急性呼吸窘迫综合征患者外周血单核细胞mCD14的表达及意义

目的观察急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者外周血单核细胞mCD14的表达情况,并探讨其意义。方法对5例ARDS患者及10例健康志愿者,分别分离其外周血单核细胞,用抗生物素-生物素-过氧化酶复合物技术(ABC法)检测其mCD14的表达。结果ARDS组及对照组外周血mCD14阳性单核细胞的百分率分别为94.3%±1.5%、93.6%±1.7%,两组间无统计差别(P>0.05)。结论ARDS患者及健康志愿者外周血单核细胞高表达mCD14,说明它们对LPS具有较高的潜在识别能力,一旦有LPS存在或入侵,这些细胞将可能被激活并释放介质。

内毒素对牙龈成纤维细胞mCD14表达的影响

目的:研究mCD14在牙龈成纤维细胞的膜表面分布及内毒素对mCD14在牙龈成纤维细胞膜表面表达的影响。方法:组织块法培养人牙龈成纤维细胞,利用免疫组化和Western blot方法研究mCD14在牙龈成纤维细胞的膜表面分布,同时观察内毒素对mCD14在牙龈成纤维细胞膜表面表达的影响。结果:免疫组织化学染色实验和蛋白印迹实验结果均表明mCD14在牙龈成纤维细胞的膜表面表达阳性,同时LPS可增强膜表面的mCD14的表达。结论:本实验表明正常人牙龈成纤维细胞可表达mCD14,LPS可以上调膜表面mCD14的表达,从而导致牙周损伤。

腹水CD64、外周血mCD14在肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎中的变化及其意义

目的探讨腹水CD64、外周血mCD14在肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)中的变化及其意义。方法选取该院肝硬化合并腹水患者174例,根据是否合并SBP将患者分为研究组(合并SBP,88例)和对照组(未合并SBP,86例)。采用流式细胞术检测腹水CD64与外周血mCD14,全部患者均采用头孢他啶联合氧氟沙星抗菌治疗。结果与对照组相比,研究组的外周血白细胞计数[(4.41±1.05)×109/L]、腹水中性粒细胞CD64平均荧光强度(16 421.35±289.37)和腹水CD64指数(182.34±16.31)均显著升高(P<0.05),而淋巴细胞的外周血mCD14阳性表达率[(2.71±0.07)%]、外周血mCD14平均荧光强度(45.62±14.07)、外周血mCD14指数(115.24±24.15)及腹水CD64平均荧光强度(86.47±10.24)则均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与治疗无效/死亡患者相比,治疗有效/生存患者的腹水中性粒细胞CD64平均荧光强度(574.34±114.01)和腹水CD64指数(52.33±11.25)均显著降低(P<0.05),而外周血mCD14平均荧光强度(130.11±15.31)、外周血mCD14指数(289.01±30.11)和腹水淋巴细胞CD64平均荧光强度(131.06±20.33)则显著升高,比较差异有统计学意义(P<0.05);此外,与腹水CD64、外周血mCD14单项检测相比,二者联合检测对治疗效果和预后的预测的准确度显著升高,比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论腹水CD64与外周血mCD14检测可以提示肝硬化是否合并SBP,二者联合检测在对肝硬化合并SBP的诊断和治疗效果判定中有显著的临床意义。

CBP治疗对重症脓毒症患者外周血单核细胞mCD14的影响

目的探讨连续性血液滤过技术(CBP)治疗对重症脓毒症患者外周血单核细胞m CD14的影响及其治疗脓毒症的机制。方法将笔者医院重症医学科收治的60例重症脓毒症患者分为CBP组及非CBP组。在两组患者治疗过程的0、12、24、48、72h时相点,留取外周血标本,检测其m CD14及白细胞弹性蛋白酶表达量的变化。将治疗24h后的两组患者分离出外周血单核细胞,并于体外培养,以LPS刺激后,在4、8、12、24、48h时相点检测单核细胞中m CD14表达量的变化;同时用ELISA法检测单核细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-10水平。结果随着治疗的进行,CBP组白细胞弹性蛋白酶水平较非CBP组下调更显著,差异具有统计学意义(P<0.05),而CBP组m CD14水平较非CBP组上调亦更显著,差异有统计学意义(P<0.05);CBP组在孵育前及孵育后4、8h时相点m CD14水平明显高于同时相的脓毒症组,差异有统计学意义(P<0.05),其单核细胞接受LPS再刺激后对炎性反应能力也较脓毒症组强。结论 CBP治疗可通过高效清除循环中的炎性因子及白细胞弹性蛋白酶,使m CD14水平上调,使部分免疫细胞免疫功能得到一定的恢复,从而改善机体内环境,参与重建机体免疫内稳状态。

重症脓毒症患者外周血单核细胞mCD14和HLA-DR的表达及临床意义

目的观察重症脓毒症患者外周血单核细胞(PBMC)脂多糖受体(mCD14)、HLA-DR的表达变化及临床意义。方法选取符合重症脓毒症患者35例和健康志愿者15例作为对照。按预后分为生存组(25例)和死亡组(10例),用流式细胞仪检测PBMC表面mCD14、HLA-DR在病后不同时间的动态改变。结果死亡组PBMC表面mCD14、HLA-DR各点均显著低于正常对照组(P<0.01),生存组mCD14在0～24h明显低于正常对照组(P<0.01),48、72h恢复正常对照组水平;HLA-DR在0～48h均低于正常对照组,72h逐渐升高但仍未恢复正常对照水平,0～24h生存组与死亡组mCD14表达水平差异无统计学意义(P>0.05),第48、72小时生存组明显高于死亡组(P<0.05或<0.01);0～48h生存组与死亡组HLA-DR表达水平差异无统计学意义(P>0.05),第72小时生存组明显高于死亡组(P<0.05)。结论重症脓毒症患者单核细胞呈抑制状态,不同预后患者其免疫功能恢复时mCD14恢复早于HLA-DR。

腹水CD64及外周血mCD14检测在肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎中的价值研究

目的探讨肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)患者腹水CD64及外周血mCD14的变化及其意义。方法选取肝硬化合并腹水患者87例,根据是否合并SBP将患者分为2组:合并SBP 44例为研究组,未合并SBP 43例为对照组,采用流式细胞术检测2组患者腹水中性粒细胞和淋巴细胞CD64平均荧光强度、CD64指数,外周血白细胞计数、mCD14阳性表达率、mCD14平均荧光强度和mCD14指数。研究组抗感染治疗1周后再按治疗有效与无效、生存与死亡分组评价腹水中性粒细胞和淋巴细胞CD64平均荧光强度、CD64指数,外周血mCD14平均荧光强度和mCD14指数。结果研究组腹水中性粒细胞CD64平均荧光强度、CD64指数和外周血白细胞计数明显高于对照组(P均<0.05),淋巴细胞CD64平均荧光强度、mCD14阳性表达率、mCD14平均荧光强度和mCD14指数均明显低于对照组(P均<0.05)。治疗有效组和生存组中性粒细胞CD64平均荧光强度和CD64指数均明显低于治疗无效组和死亡组(P均<0.05),淋巴细胞CD64平均荧光强度、mCD14平均荧光强度和mCD14指数均明显高于治疗无效组和死亡组(P均<0.05)。腹水CD64与外周血mCD14联合检测对治疗效果和预后判断的ROC曲线下面积、临界值、灵敏度和特异度均明显高于CD64、mCD14单项检测(P均<0.05)。结论肝硬化合并SBP患者腹水中性粒细胞CD64显著增高,腹水淋巴细胞CD64与外周血mCD14显著降低,腹水CD64与外周血mCD14联合检测预示肝硬化合并SBP治疗效果和预后的价值显著。

LPS对THP-1细胞sCD14和mCD14表达的影响

目的观察不同浓度脂多糖(LPS)刺激THP-1细胞(human acute monocytic leukemia cell line)不同时间对可溶性CD14(soluble CD14,sCD14)和膜CD14(Membrane CD14,mCD14)表达的影响及sCD14、mCD14表达之间的关系。方法不同浓度LPS(0、0.1、1.0、10、50ng/ml)刺激经佛波酯(PMA)诱导的THP-1细胞不同时间(0.5、1、3、5、8h),用酶联免疫吸附法检测sCD14的量,流式细胞术检测mCD14的量。结果 LPS浓度为0ng/ml时,sCD14的表达与时间呈正相关(r=0.915,P=0.029),8h达最高值(1044.39±12.21pg/ml),mCD14的表达与时间呈正相关(r=0.945,P=0.015),8h达最高值(4.23%±2.11%),且随着时间的延长,sCD14的表达与mCD14的表达呈正相关(r=0.969,P=0.006);LPS浓度为0.1ng/ml时,随着时间的延长,sCD14的表达与mCD14的表达呈正相关(r=0.944,P=0.016);当LPS刺激细胞0.5h时,sCD14的表达与mCD14的表达呈负相关(r=-0.839,P=0.037);1h时,mCD14的表达与LPS浓度呈正相关(r=0.839,P=0.037),100ng/ml时达最高值(3.24%±1.95%)。结论未经LPS刺激的THP-1细胞可以表达sCD14及mCD14;LPS的浓度及刺激细胞的时间促进sCD14和mCD14表达。

ARDS患者外周血mCD14阳性单核细胞的检测及其意义

目的 观察急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ） 患者外周血单核细胞ｍＣＤ１４ 的表达情况，并探讨其意义。方法 对５ 例ＡＲＤＳ患者及１０ 例健康志愿者，分别分离其外周血单核细胞，用抗生物素－ 生物素－ 过氧化酶复合物技术（ＡＢＣ 法） 检测其ｍＣＤ１４ 的表达。结果 ＡＲＤＳ组及对照组外周血ｍＣＤ１４ 阳性单核细胞的百分率分别为９４３ ％ ±１５ ％ 、９３６ ％ ±１７ ％ ，两组间无显著性差别（ Ｐ＞ ００５） 。结论 ＡＲＤＳ患者及健康志愿者外周血单核细胞高表达ｍＣＤ１４ ，说明它们对ＬＰＳ具有较高的潜在识别能力，一旦有ＬＰＳ存在或入侵，这些细胞将可能被激活并释放介质。

不同麻醉方法对单核细胞mCD14与TLR4表达的影响

目的:研究不同麻醉方法对外周血单核细胞mCD14与Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:选择择期行结、直肠癌根治术患者,共24例,年龄18~65岁,性别不限;体质量指数(BMI)18~23kg/m2;美国麻醉医师学会(ASA)I^II级。所有患者分为2组:单纯全麻组(GA组)和全麻复合硬膜外阻滞组(GA+E组),每组各12例。GA组以6μg/kg芬太尼、1.5~2.0mg/kg丙泊酚和0.6~0.8mg/kg罗库溴铵行全麻诱导,术中以七氟醚维持麻醉,呼气末浓度维持在1.0~1.3最低肺泡有效浓度(MAC)。GA+E组患者入手术室后于T12~L1穿刺并放置硬膜外导管,全麻诱导方法和药物同GA组,气管插管后硬膜外分次给予1%利多卡因及0.2%丁卡因混合液共9~12mL,并维持呼气末七氟醚浓度在0.6~0.8MAC,术中每小时追加1%利多卡因及0.2%丁卡因混合液3~4mL。分别于手术前、手术开始(切皮)时、切皮后2h及术后24h采外周血测定单核细胞膜型CD14(mCD14)、Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)数值。结果:GA+E组和GA组相比,患者各时间点单核细胞mCD14数值均无显著变化。GA组手术开始时单核细胞TLR4较术前显著下降(P<0.05),而GA+E组各时间点单核细胞TLR4无显著变化。结论:硬膜外阻滞可能通过影响TLR4的表达平衡手术应激产生的免疫抑制。

动态检测ICU重度腹部创伤患者外周血sCD14-T/mCD14水平的意义

目的探讨外周血可溶性CD14分子亚型(sCD14-T)/膜结合CD14(mCD14)对腹部创伤并发脓毒症患者的早期诊断价值。方法前瞻性病例对照研究分析2017年6月~2019年12月笔者医院ICU收治的86例符合纳入标准的腹部创伤患者,根据其48h后是否并发脓毒症分为脓毒症组及非脓毒症组,选择30例胃大部切除术(为择期手术)后患者作为对照组,分别检测3组患者入科后0、24、48、72h外周血中sCD14-T/mCD14、sCD14-T、sTREM-1和PCT的水平,比较上述指标对创伤后并发脓毒症的早期诊断价值。结果随着时间推移,3组患者sCD14-T水平较入科时均上调,以脓毒症组上调幅度最大(P<0.01);在各时相点(0、24、48、72h)sCD14-T表达水平呈现为脓毒症组>非脓毒症组>对照组(P<0.01)。脓毒症组及非脓毒症组mCD14-T水平较入科时均下调,脓毒症组下调幅度大于非脓毒症组(P<0.01),在各时相点mCD14表达水平呈现为对照组>非脓毒症组>脓毒症组(P<0.01);脓毒症组及非脓毒症组sTREM-1、PCT水平较入科时均上调,上调幅度脓毒症组大于非脓毒症组(P<0.01);在各时相点sTREM-1、PCT表达水平呈现为脓毒症组>非脓毒症组>对照组(P<0.01)。sCD14-T/mCD14诊断腹部创伤后脓毒症的敏感度为84.6%,特异性为87.5%,ROC曲线下面积为0.895,明显优于sCD14-T、sTREM-1和PCT(P<0.05)。结论sCD14-T/mCD14是一种优于sCD14-T、sTREM-1及PCT早期诊断脓毒症的指标,可以提高腹部创伤患者脓毒症早期确诊率,为及早干预治疗赢得时间。

人牙周膜细胞及炎症龈组织中mCD14表达的免疫组化研究

目的 研究人PDLC及炎症龈组织中mCD14表达情况。方法 采用免疫组化SABC方法。结果 正常人牙周膜细胞mCD14染色为阳性反应 ,但细胞经脂多糖刺激 2天后 ,胞浆染色要比未刺激的细胞染色深。健康牙龈组织中mCD14表达阴性 ;边缘性龈炎和牙周炎龈组织上皮棘层细胞mCD14呈强阳性表达 ,增生性龈炎也呈阳性表达。结论 mCD14可在非髓样细胞中表达 ;

百草枯中毒患者血sCD14-T/mCD14水平与病情程度、APACHEⅡ评分有相关性

目的:探讨百草枯中毒患者血可溶性CD14分子亚型(sCD14-T)/膜结合CD14(mCD14)水平变化以及与急性生理与慢性健康状况评估(APACHEⅡ)评分的相关性。方法:选取84例百草枯中毒患者,检测入院时血sCD14-T/mCD14水平、APACHEⅡ评分,根据《急性百草枯中毒诊治专家共识(2013)》,按病情程度,将患者分为轻度17例,中度42例,重度25例。比较不同病情程度患者血sCD14-T/mCD14水平、APACHEⅡ评分,并分析二者相关性,比较不同sCD14-T/mCD14水平、APACHEⅡ评分患者预后情况,分析血sCD14-T/mCD14水平、APACHEⅡ评分与预后的关系。结果:重度患者血sCD14-T、sCD14-T/mCD14水平、APACHEⅡ评分高于中度、轻度患者,且中度患者高于轻度患者,重度患者mCD14水平低于中度、轻度患者,且中度患者低于轻度患者(P均<0.05);以百草枯中毒重度为阳性样本,轻、中度为阴性样本,绘制受试者工作特征(ROC)曲线;外周血sCD14-T/mCD14水平联合APACHEⅡ评分评估重度百草枯中毒的曲线下面积(AUC)为0.898(95%CI:0.824~0.971);百草枯中毒患者sCD14-T/mCD14水平与APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.05);sCD14-T/mCD14水平>3.22、APACHEⅡ评分>23分患者的生存率相较于sCD14-T/mCD14水平≤3.22、APACHEⅡ评分≤23分患者更低(P均<0.05);sCD14-T/mCD14水平、APACHEⅡ评分为百草枯中毒患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论:百草枯中毒患者外周血sCD14-T/mCD14水平随病情加重逐渐升高,与APACHEⅡ评分呈正相关。

CD14的结构和功能

CD14分为膜上CD14(mCD14)和可溶性CD14(sCD14)。mCD14分布在单核细胞等表面;sCD14存在于正常人和动物的血清中。编码CD14的基因已被克隆,该基因位于人5号常染色体长臂端5q23-q31。mCD14是一种55kDa糖蛋白,化学组成为糖基磷脂酰肌醇(GPI)—蛋白质,通过PI的磷脂部分与细胞膜连接;sCD14蛋白部分与mCD14基本相同,但不含PI部分,故分子量稍小,为48kDa。mCD14作为LPS受体,介导LPS对单核细胞等的刺激作用,sCD14也可与LPS结合,激活。

加减陷胸桃承汤合参麦注射液对盲肠结扎穿孔术后ARDS大鼠肺泡巨噬细胞mCD_(14)表达和血清NO的观察

目的观察加减陷胸桃承汤合参麦针对盲肠结扎穿孔术后呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠模型的治疗作用,并探讨其作用机理。方法选用SD大鼠为实验对象,采取盲肠结扎穿孔术(CLP)造成大鼠ARDS模型。分别对假手术组、模型组、合方组、桃承组、参麦组进行对照观察,检测血清NO含量、肺泡巨噬细胞mCD14的表达,并在光镜下观察动物肺组织的形态学变化。结果术后模型组PaO2明显下降,PaCO2呈上升趋势,24h达最低或最高值,相同时相点用药各组PaO2较模型组明显升高,PaCO2较模型组显著下降,有极显著性差异(P<0.01),合方组最明显;术后3h、12h模型组大鼠血清中NO含量明显上升,用药各组对NO含量明显下降,与模型组相比有极显著性差异(P<0.01)。术后3h、12h模型组mCD14表达水平均较高,与假手术组相比有极显著性差异(P<0.01),合方组、桃承组、参麦组mCD14的表达较低,与模型组相比有极显著性差异(P<0.01)。肺组织光镜观察结果显示术后3h模型组肺组织血管、肺间质、肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞等出现严重损伤;桃承组、参麦组和合方组的肺组织损伤程度明显减轻,6h,12h,24h模型组损伤更为严重,甚至有脓肿形成。结论加减陷胸桃承汤、参麦针以及两药合用对大鼠ARDS有一定的防治作用。

LPS刺激牙龈成纤维细胞IL-6、IL-8的产生和膜表面受体CD_(14)的表达

目的 :观察牙龈卟啉菌和中间普氏菌LPS刺激人牙龈成纤维细胞合成IL - 6、IL - 8的能力 ,并了解LPS是否通过细胞表面膜受体mCD14 介导信号传导。方法 :4种浓度的LPS在不同时间段 ,分别作用于体外培养的人牙龈成纤维细胞。采用ELISA检测IL - 6、IL - 8含量的变化 ,同时利用逆转录聚合酶链反应 ,进一步观察IL - 6、IL - 8、CD14 在mRNA水平的表达特征。结果 :ELISA和RT -PCR的反应结果证实 ,受LPS的刺激 ,细胞合成和分泌细胞因子IL - 6、IL - 8的能力明显增强 ,但未检测到细胞表面膜受体mCD14 mR NA的表达。结论 :LPS作用于牙龈成纤维细胞合成和分泌细胞因子没有通过膜受体mCD14 的介导。

重症脓毒症患者外周血单核细胞TLR4和炎性因子的表达及临床意义

目的观察重症脓毒症患者外周血单核细胞(PBMC)膜结合CD14(mCD14)、TLR4及炎性因子的表达及临床意义。方法选取符合重症脓毒症患者35例和健康志愿者15例作为对照。在患者被诊断重症脓毒症的第1、3、5天测定其外周血单核细胞mCD14、TLR4的表达及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)浓度、当天的APACHE-Ⅱ评分和SOFA评分及预后。结果按预后分为生存组(25例)和死亡组(10例),第1、3天2组PBMC表面mCD14、TLR4比较差异无统计学意义(P>0.05),生存组PBMC表面mCD14、TLR4第5天升高,并高于死亡组的对应值(P<0.05);APACHE-Ⅱ、SOFA评分明显下降,2组血清TNF-α、IL-10各点均没有发生明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论重症脓毒症患者外周血单核细胞mCD14、TLR4表达与患者预后密切相关,血清TNF-α、IL-10的动态变化不能反映患者疾病的演变和预后。

脂多糖受体mCD_(14)定量研究的方法探讨

本文通过横断面研究,对100例正常人群(一次性)采集外周全血2ml,选用流式细胞技术测定单核细胞群、mCD14平均荧光强度值,行盲法测定。观察正常人群外周血mCD14的表达水平,探讨正常人群mCD14定量研究的方法。结果显示单核细胞与淋巴细胞的比值比单个读取mCD14的平均荧光强度值更具可重复性,集中趋势较好,有利于临床应用和比较研究。此方法可作为流式细胞仪定量检测数据校正的方法参考。

呼吸窘迫综合征机械通气早产儿肺泡巨噬细胞表面mCD_(14)的表达

目的探讨肺泡巨噬细胞(AM)表面mCD14的表达在新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)发病和并肺炎中的作用。方法用流式细胞仪检测早产新生儿呼吸道清洗液中AM表面mCD14的阳性表达率.用酶联免疫吸附试验检测早产新生儿呼吸道清洗液中IL-1β、IL-8含量。结果1.病例组AM的mCD14阳性表达率[(54.772±17.341)%]高于对照组[(14.023±10.713)%],差异有显著性(t=-7.739P<0.001);病例组IL-1β含量[(263.220±69.015)ng/L]高于对照组[(73.979±40.850)ng/L].差异有显著性(t=-9.139P<0.001);病例组IL-8含量[(377.564±165.867)ng/L]高于对照组[(61.064±39894)ng/L],差异有显著性(t=-7,185P<0.001)。2.IL-1β和IL-8均与AM表面的mCD14阳性表达率呈显著正相关(r=0872,0847P均<0.01);IL-8与IL-1β含量呈显著正相关(r=0.861P<0.01)。结论mCD14在AM表面的高表达以及细胞因子IL-1β和IL-8在NRDS发病及并肺部炎症的病理生理过程中起重要作用。

银屑病患者外周血白细胞膜CD14和血浆可溶性CD14表达水平的意义

目的:了解银屑病患者外周血白细胞膜CD14(mCD14)和血浆中可溶性CD14(sCD14)的表达水平,探讨内毒素信号通路激活与银屑病的关系。方法:采用流式细胞仪和ELISA法分别检测银屑病患者外周血白细胞mCD14的表达水平和血浆sCD14的含量。结果:患者组外周血白细胞mCD14表达水平与血浆中sCD14含量均较正常对照组升高,差异有统计学意义。结论:G-细菌感染所产生的内毒素使外周血白细胞mCD14和sCD14水平升高,可能导致银屑病发病或病情加重。