期刊文献+
共找到2,286篇文章
< 1 2 115 >
每页显示 20 50 100
植物乳杆菌WLPL04的荧光标记及其表征
1
作者 钟常城 王祺安 +4 位作者 张启蒙 赵香香 王志跃 魏华 陶雪莹 《南昌大学学报(理科版)》 CAS 2024年第2期156-165,共10页
植物乳杆菌WLPL04源自健康母乳,能在肠道定植。对植物乳杆菌WLPL04进行荧光标记,为研究其在体内的定植、移位及分布提供重要实验材料。以pMG36e为骨架,含3种不同启动子(P_(X),P_(23)和P_(ldh))的mCherry红色荧光蛋白基因作为标记基因,... 植物乳杆菌WLPL04源自健康母乳,能在肠道定植。对植物乳杆菌WLPL04进行荧光标记,为研究其在体内的定植、移位及分布提供重要实验材料。以pMG36e为骨架,含3种不同启动子(P_(X),P_(23)和P_(ldh))的mCherry红色荧光蛋白基因作为标记基因,构建重组质粒pMG36e-P_(X)-mCherry、pMG36e-P_(23)-mCherry和pMG36e-P_(ldh)-mCherry,转化大肠杆菌,通过PCR、质粒DNA酶切、菌落颜色观察和激光共聚焦显微镜观察进行验证。验证构建成功后进一步将3种重组质粒分别导入植物乳杆菌WLPL04。结果显示导入质粒pMG36e-P_(X)-mCherry、pMG36e-P_(23)-mCherry的植物乳杆菌WLPL04,其菌体在激光共聚焦显微镜下均显示明显红色荧光;而导入pMG36e-P_(ldh)-mCherry的菌体其红色荧光较弱。此外,通过生长曲线和扫描电镜观察分析不同重组质粒对菌株生长及形态的影响,结果表明3种质粒对植物乳杆菌WLPL04的生长及菌体形态没有显著影响。以上结果表明植物乳杆菌WLPL04已被红色荧光蛋白mCherry成功标记,可为后续研究其在体内的定植、移位及分布提供重要实验材料。 展开更多
关键词 植物乳杆菌WLPL04 mcherry荧光标记 启动子 表达
下载PDF
粗穗披碱草1H^(t)S染色体特异荧光原位杂交标记开发
2
作者 宫文萍 汪晓璐 +6 位作者 王开 韩冉 祁广 徐文竞 曾小雪 郭军 刘成 《山东农业科学》 北大核心 2024年第7期16-22,共7页
小麦-粗穗披碱草1H^(t)S.1BL罗伯逊易位系高抗小麦条锈病和叶锈病,是小麦遗传改良的优异基因源。我们前期利用中国春ph1b基因突变体对该易位系进行诱导,获得了一批诱导后代材料,为了从中准确鉴定小麦-粗穗披碱草1H^(t)S小片段易位系,需... 小麦-粗穗披碱草1H^(t)S.1BL罗伯逊易位系高抗小麦条锈病和叶锈病,是小麦遗传改良的优异基因源。我们前期利用中国春ph1b基因突变体对该易位系进行诱导,获得了一批诱导后代材料,为了从中准确鉴定小麦-粗穗披碱草1H^(t)S小片段易位系,需要建立能够覆盖粗穗披碱草1H^(t)S染色体的荧光原位杂交(FISH)标记。本研究利用21个小麦及其近缘种探针、61个基于中国春基因组序列新开发的小麦1BS染色体探针以及40个根据简单三碱基重复序列新开发的探针对小麦-粗穗披碱草1H^(t)S.1BL易位系进行非变性FISH分析。结果显示,B74、B76和B77等36个探针(33个为新开发的)在1H^(t)S染色体上具有杂交信号,并且杂交信号可分为仅在染色体末端、仅在着丝粒处、同时在着丝粒处和近着丝粒处、覆盖1H^(t)S约3/4染色体臂、覆盖绝大部分1H^(t)S共五种类型。因此,部分探针单独使用或多个探针联合使用,其信号能覆盖1H^(t)S染色体,能够满足小麦-粗穗披碱草1H^(t)S小片段易位系鉴定,这可为小麦背景中粗穗披碱草染色质追踪提供新的检测手段。 展开更多
关键词 粗穗披碱草 1H^(t)S染色体 探针 荧光原位杂交标记
下载PDF
东北春播区糜子核心种质的荧光微卫星标记鉴定
3
作者 丁艺冰 辛旭霞 +9 位作者 冯智尊 郭娟 曹越 陈喜明 王晓丹 曹晓宁 SANTRA Dipak K 陈凌 乔治军 王瑞云 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1728-1739,共12页
优异种质资源是糜子新品种选育和产业发展的基础。本研究以190份东北春播区糜子核心种质为材料,利用前期构建的SSR标记在5'端标注荧光,进行PCR扩增和毛细管电泳。根据毛细管电泳检测的片段有无采用“0/1”表示,利用ID Analysis4.0... 优异种质资源是糜子新品种选育和产业发展的基础。本研究以190份东北春播区糜子核心种质为材料,利用前期构建的SSR标记在5'端标注荧光,进行PCR扩增和毛细管电泳。根据毛细管电泳检测的片段有无采用“0/1”表示,利用ID Analysis4.0进行区分,使用PopGene、PowerMarker、MEGA、Structure、NTSYS进行遗传多样性分析。试验结果表明,3个荧光SSR标记组合(RYW3+RYW6+RYW28)可区分190份材料,共检测出等位变异73个,平均为24.3333;有效等位基因数(Ne)为5.4728(RYW3)~15.8922(RYW6),平均为9.6496;检出Shannon多样性指数(I)为2.0851(RYW3)~2.9457(RYW6),平均为2.4896;观测杂合度(Ho)为0.7529(RYW6)~0.9574(RYW28),平均为0.8876;期望观测杂合度(He)为0.8194(RYW3)~0.9398(RYW6),平均为0.8765;Nei’s基因多样性指数(Nei)为0.8173(RYW3)~0.9371(RYW6),平均为0.8741;多态性信息含量(PIC)为0.8656(RYW3)~0.9722(RYW6),平均为0.9198。基于UPGMA将190份资源划分为3个群组。基于Structure的遗传结构分析(K=3)将糜子核心种质分为3个类群,来源于东北地区的4个基因库(黑龙江、吉林、辽宁和内蒙古的一部分)。基于主成分分析将材料分为4个类群,与地理来源一致。利用在线二维码技术(https://cli.im/)构建了190份东北糜子核心种质的DNA分子身份证。 展开更多
关键词 糜子 东北春播区 荧光微卫星标记 毛细管电泳 DNA分子身份证
下载PDF
应用STR荧光标记分析烟台地区菊花种质资源遗传多样性
4
作者 朱胜波 李恺睿 +2 位作者 樊铭玺 焦睿 陈晓峰 《贵州农业科学》 2024年第1期1-9,共9页
【目的】探明烟台地区菊花种质资源的遗传多样性,为烟台地区菊花种质的分类鉴别、资源保护及品种培育提供依据。【方法】应用荧光STR分子标记和毛细管电泳检测技术分析烟台地区非洲菊、秋菊、洋甘菊等12份菊花种质,结合主要表型性状观... 【目的】探明烟台地区菊花种质资源的遗传多样性,为烟台地区菊花种质的分类鉴别、资源保护及品种培育提供依据。【方法】应用荧光STR分子标记和毛细管电泳检测技术分析烟台地区非洲菊、秋菊、洋甘菊等12份菊花种质,结合主要表型性状观察进行聚类分析并构建分子身份证。【结果】10对引物共检测到103个STR等位基因位点,平均每对引物的位点数10.3个,扩增片段长度在118~376 bp之间,引物多态性信息(PIC)平均0.795 8。聚类分析依照遗传相似系数将12份菊花种质分为四大类,其中,Ⅰ类群包括秋菊、雏菊、野菊(1)、杭菊(白)、杭菊(黄)、翠菊、野菊(2)共7份种质,占总数的58.3%,含大菊1份、小菊6份,平瓣2份、匙瓣3份、管瓣2份;Ⅱ类群包括非洲菊、洋甘菊2份种质,占总数的16.7%,花瓣类型均为平瓣;Ⅲ类群仅杭菊(紫)1份种质,占总数的8.3%;Ⅳ类群包括一年蓬、野菊(3)2份种质,占总数的16.7%,均为小菊、平瓣花。不同花色、花序大小、花瓣类型的种质存在交叉聚集现象。【结论】烟台地区菊花种质具有较好的遗传多样性,STR荧光标记可有效分析该类种质资源,基于STR分子手段构建了12份菊花种质资源的分子身份证。 展开更多
关键词 STR荧光标记 菊花 遗传多样性 种质资源 分子身份证
下载PDF
应用STR荧光标记分析烟台地区草莓种质资源遗传多样性
5
作者 李恺睿 史庆瑶 +2 位作者 樊铭玺 谭浩然 陈晓峰 《山东农业科学》 北大核心 2024年第1期43-49,共7页
本研究以烟台地区1份野生草莓种质和6份常规栽培品种为试材,选取已发表具有扩增多态性的11对STR荧光标记引物进行扩增,采用多重荧光毛细管电泳检测,分析了该地区草莓种质的遗传多样性,并构建了其分子身份证.结果表明,用这11对引物从7份... 本研究以烟台地区1份野生草莓种质和6份常规栽培品种为试材,选取已发表具有扩增多态性的11对STR荧光标记引物进行扩增,采用多重荧光毛细管电泳检测,分析了该地区草莓种质的遗传多样性,并构建了其分子身份证.结果表明,用这11对引物从7份草莓种质中共检测到60个STR等位基因位点,平均每对引物5.45个,扩增片段长度在90~270 bp之间,多态信息含量平均为0.676,可用于草莓种质的多态性检测.聚类分析显示7份草莓种质间的遗传相似系数为0.077~0.842,在遗传相似系数为0.257时,7份种质被分为3个类群,W1(野生草莓)与S2(丰香种质)同源性较高.对7份草莓种质进行不同等位基因编码,构建了分子身份证.本研究结果可为烟台地区草莓种质资源鉴定、保护和开发利用提供重要依据. 展开更多
关键词 STR荧光标记 草莓 遗传多样性 聚类分析 分子身份证 烟台地区
下载PDF
牛大力多糖的荧光标记、鉴定及其体内分布
6
作者 多水银 张兴波 +2 位作者 吴玉辉 李静涛 杨雨辉 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第8期88-91,共4页
研究旨在探究牛大力多糖在小鼠体内的吸收与分布。使用罗丹明B标记牛大力多糖得到牛大力多糖罗丹明B荧光标记物(MSP-RhB)。使用荧光显微镜和红外光谱扫描鉴定标记成功后,给小鼠灌胃MSP-RhB,分别于1、3、6、12、24h取材,通过小动物活体... 研究旨在探究牛大力多糖在小鼠体内的吸收与分布。使用罗丹明B标记牛大力多糖得到牛大力多糖罗丹明B荧光标记物(MSP-RhB)。使用荧光显微镜和红外光谱扫描鉴定标记成功后,给小鼠灌胃MSP-RhB,分别于1、3、6、12、24h取材,通过小动物活体成像仪系统观察MSP-RhB在小鼠体内、体外的分布情况。结果显示:荧光标记牛大力多糖成功;灌胃小鼠后,MSP-RhB主要分布于胃肠道、肝脏和肾脏;MSP-RhB在1h到达小肠各段,约3h达到最大值,在小肠中停留时间长达24h。研究表明,MSP-RhB通过小肠吸收,先进入全身循环,然后分布到肝脏和肾脏中,且荧光信号随时间的推移逐渐减弱。 展开更多
关键词 牛大力多糖 荧光标记 口服吸收 体内分布
下载PDF
基于荧光标记法的集束化措施在多重耐药菌感染预防与控制中的效果
7
作者 秦廷正 刘云 +4 位作者 郝跃伟 杨娜 宋亚腾 王晓群 李卫光 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期225-230,共6页
目的 采取基于荧光标记法的集束化防控措施,观察多重耐药菌(MDRO)感染预防与控制的效果。方法 选取某院2022年1—12月检出MDRO的患者为研究对象。收集MDRO监测数据及防控措施落实情况。采用荧光标记法监测床单元环境物体表面的清洁消毒... 目的 采取基于荧光标记法的集束化防控措施,观察多重耐药菌(MDRO)感染预防与控制的效果。方法 选取某院2022年1—12月检出MDRO的患者为研究对象。收集MDRO监测数据及防控措施落实情况。采用荧光标记法监测床单元环境物体表面的清洁消毒效果,干预后组在对干预前组采取集束化防控措施与管理模式的基础上,针对干预前组发现的问题实施强化整改措施。比较2022年1—6月(干预前)与2022年7—12月(干预后)相关指标变化。结果 干预前组共有136例MDRO感染患者,检出MDRO 208株,发生医院感染10例。干预后组共有128例MDRO感染患者,检出MDRO 198株,发生医院感染9例。干预后患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)及MDRO总检出率较干预前均有所降低(均P<0.05)。干预后环境物体表面MRSA、耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)、CRAB及MDRO总检出率均低于干预前(均P<0.05)。干预前环境物体表面MDRO检出率为34.52%,干预后环境物体表面MDRO检出率呈下降趋势(P<0.05)。干预前荧光标记位点清除率为41.84%;实施干预措施后,7—12月荧光标记点清除率呈上升趋势,在干预末(11—12月)达85.00%。干预后隔离医嘱下达、隔离标识放置、医疗用品专用、医疗废物正确处置的依从率均较干预前提高(均P<0.05)。结论 采取基于荧光标记法的集束化防控措施可有效提高MDRO感染预防与控制效果。 展开更多
关键词 多重耐药菌 集束化措施 荧光标记 预防与控制
下载PDF
蛋白质的非定点荧光标记——推荐一个化学生物学实验
8
作者 洪歆怡 薛太玲 +4 位作者 徐洲 谢恩蓉 吴明凯 王青青 吴丽娜 《大学化学》 CAS 2024年第4期351-360,共10页
本论文介绍了一项化学生物学实验,旨在利用异硫氰酸荧光素的异硫氰基与蛋白质氨基共价结合的原理,实现对体外蛋白(以牛血清白蛋白为例)和体内蛋白(以大肠杆菌总蛋白为例)的非定点荧光标记。实验采用凝胶过滤法作为后续纯化手段,并运用紫... 本论文介绍了一项化学生物学实验,旨在利用异硫氰酸荧光素的异硫氰基与蛋白质氨基共价结合的原理,实现对体外蛋白(以牛血清白蛋白为例)和体内蛋白(以大肠杆菌总蛋白为例)的非定点荧光标记。实验采用凝胶过滤法作为后续纯化手段,并运用紫外-可见分光光度计、流式细胞术以及荧光显微镜对标记结果进行全面表征。该实验涵盖了多种基础和前沿实验技能,与科研工作中常见的抗体荧光标记技术密切相关,难度适中。通过参与这一实验,学生不仅能够深入理解化学生物学基础知识,提高综合实践能力,还能够拓宽科研视野并培养科研思维。 展开更多
关键词 非定点荧光标记 蛋白质 异硫氰酸荧光 化学生物学实验
下载PDF
基于SSR荧光标记的121份野生枸杞种质遗传结构解析
9
作者 戴国礼 刘娜 +4 位作者 秦垦 张波 尹跃 米佳 何昕孺 《湖北农业科学》 2024年第5期207-214,共8页
以采集的121份野生枸杞(Lycium barbarum L.)种质为材料,用9对SSR引物进行扩增,采用GeneALEX、Power Marker软件进行多态性分析,利用NTSYS、STRUC-TURE软件进行遗传多样性分析、聚类分析和主成分分析。结果表明,9对SSR引物共检测到108... 以采集的121份野生枸杞(Lycium barbarum L.)种质为材料,用9对SSR引物进行扩增,采用GeneALEX、Power Marker软件进行多态性分析,利用NTSYS、STRUC-TURE软件进行遗传多样性分析、聚类分析和主成分分析。结果表明,9对SSR引物共检测到108个等位基因,等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、多态信息含量(PIC)、Shannon’s信息指数分别为12个、4.620个、0.678、0.651、0.629、1.568;聚类结果显示121份野生枸杞种质可划分为5个亚群,群体遗传结构表明当K=5时,121个种质划分为5个亚群,来自宁夏的NXGY-02、NXGY-032个种质与来自内蒙古的6个种质之间的遗传距离最远,亲缘关系较远,来自青海省、新疆、甘肃省及内蒙古的其余野生枸杞种质之间存在广泛的基因交流现象;宁夏、内蒙古的野生枸杞种质具有独立起源进化的可能,而新疆、甘肃省、青海省的种质与宁夏种质亲缘关系较近,很可能属于同一起源。 展开更多
关键词 野生枸杞(Lycium barbarum L.) 种质 SSR荧光标记 遗传结构
下载PDF
荧光标记法在提高多重耐药菌患者床单元高频接触物表清洁卫生质量中的应用
10
作者 杨君华 陈春媚 +2 位作者 黎君园 罗家栋 陈飞燕 《中国科技期刊数据库 医药》 2023年第10期34-37,共4页
探讨荧光标记法在提高多重耐药菌患者床单元高频接触物体表面清洁卫生质量中的应用。方法 选取2023年1-6月某医院临床检出多重耐药菌后在院时间>24h的病例170例隔离期间床单元高频接触物表作为研究对象,1月-2月为基线调查阶段(对照组... 探讨荧光标记法在提高多重耐药菌患者床单元高频接触物体表面清洁卫生质量中的应用。方法 选取2023年1-6月某医院临床检出多重耐药菌后在院时间>24h的病例170例隔离期间床单元高频接触物表作为研究对象,1月-2月为基线调查阶段(对照组),3月-6月为干预阶段(实验组)。对照组给予常规管理,实验组在常规管理基础上,根据患者隔离时间长短不同定期给予荧光标记干预高频接触物体表面至解除隔离,即隔离时间≤10d的病例分别于首次检出24h、48h、72h荧光标记,>10d而≤20d的病例增加一次标记,>20d的病例于首次检出24h、48h、72h标记后,每10d标记一次,观察荧光标记清除率,每10d开展清洁卫生质量满意度调查一次。对比干预前后荧光标记清除率、清洁消毒频率及清洁卫生质量满意度。结果 采用荧光标记给予定期干预后,荧光清除率由基线调查阶段由46.18%提高到74.84%、清洁消毒频次≥1次/d依从率从基线调查阶段23.22%提高到95.53%;清洁卫生满意度由1月份30.33%提高到6月份100%,总满意度由31.67%提高到70.34%,与实施前比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 根据患者隔离时间不同定期给予荧光标记干预,对保洁效果进行定期评价,可以有效提高环境物表荧光标记清除率、清洁消毒频率和清洁卫生质量满意度,减少多重耐药菌的定植和传播风险。 展开更多
关键词 荧光标记 多重耐药菌 床单元高频接触物体表面 清洁消毒
下载PDF
SSR荧光标记毛细管电泳分析24个广西常规香稻品种的遗传多样性 被引量:3
11
作者 唐梅 孙富 +6 位作者 何聪 卢宏琮 黄鹂 夏秀忠 唐忠平 钟志坚 陆桂耀 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期506-515,共10页
分析香稻品种的遗传多样性和理清香稻品种之间的亲缘关系,可为选育优质香稻品种提供参考。为分析广西审定的24个常规香稻品种的遗传多样性,明确其遗传差异,本研究利用SSR荧光标记毛细管电泳技术对24个广西常规香稻品种进行遗传多样性分... 分析香稻品种的遗传多样性和理清香稻品种之间的亲缘关系,可为选育优质香稻品种提供参考。为分析广西审定的24个常规香稻品种的遗传多样性,明确其遗传差异,本研究利用SSR荧光标记毛细管电泳技术对24个广西常规香稻品种进行遗传多样性分析。结果表明,48对SSR引物共检测出170个等位基因位点;遗传多样性参数中观测等位基因数(Na)变化幅度为1~9,平均为3.54;有效等位基因数(Ne)的变化幅度为1~4.5534,平均为2.0736,其中有效等位基因数最高是RM21,其次是RM481、RM493和RM258,说明这4对引物有较高的检测效率;Shannon’s指数(I)的变化幅度为0~1.7942,平均为0.7726;多态信息含量(PIC)值的变化幅度为0~0.7541,平均为0.3732,属于中度多态位点,说明24个广西常规香稻品种具有一定的遗传变异。24个品种遗传相似系数范围为0.3299~0.9600,其中‘三香628’与‘农香32’遗传相似系数最小,说明这2个品种遗传基础差异最大,亲缘关系最远,‘万香696’与‘广粮香2号’遗传相似性系数最大,说明这2个品种遗传基础差异较小,亲缘关系接近。聚类分析结果显示24个广西常规香稻品种在相似系数0.504处可以分为3个大类群和4个亚类群,第Ⅰ大类2个品种,第Ⅱ大类19个品种,第Ⅲ大类3个品种;第Ⅱ大类在相似系数0.624处可分为4个亚类,第ⅰ亚类1个品种,第ⅱ亚类14个品种,第ⅲ亚类3个品种,第ⅳ亚类1个品种。研究结果表明24个广西常规香稻品种具有一定的遗传多样性,但不够丰富。以数字编码形式构建24个广西常规香稻品种的DNA指纹图谱。其分析结果可为广西常规香稻品种选育和鉴定提供参考。 展开更多
关键词 广西 常规香稻 SSR荧光标记 毛细管电泳 遗传多样性
下载PDF
荧光标记多糖的制备及应用 被引量:2
12
作者 朱敏 王亚楠 《皮革科学与工程》 CAS 北大核心 2023年第1期36-45,共10页
多糖是一类来源丰富、可降解和可再生的天然高分子,广泛应用于食品、医药、造纸、皮革等行业。然而,由于多糖结构中缺少可被特异性检测的基团,使得其在应用时的定性/定量分析较为困难。荧光标记技术能赋予多糖可被检测的荧光基团,是实... 多糖是一类来源丰富、可降解和可再生的天然高分子,广泛应用于食品、医药、造纸、皮革等行业。然而,由于多糖结构中缺少可被特异性检测的基团,使得其在应用时的定性/定量分析较为困难。荧光标记技术能赋予多糖可被检测的荧光基团,是实现多糖应用可视化、进而研究多糖功能与作用机理的重要手段。文章综述了常见的荧光标记多糖的方法,包括在多糖的羟基、羧基和醛基引入荧光素的荧光标记法,以及通过化学反应构造共轭结构的自发荧光法,详细阐述了不同荧光标记法的原理、标记条件和应用效果。总结和展望了荧光多糖在荧光示踪、生物成像、食品监测、水质监测和智能包装材料等领域的应用。 展开更多
关键词 多糖 荧光标记 荧光示踪 荧光 自发荧光
下载PDF
应用STR荧光标记法分析大白菜品种遗传多样性 被引量:1
13
作者 钟世超 李潇萱 +2 位作者 樊铭玺 谭浩然 陈晓峰 《中国蔬菜》 北大核心 2023年第11期22-33,共12页
以19个大白菜品种为试材,采用STR分子标记技术构建烟台地区大白菜种质的指纹图谱与分子身份证。遵循染色体和扩增条带多样性原则,筛选出9对STR荧光标记引物,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和多重毛细管荧光电泳技术进行遗传多样性分析,并构建... 以19个大白菜品种为试材,采用STR分子标记技术构建烟台地区大白菜种质的指纹图谱与分子身份证。遵循染色体和扩增条带多样性原则,筛选出9对STR荧光标记引物,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和多重毛细管荧光电泳技术进行遗传多样性分析,并构建大白菜种质的STR指纹图谱,将指纹图谱的结果进行编码赋值,进一步构建分子身份证,同时进行品种间遗传关系聚类分析。结果表明,筛选出的9对STR引物具有较好的多态性,可有效区分参试的19个大白菜品种。9对引物共检测到52个等位基因,每对引物检测出3~8个等位基因,平均5.7778个;香农信息指数(I)的变化范围为0.7142~1.6685,平均为1.3787;Nei’s基因多样性指数(H)的变化范围为0.4474~0.7895,平均为0.6927;多态性信息含量(PIC)的变化范围为0.3681~0.7572,平均为0.6442;对STR扩增条带进行分析并编码,成功构建了19个大白菜品种的分子身份证。聚类分析结果显示,在遗传相似系数(GS)为0.66时,参试19个大白菜品种被分成3个类群,具有明显的地域特性。 展开更多
关键词 大白菜 种质资源 STR荧光标记 指纹图谱 分子身份证
下载PDF
荧光标记技术在新型农用化合物创制中的应用现状及进展
14
作者 文鼎 张亚 +2 位作者 刘双清 王翀 廖晓兰 《河南农业科学》 北大核心 2023年第9期1-13,共13页
荧光标记技术广泛应用于现代社会的各个方面,但其在农用化合物创制领域的应用鲜见综述。基于近10 a国内外农用化合物创制领域的荧光标记技术相关文献,系统总结了荧光标记技术中荧光染料的种类,综合介绍了荧光探针技术和免疫荧光技术在... 荧光标记技术广泛应用于现代社会的各个方面,但其在农用化合物创制领域的应用鲜见综述。基于近10 a国内外农用化合物创制领域的荧光标记技术相关文献,系统总结了荧光标记技术中荧光染料的种类,综合介绍了荧光探针技术和免疫荧光技术在新型农用化合物创制领域的应用现状及进展,分析了目前荧光标记技术在新型农用化合物创制领域存在的局限与不足,并对未来荧光标记技术的发展趋势进行了展望。 展开更多
关键词 荧光标记 农用化合物创制 荧光染料 荧光探针 免疫荧光
下载PDF
应用SSR荧光标记法构建22个柚类品种的分子身份证 被引量:6
15
作者 吴仕蔓 娄兵海 +3 位作者 陈传武 唐艳 邓崇岭 武晓晓 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期605-614,共10页
【目的】应用荧光SSR分子标记构建柚类种质分子身份证,用于品种资源鉴定。【方法】收集22份柚类材料,筛选SSR荧光标记引物,采用荧光毛细管电泳检测技术分析扩增条带分子质量和等位基因,获得相应的扩增带型,从而对每份柚材料进行标记。... 【目的】应用荧光SSR分子标记构建柚类种质分子身份证,用于品种资源鉴定。【方法】收集22份柚类材料,筛选SSR荧光标记引物,采用荧光毛细管电泳检测技术分析扩增条带分子质量和等位基因,获得相应的扩增带型,从而对每份柚材料进行标记。采用个位阿拉伯数字和小写英文字母对不同等位基因分子质量大小进行编码,再按照引物扩增带型数由大到小顺序将各位点赋值编码的数字串联排序,构建供试样品的分子身份证。【结果】筛选出4对多态性较好的引物,使用这4对引物共检测到49个扩增带型和41个SSR等位位点,平均每对引物的有关带型数12.25个、位点数10.25个。【结论】通过扩增带型分析,构建了22份柚类种质的分子身份证,包括12条信息独特的身份证。遗传聚类与分子身份证分析结果一致,为柚类品种鉴定和保护提供了重要依据。 展开更多
关键词 柚类 种质资源 SSR荧光标记 分子身份证
下载PDF
拟轮枝镰孢荧光标记与侵染结构观察
16
作者 哈丹丹 郑红霞 +4 位作者 张振昊 竺利红 刘浩 王教瑜 周雷 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第18期3556-3573,共18页
【目的】以玉米穗腐病优势病原菌和伏马毒素主要产毒菌拟轮枝镰孢(Fusarium verticillioides)为研究对象,构建组成型表达绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白DsRED、过氧化物酶体靶向标记蛋白DsRED-PTS1和细胞骨架F-actin结合蛋白LifeAct-GF... 【目的】以玉米穗腐病优势病原菌和伏马毒素主要产毒菌拟轮枝镰孢(Fusarium verticillioides)为研究对象,构建组成型表达绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白DsRED、过氧化物酶体靶向标记蛋白DsRED-PTS1和细胞骨架F-actin结合蛋白LifeAct-GFP的荧光菌株,观察拟轮枝镰孢侵染玉米须表皮的穿透结构,明确拟轮枝镰孢侵染结构形成的调控机制和影响因素。【方法】通过农杆菌介导的遗传转化方法将荧光表达载体pCOM-GFP、pCOM-DsRED、pCOM-DsRED-PTS1和pCOM-LifeAct-GFP分别导入拟轮枝镰孢野生型菌株D85-2中,PCR鉴定含有目标基因的转化子,激光共聚焦显微镜观察各荧光蛋白的表达和分布;接种玉米须观察侵染结构;赛璐酚膜模拟植物表皮穿透试验,观察穿透结构和F-actin的动态组装;使用F-actin聚合抑制剂Latrunculin A、三环唑和活性氧抑制剂DPI(diphenyleneiodonium chloride)检测穿透结构形成的影响因素。【结果】建立了以遗传霉素G418为抗性标记的遗传转化方法;FV-GFP和FV-DsRED菌株分别具有清晰、明亮的绿色荧光和红色荧光,FV-DsRED-PTS1菌株中红色荧光呈圆点状分布,符合真菌中过氧化物酶体的分布特征,FV-LifeAct-GFP菌株孢子和菌丝内部具有丝絮状绿色荧光,符合真菌中F-actin蛋白的分布特征;玉米须表皮侵染过程中观察到菌丝顶端膨大类似附着枝侵染结构;赛璐酚膜模拟穿透试验观察到穿透结构中F-actin蛋白的成环组装;药物胁迫试验表明,穿透结构的形成受F-actin蛋白聚合和活性氧调控。同时,三环唑能够抑制穿透。【结论】构建了4种荧光标记菌株,细胞定位清晰,具有正常的生长表型和致病力,能够满足致病机制相关研究需求;明确了拟轮枝镰孢在侵染玉米时能够形成一种菌丝顶端膨大的类似附着枝状的侵染结构;确定了F-actin成环聚集、细胞骨架组装和活性氧调控是影响拟轮枝镰孢侵染结构形成的关键因素。 展开更多
关键词 拟轮枝镰孢 荧光标记 过氧化物酶体 侵染结构 细胞骨架 活性氧
下载PDF
BNP和IL-6双标记时间分辨免疫荧光检测方法的建立及初步应用
17
作者 李云鹏 郝培远 +3 位作者 曹雪明 闫兆月 王恩锋 代荣钦 《实验与检验医学》 CAS 2023年第2期127-131,共5页
目的研制一种脑钠肽(BNP)、白细胞介素-6(IL-6)的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并对其性能进行初步评价。方法将抗BNP和IL-6单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔板,用Eu3+和Sm3+分别标记另一配对抗体作为检测抗体,建立双抗... 目的研制一种脑钠肽(BNP)、白细胞介素-6(IL-6)的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并对其性能进行初步评价。方法将抗BNP和IL-6单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔板,用Eu3+和Sm3+分别标记另一配对抗体作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。进行灵敏度、准确度、重复性、特异性、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果制备的双标记时间分辨免疫荧光试剂盒对BNP检测的线性范围为10 pg/mL~5000 pg/mL,灵敏度为8.65 pg/mL,对IL-6检测的线性范围为1 pg/mL~1000 pg/mL,灵敏度为5.36 pg/mL。BNP的回收率在91.49%~99.16%,批内CV在5.73%~8.96%,批间CV在8.42%~11.73%;IL-6的回收率在93.95%~111.50%,批内CV在7.32%~10.07%,批间CV在9.40%~11.30%。与血清中常见的脓毒血症检测指标均无明显的交叉反应。试剂盒能够在4℃稳定保存半年,37℃稳定保存7 d。对临床样本的检测发现,该方法参考区间Cut-off值BNP:46.01 pg/mL,IL-6:13.62 pg/mL;检测结果与临床诊断结果一致,准确性较好。结论建立的BNP和IL-6双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异性、高准确率、方便快捷等优点,可作为预警脓毒症发生、预测脓毒症病情程度及临床预后的一种新的实验室检测方法。 展开更多
关键词 脓毒血症 双抗体夹心 标记时间分辨免疫荧光分析
下载PDF
CRISPR-Cas9基因编辑技术对细胞内源蛋白进行荧光标记的实验操作 被引量:2
18
作者 吴仲胜 高誉 +2 位作者 杜勇涛 党颂 何康敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期165-175,共11页
CRISPR-Cas9是目前广泛应用的基因编辑技术,可对目的基因进行高效精准编辑,快速实现目的基因的敲除或敲入。Cas9蛋白在sgRNA引导下对靶序列进行剪切并造成DNA双链断裂,在与剪切位点两端同源的DNA模板序列存在时,可通过同源重组修复方式... CRISPR-Cas9是目前广泛应用的基因编辑技术,可对目的基因进行高效精准编辑,快速实现目的基因的敲除或敲入。Cas9蛋白在sgRNA引导下对靶序列进行剪切并造成DNA双链断裂,在与剪切位点两端同源的DNA模板序列存在时,可通过同源重组修复方式引入外源序列,实现荧光蛋白或其他标签在基因组上的精准敲入,进而实现对内源蛋白进行荧光标签的融合标记。通过基因编辑技术对内源目的蛋白进行标记,可避免由于过表达造成蛋白质定位、动力学或功能等的潜在影响,可显著提升细胞成像实验的稳定性和可重复性。本文重点介绍了利用CRISPR-Cas9基因编辑系统对目的蛋白进行荧光蛋白或自标记蛋白标签标记的方法与操作流程,为构建内源蛋白荧光标记的哺乳动物细胞系提供参考。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas9基因编辑 活细胞 内源蛋白 荧光蛋白 标记蛋白标签
下载PDF
荧光RNA及其生物传感技术研究进展
19
作者 左方婷 张雅强 +2 位作者 杨慧敏 杨弋 陈显军 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期92-108,共17页
荧光RNA技术是一种新兴的RNA标记技术,可用于活细胞RNA的原位实时标记与成像,对于人们理解RNA的功能和调控机制发挥着至关重要的作用。基于荧光RNA的生物传感技术可用于活细胞内小分子代谢物以及蛋白质等靶标的实时动态检测,为生命科学... 荧光RNA技术是一种新兴的RNA标记技术,可用于活细胞RNA的原位实时标记与成像,对于人们理解RNA的功能和调控机制发挥着至关重要的作用。基于荧光RNA的生物传感技术可用于活细胞内小分子代谢物以及蛋白质等靶标的实时动态检测,为生命科学基础研究以及生物医学传感技术开发提供极具价值的工具。本文对遗传编码的荧光RNA的发展历程、荧光RNA技术在活细胞RNA成像,以及基于荧光RNA的生物传感技术在活细胞代谢物检测等方面的应用进行了介绍和总结,并对该领域的发展现状和未来发展方向展开讨论和展望,以期为该技术的进一步发展和在相关领域的应用提供参考。 展开更多
关键词 荧光RNA 荧光标记 RNA成像 生物传感
下载PDF
基于发光共振能量转移的无标记上转换荧光探针灵敏检测8-OHdG
20
作者 闾心悦 于慧 +3 位作者 曹丹 郭会琴 颜流水 刘小明 《南昌航空大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第3期76-87,共12页
8-羟基-2’-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG)是一种重要的DNA损伤标志物,其含量的多少可反映人体的氧化损伤程度。本研究以氨基功能化的上转换纳米粒子(Upconversion nanoparticles,UCNPs)为能量供体,金纳米粒子(AuNPs)为... 8-羟基-2’-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG)是一种重要的DNA损伤标志物,其含量的多少可反映人体的氧化损伤程度。本研究以氨基功能化的上转换纳米粒子(Upconversion nanoparticles,UCNPs)为能量供体,金纳米粒子(AuNPs)为能量受体,由于AuNPs可导致UCNPs在545 nm处的荧光发生猝灭,而8-OHdG能够对AuNPs产非特异性诱导团聚作用,从而改变UCNPs在该位置处的荧光强度,据此构建了一种基于发光共振能量转移(Luminescence resonance energy transfer,LRET)的上转换荧光探针,并用于尿样基质中8-OHdG的检测。所建立方法简单、灵敏且适用pH范围宽。在AuNPs溶液的浓度为1.34 nmol•L^(−1),pH为2~7的实验条件下,所构建探针能够分别在低浓度范围(1.67×10^(−11)~3.3×10^(−9)mol•L^(−1))和高浓度范围(1.0×10^(−8)~3.3×10^(−6)mol•L^(−1))内实现对8-OHdG的快速检测。共存干扰实验结果表明,尿样中常见的无机离子和化合物存在的前提下,所构建探针对8-OHdG呈现了良好的选择性。将探针应用于实际尿液样品基质中8-OHdG的检测,加标回收率为91.4%~109.2%。 展开更多
关键词 8-羟基-2’-脱氧鸟苷 标记检测 上转换荧光 纳米金 尿样
下载PDF
上一页 1 2 115 下一页 到第
使用帮助 返回顶部