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多重荧光定量PCR对mAchR1表达相对定量分析 被引量:1
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作者 胡昕 吕建新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1864-1866,共3页
目的:建立多重荧光通道定量PCR方法研究乙酰胆碱Ach对毒蕈碱受体mAchRsⅠ型基因表达的影响。方法:分别用FAM和VIC不同荧光素标记的MGB-TaqMan探针同时对靶基因和看家基因的转录拷贝数进行多色多通道测定。结果:多重荧光通道定量PCR与单... 目的:建立多重荧光通道定量PCR方法研究乙酰胆碱Ach对毒蕈碱受体mAchRsⅠ型基因表达的影响。方法:分别用FAM和VIC不同荧光素标记的MGB-TaqMan探针同时对靶基因和看家基因的转录拷贝数进行多色多通道测定。结果:多重荧光通道定量PCR与单通道荧光定量PCR比较没有差异。Ach作用SK-N-SH细胞24h和72h后mAchR1表达分别上调1.38倍和下降6.71倍(P<0.01)。结论:MGB-TaqMan探针技术在多重荧光RT-qPCR技术中具有高灵敏度和高重复性。Ach对mAchR1 mRNA表达水平有调节作用,并有时间效应。 展开更多
关键词 多重荧光 基因 machr1 基因表达
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乙酰胆碱及其拮抗剂对人SK-N-SH细胞增殖及mAchR1表达的影响 被引量:1
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作者 胡昕 吕建新 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期287-296,共10页
用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(at-ropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型Ⅰ... 用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(at-ropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型Ⅰ型(mAchR1)和c-fos的表达差异。结果表明,1mmol/LAch对SK-N-SH细胞有明显促增殖作用,而1mmol/LAtro阻滞细胞从S期向G_2/M期移行;1mmol/LAch与1mmol/LAtro均反馈调节mAchR1的蛋白水平,但mAchR1mRNA的表达不受影响;1mmol/LAch显著上调c-fosmRNA和Fos蛋白的表达,但这种作用可被Atro逆转。提示胆碱类受体参与配基对肿瘤细胞的促增殖作用。 展开更多
关键词 乙酰胆碱 拮抗剂 人SK-N-SH 细胞增殖 machr1表达 胆碱受体途径 中枢神经 信息传递物质
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乙酰胆碱及其拮抗剂对人SK-N-SH细胞增殖及mAchR1表达的影响
3
作者 胡昕 吕建新 《检验医学教育》 2005年第2期33-41,共9页
用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(atropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型型(m... 用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(atropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型型(mAchR1)和c-fos的表达差异。结果表明,1mmol/L Ach对SK-N-SH细胞有明显促增殖作用,而1mmol/L Atro阻滞细胞从S期向G2/M期移行;1mmol/L Ach与1mmol/L Atro均反馈调节mAchR1的蛋白水平,但mAchR1mRNA的表达不受影响;1mmol/L Ach显著上调c-fos mRNA和Fos蛋白的表达,但这种作用可被Atro逆转。提示胆碱类受体参与配基对肿瘤细胞的促增殖作用。 展开更多
关键词 乙酰胆碱 SK—N—SH machr1 增殖 SK-N-SH细胞 细胞增殖活性 拮抗剂 毒蕈碱受体亚型 mol/L 间接免疫荧光技术
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拟黑多刺蚁mAchR基因发育表达的荧光实时定量RT-PCR检测 被引量:2
4
作者 吕淑敏 姜鸣 +1 位作者 卜翠萍 奚耕思 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第12期161-166,共6页
【目的】研究毒蕈碱型乙酰胆碱受体(Muscarinic cholinergic receptor,mAchR)在拟黑多刺蚁个体发育中的表达情况,探讨其是否参与拟黑多刺蚁的个体发育行为。【方法】采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR方法,检测拟黑多刺蚁卵、幼虫、蛹和成... 【目的】研究毒蕈碱型乙酰胆碱受体(Muscarinic cholinergic receptor,mAchR)在拟黑多刺蚁个体发育中的表达情况,探讨其是否参与拟黑多刺蚁的个体发育行为。【方法】采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR方法,检测拟黑多刺蚁卵、幼虫、蛹和成虫个体发育阶段mAchR基因mRNA的相对表达量。【结果】mAchR基因在拟黑多刺蚁整个发育过程及各个品级成虫中均有表达。在卵期mAchR mRNA的表达量较幼虫期和蛹期高,而成虫期的表达量最高,可达卵期的3倍以上。3个成虫品级之间,工蚁的表达量最高,雄蚁和雌蚁的表达量在统计学上差异不显著。【结论】mAchR基因参与了拟黑多刺蚁的发育行为,而其主要功能可能是在调节成虫更为复杂的行为中起作用。 展开更多
关键词 拟黑多刺蚁 毒蕈碱型乙酰胆碱受体 实时定量RT-PCR 发育表达
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激动M3-mAchR对乌头碱诱发大鼠心律失常的保护机制的研究 被引量:1
5
作者 乔尚 尚佳 +1 位作者 董巧玲 郭曙军 《临床和实验医学杂志》 2017年第24期2408-2411,共4页
目的通过乌头碱诱导的大鼠心律失常模型,研究匹罗卡品对心律失常的可能保护机制。方法 32只Wistar大鼠,雌雄不限,随机分成4组:模型组、4-二甲基氨基吡啶(4-DAMP)组、匹罗卡品组、匹罗卡品+4-DAMP组。4-DAMP组和匹罗卡品组大鼠,在股静脉... 目的通过乌头碱诱导的大鼠心律失常模型,研究匹罗卡品对心律失常的可能保护机制。方法 32只Wistar大鼠,雌雄不限,随机分成4组:模型组、4-二甲基氨基吡啶(4-DAMP)组、匹罗卡品组、匹罗卡品+4-DAMP组。4-DAMP组和匹罗卡品组大鼠,在股静脉静注乌头碱之前,分别提前5 min静注4-DAMP(0.12μg/kg)和匹罗卡品(0.2 mg/kg)。匹罗卡品+4-DAMP组大鼠,先给与M3-mAChR拮抗剂4-DAMP,5 min之后再给与匹罗卡品,再5min之后,用灌流泵经大鼠股静脉灌输乌头碱(0.06μg/min)诱发心律失常。观察每组大鼠的心律失常的严重程度,直至实验大鼠死亡。比较四组大鼠心律失常发生的起始时间、心肌室速和室颤发生时程、Mest评分和存活时间。采用激光共聚焦显微镜观察分离的心肌细胞内钙浓度变化。结果与模型组比较,匹罗卡品显著延迟大鼠心律失常发生的起始时间(P<0.001),减少大鼠心肌室速发生时程(P<0.001)和室颤的发生时程(P<0.001),降低心律失常的严重性和Mest评分(P<0.001),增加大鼠的存活时间(P<0.001)。预先给与匹罗卡品能够显著降低乌头碱诱导的心肌细胞发生的钙浓度的增加(P<0.05),与匹罗卡品组比较M3-mAchR选择性拮抗剂4-DAMP能部分阻断匹罗卡品对心律失常的保护作用(P<0.001),但4-DAMP本身对乌头碱诱导的心律失常并没有保护作用(P>0.05)。结论匹罗卡品对乌头碱诱导的大鼠心律失常具有保护作用,这种作用可能是通过激活M3-mAChR产生的,其机制可能与Ca^(2+)有关。 展开更多
关键词 大鼠 心律失常 匹罗卡品 M3受体 M3受体拮抗剂 心肌保护
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血水草生物碱对钉螺足跖平滑肌mAChR的作用 被引量:3
6
作者 廖鑫鑫 黄胜 +4 位作者 杨华中 黄琼瑶 彭飞 刘年猛 孙慧 《湖南师范大学学报(医学版)》 2010年第1期11-13,21,共4页
目的:研究血水草生物碱(Eomecon chionantha Hance alkaloids,ECA)对钉螺足跖平滑肌收缩活动的影响及与毒蕈碱型乙酰胆碱受体(muscarinic acetylcholine receptors,mAChR)的关系,探讨其减低钉螺附壁上爬、增强灭螺效果的作用机制。方法... 目的:研究血水草生物碱(Eomecon chionantha Hance alkaloids,ECA)对钉螺足跖平滑肌收缩活动的影响及与毒蕈碱型乙酰胆碱受体(muscarinic acetylcholine receptors,mAChR)的关系,探讨其减低钉螺附壁上爬、增强灭螺效果的作用机制。方法:采用离体钉螺足跖平滑肌实验方法,观察ECA对钉螺足跖平滑肌收缩活动的影响。结果:5.0、10.0、20.0 mg/L ECA均可增加钉螺足跖平滑肌张力、减小收缩幅度、加快收缩频率;2×10-6mol/L阿托品可明显降低由ECA所至的钉螺足跖平滑肌的张力,而对其所至的收缩幅度及收缩频率影响不明显;6×10-6mol/L阿托品则可显著地拮抗ECA引起的钉螺足跖平滑肌兴奋作用,使钉螺足跖平滑肌的张力及收缩幅度均明显降低,但对其所至收缩频率影响不明显。结论:ECA能兴奋钉螺足跖平滑肌;ECA引起的钉螺足跖平滑肌兴奋作用部分由mAChR介导,其作用机制可能与激活受体依赖性钙通道(receptor operated calcium channel,ROCC)有关。 展开更多
关键词 血水草生物碱 钉螺 平滑肌 乙酰胆碱受体 毒蕈碱型受体
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幼年爪蟾视顶盖神经元微兴奋性突触后电流的一些特性 被引量:1
7
作者 王红 蔡浩然 《中国神经科学杂志》 CSCD 2002年第4期708-714,共7页
以微兴奋性突触后电流 (miniatureexcitatorypostsynapticcurrents,mEPSCs)为指标 ,采用盲法膜片电压钳全细胞记录技术 ,研究敏感期内爪蟾视顶盖神经元突触前受体调制突触后mEPSCs的作用。结果发现 ,mEP SCs可以被NMDA受体特异性阻断剂... 以微兴奋性突触后电流 (miniatureexcitatorypostsynapticcurrents,mEPSCs)为指标 ,采用盲法膜片电压钳全细胞记录技术 ,研究敏感期内爪蟾视顶盖神经元突触前受体调制突触后mEPSCs的作用。结果发现 ,mEP SCs可以被NMDA受体特异性阻断剂APV和 (或 )AMPA/KA受体特异性阻断剂CNQX所阻断 ,NMDA受体激动剂NMDA可以诱发内向突触后电流。与成年神经元相比 ,未成年动物神经元的mEPSCs的下降相时间较长 ,mEPSCs的NMDA成分较多 ,而AMPA成分较少。尼古丁乙酰胆碱受体激动剂 (carbachol,nicotine和cytisine)可使mEPSCs的频率增加 ,且carbachol使频率增加作用需要Ca2 +介导 ;而乙酰胆碱水解产物choline亦有此作用 ;尼古丁乙酰胆碱受体的竞争性拮抗剂DH β E能够拮抗carbachol诱发的mEPSCs频率增加作用 ;α3β4亚型尼古丁乙酰胆碱受体拮抗剂mecamyllamine不能拮抗carbachol诱发的mEPSCs频率增加作用 ,但在低浓度下对含有α7亚单元尼古丁乙酰胆碱受体起特异拮抗作用的MLA却有这种拮抗作用 ;同时我们还观察到 ,无Ca2 +灌流可以导致巨型PSCs的出现 ,无镁液可以使mEPSCs的下降相延长。结果表明 ,mEPSCs是由NMDA受体和AMPA/KA受体共同介导的 ,尼古丁乙酰胆碱受体以Ca2 +依赖的方式参与了mEPSCs的突触前调制 。 展开更多
关键词 视顶盖 脑片 敏感期 NMDAR 微兴奋性突触后电流 mEPSCs 膜片钳 N型乙酰胆碱受体 machr
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虎纹捕鸟蛛毒素-I(HWTX-I)对豚鼠回肠的作用机制研究 被引量:14
8
作者 陈湘定 彭宽 梁宋平 《生命科学研究》 CAS CSCD 1998年第4期273-277,共5页
虎纹捕鸟蛛毒素HWTX-I(5mg/L)对电刺激豚鼠回肠引起的一过性收缩有非常明显的抑制作用.HWTX-I的抑制作用发生后,乙酰胆碱(ACh)诱发的回肠收缩幅度与使用HWTX-I前无明显差异.在使用酚妥拉明后,HWT... 虎纹捕鸟蛛毒素HWTX-I(5mg/L)对电刺激豚鼠回肠引起的一过性收缩有非常明显的抑制作用.HWTX-I的抑制作用发生后,乙酰胆碱(ACh)诱发的回肠收缩幅度与使用HWTX-I前无明显差异.在使用酚妥拉明后,HWTX-I仍能抑制豚鼠回肠的一过性收缩. 展开更多
关键词 虎纹捕鸟蛛毒素 递质释放 神经毒素 回肠
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三七总皂甙对吗啡戒断大鼠大脑皮质M乙酰胆碱受体mRNA及蛋白表达的影响 被引量:3
9
作者 马春玲 丛斌 +5 位作者 余磊 闫玉仙 牛增强 文迪 倪志宇 李淑瑾 《中国药物依赖性杂志》 CAS CSCD 2010年第1期20-24,共5页
目的:研究三七总皂甙(PNS)对吗啡戒断大鼠大脑皮质m2,m5乙酰胆碱受体(AChR)mRNA及蛋白表达的影响,探讨PNS抑制吗啡戒断症状的作用机制。方法:以剂量递增法建立大鼠吗啡依赖模型(MOR组),以腹腔注射(ip)纳洛酮建立催促戒断模型(NAL组),大... 目的:研究三七总皂甙(PNS)对吗啡戒断大鼠大脑皮质m2,m5乙酰胆碱受体(AChR)mRNA及蛋白表达的影响,探讨PNS抑制吗啡戒断症状的作用机制。方法:以剂量递增法建立大鼠吗啡依赖模型(MOR组),以腹腔注射(ip)纳洛酮建立催促戒断模型(NAL组),大鼠在给予吗啡的同时,采用3种不同剂量PNS(100、200、400mg.kg-1)灌胃(ig)。采用RT-PCR和Western-blot方法分别观察PNS对吗啡依赖及戒断大鼠皮质m2,m5AChR mRNA及蛋白表达的影响。结果:(1)慢性吗啡作用使皮质m2,m5AChR mRNA及m2AChR蛋白表达明显增加(P<0.01);(2)纳洛酮催促戒断使m2,m5AChR mRNA及蛋白表达进一步升高(P<0.01);(3)PNS可以剂量依赖性地抑制纳洛酮催促戒断所引起的AChR mRNA及蛋白表达的增强。结论:PNS可通过抑制m2,m5AChR mRNA及蛋白的表达缓解吗啡戒断症状。 展开更多
关键词 三七总皂甙 吗啡戒断综合征 大脑皮质 M乙酰胆碱受体
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Muscarinic acetylcholine receptor M3 in proliferation and perineural invasion of cholangiocarcinoma cells 被引量:4
10
作者 Yu-Jie Feng,Bing-Yuan Zhang,Ru-Yong Yao and Yun LuSecond Department of General Surgery and Central Laboratory of Molecular Biology,Affiliated Medical College Hospital,Qingdao University,Qingdao 266003,China 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2012年第4期418-423,共6页
BACKGROUND:Cholangiocarcinoma,a type of malignant tumor,originates from epithelial cells of the bile duct.Perineural invasion is common path for cholangiocarcinoma metastasis,and it is highly correlated with postopera... BACKGROUND:Cholangiocarcinoma,a type of malignant tumor,originates from epithelial cells of the bile duct.Perineural invasion is common path for cholangiocarcinoma metastasis,and it is highly correlated with postoperative recurrence and poor prognosis.It has been reported that muscarinic acetylcholine receptor M3(mAChR M3) is widely expressed in digestive tract cancer,and may play an important role in the proliferation,differentiation,transformation and carcinogenesis of tumors.This study was to explore the effect of mAChR M3 on the growth of cholangiocarcinoma cells in vitro and provide a new approach to the pathogenesis and treatment of cholangiocarcinoma.METHODS:Streptavidin-biotin complex immunohistochemistry was carried out to assess the expression of mAChR M3 in surgical specimens of cholangiocarcinomas(40 cases) and normal bile duct tissues(9),as well as to investigate nerve infiltration.The cholangiocarcinoma cells were treated with different concentrations of selective M-receptor agonist pilocarpine and M-receptor blocker atropine sulfate to induce changes in cell proliferation.The experimental data were analyzed by the Chi-square test.RESULTS:The strongly-positive expression rate of mAChR M3 was much higher in poorly-differentiated(69%,9/13) than in well-and moderately-differentiated cholangiocarcinomas(30%,8/27)(χ 2 =5.631,P<0.05).The strongly-positive mAChR M3 expression rate in hilar cholangiocarcinoma(50%,14/28) was higher than that in cholangiocarcinomas from the middle and lower common bile duct(25%,3/12)(χ 2 =2.148,P<0.05).Cholangiocarcinomas with distant metastasis had a stronglypositive expression rate(75%,9/12),which was much higher than those without distant metastasis(29%,8/28)(χ 2 =7.410,P<0.01).The absorbance value in the pilocarpine+atropine group was significantly higher than the corresponding value in the pilocarpine group.CONCLUSIONS:The expression of mAChR M3 is influenced by the extent of differentiation,distant metastasis and the site of cholangiocarcinoma.It also plays a key role in the proliferation and metastasis of cholangiocarcinoma. 展开更多
关键词 CHOLANGIOCARCINOMA machr M3 IMMUNOHISTOCHEMISTRY perineural invasion PROLIFERATION
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毒蕈碱样乙酰胆碱受体及其拮抗剂在近视发生发展中的作用 被引量:2
11
作者 张立华 周翔天 瞿佳 《眼视光学杂志》 2004年第2期129-131,共3页
毒蕈碱样受体 (M受体 )是G蛋白偶联受体 ,调节许多重要生理活动。M受体信号的改变 ,在近视发生时的眼球改变中起着重要作用。M受体拮抗剂可以延缓近视进展 ,其中最有效的是阿托品 ,其次是哌仑西平和himbacine,但目前其阻断近视的机制以... 毒蕈碱样受体 (M受体 )是G蛋白偶联受体 ,调节许多重要生理活动。M受体信号的改变 ,在近视发生时的眼球改变中起着重要作用。M受体拮抗剂可以延缓近视进展 ,其中最有效的是阿托品 ,其次是哌仑西平和himbacine,但目前其阻断近视的机制以及作用部位仍未明确。进一步研究M受体及其拮抗剂在近视发生、发展中的作用 ,对深入了解近视发病机制以及有效地防治近视具有重要的意义。 展开更多
关键词 M受体 亚型 近视 巩膜
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“益气调血、扶本培元”药线灸对MID大鼠海马M受体、CREB含量的影响及其相关性
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作者 罗本华 曾启峰 +2 位作者 吴小玲 李玉秋 王燕 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第7期1473-1477,共5页
目的观察药线灸法对多发梗死性痴呆模型(MID)大鼠海马M受体及环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)含量的影响,分析二者的相关性。方法40只雄性MID大鼠随机分为模型组、药线灸组、药物组和药线非穴组各10只,并取10只正常大鼠为正常组;药线... 目的观察药线灸法对多发梗死性痴呆模型(MID)大鼠海马M受体及环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)含量的影响,分析二者的相关性。方法40只雄性MID大鼠随机分为模型组、药线灸组、药物组和药线非穴组各10只,并取10只正常大鼠为正常组;药线灸组给予“益气调血、扶本培元”药线点灸治疗,药物组给予多奈哌齐灌胃治疗,药线非穴组给予药线点灸两肋下非穴点,模型组与对照组未给予特殊处理,经4 w干预后处死大鼠,分离海马,匀浆、分离上清,检测总M受体、M1、M2受体及CREB含量;用线性相关分析二者关联性,并求回归方程。结果与对照组比较,MID大鼠总M受体、M1受体、CREB含量均显著降低,M2受体显著升高;药线灸组和药物组均能显著升高MID大鼠总M受体、M1受体、CREB的含量,降低M2受体含量;各组总M受体、M1受体与CREB含量呈正相关性,而M2受体与CREB呈负相关性。结论药线灸法可能经由调控ACh-M受体-CREB信息信号通路,从而改善VD认知功能障碍的作用。 展开更多
关键词 “益气调血、扶本培元”药线灸 多发梗死性痴呆模型(MID) M受体 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB) 盐酸多奈哌齐
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Anti-M<sub>3</sub>Muscarinic Acetylcholine Receptor Antibodies in Systemic Lupus Erythematosus
13
作者 Silvia Reina Cecilia Pisoni +3 位作者 Alicia Eimon Carolina Carrizo Roberto Arana Enri Borda 《Pharmacology & Pharmacy》 2015年第1期25-33,共9页
Background: Evidences have shown that anti-M3 muscarinic acetylcholine receptor IgG (anti-M3 mAChR IgG) are clinically useful autoantibody that exert a cholinergic pharmacologic effect binding and interacting with M3 ... Background: Evidences have shown that anti-M3 muscarinic acetylcholine receptor IgG (anti-M3 mAChR IgG) are clinically useful autoantibody that exert a cholinergic pharmacologic effect binding and interacting with M3 mAChR at the level of exocrine gland (salivary and ocular). Aims: The aim of this study was to determine the associations between serum level of anti-M3 mAChR IgG in patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and other autoantibodies, serum prostaglandin E2 (PGE2), and clinical manifestations. Methods: Serum autoantibodies against M3 mAChR synthetic peptide were measured by enzyme-linked immuno absorbent assay (ELISA) using, as an antigen, a 25-mer peptide K-R-T-V-P-D-N-Q-C-F-I-Q-F-L-S-N-P-A-V-T-F-G-T-A-I corresponding to the amino acid sequence of the second extracellular loop of the human M3 mAChR. Serum levels of antinuclear antibodies (ANA), anti-Smith (Sm) antibodies, anti-phospholipid (APL) antibodies, and PGE2 were determined by ELISA in patients with SLE. Results: We found significantly enhanced titers of anti-M3 mAChR IgG in sera from SLE patients compared with healthy individuals (control). In addition, serum levels of PGE2 were significantly higher in SLE patients than in control patients and were significantly higher in active than in non-active SLE. No correlation was found with other autoantibodies present in SLE. By contrast, a positive correlation was found between anti-M3 mAChR IgG and PGE2 serum levels in SLE. Conclusions: As anti-M3 mAChR antibodies present in the sera of SLE patients may be another factor in the pathogenesis of this disease, and the increment of PGE2 in the sera of SLE has a modulatory action on the inflammatory process, suggesting that the presence of these autoantibodies against M3 mAChR may contribute to sustained immune deregulation and the strong inflammatory component observed in SLE. 展开更多
关键词 Anti-M3 machr ANTIBODIES Systemic Lupus ERYTHEMATOSUS PROSTAGLANDIN E2
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Role of M<sub>3</sub>Muscarinic Acethylcholine Receptor Antibodies as a New Marker in Primary Sjögren Syndrome
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作者 Silvia Reina Cecilia Pisoni +2 位作者 Roberto Arana Sabrina Ganzinelli Enri Borda 《Pharmacology & Pharmacy》 2017年第7期242-252,共11页
Aims: This paper investigates the presence of M3 muscarinic acetylcholine receptor autoantibody present in the serum of patients with primary Sj?gren syndrome (pSS). Main methods: We detected the levels of M3mAChR pep... Aims: This paper investigates the presence of M3 muscarinic acetylcholine receptor autoantibody present in the serum of patients with primary Sj?gren syndrome (pSS). Main methods: We detected the levels of M3mAChR peptide IgG, PGE2, IL-1β in serum of SS patients using the enzyme-linked immune sorbent assay (ELISA). To measure the quantity of nitrite/nitrate, we used Griess reagent system. Key findings: Titres of M3mAChR antibody in sera from SS patients are significantly enhanced compared to healthy subjects (control). The enhancement of these autoantibodies is accompanied by the increase of the levels of PGE2, IL-1β and nitrite/nitrate in serum. Under in vitro conditions, the synthetic human M3 peptide impaires the increment of M3mAChR antibody but not that of nati-Ro/SSA antibody. In positive anti-Ro/SSA antibody patients, the increment of M3mAChR peptide IgG and the measured pro-inflammatory substances is related. Significance: On this basis, anti M3mAChR peptide IgG can be said to act as a modulator of the immune system and to play a role in the host-chronic increment of proinflammatory substances in SS patients with positive Ro/SSA antibody. This association between the antibody and the pathogenesis of SS disease may result in useful predicting SS. 展开更多
关键词 Anti-Ro/SSA Antibody ANTI M3machr Peptide IgG IL-1β PGE2 NITRIC Oxide
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OXO-Ses对小鼠神经病理性疼痛的镇痛作用研究 被引量:1
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作者 张梅 王永杰 +2 位作者 左振兴 严敏 李相尧 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2016年第10期743-748,共6页
目的:研究毒蕈碱受体(muscarinic acetylcholine receptors,m ACh Rs)非选择性激动剂氧化震颤素半富马酸盐(oxotremorine sesquifumarate,OXO-Ses)对神经病理性疼痛的镇痛作用。方法:6~8周雄性C57BL/6小鼠,体重20~25 g。随机分为... 目的:研究毒蕈碱受体(muscarinic acetylcholine receptors,m ACh Rs)非选择性激动剂氧化震颤素半富马酸盐(oxotremorine sesquifumarate,OXO-Ses)对神经病理性疼痛的镇痛作用。方法:6~8周雄性C57BL/6小鼠,体重20~25 g。随机分为对照组、腓总神经(common peroneal nerve,CPN)损伤组。两组分别于造模前、后测定小鼠缩足反射阈值(paw withdraw thresholds,PWTs)和静态负重实验(static weight bearing,SWB)值。CPN后3天、14天腹腔注射OXO-Ses,浓度分别为0.01 mg/kg,0.05 mg/kg,0.10 mg/kg,在注射前、注射后0.5小时和2小时检测PWTs和SWB值。结果:与对照组相比,OXOSes能够显著提高实验组小鼠的PWTs(P〈0.05),并改变小鼠的后足重量分布状况(P〈0.05),呈现出剂量依赖性。结论:OXO-Ses非选择性的激活m ACh Rs可以减轻慢性痛小鼠的机械性触诱发痛,对神经损伤小鼠的慢性痛有一定的镇痛作用。 展开更多
关键词 氧化震颤素半富马酸盐 毒蕈碱受体 慢性痛 触诱发痛
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激活M_3受体减轻CoCl_2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤
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作者 彭源 赵延礼 +4 位作者 苏晓灵 沈国平 龙启福 秦海兰 王嵘 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第4期458-463,共6页
目的探讨卡巴胆碱(CCH,毒蕈碱受体亚型3特异性激动剂)激活毒蕈碱受体亚型3(M_3-mAChR)在氯化钴(CoCl_2)诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤中的作用及机制。方法正常大鼠心肌细胞系H9c2作为对照组,利用CoCl_2建立低氧损伤模型,选用M_3受... 目的探讨卡巴胆碱(CCH,毒蕈碱受体亚型3特异性激动剂)激活毒蕈碱受体亚型3(M_3-mAChR)在氯化钴(CoCl_2)诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤中的作用及机制。方法正常大鼠心肌细胞系H9c2作为对照组,利用CoCl_2建立低氧损伤模型,选用M_3受体特异性激动剂CCH及其特异性阻断剂4-二苯乙酰氧基-N-甲基-哌啶甲碘化物(4-DAMP)对低氧损伤组进行干预。噻唑蓝比色法(MTT)检验细胞增殖活力;流式细胞计量术检测细胞凋亡;Western blot检测M_3受体、HIF-1α、HO-1和caspase-3蛋白表达水平。结果低氧模型组细胞凋亡率显著增高(P<0.01),细胞增殖显著降低(P<0.01);HIF-1α、caspase-3和HO-1蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。用CCH干预后细胞凋亡率明显下降(P<0.01),细胞增殖活力明显增加(P<0.01);M_3受体、HIF-1α和HO-1蛋白表达水平显著上升(P<0.01);caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。应用4-DAMP干预后,由CCH介导的上述相关作用被抑制。结论 CCH激活M_3受体抑制CoCl_2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2的低氧损伤,机制可能与HIF-1α和HO-1的蛋白表达水平上调有关。 展开更多
关键词 毒蕈碱受体亚型3 低氧损伤 低氧诱导因子-1Α 血红素加氧酶-1
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毒蕈碱样乙酰胆碱受体m1~m5亚基在大鼠前庭终器组织中的表达 被引量:1
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作者 程华茂 孔维佳 姚琦 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2006年第22期1027-1029,共3页
目的:检测大鼠前庭终器中毒蕈碱样乙酰胆碱受体(mAChRs)m1~m5哑基的表达。方法:根据GeneBank公布的大鼠mAChR m1~m5亚基的mRNA序列设计特异性引物,再运用RTPCR方法检测大鼠前庭终器中编码mAChR m1~m5亚基的mRNA的表达,之后行PC... 目的:检测大鼠前庭终器中毒蕈碱样乙酰胆碱受体(mAChRs)m1~m5哑基的表达。方法:根据GeneBank公布的大鼠mAChR m1~m5亚基的mRNA序列设计特异性引物,再运用RTPCR方法检测大鼠前庭终器中编码mAChR m1~m5亚基的mRNA的表达,之后行PCR产物直接测序。以大鼠脑千组织提取RNA为阳性对照,以解剖液为阴性对照。结果:扩增出标志mAChR m1~m5亚基表达的PCR产物,并经测序证实与预计扩增的cDNA片段序列一致。结论:在大鼠前庭终器组织中有mAChR m1~m5亚基的表达,为乙酰胆碱作为大鼠外周前庭系统冲经递质提供了最直接的证据。 展开更多
关键词 前庭 功能试验 machr RT—PCR
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Localization of muscarinic acetylcholine receptor in plant guard cells 被引量:2
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作者 Fanxia Meng Xin Liu +1 位作者 Shuqiu Zhang Chenghou Lou 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2001年第7期586-588,618,共4页
Acetylcholine (ACh), as an important neuro-transmitter in animals, also plays a significant role in various kinds of physiological functions in plants. But relatively little is known about its receptors in plants. A g... Acetylcholine (ACh), as an important neuro-transmitter in animals, also plays a significant role in various kinds of physiological functions in plants. But relatively little is known about its receptors in plants. A green fluorescence BODIPY FL-labeled ABT, which is a high affinity ligand of muscarinic acetylcholine receptor (mAChR), was used to localize mAChR in plant guard cells. In Vicia faba L. and Pisum sativum L., mAChR was found both on the plasma membrane of guard cells. mAChR may also be distributed on guard cell chloroplast membrane of Vicia faba L. The evidence that mAChR localizes in the guard cells provides a new possible signal transduction pathway in ACh mediated stomata movement. 展开更多
关键词 GUARD cell machr FLUORESCENT LOCALIZATION VICIA faba L. PISUM sativum L.
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R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及其消旋体对M受体亚型的选择性研究(英文)
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作者 王丽韫 孙洪良 +3 位作者 牟男 仲伯华 刘克良 郑建全 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2009年第2期121-127,共7页
构建人源性5种乙酰胆碱M受体亚型(M1-M5)在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)上表达(CHO-hml-5R)稳定表达株对比分析R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及其消旋体对M受体亚型的选择性。在稳定培养2代CHO-hml-5R细胞上,利用RT-PCR方法证实目的基因的表达,... 构建人源性5种乙酰胆碱M受体亚型(M1-M5)在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)上表达(CHO-hml-5R)稳定表达株对比分析R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及其消旋体对M受体亚型的选择性。在稳定培养2代CHO-hml-5R细胞上,利用RT-PCR方法证实目的基因的表达,检测到5种乙酰胆碱M受体亚型的mRNA,应用放射性配体受体饱合试验检验分析各M受体亚型对氚标东莨宕碱([3H]-NMS)的亲合力及结合饱和度,试验表明[3H]-NMS对CHO-hml-5R的最大结合力(Bmax值)分别是M1:2110±165.1,M2:861±90.0,M3:1127±34.0,M4:1055±61.5,M5:1179±87.0pmol/mgpro,[3H]-NMS的Kd值M1-M5分别是0.97±0.22,1.16±0.14,0.99±0.06,0.56±0.08,1.12±0.06nM。结果表明5种M受体亚型(M1-M5)稳定住株成功表达,竞争抑制试验评价R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及其消旋体的亚型选择特性,试验表明R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯对M4受体亚型(pD2=7.48)具有较高的选择性,高于其他M受体亚型M1(pD2=6.20),M2(pD2=5.99),M3(pD2=5.99),M5(pD2=6.70),而去甲基苯环壬酯的消旋体对五种受体亚型未表现出明显的亚型选择型。R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及消旋体对五个受体亚型的Hill系数(nH)<1,均表现出对M受体的变构调节作用。该研究发现R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯对M4亚型具有较高的选择型拮抗作用,R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及其消旋体与CHO-hml-5R细胞的M亚型之间的作用存在变构调节机制。 展开更多
关键词 光学异构体 毒蕈碱乙酰胆碱受体 受体亚型选择性 放射性配体分析
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幼年小鼠初级听皮层第V层锥体神经元持续性放电与毒蕈碱受体亚型关系
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作者 贾慧娟 王欣 +3 位作者 付欣 杜小凤 郑维维 罗峰 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期123-131,共9页
激活胆碱能受体结合去极化电流诱导产生的持续性放电(persistent activity,PA)是神经元产生可塑性的一种特征表现。小鼠初级听皮层(primary auditory cortex,AI)神经元PA的产生与毒蕈碱受体(即M型受体)密切相关,但其涉及的毒蕈碱受体亚... 激活胆碱能受体结合去极化电流诱导产生的持续性放电(persistent activity,PA)是神经元产生可塑性的一种特征表现。小鼠初级听皮层(primary auditory cortex,AI)神经元PA的产生与毒蕈碱受体(即M型受体)密切相关,但其涉及的毒蕈碱受体亚型尚不清楚。本研究采用离体脑片全细胞膜片钳技术结合药理学方法,探讨幼年小鼠AI第V层锥体神经元PA与毒蕈碱受体亚型之间的关系。结果显示,激活胆碱能受体并同时注入去极化电流可诱导锥体神经元产生PA。M1、M2和M3受体拮抗剂分别能阻断PA的产生,而M4受体拮抗剂对PA的产生没有影响。该结果表明M1、M2和M3毒蕈碱受体均参与幼年小鼠AI第V层锥体神经元PA的形成,而M4毒蕈碱受体不参与PA的形成。 展开更多
关键词 全细胞膜片钳 毒蕈碱受体 持续性放电 可塑性 小鼠
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