对A549细胞增殖的影响,计算20%致死浓度(20%lethal concentration,LC20);将对数期生长A549... 目的探讨苦参碱通过Hedgehog信号通路对肺癌A549细胞顺铂(cisplatin,DDP)化疗敏感性的影响。方法用噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)检测苦参碱的浓度对A549细胞增殖的影响,计算20%致死浓度(20%lethal concentration,LC20);将对数期生长A549细胞分为对照组、苦参碱组(LC20苦参碱干预)、Hedgehog信号通路抑制剂(Hedgehog pathway inhibitor,HPI-4)组(5μmol·L^(−1) HPI-4干预)、DDP组(5 mg·L^(−1) DDP干预)、DDP+苦参碱组(5 mg·L^(−1) DDP和LC20苦参碱共同干预)、DDP+苦参碱+HPI-4组(5 mg·L^(−1) DDP、LC20苦参碱、5μmol·L^(−1) HPI-4共同干预),每组设置3个复孔。用MTT法和流式细胞术检测干预48 h后各组细胞的存活率和凋亡率,用蛋白印迹法(Western blotting)检测各组细胞Hedgehog信号通路相关蛋白音猬因子(sonic hedgehog,SHH)、补缀同源物1(patched1,Ptch1)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(glioma-associated oncogene homolog 1,Gli1)的表达。结果与对照组比较,不同质量浓度的苦参碱干预组细胞存活率均降低(P<0.05),且细胞存活率随苦参碱质量浓度升高而降低(P<0.05)。与对照组比较,苦参碱组、HPI-4组、DDP组、DDP+苦参碱组、DDP+苦参碱+HPI-4组的细胞存活率均降低,且DDP+苦参碱+HPI-4组<DDP+苦参碱组<DDP组<苦参碱组、HPI-4组(P<0.05);细胞凋亡率结果与细胞存活率结果相反。与对照组比较,苦参碱组、HPI-4组、DDP组、DDP+苦参碱、DDP+苦参碱+HPI-4组Hedgehog信号通路SHH、Ptch1、Glis1蛋白的相对表达量均降低,且DDP+苦参碱+HPI-4组<HPI-4组<DDP+苦参碱组<DDP组、苦参碱组(P<0.05)。结论苦参碱可增加肺癌A549细胞DDP化疗敏感性,其作用机制可能与抑制Hedgehog信号通路有关。 展开更多
关键词 苦参碱 肺癌 a549细胞 化疗敏感性 HEDGEHOG信号通路
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刺梨果多糖对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及机制研究
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作者 李倩倩 李自霖 +5 位作者 刘涵 黄丽金 王涵 杨紫焰 陈贵元 张翠香 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期484-492,共9页
目的探讨刺梨果多糖对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及机制。方法在0、2、4、6、8、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞24、48、72 h后,采用CCK-8法检测A549细胞增殖情况。在0、2、6、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞24... 目的探讨刺梨果多糖对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及机制。方法在0、2、4、6、8、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞24、48、72 h后,采用CCK-8法检测A549细胞增殖情况。在0、2、6、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞24、48 h后,采用细胞划痕实验测定A549细胞的迁移情况;Transwell实验测定A549细胞侵袭情况。在0、2、6、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞48 h后,采用流式细胞术(PI单染法)测定A549细胞周期;流式细胞术(Annexin V-FITC/PI双染法)测定A549细胞的凋亡情况;Real-Time PCR法测定A549细胞的周期、凋亡相关基因表达水平;Western Blot法测定A549细胞的周期、凋亡相关蛋白表达水平。结果(1)干预24、48、72 h后,与对照组(0 g·L^(-1))比较,刺梨果多糖2、4、6、8、10 g·L^(-1)组的A549细胞生长受到显著抑制,细胞的存活率显著降低(P<0.05,P<0.01),刺梨果多糖干预48 h的IC50值为6.109 g·L^(-1),后续实验采用2、6、10 g·L^(-1)浓度作为刺梨果多糖低、中、高剂量。(2)干预48 h后,与对照组比较,刺梨果多糖2、6、10 g·L^(-1)组的A549细胞迁移距离显著增加(P<0.05,P<0.01),细胞侵袭数量显著减少(P<0.05,P<0.01);刺梨果多糖6、10 g·L^(-1)组的G0/G1期、G2/M期细胞比例均显著升高(P<0.05,P<0.01),S期的细胞比例显著降低(P<0.01);刺梨果多糖2、6、10 g·L^(-1)组A549细胞的G0/G1、G2/M期相关调控因子CDK-4、CDK-6、CyclinD1、CDK-1、CyclinB1 mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P<0.05,P<0.01);A549细胞的凋亡率均显著升高(P<0.01);凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01);促凋亡Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01),抗凋亡Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论刺梨果多糖能够抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭,阻滞细胞周期于G0/G1和G2/M期,并通过线粒体通路和死亡受体通路诱导A549细胞凋亡。 展开更多
关键词 刺梨果多糖 肺腺癌a549细胞 细胞增殖 迁移 侵袭 细胞周期 细胞凋亡
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芹菜素通过AMPK/mTOR通路调控肺癌A549细胞自噬
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作者 雷轩 罗丹 +2 位作者 卢梁杰 高露洋 王文军 《西部医学》 2024年第1期6-10,共5页
目的 探讨芹菜素(APG)对肺癌A549细胞增殖及自噬的影响及其与AMPK/mTOR通路的关系。方法 体外培养肺癌A549细胞,采用CCK-8法检测不同浓度芹菜素处理A549细胞不同时间后对细胞增殖的影响。后续实验分为空白对照组(0μmol/L APG),低、中... 目的 探讨芹菜素(APG)对肺癌A549细胞增殖及自噬的影响及其与AMPK/mTOR通路的关系。方法 体外培养肺癌A549细胞,采用CCK-8法检测不同浓度芹菜素处理A549细胞不同时间后对细胞增殖的影响。后续实验分为空白对照组(0μmol/L APG),低、中、高浓度实验组和抑制剂组5组,采用MDC染色法检测各组对细胞自噬的影响,免疫印迹法检测自噬相关蛋白以及AMPK/mTOR通路相关蛋白表达情况。结果 芹菜素可显著抑制A549细胞增殖,且呈浓度依赖性(P<0.05);20、40、80μmol/L芹菜素组随作用时间延长,对A549细胞的增殖抑制率逐渐增加,呈时间依赖关系(P<0.05)。与空白对照组比较,实验组A549细胞中含高亮点状荧光的自噬小泡数量及IOD值逐渐增加(P<0.05),芹菜素可浓度依赖性上调LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p-AMPKα蛋白表达水平及p-AMPKα/AMPKα比值(P<0.05),下调p-mTOR、p62蛋白表达水平及p-mTOR/mTOR比值(P<0.05)。与高浓度实验组比较,抑制剂组细胞中含高亮点状荧光的自噬小泡减少,IOD值下降,LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p-AMPKα蛋白表达水平及p-AMPKα/AMPKα比值降低,而P62、p-mTOR蛋白表达水平及p-mTOR/mTOR比值升高(P<0.05)。结论 芹菜素能抑制肺癌A549细胞增殖,诱导其自噬,作用机制可能与AMPK/mTOR通路有关。 展开更多
关键词 芹菜素 a549细胞 自噬 AMPK/mTOR通路 肺癌
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基于网络药理学探讨西黄丸通过EGFR/AKT/P65信号通路抑制肺癌A549细胞侵袭转移的作用
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作者 黄倩 张瀚涛 +2 位作者 张晓笛 李晋生 徐意 《中医药导报》 2024年第6期1-9,28,共10页
目的:通过网络药理学和体外实验探讨西黄丸抑制肺癌A549细胞侵袭转移的药效学作用及机制。方法:通过检索TCMSP、TCMID、PubChem数据库筛选西黄丸有效成分及其靶点;搜索GeneCard数据库、OMIM数据库和DrugBank数据库获取肺癌转移的靶点;... 目的:通过网络药理学和体外实验探讨西黄丸抑制肺癌A549细胞侵袭转移的药效学作用及机制。方法:通过检索TCMSP、TCMID、PubChem数据库筛选西黄丸有效成分及其靶点;搜索GeneCard数据库、OMIM数据库和DrugBank数据库获取肺癌转移的靶点;将药物成分对应靶点与肺癌转移相关的全部靶点取交集,导入Cytoscape 3.8.0软件构建化合物-靶点网络,筛选出西黄丸抗肺癌转移的核心靶点,构建PPI网络;利用R Project软件及Bioconductor数据库、ClusterProfiler程序对共有靶点进行GO和KEGG富集分析;通过划痕愈合实验和Transwell侵袭实验,评价西黄丸含药血清抑制肺癌A549细胞侵袭迁移的作用;利用Western blotting法检测西黄丸含药血清对肺癌A549细胞EGFR、AKT、P65蛋白表达的影响。结果:网络药理学研究获得西黄丸中66个主要活性成分,药物-疾病共同靶点303个,筛选得到核心基因AKT1、JUN、TP53、EGFR、RELA、PIK3CA等;GO和KEGG通路富集分析显示主要信号通路有PI3K/Akt信号通路、TNF信号通路、EGFR信号通路等。体外细胞实验结果显示西黄丸含药血清能降低肺癌A549细胞的划痕愈合率(P<0.05),减少肺癌A549细胞侵袭人工基底膜(P<0.01),并能够抑制EGFR、Akt、P65蛋白的表达(P<0.01或P<0.05)。结论:西黄丸可能通过抑制EGFR/AKT/P65信号通路起到抑制肺癌侵袭转移的生物学效应。 展开更多
关键词 肺癌 西黄丸 网络药理学 侵袭迁移 a549细胞 EGFR
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miR-152-3p对非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的作用及分子机制研究 被引量:3
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作者 常彩虹 高玉林 +1 位作者 王敏 林楠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1274-1278,1284,共6页
目的:探究miR-152-3p对非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的作用及其分子机制。方法:采用顺铂处理体外培养的A549细胞,检测细胞内miR-152-3p、SOS1表达水平的变化;采用荧光素酶活性检测法分析miR-152-3p与SOS1的调控关系。A549细胞转染miR... 目的:探究miR-152-3p对非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的作用及其分子机制。方法:采用顺铂处理体外培养的A549细胞,检测细胞内miR-152-3p、SOS1表达水平的变化;采用荧光素酶活性检测法分析miR-152-3p与SOS1的调控关系。A549细胞转染miR-152-3p慢病毒过表达载体、SOS1慢病毒过表达载体或慢病毒空载体,采用顺铂处理转染的细胞,比较miR-152-3p过表达或SOS1过表达对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及迁移的影响。结果:与正常培养的A549细胞相比,顺铂处理的A549细胞内miR-152-3p表达水平显著降低,而SOS1表达水平显著升高(P<0.05);生物信息学分析显示SOS1是miR-152-3p的一个潜在靶基因,而荧光素酶活性检测法分析显示miR-152-3p具有负调控SOS1的作用。与转染空载体的A549细胞相比,miR-152-3p过表达显著抑制A549细胞增殖及迁移、阻滞细胞周期、促进细胞凋亡(P<0.05)。miR-152-3p过表达的A549细胞内SOS1表达水平显著低于转染空载体的细胞(P<0.05);与单独转染miR-152-3p过表达载体的细胞相比,同时转染miR-152-3p过表达载体和SOS1慢病毒过表达载体的A549细胞增殖、迁移增强,且细胞凋亡受到显著抑制(P<0.05)。结论:miR-152-3p通过抑制SOS1表达增强A549细胞对顺铂的敏感性,继而抑制A549细胞增殖、迁移,阻滞细胞周期以及促进A549细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-152-3p 非小细胞肺癌 a549细胞 顺铂 SOS1
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miR-185/YWHAZ轴通过糖酵解调控NSCLC A549细胞凋亡 被引量:1
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作者 马建刚 王冬 +2 位作者 谭维 周凤 张莉媛 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第3期330-334,共5页
目的 探讨miR-185/YWHAZ轴通过糖酵解对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞凋亡的影响。方法 糖酵解抑制剂处理后,检测各组糖酵解酶、乳酸、NADH水平和细胞凋亡水平。过表达或敲低miR-185后,过表达或敲低YWHAZ后,均检测细胞乳酸、NADH和细胞... 目的 探讨miR-185/YWHAZ轴通过糖酵解对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞凋亡的影响。方法 糖酵解抑制剂处理后,检测各组糖酵解酶、乳酸、NADH水平和细胞凋亡水平。过表达或敲低miR-185后,过表达或敲低YWHAZ后,均检测细胞乳酸、NADH和细胞凋亡水平。荧光素酶报告实验检测miR-185与YWHAZ mRNA的相互作用。结果 糖酵解抑制剂处理后,糖酵解酶、乳酸、NADH下降,细胞凋亡水平上升(P<0.05)。过表达miR-185时,细胞乳酸、NADH下降,YWHAZ mRNA和蛋白水平下降,细胞凋亡水平上升;敲低miR-185时上述变化逆转(P<0.05)。敲低YWHAZ时,细胞乳酸、NADH下降,细胞凋亡水平上升;过表达YWHAZ时上述变化逆转(P<0.05)。miR-185靶向YWHAZ mRNA的3′端非翻译区。结论 YWHAZ、miR-185分别是促进和抑制糖酵解的关键分子。miR-185靶向YWHAZ mRNA的3′端非翻译区,减少了YWHAZ表达,促进了NSCLC的细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-185 YWHAZ 非小细胞肺癌 凋亡 糖酵解 a549 cell
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肺岩宁方介导Atg5对肺癌A549细胞自噬调控抗肺癌侵袭转移的实验研究
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作者 马玥 徐振晔 +3 位作者 王立芳 郑展 邓海滨 张琦君 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第4期1230-1238,共9页
目的探讨肺岩宁方(Feiyan Ning Decoction,FYN)通过介导Atg5(自噬相关靶向基因5,Autophagy-related gene 5)自噬相关基因调控人肺腺癌A549细胞自噬,及其对A549肺癌细胞增殖、迁移、侵袭等作用的影响。方法肺岩宁方干预培养肺癌A549细胞... 目的探讨肺岩宁方(Feiyan Ning Decoction,FYN)通过介导Atg5(自噬相关靶向基因5,Autophagy-related gene 5)自噬相关基因调控人肺腺癌A549细胞自噬,及其对A549肺癌细胞增殖、迁移、侵袭等作用的影响。方法肺岩宁方干预培养肺癌A549细胞,通过运用CCK-8(Cell Counting kit-8)细胞增殖实验检测肺岩宁方对细胞增殖抑制率的影响,显微镜下观察肺岩宁方作用后的细胞形态学改变;采用划痕实验检测肺岩宁方及自噬抑制剂氯喹(Chloroquine diphosphate salt,CQ)对肺癌A549细胞迁移能力;运用Transwell细胞侵袭实验检测肺岩宁方及氯喹对肺癌A549细胞侵袭能力;运用Western Blot检测自噬相关蛋白Atg5、LC3表达情况;运用透射电子显微镜观察肺癌A549细胞在肺岩宁方干预下的自噬结构形态改变情况。结果CCK8检测试验结果:肺岩宁方能有效抑制A549细胞增值活力(P<0.01),其优化浓度为200μg mL-1;划痕实验结果:与对照组比,肺岩宁方干预A549细胞迁移能力减弱(P<0.05),A549细胞在FYN联合CQ的作用下迁移能力明显减弱(P<0.01);Transwell实验结果:与对照组比较,肺岩宁方抑制细胞侵袭转移能力(P<0.05),FYN联合CQ细胞侵袭力明显抑制(P<0.05);Western Blot实验结果:肺岩宁方下调自噬相关蛋白Atg5、LC3表达能力(P<0.01);透射电子显微镜观察结果:肺岩宁方抑制自噬结构的出现。结论肺岩宁方介导Atg5自噬相关基因,具有调控人肺腺癌A549细胞自噬能力,可抑制A549细胞增殖活力、迁移能力、侵袭转移水平。 展开更多
关键词 肺岩宁方 肺癌 肺癌a549细胞 细胞自噬 增殖 侵袭转移
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加味二陈汤诱导肺癌A549移植瘤细胞凋亡的实验研究 被引量:1
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作者 吴国玉 何粒芳 +1 位作者 柯见龙 熊绍权 《中医药信息》 2023年第10期22-26,共5页
目的:研究加味二陈汤对肺腺癌A549移植瘤生长抑制作用并初步探讨其对内质网应激反应的作用机制。方法:18只BALB/C裸鼠接种A549肺癌细胞后,随机分为对照组、加味二陈汤高剂量组(简称中药高剂量组)、加味二陈汤低剂量组(简称中药低剂量组)... 目的:研究加味二陈汤对肺腺癌A549移植瘤生长抑制作用并初步探讨其对内质网应激反应的作用机制。方法:18只BALB/C裸鼠接种A549肺癌细胞后,随机分为对照组、加味二陈汤高剂量组(简称中药高剂量组)、加味二陈汤低剂量组(简称中药低剂量组),每组6只,分别灌胃给予生理盐水,26、13g/(kg·d)加味二陈汤水煎液,连续给药21 d。观测并分析各组肿瘤体积、瘤体生长曲线、瘤重、抑瘤率、凋亡率,并分析ATF4、CHOP蛋白表达水平。结果:与对照组比较,中药低剂量组和高剂量组裸鼠在肿瘤生长减慢、肿瘤体积缩小、瘤重降低,差异有统计学意义(P<0.05);中药低剂量组和高剂量组抑瘤率分别为21.4%、37%,与对照组比较均有统计学意义(P<0.05);对照组、中药低剂量组、中药高剂量组瘤体凋亡率分别为0.23%、0.29%、0.35%,中药高剂量组与对照组差异具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组和低剂量组ATF4、CHOP蛋白表达水平均较对照组上调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:加味二陈汤能诱导肺腺癌A549细胞凋亡,其机制与调控内质网蛋白ATF4、CHOP的表达水平有关。 展开更多
关键词 加味二陈汤 肺癌a549细胞 细胞凋亡 ATF4 CHOP
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