LHRH-A缓释剂促进雄性赤点石斑鱼性类固醇激素分泌和精巢发育与排精的研究

研究了促黄体生成素释放激素类似物(LHRHA)不同处理方式对雄性赤点石斑鱼性类固醇激素分泌和精子生成及精子排放的影响。对照组在0、7d二次注射生理盐水(50μg·kg-1BW),注射组在0、7d二次注射LHRHA(50μg·kg-1BW),埋植组在0d埋植LHRHA缓释剂(100μg·kg-1BW)。结果表明,通过埋植LHRHA缓释剂,血清睾酮(T)和11-酮基睾酮(11-KT)水平快速增加,显示血清睾酮和11-酮基睾酮水平与赤点石斑鱼精子生成和精子排放有密切关系。组织学观察表明,在21d,对照组和注射组鱼精巢充满了精子细胞、精母细胞和精原细胞,而在同一时间,LHRHA埋植组鱼精巢含有大量精子,表明精子排放仍在进行。在40d期间采集精液总量为对照组<注射组<埋植组,差异显著。当注射组在处理14d后精液量逐渐回落到对照组水平时,埋植组仍然维持较高精液量水平。各组采集的精子的活力与采集的精液量呈正相关,而精子密度没有显著差异。数据显示,LHRHA缓释剂能显著增加赤点石斑鱼的精液量及延长精子排放时间而不改变精子的质量。

促黄体素释放激素和多巴胺拮抗物对鲇促性腺激素释放的作用

以珠江流域站为研究对象，分别在性腺发育早期、性腺发育晚期、性腺发育成熟与产卵前期、性腺退化期注射促黄体素释放激素类似物和多巴胺Ｄ２受体拮抗物，处理后６ｈ、１２ｈ、２４ｈ测定血液中的促性腺激素水平变化。结果表明，在性腺发育的各个时期，促黄体素释放激素类似物和多巴胺Ｄ２受体拮抗物联合注射能显著刺激站促性腺激素分泌；站脑垂体促性腺激素的分泌受下丘脑释放的促性腺素释放激素和多巴胺的双重调节，多巴胺只能抑制促性腺素释放激素诱导的促性腺激素分泌。在建立站人工繁殖技术时，可采用促黄体素释放激素类似物和多巴胺Ｄ２受体拮抗物联合注射方法。

GnRH-A免疫与母兔生殖激素浓度的变化

目的探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对动物生殖功能调节的效果和作用机制。方法 24只日本大耳白兔分为四组,分别在实验Ⅰ组(EG-I)、实验Ⅱ组(EG-II)和实验III(EG-III)组兔的颈背侧注射1.0 mL(100、100和50μg/mL)GnRH-A抗原,实验II组和实验III组于第3周以原剂量加强注射一次,用ELISA法测定血清GnRH抗体效价、促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量。结果注射GnRH-A后10 d实验组兔均出现GnRH抗体,而对照组未检测到;EG-I在第30天达到高峰,而EG-II和EG-III于40～50 d至峰值,但在实验结束时(70 d)实验组均高于对照组,40～70 d时EG-II显著高于EG-I和EG-III。30～50 d时EG-II的LH明显高于EG-I和EG-III及对照组。EG-II和EG-III的FSH浓度在40 d达到峰值,但EG-II高于EG-I、对照组及EG-III,EG-I和对照组无显著差异。结论兔体内注射GnRH-A可以明显提高GnRH抗体效价,增强LH和FSH的合成与分泌,加强注射效果更明显,且与注射剂量相关,持续时间为40 d左右。

GnRH-A促进雌兔FSH与LH分泌及卵巢发育的作用

目的探讨GnRH类似物(GnRH-A)对FSH与LH分泌及卵巢发育的影响,及GnRH-A调节生育的机制。方法 24只雌兔均分为实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、Ⅱ组(EG-Ⅱ)、Ⅲ组(EG-Ⅲ)和对照组(CG)(n=6),实验组分别于颈背侧皮下注射0.1、0.1和0.05 g/L GnRH-A抗原1.0 mL,EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组于20 d加强注射1次。ELISA法测定血清FSH和LH含量。于70 d无菌切取卵巢,光镜和电镜观察。结果 40 d时EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组血清FSH和LH浓度均达到峰值,明显高于EG-Ⅰ和CG组的FSH和LH(P<0.01),且EG-Ⅱ组高于EG-Ⅲ组(P<0.05)。EG-Ⅱ组和EG-Ⅲ组卵巢皮质变厚,卵泡纵径和横径均增大,且与剂量相关。实验组卵巢卵泡数增加,生长加快。细胞核、线粒体和线粒体嵴变大,细胞质中的皮质颗粒和分泌物增多,透明带和微绒毛变大。结论 GnRH-A能促进FSH和LH的合成及卵巢与卵泡的发育,加强注射效果更明显。

促性腺激素释放激素类似物联合生长激素治疗特发性中枢性性早熟的临床效果

目的探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)联合生长激素(rhGH)对特发性中枢性性早熟(ICPP)患儿的治疗效果及对其身高、雌二醇(E2)、黄体生成激素(LH)水平的影响。方法选取2015年1月～2017年6月东莞市妇幼保健院收治的68例ICPP女性患儿,根据用药情况不同分为实验组(35例)和对照组(33例)。对照组使用GnRHa进行治疗,实验组在对照组的基础上使用rhGH治疗,比较两组患儿治疗前后的身高、预测成年身高(PAH)、身高标准差分值(HtSDSBA)及LH、卵泡刺激素(FSH)、E2水平。结果两组治疗前的身高、PAH及HtSDSBA比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后的身高、PAH与HtSDSBA均高于治疗前,且实验组治疗后的身高、PAH与HtSDSBA均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前GnRHa激发试验60 min的LH、FSH、基础E2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后的LH、FSH、基础E2水平均低于治疗前,且实验组治疗后的LH、FSH、基础E2水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GnRHa联合rhGH治疗能明显改善ICPP患儿的成年预测身高和体内E2、LH水平,且药物稳定、安全性高。对于预测成年身高不理想的患儿,可以投入使用。

性类固醇激素对鲤鱼脑垂体生长激素基因表达的影响

建立核糖核酸酶保护法 ,检测性类固醇激素对鲤鱼脑垂体生长激素基因表达水平的影响。根据已知的鲤鱼生长激素cDNA设计PCR引物 ,亚克隆构建新的含鲤鱼生长激素cDNA片段的质粒 ,并以此作为模板 ,体外转录合成鲤鱼生长激素的反义RNA探针 ,用以检测鲤鱼脑垂体中的生长激素mRNA水平。处于性腺成熟早期的雌性鲤鱼埋植雌二醇 5天或 10天后 ,血液中生长激素水平均显著高于对照组 ,但其脑垂体的生长激素mRNA水平均没有显著变化 ;埋植睾酮 5天或 10天 ,血液中生长激素水平与对照组之间无显著性差异 ,生长激素mRNA水平也没有显著性变化。但埋植雌二醇 5天后显著增强了促性腺激素释放激素类似物对血液生长激素水平升高和促进生长激素mRNA合成的刺激作用。这表明 :性类固醇激素不能在转录水平上对生长激素基因表达进行调控 。

黄激素释放激素及其类似物的缓释给药系统

综述了黄体激素释放激素（ＬＨＲＨ）及其类似物的缓释制剂研究进展，包括生物可降解埋植剂、微球及毫微球、电渗透皮、衍生化技术等；介绍了ＬＨＲＨ

家鱼人工催产机理的研究

本实验证实,对已达性成熟雌性草、青鱼注射促黄体生长激素释放的类似物(Luteinzing hormone releasing hormone analogue,LRH-A),可诱导被催产雌性亲鱼自身垂体促性腺激素细胞分泌促性腺激素,也可引起Ⅳ时相卵母细胞进行成熟、排卵;如果注射鲤鱼垂体,对被催产的雌性草、青鱼垂体中的促性细胞没有影响,保持与催产前促性腺细胞相同的结构,并不因为注射外来鲤鱼垂体中的促性腺激素作出反应,分泌促性腺激素.因此,可以肯定地说,中国当前四大家鱼人工催产的机理是: PG.HCG→(直接作用于)生殖细胞 LRH-A→(诱发)垂体→LH.FSH→(内源QTH)

LHRHa靶向紫杉醇脂质体的制备及体外抗肿瘤作用

目的:制备促黄体激素释放激素类似物(Luteinizing hormone-releasing hormone analogues,LHRHa)靶向紫杉醇脂质体(Paclitaxel liposomes,PTX-Lipo),研究其在体外增强紫杉醇(Paclitaxel,PTX)对卵巢癌A2780/DDP细胞的抑制作用。方法:采用薄膜超声法制备PTX-Lipo与LHRHa靶向紫杉醇脂质体(LHRHa-Paclitaxel liposomes,LHRHa-PTX-Lipo),用透射电镜考察脂质体形态;高效液相色谱法测定2种PTX-Lipo的包封率;激光共聚焦法通过卵巢癌A2780/DDP细胞对4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑荧光素的摄取检测来反映细胞对NBD-Lipo与NBD-LHRHa-Lipo的摄取情况;MTT法及细胞克隆形成实验检测LHRHa-PTX-Lipo体外对卵巢癌细胞的生长抑制情况。结果:制备LHRHa-PTX-Lipo的平均粒径123.4 nm,包封率在90%以上;A2780/DDP细胞对NBD-LHRHa-Lipo组的荧光摄取明显高于NBD-Lipo组;LHRHa-PTX-Lipo对A2780/DDP细胞的生长及克隆形成抑制明显高于PTX组及PTX-Lipo组(P<0.05)。结论:采用薄膜超声法制备的LHRHa-PTX-Lipo可使药物在靶部位聚集,增强药物对卵巢癌细胞的抑制作用。

促黄体素释放激素类似物对种鸡产蛋性能的影响

选用促黄体素释放激素类似物(LRH-A_3)作为种鸡饲料添加物,进行了2批试验。试验1采用单因子四水平试验设计,结果表明,10 μg LRH-A_3(每隔15 d用药1次)的添加水平对康达尔(Kangdar)种鸡可提高产蛋率和饲料报酬率分别是3.20%(P<0.05)、6.80%。试验Ⅱ,用10 μg LRH-A_3(每隔15 d用药1次)添加水平对阿纳克(Anak)种鸡可提高产蛋率和饲料报酬率分别是4.23%(P<0.05)、8.75%。在试验Ⅰ的第3次用药后3 h采血,用放射免疫测定法测定血清LH水平,结果是添加10 μg LRH-A_3(每隔15 d用药1次)种鸡血清LH显著高于对照组(P<0.05)。这些结果表明,LRH-A_3对提高种鸡的产蛋性能有一定效果,是通过影响垂体前叶释放LH分泌而实现的。

LHRH类似物在卵巢癌治疗中的应用

卵巢癌是激素依赖性肿瘤 ,LHRHa除了通过下丘脑 垂体 性腺轴间接抑制卵巢癌细胞外 ,还通过癌细胞上LHRH受体介导 ,直接抑制癌细胞增殖、诱导凋亡。此外 ,还可以运用LHRHa对细胞的靶效应 ,将LHRHa作为载体载上细胞毒性物 ,从而可以提高细胞毒性药物的功效、降低毒副作用。

GnRH-A免疫母兔对血清LH和FSH浓度的作用

目的:探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对动物性腺激素分泌的作用与机理,为临床应用奠定基础.方法:以EDC.HCL为偶合剂,将GnRH-A与BSA连接为复合物,制备GnRH-A抗原.24只日本大耳白兔分为四组,在实验Ⅰ组、实验Ⅱ组和实验Ⅲ组兔子的颈背部分别皮下注射1.0 mL(100μg/mL、100μg/mL和50μg/mL)GnRH-A抗原,实验Ⅱ组和实验Ⅲ组于第3周以相同剂量加强注射一次,在实验的不同时间采血、分离血清,用ELISA法测定促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量.结果:EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的FSH浓度在注射后30 d开始升高,至40 d达到峰值,EG-Ⅱ和EG-Ⅲ明显高于EG-Ⅰ和对照组及EG-Ⅲ(P<0.05),整个实验期间EG-Ⅰ和对照组无显著差异.EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的LH注射后不断升高,在40 d至峰值(P<0.05),此后降低,30 d^50 d时EG-Ⅱ明显高于EG-Ⅰ和EG-Ⅲ及对照组.结论:兔体内注射GnRH-A可以明显增强LH和FSH的合成与分泌,加强注射效果更明显,而且与注射剂量相关,持续时间为40 d左右.

LHRHa与八聚精氨酸共修饰载氟尿嘧啶靶向脂质体的构建及其抗前列腺癌作用

目的构建促黄体激素释放激素类似物(LHRHa)与八聚精氨酸(R8)共修饰载氟尿嘧啶(5-FU)脂质体(LHRHa/R8-LP-5-FU),对其前列腺癌靶向性以及治疗效果进行初步研究。方法采用薄膜分散法制备LHRHa/R8-LP-5-FU,考察其形态、粒径、电位,并通过PC-3前列腺癌细胞定性和定量摄取实验考察其前列腺癌细胞靶向性。采用噻唑蓝(MTT)实验以及肿瘤球实验考察LHRHa/R8-LP-5-FU对PC-3细胞增殖抑制率。结果所制备LHRHa/R8-LP-5-FU粒径为(115.0±15.2)nm,电位为(11.00±2.15)m V,5-FU的包封率(84.5±5.1)%。体外细胞摄取实验表明,PC-3细胞对LHRHa/R8-LP摄取效率分别是R8修饰脂质体(R8-LP)和LHRHa修饰脂质体(LHRHa-LP)2.8和3.2倍(P<0.01)。细胞毒性实验结果显示,以0.9%氯化钠溶液为对照,LP-5-FU、R8-LP-5-FU、LHRHa-LP-5-FU和LHRHa/R8-LP-5-FU对PC-3细胞的增殖抑制率分别为(26.4±4.5)%,(39.5±4.2)%,(48.6±3.5)%和(82.5±4.3)%(P<0.01)。LHRHa/R8-LP-5-FU对肿瘤球的生长抑制作用明显高于其他脂质体。细胞毒性实验结果与细胞摄取实验结果一致。结论 LHRHa与细胞穿膜肽共修饰载5-FU脂质体具有良好的前列腺肿瘤细胞靶向性和抗肿瘤作用,是一种潜在的治疗前列腺癌的高效给药系统。

注射大剂量促黄体激素释放激素类似物后受孕大鼠垂体促性腺激素细胞的免疫组织化学变化

本文用特异的抗鼠促黄体激素(抗LH)、抗鼠卵泡刺激素(抗FSH)和抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)血清,以PAP免疫组织化学方法,观察注射大剂量促黄体激素释放激素类似物(LHRH-A)后受孕大鼠垂体促性腺激素细胞的变化。注射后24 h,促性腺激素细胞的免疫组织化学反应明显减弱;注射后48 h,促性腺激素细胞的免疫组织化学反应开始恢复;注射后168 h,其恢复过程仍在进行。计数对照组和实验组不同免疫反应强度的LH细胞数和它们占LH细胞总数的百分数,并用统计学方法检验,发现其结果与上述一致。大剂量LHRH-A能刺激受孕大鼠垂体促性腺激素细胞释放大量LH,从而抑制卵巢合成孕酮的功能,并导致终止妊娠。本文支持这种看法,而且认为,这种对促性腺激素细胞分泌活动的影响是可以恢复的。

LHRH-A对孕中期大鼠抗妊娠作用的研究

本文观察了[D-Ala^6,Pro^9-Ethylamide^(10)]-LHRH(LHRH-A)对孕中期大鼠的抗妊娠作用。结果显示:在孕9～11d sc 200μg/d LHRH-A,血浆孕酮水平自第二次给药后明显下降(P<0.05),给药大鼠均流产终止妊娠;LHRH-A的抗妊娠作用可被醋酸甲地孕酮所拮抗;LHRH-A对体外培养的假孕大鼠和孕d 9大鼠黄体细胞分泌孕酮有明显的直接抑制作用。

探讨促黄体生成素释放激素类似物治疗前列腺肿瘤的效果观察

目的:观察前列腺肿瘤患者采取促黄体生成素释放激素类似物治疗效果分析。方法:选取前列腺肿瘤诊断患者45例,对照组22例试验组23例。对照组采用手术去势加用雄激素受体拮抗剂口服治疗,试验组在对照组基础上采用雄激素受体拮抗剂联合皮下注射促黄体生成素释放激素类似物治疗。完成治疗后3年随访。对比两组患者治疗时间、中位进展时间、激素非依赖性前列腺癌发生率及不良反应率。结果:试验组中位进展时间明显长于对照组,试验组激素非依赖性前列腺癌发生率为4. 35%,不良反应发生率为13. 04%,而对照组分别为40. 91%、45. 46%,差异有统计学意义(P <0. 001)。结论:前列腺肿瘤患者采取促黄体生成素释放激素类似物治疗,可降低激素非依赖性前列腺癌发生率及不良反应率。

大剂量促黄体生成素释放激素类似物对假孕大鼠子宫内膜影响的组织化学研究

29只 Wistar 雌性大鼠,用人工方法产生假孕蜕膜反应后,分成实验组与对照组。自假孕第5天起,实验组动物每日经腹部皮下注射200μg 促黄体生成素释放激素类似物(LH-RH-A)(溶于0.2ml 生理盐水);对照组给予等量生理盐水,连续4天。假孕第9、11、13天取材,制冰冻切片,分别显示 AcP、AlP、G6 Pase、TPPase、LDH、SDH、~5△-3β-HSD 和 NE,以及脂类、糖和RNA。结果显示,大剂量 LH-RH-A 使假孕大鼠子宫内膜蜕膜细胞中上述8种酶呈阴性反应。在近中央带基质细胞这些酶呈阳性反应,尤其 LDH、SDH、~5△-3β-HSD 更明显,并可见细胞内 RNA 含量增加。实验组第9天与对照组第13天的子宫内膜细胞组织化学反应相似,提示大剂量 LH-RH-A 所引起的子宫蜕膜的退化与自然假孕中蜕膜组织的退化是相同的。

大剂量促黄体生成素释放激素类似物对假孕大鼠子宫内膜影响的组织学研究

本文报道假孕大鼠子宫内膜,在大剂量促黄体生成素释放激素类似物(LH-RH-A)作用下的组织学变化。用29只Wistar雌性大鼠,人工方法产生假孕蜕膜反应。从假孕第5天,每日腹部皮下注射LH-RH-A 200μg(溶于0.2ml生理盐水),连续4天。对照组注射等量生理盐水。于假孕第9、11、13天取材,经不同固定液固定后,做HE及显示结缔组织纤维和子宫内膜颗粒细胞的染色。结果表明,大剂量LH-RH-A可使假孕大鼠子宫内膜蜕膜化提前终止,蜕膜退化,子宫内膜颗粒细胞明显减少。

黄体生成激素释放激素类似物联合低剂量炔诺酮治疗子宫内膜异位症对生殖激素及腰椎骨量的影响

目的 了解国产黄体生成激素释放激素类似物 (LHRH -a)联合低剂量炔诺酮治疗子宫内膜异位症对生殖激素及腰椎骨量的影响。方法 对 110例内异症患者随机分为两组 ,A组 6 3例 ,采用LHRH -a 15 0 μg每日肌注加炔诺酮 2 5mg每日口服 ,B组 4 7例 ,单独应用LHRH -a肌注 ,疗程 3～ 6个月。放射免疫法测定血清FSH、LH、E2 、P、游离雌三醇 (FE3 )、游离睾丸酮 (FT)、骨钙素 (BGP)水平并比较阴道脱落细胞片型变化。双能X线吸收仪 (DEXA)测定两组患者腰椎2～ 4(前后位 )骨密度。结果 A组于给药 6小时后FSH、LH、E2 水平显著升高 ,但第 6天已不再升高 ;治疗 3个月后LH、E2 、P ,6个月后FSH、LH、E2 、P水平显著低于治疗前。B组于给药 6小时后FSH、LH、E2 、P水平显著升高 ,第 6天E2 仍显著高于治疗前 ;治疗 3个月后FSH、P ,6个月后FSH水平显著降低。二组阴道脱落细胞片型显示以中层细胞为主 ,伊红指数低。A组治疗 3个月后FE3 显著低于B组 ,而FT则显著高于B组。治疗 6个月后A组BGP水平低于B组。B组治疗 6个月后腰椎骨量丢失 (2 6 7±0 72 ) % ,显著低于治疗前。A组治疗 6个月后骨丢失 (0 2 4± 0 89) % ,与治疗前无显著差异。结论 国产LHRH -a联合低剂量炔诺酮治疗内异症的作用机制同样是通过药物的去卵巢?

不同时期添加黄体生成素对多囊卵巢综合征GnRH-a长方案卵巢慢反应患者临床结局的影响

目的 :探究不同时期添加外源性黄体生成素(LH)是否改善多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢慢反应患者临床结局,为探寻PCOS个体化的促排卵提供参考。方法 :回顾性分析2012年8月~2014年8月在中南大学湘雅医院生殖中心实施体外受精-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)常规长方案降调节治疗的PCOS患者共158个周期,根据是否加用尿促性腺激素(hMG,内含FSH、LH各75U/支)即外源性LH分为:未加组44例,即整个控制性促排卵(COS)过程中未加LH;早加组66例早卵泡期添加LH组;晚加组48例晚卵泡期添加LH组。比较三组一般资料、基础状态、临床指标及助孕结局。结果 :早、晚卵泡期添加LH组与未添加组在年龄、体重指数、基础LH及E2水平方面差异无统计学意义,早加组在不孕年限、基础睾酮水平明显高于其他两组差异有统计学意义,但三组GnRH-a降调后启动日LH及E2水平,Gn起始剂量方面差异无统计学差异。早加组获卵数明显高于未加组差异有统计学意义,早加组h CG日E2、可利用胚胎数、植入率、临床妊娠率明显高于未加组、晚加组,差异有统计学意义。结论 :多囊卵巢综合征GnRH-a长方案卵巢慢反应患者早卵泡期适当的补充外源性LH可以改善慢反应的临床结局。