m6A甲基转移酶样蛋白3在溃疡性结肠炎病人结肠组织中的表达及意义

目的:探讨m6A甲基转移酶样蛋白3(METTL3)在溃疡性结肠炎(UC)病人结肠组织中的表达及其临床意义。方法:纳入UC病人100例作为研究对象,依据Mayo评分方法判定病情活动度:轻度活动期30例,中度活动期34例,重度活动期36例。根据预后情况分为不良预后组(56例)和预后良好组(44例)。另以同期结肠息肉病人60例为对照组。通过qRT-PCR法检测UC病人及对照组结肠黏膜METTL3 mRNA的表达,采用免疫组织化学法检测UC病人METTL3蛋白水平。比较UC不同严重程度病人METTL3 mRNA及蛋白表达变化,分析其与UC严重程度及预后的关系;受试者工作特征(ROC)曲线评价METTL3 mRNA对UC预后的预测效能;Cox回归分析影响UC预后不良的相关因素。结果:研究组病人结肠黏膜METTL3 mRNA水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。与轻度活动期相比较,中度活动期与重度活动期病人结肠黏膜METTL3 mRNA水平以及阳性率显著升高(P<0.05);与中度活动期相比较,重度活动期病人结肠黏膜METTL3 mRNA水平以及阳性率显著升高(P<0.05)。预后不良组病人Mayo评分、METTL3 mRNA水平、METTL3阳性表达率及CRP均显著高于预后良好组(P<0.05~P<0.01)。Spearman相关性分析结果显示,研究组病人METTL3 mRNA与Mayo评分呈正相关关系(r=0.540,P<0.05)。ROC结果显示,METTL3 mRNA诊断病人预后的曲线下面积为0.882(95%CI:0.813~0.951),灵敏度为82.10%,特异度为86.40%。Cox回归分析显示,Mayo评分、METTL3 mRNA水平升高是UC病人发生不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:UC病人METTL3水平与预后有关,其高水平可提示病人预后不良。

癌组织M6A甲基转移酶样蛋白3水平对手术切除后接受索拉非尼治疗的肝细胞癌患者预后的影响

目的探讨肝细胞癌(HCC)组织N 6-甲基嘌呤(M6A)甲基转移酶样蛋白3(METTL3)水平及其对术后索拉非尼治疗的患者预后的预测价值。方法2016年8月~2019年8月我院手术切除治疗的HCC患者62例,随访2年。采用qRT-PCR法检测癌组织和癌旁组织METTL3 mRNA水平,应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析癌组织METTL3 mRNA水平对患者预后的预测价值。结果癌组织METTL3 mRNA水平为(7.7±1.4),显著高于癌旁组织【(5.3±1.1),P<0.05】;肿瘤直径≥5 cm、TNMⅢ期和肝外转移患者癌组织METTL3 mRNA水平分别为(8.1±1.1)、(8.2±1.4)和(8.6±0.8),显著高于肿瘤直径<5 cm、TNMⅠ/Ⅱ期和无肝外转移患者【分别为(7.0±0.9)、(7.3±0.7)和(7.4±1.2),P<0.05】;在随访2年末,HCC患者生存27例,死亡35例;生存组癌组织METTL3 mRNA水平为(7.0±1.0),显著低于死亡组【(8.2±1.1),P<0.05】;以METTL3 mRNA水平为7.6为最佳截断点,预测患者死亡的AUC为0.712【95%CI(0.584~00.839)】,其灵敏度、特异度和准确度分别为71.4%、66.7%和69.4%;癌组织METTL3 mRNA低水平组2 a总体生存率为64.3%,显著高于高水平组的26.5%(P<0.05)。结论肝细胞癌患者癌组织METTL3 mRNA呈现高水平,且其高水平状态与肿瘤直径、TNM分期和肝外转移有关,预示患者不良预后。检测癌组织METTL3 mRNA水平可作为手术切除接受索拉非尼治疗的HCC患者的预后指标。

m^(6)A甲基转移酶样蛋白14在抑郁样小鼠海马中的表达

目的研究m^(6)A甲基转移酶样蛋白14(METTL14)在抑郁样小鼠海马中的表达变化和作用。方法1)将C57BL/6J小鼠分为对照组和抑郁模型组。单笼单只饲养并加以不定期慢性不可预知刺激(CUMS),制备抑郁模型时间为4个月。2)用强迫游泳实验(FST)、蔗糖偏好实验(SPT)、悬尾实验(TST)测试模型小鼠的抑郁样行为。3)行为学检测完成后,取两组小鼠的海马组织,用qRT-PCR、Western blot、Dot blot、免疫组化及免疫荧光等技术检测小鼠海马组织m^(6)A修饰及甲基化转移酶样蛋白METTL14的表达。结果1)模型组小鼠出现明显的抑郁样行为;2)模型组小鼠海马组织中METTL14表达量在mRNA水平升高并伴随m^(6)A修饰水平升高;3)模型组小鼠海马CA1、CA3及DG区METTL14蛋白表达量升高且存在神经元损伤现象。结论抑郁样小鼠海马区m^(6)A甲基化功能活跃。

N^(6)-甲基腺苷(m6A)转移酶METTL3和m6A调控LINC01465在肝细胞癌增殖转移中的作用机制

目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)在肝癌细胞中调控m6A水平,影响长链非编码(lncRNA)LINC01465的表达,促进肝癌细胞增殖转移的机制。方法利用人类癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析METTL3在肝癌组织和正常肝组织中的表达差异及与患者预后的关系;用Western blot、RT-qPCR分析验证METTL3在细胞、组织中的表达;用m6A比色法验证肝癌细胞及正常肝细胞中的m6A水平;敲低METTL3后进行CCK-8、克隆形成、Transwell迁移、侵袭实验,研究METTL3对肝癌增殖转移的调控作用;转录组RNA m6A甲基化测序确定METTL3的下游调控基因LINC01465。RT-qPCR验证沉默METTL3后LINC01465的表达量,以及LINC01465在肝细胞癌中的表达水平。结果METTL3在肝癌组织和细胞中明显高表达且与患者预后较差相关;高表达的METTL3促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭;METTL3影响LINC01465的m6A水平及其表达量来促进肝细胞癌的发展进程。结论METTL3可通过m6A依赖的方式来影响LINC01465的表达水平,促进肝癌细胞增殖转移,METTL3可能成为肝癌预后及治疗的靶向标志物。

甲基转移酶样蛋白3与前列腺癌患者预后的相关性

目的探讨甲基转移酶样蛋白3(METTL3)与前列腺癌(PCa)患者预后的相关性,以期建立新的预测PCa患者预后的方法。方法使用开放数据集和PCa组织芯片评估METTL3基因和蛋白的表达、METTL3与Gleason评分(GS)之间的相关性以及METTL3预测PCa不良预后的能力,构建列线图模型定量评估PCa预后。结果与正常前列腺组织比较,PCa组织中METTL3基因和蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。METTL3在高危PCa组(GS>7分)中的基因和蛋白表达水平明显高于中-低危PCa组(GS≤7分)(P<0.05)。METTL3基因高表达组患者的短期和长期无进展生存率和总体生存率均较METTL3基因低表达组患者差(P<0.05)。此外,本研究建立了一个由7个受METTL3 N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰调控的靶基因组成的风险模型。该风险模型中的7个靶基因主要与细胞周期过程密切相关,METTL3蛋白表达水平与细胞周期蛋白B1(CCNB1)的蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.30,P=0.0025)。结论METTL3具有预测PCa预后的潜力,其可能通过m6A修饰调控与细胞周期过程密切相关的靶基因的表达来影响PCa预后。

甲基转移酶样蛋白14对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用

目的 探讨过表达和敲低甲基转移酶样蛋白14(METTL14)对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用。方法 取人急性早幼粒白血病细胞NB4进行培养,分为过表达对照组、过表达组、干扰对照组、干扰组,过表达对照组及过表达组分别转染空白质粒和METTL14质粒,干扰对照组和干扰组分别转染si-NC和si-METTL14质粒。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Dot Blotting法检测细胞N-6甲基腺苷(m6A)修饰水平。结果 与过表达对照组相比,过表达组细胞增殖率升高、细胞凋亡率降低、细胞迁移数、细胞侵袭数升高,NB4细胞m6A修饰水平提高(P均<0.05);与干扰对照组相比,干扰组细胞增殖率降低、细胞凋亡率增加、细胞迁移数、细胞侵袭数降低,NB4细胞m6A修饰水平降低(P均<0.05)。结论 METTL14可促进NB4细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与提高m6A修饰水平有关。

RNA甲基转移酶METTL3在急性髓系白血病发生发展及耐药中的研究进展

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是成人最常见的血液系统恶性肿瘤,其广泛的基因组变化和分子突变为药物的开发提供了潜在靶点。目前靶向治疗药物及免疫治疗无法替代传统的“3+7”方案。30%~40%的初治AML患者对于传统蒽环类方案原发耐药,治疗效果极差,是AML治疗及研究领域的重大难题。甲基转移酶样3(methyltransferaselike 3,METTL3)作为重要的甲基转移酶在调节AML发生发展及耐药中具有重要意义。本文总结了METTL3在AML发生发展及耐药中的作用及其在抗白血病治疗中的潜力,以期为克服AML的耐药及复发提供新思路及潜在治疗靶点。

甲基转移酶样蛋白14在恶性肿瘤中作用及机制的研究进展

RNA修饰在许多生物学功能中起重要作用。其中,N^(6)-甲基腺苷(m^(6)A)是最丰富的RNA修饰。m^(6)A在许多物种中高度保守,调节RNA代谢、细胞分化、细胞昼夜节律和细胞周期,并与肿瘤进展有关。甲基转移酶样蛋白(METTL)14是m^(6)A甲基转移酶复合物中的关键成分,主要作为RNA结合支架以提高METTL3的催化能力。目前,METTL14在各种恶性肿瘤中的分子机制尚未得到充分研究。因此,METTL14作为癌症诊断新生物标志物具有潜在临床应用前景。深入研究METTL14在恶性肿瘤肿瘤中的生物学功能,可为恶性肿瘤的靶向治疗以及改善患者预后提供新思路。

m6A甲基转移酶样3基因在泛癌中的表达及对肿瘤微环境的影响

目的分析m6A甲基转移酶样3(methyltransferase like 3,METTL3)基因在泛癌中的表达及对肿瘤微环境的影响。方法在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载多种癌症患者的基因测序结果及临床资料,分析METTL3基因在各类型肿瘤中的表达以及其与肿瘤微环境相关细胞浸润及预后的关系。结果METTL3基因在大多数恶性肿瘤中表达上调,导致肝细胞癌和前列腺癌患者无进展生存期缩短(P<0.05)。肝细胞癌和前列腺癌中,METTL3表达与多种免疫细胞浸润水平及抑制性免疫检查点基因表达水平相关(P<0.05)。结论METTL3基因表达增加导致肝细胞癌和前列腺癌患者的不良预后,可能通过促进免疫浸润及增加抑制性免疫检查点基因表达发挥作用。

m6A甲基转移酶METTL3通过AFF4/NF-κB/MYC信号网络影响膀胱癌的研究进展

膀胱癌(BCa)是泌尿外科最常见的恶性肿瘤之一,发病机制目前尚未明确。甲基转移酶3(METTL3)是N6-甲基腺苷甲基转移酶复合物(m6A MTC)的核心部分,介导mRNA的甲基化修饰,影响mRNA的稳定性和翻译过程。研究表明METTL3可以通过AFF4/NF-κB/MYC信号网络对BCa细胞分裂增殖起到促进作用。该信号网络涉及多种信号分子,METTL3可分别影响AFF4、NF-κB和MYC的表达水平影响其下游通路,促进肿瘤发展。

甲基转移酶样3抑制剂STM2457通过调节线粒体功能改善代谢相关脂肪性肝病

目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)特异性抑制剂STM2457在代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)中的作用及机制。方法动物水平:15只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为基础组(CD组,n=5,10%低脂饲料喂养16周)、高脂组(HFD组,n=5,60%高脂饲料喂养16周,建模MAFLD)、STM2457组(STM组,n=5,60%高脂饲料建模小鼠MAFLD后,给予STM245750 mg/kg腹腔注射2周)。斑点杂交实验(Dot-blot)检测小鼠肝组织m6A修饰水平,检测各组肝组织匀浆甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量,HE染色观察小鼠肝组织形态,IPGTT和IPITT检验小鼠胰岛素抵抗程度,代谢笼实验检测代谢方式的改变,透射电镜(TEM)检测线粒体的形态。细胞生物学水平:油酸钠/棕榈酸钠作用48 h诱导建立人肝癌细胞株HepG2脂肪变性模型(FFA)。STM2457组在诱导脂肪变性的同时给予STM2457(1μmol/L)作用48 h,通过线粒体膜电位荧光探针(JC-1)检测线粒体功能。结果经高脂饮食诱导建立的MAFLD模型小鼠,其肝组织中m6A修饰水平升高,METT3的mRNA表达上调,与CD组比较,HFD组METT3的mRNA表达上调1.557±0.074倍(P<0.05),而在STM2457作用下,小鼠体质量显著下降且肝脏脂质沉积减少,肝组织m6A修饰水平下降,葡萄糖耐量和胰岛素敏感性升高,肝组织匀浆TG含量减少,(P<0.05),血清ALT、AST含量降低(P<0.05),。HFD组肝细胞线粒体肿胀明显,线粒体膜电位下降,STM2457作用后线粒体形态恢复正常,膜电位上升(P<0.05)。结论METTL3抑制剂STM2457能够通过减轻高脂饮食诱导的线粒体损伤改善MAFLD。

甲基转移酶样蛋白3在结直肠癌化疗耐药中的作用研究进展

目的:结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,提高结直肠癌疗效是重要的临床问题。近年来,表观遗传修饰相关机制在肿瘤进展及耐药中的作用日渐受到关注,靶向表观遗传改变可能逆转化疗耐药。甲基转移酶样蛋白3(METTL3)作为表观遗传修饰最常见的RNA甲基化转移酶,在结直肠癌化疗耐药中的作用值得进一步探究。该文将有关METTL3表达与化疗耐药现状及DNA修复损伤、细胞自噬、代谢紊乱等经典机制的研究进展作一综述。

日本脑炎病毒感染宿主后m^(6)A甲基化相关蛋白的表达和定位研究

为了研究日本脑炎病毒(JEV)感染宿主后在体内外对m^(6)A甲基化相关蛋白表达和定位的影响,本试验建立了JEV感染的C57BL/6小鼠模型及乳仓鼠肾细胞(BHK-21)模型,检测JEV感染后小鼠的脑、肾及BHK-21细胞的m^(6)A修饰水平,通过蛋白免疫印迹检测小鼠脑、肾以及JEV感染不同时间点的细胞中m^(6)A相关蛋白的表达水平,共聚焦显微镜观察JEV感染细胞的m^(6)A相关蛋白的亚细胞定位变化。结果显示:与对照组相比,感染JEV后m^(6)A修饰水平极显著上升(P<0.01);感染JEV的小鼠脑、肾中m^(6)A甲基转移酶样蛋白(METTL)3表达量大幅上升,细胞中METTL3表达量随感染时间推移而逐渐增加;METTL3和METTL14的亚细胞定位发生改变,大量由细胞核转移至细胞质。综上所述,JEV可使体内外的m^(6)A水平和METTL3的表达水平上升,细胞中METTL3和METTL14的亚细胞定位改变,表明JEV的感染与m^(6)A修饰具有较强的关联性,为进一步研究m^(6)A及其相关蛋白调控JEV复制的机制奠定了基础。

m6A修饰调控酶及其结合蛋白在细胞自噬中作用的研究进展

自噬可消除细胞内错误折叠或聚集的蛋白质、清除受损的细胞器以及降解不必要的细胞成分,对于维持细胞功能和新陈代谢十分重要[1]。自噬水平的异常在癌症、心血管、呼吸系统和神经退行性病变等疾病的发病机制中起到重要作用[2]。在过去几十年,对自噬的研究主要集中在自噬的调控机制及自噬基因的生物学功能[3-4]。

m6a甲基转移酶METTL3调控KAI1/CD82表达介导垂体神经内分泌肿瘤细胞生物学行为的机制研究

目的研究m6a甲基转移酶METTL3调控KAI1/CD82表达介导垂体神经内分泌肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的机制。方法通过实时荧光聚合酶链反应(qPCR)和蛋白免疫印迹测定大鼠垂体细胞、大鼠垂体神经内分泌肿瘤细胞系GH3和MMQ中的METTL3与KAI1/CD82表达水平。体外培养GH3细胞,将其随机分为对照组、METTL3过表达质粒组、METTL3空质粒组、METTL3 siRNA组、METTL3 siRNA阴性对照组,经分组转染后,通过qPCR和蛋白免疫印迹检测各组细胞METTL3与KAI1/CD82表达;通过CCK-8实验检测各组细胞活力;通过细胞划痕、Transwell侵袭实验检测各组细胞迁移侵袭情况;通过甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)实验检测各组细胞KAI1/CD82 m6A甲基化修饰情况。结果相比大鼠垂体细胞,大鼠垂体神经内分泌肿瘤细胞系GH3及MMQ中的METTL3蛋白及mRNA表达水平明显升高,KAI1/CD82蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。与对照组相比,METTL3空质粒组、METTL3 siRNA阴性对照组细胞各指标差异无统计学意义;与对照组、METTL3空质粒组相比,METTL3过表达质粒组细胞活力、迁移距离、侵袭细胞数、METTL3蛋白及mRNA表达水平、KAI1/CD82 m6A甲基化水平升高(P<0.05),KAI1/CD82蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05);与对照组、METTL3 siRNA阴性对照组相比,METTL3 siRNA组细胞活力、迁移距离、侵袭细胞数、METTL3蛋白及mRNA表达水平、KAI1/CD82 m6A甲基化水平降低(P<0.05),KAI1/CD82蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05)。结论下调METTL3表达可降低KAI1/CD82 m6A甲基化水平,促进KAI1/CD82mRNA转录表达,抑制垂体神经内分泌肿瘤细胞增殖、侵袭及迁移。

甲基转移酶样3通过调控MYC的N6-甲基腺苷水平促进急性髓系白血病细胞的增殖

目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)在急性髓系白血病(AML)细胞增殖中的功能和调控机制。方法通过基因表达汇编数据集检索METTL3在AML患者中的表达情况及METTL3在成体造血干/祖细胞髓系分化中的表达情况;在MOLM13细胞中利用慢病毒转导的方式抑制METTL3的内源表达,检测细胞增殖情况,总mRNA的N6-甲基腺苷(m6A)水平,采用基因特异的m6A RNA免疫共沉淀检测MYC mRNA上的m6A水平,并进一步检测MYC mRNA和蛋白的表达水平。结果与正常对照相比,METTL3在AML-M5型患者中有上调趋势;幼稚细胞中的METTL3相对表达量显著高于成熟的单核细胞(t=4.504,P=0.0098)。抑制内源METTL3的表达后,MOLM13细胞增殖减缓(P<0.001),MOLM13细胞总mRNA的m6A水平降低(t=3.606,P=0.042),MYC上特异的m6A水平显著降低(P<0.01),MYC的表达显著减少(P<0.01)。结论 METTL3在MOLM13细胞中可通过增加MYC的表达水平而发挥原癌基因的功能。

脂多糖诱导人和小鼠肠上皮细胞炎症并上调细胞甲基转移酶样蛋白3(METTL3)和METTL14表达

目的探讨N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A)修饰在HIEC-6人肠上皮细胞与MODE-K小鼠肠上皮细胞炎性状态下的变化。方法采用不同剂量的脂多糖(LPS)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞10 h或相同剂量LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α分别刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞(0、3、6、12、24)h。实时定量PCR检测细胞炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达;实时定量PCR和Western blot法分别检测m^(6)A修饰相关分子甲基转移酶样蛋白3(METTL3)、METTL14、METTL16、Wilms瘤1相关蛋白(WTAP)、烷基化修复同源蛋白5(ALKBH5)、脂肪量和肥胖相关蛋白(FTO)、YTH结构域蛋白1(YTHDC1)、YTHDC2的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,HIEC-6细胞与MODE-K细胞在LPS诱导的时间依赖与剂量依赖模型中IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平增高,并同步上调METTL3和METTL14 mRNA与蛋白水平。结论LPS可以诱导肠上皮细胞出现炎症反应,并上调肠上皮细胞中METTL3和METTL14的表达。

甲基转移酶样蛋白3(METTL3)通过NF-κB信号通路促进小鼠巨噬细胞活化和炎症反应

目的研究参与腺嘌呤第6位氮原子上的甲基化修饰(m^6A)的甲基转移酶样蛋白3(METTL3)在巨噬细胞活化中的作用。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,并以1μg/mL脂多糖(LPS)刺激0、2、4、6 h,检测METTL3的表达情况。设计合成的针对小鼠METTL3的小干扰RNA(siRNA)敲低METTL3的表达,通过实时定量PCR和Western blot法检测干扰效率;利用siRNA下调METTL3表达48 h后,以1μg/mL LPS刺激RAW264.7细胞,采用实时定量PCR检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-12、IL-1β的mRNA水平,Western blot法检测核因子κB(NF-κB)信号通路中p65和磷酸化p65蛋白水平。结果LPS刺激后RAW264.7细胞METTL3的表达上调,设计合成的METTL3 siRNA能有效敲低METTL3的水平。敲低METTL3后,巨噬细胞LPS刺激诱导表达的IL-6、IL-12、TNF-α和IL-1β显著降低,同时伴有NF-κВ信号通路p65蛋白的磷酸化水平降低。结论METTL3通过激活NF-κВ信号通路促进LPS刺激的巨噬细胞活化和炎症反应。

甲基化转移酶样蛋白3在急性心肌梗死患者外周血中的表达及对缺氧缺血所致心肌细胞损伤的调节作用

目的探讨甲基化转移酶样蛋白3(METTL3)在急性心肌梗死患者外周血中的表达及对急性缺氧/缺血(HI)所致心肌细胞损伤的调节作用。方法(1)收集60例急性心肌梗死患者和60例健康者的血浆和血清,采用酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量聚合酶链反应法分别检测血清和血浆中METTL3的表达水平。(2)取人心肌细胞AC16,分为对照组、HI-2h组、HI-4h组、siMETTL3+HI-2h组、siNC+HI-2h组;对照组不进行任何处理,HI-2h组、HI-4h组使用1%O 2和1%胎牛血清培养基诱导HI心肌细胞模型,siMETTL3+HI-2h组、siNC+HI-2h组分别转染有效沉默METTL3的小干扰RNA序列、阴性对照小干扰RNA序列后建立HI心肌细胞模型。检测各组AC16细胞的增殖率和凋亡率,METTL3、激活型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved-Caspase3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)。将溶酶体抑制剂巴弗洛霉素A1添加至培养基后,按照上述方法进行分组及干预,检测微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)、人死骨片1(SQSTM1)的蛋白表达水平。结果(1)心肌梗死患者血浆METTL3 mRNA相对表达水平以及血清中METTL3表达水平均高于健康者(P<0.05)。(2)与对照组比较,HI-2h组、HI-4h组AC16细胞的增殖率降低,细胞凋亡率升高,METTL3蛋白、cleaved-Caspase3蛋白、Bax/Bcl-2比值、SQSTM1蛋白的表达上调,而LC3B-Ⅱ的蛋白表达下调(均P<0.05)。与HI-2h组和siNC+HI-2h组比较,siMETTL3+HI-2h组的细胞增殖率升高,细胞凋亡率降低,METTL3、cleaved-Caspase3、Bax/Bcl-2比值、SQSTM1的蛋白表达下调,LC3B-Ⅱ的蛋白表达上调(均P<0.05)。结论METTL3在心肌梗死患者体内和HI诱导的急性心肌细胞损伤模型中的表达均升高,沉默METTL3可以抑制HI心肌细胞的凋亡并增加自噬通量,从而促进细胞增殖的恢复。

核糖体18S rRNA m^(6)A甲基转移酶METTL5的研究进展

N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)即在腺苷酸的第6位氮原子处发生甲基化,是真核生物核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)普遍的表观遗传修饰之一,存在于多种类型的RNA分子上,参与生物发生、稳定性调节、半衰期控制和前体信使RNA(messenger RNA,mRNA)剪接、输出及翻译等诸多关键细胞过程。m^(6)A甲基化修饰是一种动态可逆的过程,涉及到甲基化、去甲基化和甲基化修饰位点的识别,分别由m^(6)A甲基转移酶、m^(6)A去甲基化酶和m^(6)A甲基化阅读蛋白介导[1-3]。