Carba NP及mCIM试验在检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的临床应用价值

目的 探讨Carba NP试验与改良碳青霉烯类失活法(modified carbapenem inactivation method, mCIM)试验检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的临床价值。方法 选取2021年3月—2022年6月如东县中医院临床分离的60株碳青霉烯类药物肠杆菌科细菌(carbapenem resistant enterobacteriaceae, CRE),分别对细菌进行Carba NP试验和mCIM试验检测,以碳青霉烯酶耐药基因聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测结果为金标准,计算两项试验的检测效能。结果 基于金标准,Carba NP试验检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的灵敏度与特异度分别为90.00%、93.33%,mCIM试验检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的灵敏度与特异度分别为93.33%、100.00%,两种检测方法诊断灵敏度与特异度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Carba NP试验与mCIM试验均是检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的有效可行方法。

mCIM试验检测耐碳青霉烯类耐杆菌科细菌诊断价值的系统性评价

目的系统评价改良碳青霉类灭活试验对耐碳青霉烯类耐杆菌科细菌的准确性。方法检索PubMed、EMBASE、中国知网、万方、中国生物医学文献数(CBM)数据库及Cochrane图书馆,并辅以文献追溯、手工检索,检索时间为2015年1月1日-2019年6月16日。严格按照纳入和排除标准进行文献筛选,参照诊断准确性研究质量评价工具对纳入文献进行质量评价后,进行meta分析。结果共纳入8篇文献,合计1154份非重复标本。结论mCIM试验对于产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的表型检测具有很高的敏感度、特异度和准确性。

改良Hodge与Carba NP和mCIM试验快速检测产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的方法学比较

目的比较改良Hodge试验、Carba NP试验及碳青霉烯灭活试验(mCIM试验)对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌快速表型筛选的能力。方法以PCR扩增肺炎克雷伯菌中携带的碳青霉烯酶相关耐药基因为金标准,比较改良Hodge试验、Carba NP试验及mCIM试验对202株碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌试验菌的筛选能力。结果 202株试验菌经PCR扩增120株耐药基因阳性,产物测序得知75株只携带bla_(KPC-2)基因,20株同时携带bla_(KPC-2)和bla_(VIM-2)基因,19株同时携带bla_(KPC-2)和bla_(IMP-4)基因,3株只携带blaIMP-4基因,2株只携带bla_(VIM-2)基因,1株只携带bla_(NDM-1)基因;120株产碳青霉烯酶试验组菌株对亚胺培南、厄他培南及头孢菌素类抗菌药物的耐药率均为100.00%,对替加环素和多黏菌素B敏感。82株非产碳青霉烯酶的对照菌株对亚胺培南、厄他培南均敏感,对头孢曲松的耐药率为100.00%。以PCR结果为金标准,试验菌通过改良Hodge试验检测的灵敏度为92.50%,特异性为97.56%;Carba NP试验检测的灵敏度为94.17%,特异性为98.78%;mCIM试验检测的灵敏度为98.33%,特异性为100.00%。与PCR结果相比,改良Hodge试验的一致率为94.55%,Kappa值为0.8885;Carba NP试验的一致率为96.04%,Kappa值为0.9188;mCIM试验的一致率为99.01%,Kappa值为0.9796。结论 Carba NP试验和mCIM试验在快速检测产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌较改良Hodge试验具有更高的敏感性和特异性,并且操作简便,适合在临床微生物学实验室、医院感染控制室及疾病预防控制系统各单位普及应用。

mCIM试验检测临床产碳青霉烯酶革兰阴性杆菌的应用价值

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)在检测临床产碳青霉烯酶革兰阴性杆菌中的应用价值。方法采用mCIM、改良Hodge(MHT)及Carba NP试验分别检测106株碳青霉烯酶基因阳性的革兰阴性杆菌(36株肠杆菌科细菌、26株铜绿假单胞菌及44株鲍曼不动杆菌),并比较差异。同时,收集湘雅医院2016年1月-12月临床分离的非重复性耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌106株,同期随机选取100株分离的碳青霉烯类敏感菌株作为对照组,mCIM试验检测碳青霉烯酶,PCR检测碳青霉烯酶基因,分析其敏感性及特异性。结果(1)106株碳青霉烯酶基因阳性菌株,mCIM试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为88.9%(32/36),铜绿假单胞菌均为阴性。MHT试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为77.8%(28/36),铜绿假单胞菌的敏感性、特异性为69.2%(18/26)。Carba NP试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为97.2%(35/36),铜绿假单胞菌的敏感性、特异性为57.7%(15/26)。鲍曼不动杆菌3种方法均为阴性。肠杆菌科细菌中,MHT与Carba NP试验差异有统计学意义(χ^2=6.222,P=0.028),MHT与mCIM试验差异无统计学意义(χ^2=1.600,P=0.343),Carba NP与mCIM试验差异无统计学意义(χ^2=1.934,P=0.357);铜绿假单胞菌中,MHT与Carba NP试验阳性,二者差异无统计学意义(χ^2=0.746,P=0.565)。(2)144株临床分离肺炎克雷伯菌(碳青霉烯类耐药及敏感菌株分别为44株、100株),采用美罗培南和亚胺培南分别做mCIM试验,其敏感性和特异性均为100%,且与PCR的结果一致。结论mCIM试验在肠杆菌科细菌中敏感性高、特异性强,操作简单,结果易于判断,具有良好的临床应用价值。

mCIM、eCIM对碳青霉烯酶检测能力评估及CRE耐药特点分析

目的:评估碳青霉烯酶失活试验(modified carbapenem inactivation method,mCIM)、EDTA碳青霉烯酶失活试验(EDTAcarbapenem inactivation method,eCIM)及改良Hodge试验对肠杆菌科细菌不同基因型碳青霉烯酶的检测能力,分析碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)对临床常用药物最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),便于临床合理选择用药。方法:收集华北理工大学附属医院2018年6月至12月临床标本中分离的CRE菌株40株,经VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定/药敏系统进行鉴定及药敏试验,E-test法检测亚胺培南、美罗培南、替加环素、阿米卡星、左氧氟沙星、复方新诺明对CRE的MIC,微量肉汤稀释法检测多粘菌素的MIC。用mCIM、eCIM和改良Hodge试验检测CRE菌株产碳青霉烯酶的情况,用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测碳青霉烯类耐药基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48)、超广谱β-内酰胺酶基因(SHV、TEM、CTX、OXA-1)、AmpC酶编码基因(FOX)及膜孔蛋白ompK35、ompK36基因。结果:40株CRE中38株确定携带碳青霉烯酶基因,其中携带blaKPC35株,包括同时携带blaNDM7株,blaKPC+blaNDM4株。改良Hodge试验和mCIM、e CIM试验对KPC型碳青霉烯酶的阳性率均为100%(38/38);mCIM、eCIM试验对NDM型碳青霉烯酶的阳性率为100%(3/3),改良Hodge试验对NDM型碳青霉烯酶的阳性率为0。耐药性分析:40株CRE菌株对临床常用抗菌药物如三代、四代头孢菌素,酶抑制剂复合制剂,氨曲南,亚胺培南及美罗培南的耐药率均为100%,对左氧氟沙星、阿米卡星、复方新诺明的耐药率分别为90.0%、60.0%和42.5%,尚未发现对替加环素及多黏菌素耐药的菌株。结论:mCIM、eCIM试验和改良Hodge试验对KPC型碳青霉烯酶的敏感度高,mCIM、eCIM试验对NDM型的敏感性高于改良Hodge试验;不同基因型的CRE菌株耐药情况不同,建议针对不同耐药表型的CRE感染,合理选择抗菌药物。

改良Carba Np试验快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯耐药表型

目的探讨改良Carba Np试验快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯类耐药表型的应用价值。方法选取2022年邢台市第三医院从临床血培养标本分离的163株耐碳青霉烯肠杆菌目细菌菌株,分别采用改良Carba Np试验、mCIM/eCIM对菌株进行表型检测,以PCR碳青霉烯酶表型鉴定结果为金标准,比较两种改良方法的检测结果。结果163株耐碳青霉烯肠杆菌目细菌有8个菌种,其中肺炎克雷伯菌数量最多,共134株(82.21%);其次是大肠埃希菌17株(10.41%)。科室来源中ICU居首位,72株(44.17%);其次为外科20株(12.27%)。药敏试验提示氨苄青霉素、头孢唑肟、头孢曲松、亚胺培南、厄他培南耐药率100%,头孢他啶、阿奇霉素、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率高于90%,检测的16种抗菌药物中仅阿米卡星耐药率低于50%。表型检测结果显示,Carba Np试验阳性161株,阳性率98.77%;mCIM/eCIM试验阳性154株,阳性率94.47%;肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌表型试验阴性。134株肺炎克雷伯菌中101株携带blaKPC-2,3株携带blaNDM,2株携带blaIMP,28株基因检测阴性;17株大肠埃希菌中5株携带blaKPC-2,9株携带blaNDM。以PCR结果为标准,改良Carba Np试验、mCIM/eCIM试验在耐碳青霉烯肠杆菌中均具有较高的灵敏度与特异性,两种方法的灵敏度与特异性差异无统计学意义(P>0.05)。结论改良Carba Np试验能快速鉴定碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌菌株,具有较好的临床应用价值。

三种检测常见碳青霉烯酶型方法的评估研究

目的评估mCIM联合eCIM试验、Carba-5和Carba-R三种方法检测碳青霉烯类耐药细菌(carbapenem-resistant organisms,CRO)中常见碳青霉烯酶型的性能。方法随机挑选2019年1月至2020年12月浙江大学医学院附属邵逸夫医院临床分离的122株非重复CRO菌株,应用生物梅里埃MALDI-TOF MS全自动快速质谱仪对菌株进行菌种鉴定,分别采用改良碳青霉烯类抗生素灭活试验(mCIM联合eCIM试验)、Carba-5检测条和Carba-R试剂盒对所有菌株进行碳青霉烯酶型检测;以PCR法检测结果为金标准,评价上述3种检测方法的性能。结果122株CRO菌株属于12个不同菌种,PCR法碳青霉烯酶型检测结果:共112株检测结果阳性,KPC-2型阳性70株,占57%(70/122),其中肺炎克雷伯菌46株,铜绿假单胞菌12株,其他菌株12株;OXA-232型阳性19株占15%(19/122),均为肺炎克雷伯菌;NDM型阳性20株占16%(20/122),其中NDM-1型阳性7株和NDM-5型阳性13株,以大肠埃希菌为主(12/20);IMP-4型阳性2株,分别为肺炎克雷伯菌和阿氏肠杆菌;检测出1株同时产KPC-2和IMP-4的肺炎克雷伯菌;未检测到VIM型碳青霉烯酶;有10株未检出以上5种基因型。与金标准PCR方法相比mCIM联合eCIM试验灵敏度为95.65%(22/23),特异度为100.00%(90/90),阳性预测值(PPV)为100.00%(22/22),阴性预测值(NPV)为98.90%(90/91),诊断准确度为99.11%(112/113);Carba-5和Carba-R试验的灵敏度、特异性、PPV、NPV和诊断准确度均为100%。结论碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌和铜绿假单胞菌临床微生物实验室可以使用Carba-5试验快速、准确地检测常见碳青霉烯酶型,有条件的实验室还可以选择Carba-R试验,并监测患者是否存在碳青霉烯耐药菌的定植;而Carba-5和Carba-R检测结果阴性时,建议结合药敏结果进行mCIM联合eCIM试验检测。

碳青霉烯酶抑制剂检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的效能

目的评估迪尔碳青霉烯酶抑制剂检测碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)产不同基因型碳青霉烯酶的效能。方法收集2018-2020年广东省中医院临床分离的73株非重复CRE。采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)联合乙二胺四乙酸(EDTA)碳青霉烯灭活试验(eCIM)以及碳青霉烯酶抑制剂检测碳青霉烯酶,采用聚合酶链式反应(PCR)检测10种常见β-内酰胺酶基因。以PCR为金标法,评估两种表型试验的临床效能。结果mCIM试验阳性54株,产丝氨酸碳青霉烯酶20株,产金属β-内酰胺酶34株,符合率为98.63%(72/73)。碳青霉烯酶抑制剂检出56株产碳青霉烯酶,产A类酶22株,产B类酶34株。1株产OXA-181的摩根摩根菌为假阴性,2株不产碳青霉烯酶、高产头孢菌素酶DHA的CRE为假阳性。碳青霉烯酶抑制剂灵敏度和特异度分别为98.18%(54/55)和88.89%(16/18),符合率为95.89%(70/73)。结论mCIM联合eCIM无法区分A类和D类丝氨酸碳青霉烯酶。碳青霉烯酶抑制剂符合率较mCIM联合eCIM试验稍低,能有效鉴别A类和B类酶,但在D类酶和高产AmpC酶的CRE检测上仍存在不足。碳青霉烯酶抑制剂与mCIM/eCIM联合能更全面地实现碳青霉烯酶分型,精准指导临床合理用药。

碳青霉烯酶3种检测方法间的比较

目的:探讨3种碳青霉烯酶检测方法——改良hodge试验、Carba NP试验、碳青霉烯类失活法(mCIM)筛选碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌的差异。方法:对23例待测菌株分别用3种方法进行检测并记录,然后进行比较分析。结果:改良hodge试验17株阳性,阳性率为73.9%;Carba NP试验19株阳性,阳性率为82.7%;mCIM试验20株阳性,阳性率为87.0%。结论:改良hodge试验步骤简单易行,结果稳定,阳性率高,但用时较长,可用于试验结果的再次验证,也可用于大量临床住院标本。Carba NP试验前期准备及步骤复杂,对操作者技术要求高,但它最短30min内出现结果,颜色对比显著,可用于实验初期的快速检验。mCIM试验操作简单,符合率和特异性高,结果易于观察,可用于常规实验室碳青霉烯类的检测。