m6A去甲基化酶FTO通过调控p53磷酸化抑制急性髓系白血病的发生发展

目的研究FTO/p53在急性髓系白血病(AML)发生发展中的作用。方法对2018年1月至2019年1月郑州大学第一附属医院收治的27例AML患者和15例健康对照外周血中FTO表达水平进行分析,并结合TCGA数据库分析,深入研究FTO在AML发生发展中的作用。结果在AML患者外周血中,FTO表达水平升高。分析TCGA数据库发现FTO与p53磷酸化存在相关性,使用siRNA敲降白血病细胞系HL60和K562中FTO后,HL60和K562细胞凋亡增多,结果显示FTO表达水平降低后白血病细胞的凋亡增加。进一步通过体外功能实验显示FTO表达降低后p53磷酸化平均荧光强度增强。结论m6A去甲基化酶FTO通过调控p53磷酸化抑制AML的发生发展。

m6A甲基化修饰在胃癌中的研究进展

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核细胞mRNA最常见的一种表观遗传修饰方式。m6A甲基化修饰通过调控修饰mRNA,广泛参与细胞内RNA的许多生物学行为,从而影响疾病进展与肿瘤的发生。m6A RNA修饰相关因子在胃癌(gastric cancer,GC)中的异常表达,引发m6A甲基化修饰失调,影响GC的增殖、转移与侵袭、凋亡和耐药等生物学过程。因此,本文就m6A RNA甲基化修饰在GC发生发展中的作用以及化疗耐药予以综述。

ALKBH5对人肝癌细胞上皮间质转化的影响

目的探讨ALKBH5对肝癌细胞迁移、侵袭能力及上皮间质转化(EMT)的影响。方法选择手术切除的肝癌标本50例,分析ALKBH5与临床病理学参数的关系。设计ALKBH5短发夹核糖核酸(shRNA)序列,构建pLKO.1-TRC vector载体,慢病毒感染肝癌细胞HepG2和SMMC7721,嘌呤霉素筛选并培养稳定低表达ALKBH5细胞株;检测ALKBH5 mRNA及ALKBH5蛋白质水平干扰效率;Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞EMT相关蛋白的影响。结果肝癌中ALKBH5蛋白表达与分化程度、临床分期存在相关性(P<0.05),与血清甲胎蛋白(AFP)水平、肿瘤大小、年龄、性别均无相关性(P>0.05);下调肝癌细胞ALKBH5表达,对照组和实验组HepG2细胞迁移数目分别为(123±22)、(335±21)个,侵袭数目分别为(118±29)、(282±17)个;对照组和实验组SMMC7721细胞迁移数目分别为(220±27)、(453±23)个,侵袭数目分别为(200±11)、(388±20)个,2组间差异均有统计学意义(P<0.05)。下调ALKBH5表达后,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低,波形蛋白(Vimentin)、锌指结构转录抑制因子(Snail)表达水平增高。结论ALKBH5扮演了抑癌基因的角色,下调ALKBH5表达能够促进肝癌细胞的迁移、侵袭及EMT。

ALKBH5对人胃癌AGS细胞迁移和侵袭的影响

该研究探讨了6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^6A)去甲基酶ALKBH5(alk B homolog5)对人胃癌AGS细胞迁移和侵袭的影响。通过数据库分析ALKBH5在胃癌组织中的表达水平;Real-time PCR和Western blot检测ALKBH5在胃癌细胞中表达水平;用sh-EGFP和sh-ALKBH5质粒转染人胃腺癌AGS细胞,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,细胞划痕实验进一步检测细胞的迁移能力;用Western blot检测上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白质的变化。结果显示,弥漫性胃腺癌中ALKBH5的m RNA水平明显低于正常胃组织和其他类型的胃癌组织,且其基因拷贝数也明显低于正常胃组织。在胃癌细胞系中,AGS细胞ALKBH5蛋白质和m RNA水平最高,sh-ALKBH5干扰能明显促进AGS细胞迁移和侵袭能力,且下调其上皮指标水平,而上调间质指标水平。上述结果提示,ALKBH5在胃癌组织中可能是一个抑癌基因,与胃癌细胞的迁移和侵袭能力负相关。