Lycium ruthenicum Murr. treatment attenuates APP_(SWE)/PS1ΔE9 mouse model-like mitochondrial dysfunction in Slc25a46 knockout mouse model

Mitochondrial dysfunction is proposed to be substantially associated with ageing and ageing-related diseases like Alzheimer's disease(AD). However, it is unclear whether different mouse models with mitochondrialrelated diseases have similar changes in mitochondrial morphology of the same tissues. Moreover, whether similarities in mitochondrial morphology can be a suitable marker for screening and/or discovering mitochondrial-protective substances remains unknown. Mitochondria morphology in different tissues of a novel mitochondrial outer membrane protein Slc25a46 knockout mouse and a traditional APP_(SWE)/PS1ΔE9 transgenic mouse were examined using transmission electron microscope(TEM). Both young Slc25a46 knockout mice and aged APP_(SWE)/PS1ΔE9 mice models showed similar mitochondrial damage in cerebellum tissues. The results indicated that different mitochondrial-related diseases shared similar alteration and defects in mitochondrial morphology. Furthermore, Lycium ruthenicum Murr. extract, a bioactive food substance with cognition-improving property, could effectively improve muscle strength and increase body weight in the Slc25a46 knockout mice. These findings suggest that mitochondrial morphology defects in mice models, particularly in the mitochondrial compartment, represent a unified and effective marker for screening and validating natural product-derived functional substances with mitochondrial protective properties. It also holds potential application in mitochondrial-impaired senile neurodegenerative diseases, especially in AD.

Quality Analysis of Lycium ruthenicum Murr. from Different Producing Areas

[Objectives]The quality of Lycium ruthenicum Murr.from different producing areas was studied.[Methods]The content of proanthocyanidins(UV spectrophotometry),water-soluble vitamins(VB 2,VB 6,VB 12,Vc,niacinamide,and folic acid)),fat-soluble vitamins(VD,and VK 1)(high performance liquid chromatography),and trace elements Cu,Zn,and Fe(flame atomic absorption method)in L.ruthenicum from Ejin Banner of Inner Mongolia,Nuomuhong of Qinghai and Korla of Xinjiang were measured.[Results]The content of proanthocyanidins,VB 2,nicotinamide and VB 12 in L.ruthenicum from Ejin Banner was higher,and the content of Vc,VB 6,Cu,Zn,VD and VK 1 in L.ruthenicum from Nuomuhong was higher,while the content of folic acid and Fe in L.ruthenicum from Korla was higher.The proanthocyanidin content of L.ruthenicum from Ejin Banner was the highest,so it is an ideal plant for extracting proanthocyanidins.[Conclusions]This study provides a theoretical basis for the research,development and utilization of L.ruthenicum from Nuomuhong,Ejin Banner and Korla.

Technical Study on Extraction of Procyanidins in Lycium ruthenicum Murr. Using Sub-critical Fluid 1,1,1,2-Tetrafluoroethane( R134a)and Content Determination from Different Producing Areas

[Objectives] To study the optimal conditions for extracting procyanidins fromLycium ruthenicum Murr. with sub-critical fluid R134 a( 1,1,1,2-tetrafluoroethane) in 1 L extraction kettle. [Methods]Taking the extraction rate of procyanidins as an indicator,the influence of pressure,temperature,and extraction time on extraction rate of procyanidins fromL. Ruthenicum Murr. was studied by single factor experimental methods and orthogonal array design. [Results]The order of factors affecting extraction rate of procyanidins was extraction temperature > extraction pressure > extraction time. The optimum extraction conditions were as follows: the extraction rate of procyanidins fromL. ruthenicum Murr. was the highest with extraction pressure of 1. 2 MPa,extraction temperature of 50℃ and extraction time of 90 min. The content of procyanidins in L. ruthenicum Murr. from different producing areas was determined by vanillin-HCl method under the optimal conditions. [Conclusions] The method has the advantages of easy operation,good selectivity,low extraction temperature and high extraction efficiency,which is suitable for extraction of procyanidins in L. ruthenicum Murr.

黑果枸杞香气成分和多酚类物质的组成研究

随着人类对健康和养生重视程度的不断提高,具有良好功效的药食同源植物黑果枸杞受到越来越多的关注,研究黑果枸杞中具有药理活性物质的化学成分,对其深加工和进一步开发利用具有重要的意义。该文对甘肃酒泉产的黑果枸杞鲜果的香气成分及多酚类物质的化学组成进行分析,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术定性定量分析黑果枸杞鲜果香气成分;采用超高效液相色谱-电喷雾四级杆串联飞行时间质谱技术定性分析黑果枸杞鲜果中多酚类物质的组成。从黑果枸杞香气成分中鉴定出醇类、醛酮类、酯类、烃类等挥发性化学成分63种,占香气成分总量的95.4%,其中25种化合物为我国国家标准GB 2760—2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》规定的食品用合成香料;香气成分中醇类化合物共计26种,总含量占比最高(44.98%)。黑果枸杞多酚经提取和HPD-500大孔吸附树脂纯化后进行液相色谱-质谱联用测试,定性鉴别出73种多酚化合物,其主要由黄酮类和酚酸类等化合物组成。该研究初步确定了黑果枸杞香气和多酚类物质的化学成分,为黑果枸杞药用及食用功效的深入研究奠定了基础。

黑果枸杞和黄果枸杞的广泛靶向代谢组学分析

目的:全面分析和鉴定枸杞果实中的代谢物,比较不同品种间代谢物的差异,为深入挖掘和利用不同品种枸杞提供参考。方法:以黑果枸杞和黄果枸杞干果为材料,利用超高效液相色谱-串联质谱进行广泛靶向代谢组学分析,鉴定和比较两种枸杞的代谢物。结果:两种枸杞果实中共检测出1098种代谢产物,包括氨基酸及其衍生物、酚酸、黄酮、生物碱、脂质等12类,其中酚酸、黄酮和生物碱3类代谢产物占比最高。通过主成分分析和聚类分析发现,黄果枸杞与黑果枸杞相比,存在235种差异代谢物上调和252种差异代谢物下调。京都基因与基因组百科全书富集分析发现,不同品种枸杞间的差异代谢物主要涉及黄酮生物合成,托烷、哌啶和吡啶生物碱的生物合成,次生代谢物的生物合成,ABC转运等途径。结论:不同品种对枸杞代谢物的含量影响较大,本研究结果对黑枸杞和黄枸杞的开发和利用提供一定的理论指导。

黑果枸杞多糖结构表征及对乙醇诱导胃黏膜上皮细胞损伤的影响

采用热水浸提法提取黑果枸杞多糖(Lycium ruthenicum Murr. polysaccharide,LRMP),解析其单糖组成、糖苷键连接方式、链构象等结构参数,并评价其对乙醇诱导胃黏膜上皮细胞(gastric mucosal epithelial cells,GES-1)损伤的保护效果。结果表明,LRMP由阿拉伯糖、木糖、半乳糖、葡萄糖、岩藻糖和半乳糖醛酸组成,结构末端主要由阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖残基组成,在溶液中呈典型的无规卷曲构象,均方半径为(80.4±1.0)nm。LRMP对GES-1细胞无毒性作用,质量浓度600μg/mL LRMP可以显著抑制乙醇对GES-1细胞造成的损伤,同时恢复细胞内超氧化物歧化酶的活性,降低GES-1细胞凋亡率。综上所述,LRMP作为功能性多糖在健康食品开发中具有潜力。

黑枸杞花青素联合人脂肪源性血管外膜细胞支持脐血造血干/祖细胞的增殖

背景:黑枸杞花青素(Anthocyanins in Lycium ruthenicum Murr,ALRM)是黑枸杞中重要的活性成分之一,具有抗氧化、免疫调节等功效。人脂肪源性血管外膜细胞(CD146^(+)hAD-PCs)是骨髓间充质干细胞的前体细胞,在体外具有促进造血干/祖细胞增殖与分化的功能。ALRM联合CD146^(+)hAD-PCs对脐血造血干/组细胞的体外支持作用有待于研究。目的:探讨ALRM联合CD146^(+)hAD-PCs对脐血CD34^(+)造血干/祖细胞体外扩增的支持作用。方法:CCK-8法检测不同质量浓度ALRM(0,200,400,600,800,1000 mg/L)对CD146^(+)hAD-PCs增殖的影响;流式细胞术检测ALRM对CD146^(+)hAD-PCs细胞周期的影响。共培养实验分为空白组、ALRM组、CD146^(+)hAD-PCs组、ALRM+CD146^(+)hAD-PCs组,分析ALRM联合CD146^(+)hAD-PCs对脐血CD34^(+)造血干/祖细胞的体外支持作用。共培养1,2,4周,比较扩增后细胞数量、集落形成单位数量,流式细胞仪检测细胞免疫表型,ELISA检测细胞因子水平。结果与结论:(1)ALRM质量浓度为200 mg/L时,CD146^(+)hAD-PCs活力最高,CD146^(+)hAD-PCs的G_(0)/G_(1)期细胞比例下降,S期、G_(2)/M期细胞比例上升(P<0.01)。(2)脐血CD34^(+)造血干/祖细胞数量变化:在共培养1,2,4周时ALRM+CD146^(+)hAD-PCs组高于ALRM组(P均<0.05),在共培养2,4周时ALRM+CD146^(+)hAD-PCs组高于CD146^(+)hAD-PCs组(P均<0.05),ALRM组与空白组随着共培养时间延长细胞数量逐渐减少。(3)集落形成能力及免疫表型分析:在共培养1,2周时ALRM+CD146^(+)hAD-PCs组的集落形成单位数量高于CD146^(+)hAD-PCs组和ALRM组(P均<0.05);在共培养1,2,4周时ALRM+CD146^(+)hAD-PCs组CD45^(+)、CD34^(+)CD33^(-)细胞比例高于CD146^(+)hAD-PCs组(P均<0.01)。(4)细胞因子变化:在共培养4周时ALRM+CD146^(+)hAD-PCs组的白细胞介素2水平高于ALRM组、CD146^(+)hAD-PCs组(P<0.05);在共培养2,4周时ALRM+CD146^(+)hAD-PCs组白细胞介素3水平高于CD146^(+)hAD-PCs组(P<0.05);在共培养1周时ALRM+CD146^(+)h AD-PCs组的粒细胞集落刺激因子水平高于CD146^(+)hAD-PCs组,在共培养2周时高于ALRM组、CD146^(+)hAD-PCs组(P<0.01);在共培养1,2,4周时ALRM组、ALRM+CD146^(+)hAD-PCs组的干扰素γ水平低于CD146^(+)hAD-PCs组(P<0.05)。(5)由于空白组无基质细胞,脐血CD34^(+)造血干/祖细胞在共培养1周之后就无法计数,未进行免疫表型、集落分析和细胞因子检测。(6)结果表明:ALRM可以通过促进CD146^(+)hAD-PCs增殖和细胞周期转化进而促进脐血CD34^(+)造血干/祖细胞的体外扩增,在造血干细胞移植研究方面具有重要价值。

食品加工条件对黑枸杞花青素稳定性的影响

黑枸杞富含花青素,花青素具有多种生理活性,然而其稳定性较差。文章研究了不同食品加工条件对黑枸杞花青素稳定性的影响,包括温度、pH值、光照、食品添加剂和基质等。结果表明,在20℃、pH3、避光条件下的黑枸杞花青素相对稳定,保存率分别为(89.74±5.54)%、(69.56±1.44)%、(57.85±0.50)%。H_(2)O_(2)、Na_(2)SO_(3)、苯甲酸钠和3种糖(葡萄糖、蔗糖、乳糖)均会大幅降低花青素的热稳定性(65℃,30 min)。除抗坏血酸外,草酸、酒石酸和柠檬酸增强花青素热稳定性的效果依次增大。在40℃加速贮存7 d后,草酸对花青素的稳定性仍然具有较好的效果。总之,黑枸杞花青素在食品加工过程中最好在低温、酸性和避光条件下贮存,而在选用食品基质和添加剂时也应该注意其对花青素稳定性的影响。该研究结果为黑枸杞花青素类食品的加工提供了理论依据。

黑果枸杞MSAP技术体系的构建

为利用甲基化敏感多态性扩增技术(MSAP)构建黑果枸杞MSAP技术反应体系,本试验采用CTAB法提取黑果枸杞DNA,通过双酶切、预扩增和选择性扩增对16对引物的多态性进行初步筛选并构建MSAP技术体系。结果表明:双酶切进行12 h,DNA模板能够酶切完全;预扩增反应产物条带集中在250~1000 bp处,选择性扩增可筛选出6对引物组合,条带明显。本研究为后续黑果枸杞DNA甲基化水平的相关分析研究奠定了基础。

黑果枸杞果实中主要成分的傅里叶变换近红外光谱预测模型构建

使用傅里叶变换近红外光谱(FT-NIR)结合化学计量学方法,开发了一种黑果枸杞干果和鲜果中主要成分(总糖、还原糖、总酸、氨态氮、花青素、原花青素、总酚、黄酮和多糖)含量的预测方法。首先比较了11种原始光谱的预处理方式,筛选出每种成分的最优预处理方法。然后比较了利用偏最小二乘(PLS)、区间偏最小二乘(iPLS)和联合区间偏最小二乘(siPLS)算法建立的模型,最终确定采用siPLS建模。结果表明:总酸、氨态氮、花青素、原花青素、总酚和黄酮的交叉验证相关系数(Rc)和预测集相关系数(R_(P))均大于0.9818,相对分析误差(RPD)均大于2.5,模型效果优异,总糖、还原糖和多糖的建模效果良好,建立的定标模型均可以用于实际检测。验证集样本实测值与预测值无显著性差异,预测误差在±0.1%,模型的预测结果可信度高。本研究建立的预测模型,可以实现黑果枸杞干果和鲜果中主要成分含量的无损、快速、准确检测。

黑果枸杞‐酿酒葡萄混合果酒酿造过程中花色苷稳定性研究

针对黑果枸杞加工过程中存在的花色苷不稳定的关键瓶颈问题,以黑果枸杞鲜果为原料,辅以酿酒葡萄共发酵酿制果酒。分析不同酿造因子对果酒多酚、花色苷及色泽的影响;明确影响酒体中花色苷含量及稳定性的主要因子,通过正交优化试验得到最佳酒精发酵工艺。结果表明:黑果枸杞与酿酒葡萄质量比以及pH值对果酒花色苷含量和色泽影响程度较大,但对多酚含量影响作用较小,而酵母菌类型对黑果枸杞果酒多酚、花色苷和色泽影响均较小;复配酿酒葡萄可减少花色苷损失,提高黑果枸杞果酒中花色苷的稳定性。最佳酒精发酵工艺条件为黑果枸杞与酿酒葡萄质量比1∶4、果胶酶添加量0.70g/L、酿酒酵母添加量0.25g/L,发酵后酰化花色苷[矮牵牛素-3-O-芸香糖(反式-p-香豆酰基)-5-O-葡萄糖苷]含量可达(459.51±3.66)mg/L。

黑果枸杞中原花青素的提取及其稳定性研究

以黑果枸杞中原花青素为研究对象,通过单因素实验分别考查乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对原花青素提取率的影响,同时通过响应面法优化提取实验,得到提取最优工艺。另外,分别考查了不同种类、不同浓度的糊精和氨基酸对原花青素稳定性的影响,结果表明,其对原花青素具有一定的稳定性作用。

黑果枸杞花青素提取物的初步毒性评价

该文评价了黑果枸杞花青素提取物(Anthocyanins extract of Lycium ruthenicum,AEL)的急性毒性和亚急性毒性。采用固定剂量法一次灌胃AEL 8000 mg/kg进行经口急性毒性试验,观察小鼠毒性反应,记录14 d内一般状态。选取SD大鼠进行30 d喂养试验,记录大鼠体质量和体征变化,实验结束时进行尿液生化指标、血液学指标、血清生化指标检查,并观察脏器形态变化,计算脏体系数和脏脑系数。研究发现:急性毒性试验中,小鼠无不良反应,体质量正常增长,解剖脏器未见明显异常;连续灌胃30 d后,各组大鼠体质量正常增长,未见明显中毒反应;与对照组比较,高剂量组雌性大鼠单核细胞百分比(M%)显著升高(P<0.05),AST/ALT的比值显著降低(P<0.05);高剂量组雄性大鼠血清Cl-、脾脏系数高于对照组(P<0.05)。实验组大鼠其余尿液生化指标、血液学指标、血清生化指标、脏体系数和脏脑系数无明显异常。结果表明:小鼠对AEL的单次灌胃最大耐受剂量不低于8000 mg/kg;连续灌胃30 d,大鼠未见明显中毒反应,AEL在该实验条件下无急性、亚急性毒性,具有较高的安全性。

黑果枸杞乳酸菌发酵饮料生产工艺研究

采用干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)制备黑果枸杞发酵饮料,以减少加工过程中花青素和原花青素损失为主要目标,首先确定了酶解条件:果胶酶和纤维素酶各添加1 g/L,37℃酶解3.5 h;优化了扩培培养基:脱脂乳粉30 g/L,葡萄糖70 g/L,枸杞汁80 g/L;得到了最优的发酵条件:料水比1∶30(g∶mL),接种量3%(体积分数),发酵温度37℃,发酵时间15 h,发酵结束时总酸含量约3.5 g/L。结果显示,乳酸菌发酵显著提高了花青素的含量和保留率,但是杀菌会造成花青素和原花青素的大量损失。通过优化杀菌参数和控制环境因子开发了有利于花青素和原花青素保护的杀菌工艺:料液避光并控制氧气含量小于0.5 mg/L,于85℃加热25 min,此工艺使花青素保留率提高了7.1%,原花青素保留率提高了6.0%,功能成分在加工过程中得到了有效保护,制备的发酵饮料具有黑果枸杞的风味及柔和的微酸口感。该研究可为黑果枸杞深加工产品开发提供一定的理论参考。

黑果枸杞花色苷提取工艺优化及抗氧化研究

为探究黑果枸杞花色苷最佳提取工艺和抗氧化活性,采用超声酶辅助提取法、乙醇/硫酸铵双水相萃取法、乙醇/磷酸二氢钠双水相萃取法提取黑果枸杞花色苷,通过响应面优化提取工艺,并使用t-BHP诱导BRL 3A细胞建立抗氧化模型来探索黑果枸杞花色苷的氧化应激保护作用.结果表明,超声酶辅助提取得率为:(17.92±0.04)mg/g;乙醇/硫酸铵双水相萃取得率为:(15.46±0.31)mg/g;乙醇/磷酸二氢钠双水相萃取得率为:(15.02±0.19)mg/g.体外抗氧化实验表明,乙醇/硫酸铵双水相萃取的花色苷(LRN)抗氧化活性最强,纯化后的乙醇/硫酸铵双水相萃取的花色苷(LRNA)可通过减少细胞中ROS的产生来缓解t-BHP诱导的氧化损伤.综上所述,该工艺便捷、稳定可用于黑果枸杞花色苷的提取,同时证明了LRN抗氧化活性最强.

黑果枸杞果实中抗炎活性成分的筛选及作用机制研究

目的:对黑果枸杞果实中的抗炎活性成分进行筛选和评价,同时对其作用机制进行研究。方法:利用甲醇对黑果枸杞果实进行提取,并分别在微孔树脂(MCI)和大孔树脂柱上进一步分离。利用脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7构建炎症模型,对获得的组分进行筛选和评价。采用MTT法检测细胞活力、比色法检测NO水平、ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α等炎症因子水平,Western blot检测COX-2、IκBα等蛋白及其磷酸化的表达水平。结果:初步筛选发现经MCI处理后的3个组分中,Fr1表现出较好的抑制NO生成的能力。对Fr1进一步分离获得Fr1-1和Fr1-2组分。Fr1-2在抑制NO生成、炎症因子水平等方面均优于Fr1。对其作用机制进一步研究发现Fr1-2能抑制COX-2、p-IκBα蛋白表达水平从而发挥抗炎作用。对Fr1-2活性部位中的主要成分进一步分离制备,发现其主要成分为5-羟甲基糠醛,5-羟甲基糠醛在所选浓度范围内对细胞活力无显著影响,且其可以抑制炎症模型NO生成,具有一定的抗炎作用。结论:黑果枸杞果实提取物具有一定的抗炎作用,其机制可能与抑制COX-2蛋白的表达、IκBα蛋白的磷酸化水平,从而降低炎症因子的表达有关,其作用的物质基础可能与5-羟甲基糠醛有关。

酶辅助超声提取黑果枸杞多糖工艺及其保肝活性研究

目的对黑果枸杞多糖酶辅助超声提取工艺进行研究并评价其保肝活性。方法应用Box-Benhnken设计,对黑果枸杞中总多糖的提取工艺进行优化;采用柱前衍生化法对多糖组成进行了分析;并通过检测黑果枸杞总多糖对DPPH和ABTS自由基的清除率,测定黑果枸杞多糖的抗氧化作用;以H 2O 2诱导人正常肝细胞氧化损伤模型,进一步评价黑果枸杞多糖的保肝活性。结果黑果枸杞中总多糖最佳提取工艺为:提取温度39℃、提取溶剂pH为4、酶添加量3%、提取时间3.25 h,在此条件下黑果枸杞多糖提取率为7.19,其主要由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖与半乳糖组成。黑果枸杞总多糖对DPPH和ABTS自由基的清除率分别为49.30%与48.9%,具有较强的清除自由基的能力。此外,黑果枸杞总多糖具有显著的抗H 2O 2诱导LO2细胞氧化损伤的作用,当浓度为5 mg·mL-1时,细胞存活率可达77.85%。结论酶辅助热水浸提法提取黑果枸杞多糖可行,并且黑果枸杞总多糖具有良好的化学抗氧化活性以及保护肝细胞氧化损伤的潜在作用。

黑果枸杞不同组织花青苷组分及相对含量研究

通过研究黑果枸杞不同生长时期组织中花青苷的组分及相对含量的变化,为花青苷的合成调控和形成机制研究提供基础数据。采用液质联用技术,研究了野生黑果枸杞展叶期、花期和果期的茎、叶、花、果中花青苷组分和相对含量。结果表明,茎、叶、花和果中共检测到19种花青苷,茎、叶、花、青果和紫果中的主要花青苷组分是飞燕草素-3-O-对香豆酸-葡萄糖苷,黑果中的主要花青苷组分是矮牵牛素-3-O-反式对香豆酸-芸香糖苷-5-葡萄糖苷。3个生长时期茎和叶的花青苷组分没有变化,果中花青苷组分从青果中的8种增加到黑果的13种。茎、叶、花、果中都含有丰富的花青苷,其中相对含量较高的花青苷组分主要有5种,这5种组分在各组织中占比各不相同。茎中的花青苷总含量在不同时期基本保持稳定;叶中的花青苷总含量先增加后减少;果中的花青苷总含量随着果的成熟显著增加。研究证明在不同生长时期黑果枸杞组织中花青苷组分的积累存在组织特异性和时间差异。茎、叶、花中花青苷含量丰富,具有潜在的利用价值。

48份黑果枸杞种质主要表型和品质性状的遗传多样性研究

为明确野生黑果枸杞种质资源主要表型和品质性状遗传多样性,对48份黑果枸杞种质资源的18种主要表型、品质性状(15个数量性状、3个质量性状)进行描述性统计、主成分、相关性、聚类分析。结果表明,黑果枸杞种质资源具有丰富的遗传多样性,数量性状的遗传多样性指数在1.431~2.095,其变异系数在19%~189%,其中多样性指数最高的是果实纵径,其次是果实横径、枝粗、枝长、单枝成熟果实数和叶宽;质量性状遗传多样性指数在0.745~1.007,其中果实形状的多样性指数最高,叶片形状的多样性指数为0.948,果实颜色的多样性指数为0.745。主成分分析结果表明,前6个主成分累计贡献率达80.09%,果实纵径、果实颜色、叶面积、花色苷含量、果实横径和枝粗可作为反映黑果枸杞产量及品质的主要指标。相关性分析结果表明,果实横径、平均单果质量、单簇叶片数间呈极显著正相关关系(P<0.01),花色苷含量、果实颜色、单枝成熟果实数呈极显著正相关关系(P<0.01),果柄长与果实形状、果实颜色、花色苷含量和枝粗均呈极显著负相关关系(P<0.01)。基于种质间性状的遗传差异,48份黑果枸杞种质被聚为六大类,聚类结果与样品群落分布具有较强的相关性。综上,48份黑果枸杞种质资源主要表型、品质性状遗传多样性较丰富。

中压制备色谱法分离黑果枸杞中2个矮牵牛素花色苷及其对胰脂肪酶的抑制活性

为了快速制备较高纯度的黑果枸杞花色苷,黑果枸杞花色苷粗提物首先用大孔树脂-中压制备色谱进行纯化,再用凝胶树脂-中压制备色谱分离获得2个花色苷单体,采用超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)、核磁共振氢谱(1H nuclear magnetic resonance,1H NMR)对其结构进行鉴定,并对纯化物的胰脂肪酶抑制活性进行评价。结果表明:用D101大孔树脂-中压制备色谱对黑果枸杞花色苷进行纯化,所得纯化物中P1、P2的相对含量分别为18.22%和30.77%,继续采用Sephadex LH-20联合中压制备色谱分离纯化可得到相对含量分别为84.16%和81.48%的两个黑果枸杞花色苷组分P1和P2,经UPLC-MS/MS和1H NMR鉴定,2个花色苷化合物分别为矮牵牛素-3-O-芸香糖(反式-对香豆酰基)-葡萄糖苷-5-O-葡萄糖苷和矮牵牛素-3-O-芸香糖(反式-对香豆酰基)-5-O-葡萄糖苷。P1和P2具有较好的胰脂肪酶抑制活性,其IC50值分别为0.250 mg/mL和0.224 mg/mL,且远低于花色苷粗提物和大孔树脂纯化物。研究为黑果枸杞花色苷利用提供一定基础。